RESUMO
This study aims to detect the main virulence and antimicrobial resistance genes in Stapylococcus aureus from bovine mastitic milk as well as classifying them according to agr typing. A total of 55 strains from six dairy unities in the state of Rio de Janeiro were selected, of these 27.3% presented fbnA and 78,2% for fbnB genes, respectively. None of the strains tested were positive for cap5 gene, 3.6% were positive for cap8 gene. Additionally, 94.5% of strains had hlA gene and 89.1% had hlB gene while 67.3% of the strains had icaA gene and 87.3% had icaD gene. From these results it was possible to establish 12 different virulence profiles. Prevalence of agrII type was detected in 81.8% of the isolates. Concerning antimicrobial resistance evaluation, the studied strains were susceptible to all antibiotics tested except penicillin, 83.6% being resistant strains. None of the strains had mecA gene, however, 40% of the strains had blaZ gene. Associating virulence and resistance data made it possible to obtain 23 different profiles. This great diversity of strains shows wide array of bacterial strategies and the challenge of mastitis prevention in cattle. Despite antimicrobial susceptibility, these strains presented certain genes that allow its persistence in the herd.(AU)
O presente estudo teve como objetivo detectar os principais genes de virulência e resistência antimicrobiana em Staphylococcus aureus oriundos de leite bovino mastítico e classificá-los de acordo com a tipagem do gene agr. Foram selecionados 55 isolados de seis unidades produtores no estado do Rio de Janeiro. Destas, o gene fbnA foi encontrado em 27,3% das cepas e 78,2% possuíam o gene fbnB. Em nenhuma cepa foi encontrado o gene cap5 e 3,6% possuíam o gene cap8. O gene hlA foi encontrado em 94,5% das cepas e 89,1% possuíam o gene hlB. O gene icaA foi encontrado em 67,3% das cepas e 87,3% possuíam o gene icaD. Com base nesses resultados, foi possível estabelecer 12 diferentes perfis de virulência. Prevalência do agr tipo II foi detectada em 81,8% dos isolados. Considerando-se a avaliação da resistência antimicrobiana, as cepas estudadas foram suscetíveis a todos os antibióticos exceto penicilina, sendo detectado um percentual de 83,6% de cepas resistentes. Nenhuma das cepas apresentou o gene mecA, contudo 40% das cepas apresentaram o gene blaZ. Vinte e três perfis diferentes foram estabelecidos por associação de dados de virulência e resistência. Essa grande diversidade de cepas mostra a ampla gama de estratégias bacterianas e o desafio da prevenção à mastite no gado bovino, considerando-se que, a despeito da suscetibilidade antimicrobiana, essas cepas apresentam genes que permitem sua persistência no rebanho.(AU)
Assuntos
Resistência Microbiana a Medicamentos , Staphylococcus aureus/genética , Staphylococcus aureus/virologia , Virulência , Antibacterianos , Bovinos , Mastite Bovina , LeiteRESUMO
This study aims to detect the main virulence and antimicrobial resistance genes in Stapylococcus aureus from bovine mastitic milk as well as classifying them according to agr typing. A total of 55 strains from six dairy unities in the state of Rio de Janeiro were selected, of these 27.3% presented fbnA and 78,2% for fbnB genes, respectively. None of the strains tested were positive for cap5 gene, 3.6% were positive for cap8 gene. Additionally, 94.5% of strains had hlA gene and 89.1% had hlB gene while 67.3% of the strains had icaA gene and 87.3% had icaD gene. From these results it was possible to establish 12 different virulence profiles. Prevalence of agrII type was detected in 81.8% of the isolates. Concerning antimicrobial resistance evaluation, the studied strains were susceptible to all antibiotics tested except penicillin, 83.6% being resistant strains. None of the strains had mecA gene, however, 40% of the strains had blaZ gene. Associating virulence and resistance data made it possible to obtain 23 different profiles. This great diversity of strains shows wide array of bacterial strategies and the challenge of mastitis prevention in cattle. Despite antimicrobial susceptibility, these strains presented certain genes that allow its persistence in the herd.(AU)
O presente estudo teve como objetivo detectar os principais genes de virulência e resistência antimicrobiana em Staphylococcus aureus oriundos de leite bovino mastítico e classificá-los de acordo com a tipagem do gene agr. Foram selecionados 55 isolados de seis unidades produtores no estado do Rio de Janeiro. Destas, o gene fbnA foi encontrado em 27,3% das cepas e 78,2% possuíam o gene fbnB. Em nenhuma cepa foi encontrado o gene cap5 e 3,6% possuíam o gene cap8. O gene hlA foi encontrado em 94,5% das cepas e 89,1% possuíam o gene hlB. O gene icaA foi encontrado em 67,3% das cepas e 87,3% possuíam o gene icaD. Com base nesses resultados, foi possível estabelecer 12 diferentes perfis de virulência. Prevalência do agr tipo II foi detectada em 81,8% dos isolados. Considerando-se a avaliação da resistência antimicrobiana, as cepas estudadas foram suscetíveis a todos os antibióticos exceto penicilina, sendo detectado um percentual de 83,6% de cepas resistentes. Nenhuma das cepas apresentou o gene mecA, contudo 40% das cepas apresentaram o gene blaZ. Vinte e três perfis diferentes foram estabelecidos por associação de dados de virulência e resistência. Essa grande diversidade de cepas mostra a ampla gama de estratégias bacterianas e o desafio da prevenção à mastite no gado bovino, considerando-se que, a despeito da suscetibilidade antimicrobiana, essas cepas apresentam genes que permitem sua persistência no rebanho.(AU)
Assuntos
Staphylococcus aureus/virologia , Virulência , Resistência Microbiana a Medicamentos , Staphylococcus aureus/genética , Antibacterianos , Leite , Bovinos , Mastite BovinaRESUMO
O presente estudo teve como principal objetivo avaliar o potencial de atividade antimicrobiana de diterpeno isolado de Croton antisyphiliticus, espécie nativa do Cerrado, frente biofilme de Staphylococcus aureus, isolados do leite de animais com mastite. O diterpeno ácido ent-kaur-16-en-18-óico foi avaliado quanto à capacidade de erradicação da biomassa e também à redução da população bacteriana sob o biofilme. O antibiótico sulfato de gentamicina foi utilizado como tratamento comparativo. A atividade antibiofilme foi determinada por meio dos métodos do Cristal Violeta e da Contagem de Unidades Formadoras de Colônia. Os resultados obtidos demonstraram que o ácido ent-kaur-16-en-18- óico, na concentração de 250 µg/mL, reduziu 56% da biomassa formada, enquanto a gentamicina, na concentração de 30 mg/mL, apenas 13%. Quanto à atividade nas células bacterianas sob o biofilme, não houve diferença estatística significativa entre os tratamentos, que minimizaram cerca de 3 logs da população de S. aureus. Portanto, nas condições ensaiadas, o diterpeno ent-kaur-16-en-18-óico destacou-se por apresentar atividade antibiofilme significativa contra S. aureus, em concentração 120 vezes menor quando comparado ao antibiótico gentamicina.(AU)
The present study aimed to evaluate the potential antimicrobial activity of diterpene isolated from Croton antisyphiliticus, native species of the Cerrado, against biofilm of Staphylococcus aureus isolated from milk from animals with mastitis. The diterpene ent-Kaur-16-on-18-oic acid were evaluated for their ability to eradicate biomass and also reducing the bacterial population in the biofilm. The antibiotic gentamicin was used as a comparative treatment. Antibiofilm activity was determined by the methods of Crystal Violet and Count of Colony Forming Units. The results demonstrated that the ent-Kaur-16-on-18-oic acid, at a concentration of 250 μg/mL, reduced 56% of the biomass formed, while gentamicin, at a concentration of 30 mg/ml, only 13%. Regarding the activity in bacterial cells in the biofilm, there was no statistically significant difference between treatments, that minimized about 3 logs of the population of S.aureus. Therefore, in the conditions tested, the diterpene ent-kaur-16-on-18-oic highlighted for presenting antibiofilm significant activity against S. aureus, at a concentration 120 times lower when compared to the gentamicin antibiotic.(AU)
Assuntos
Animais , /análise , Diterpenos/intoxicação , Staphylococcus aureus/fisiologia , Croton/química , Croton/crescimento & desenvolvimentoRESUMO
O presente estudo teve como principal objetivo avaliar o potencial de atividade antimicrobiana de diterpeno isolado de Croton antisyphiliticus, espécie nativa do Cerrado, frente biofilme de Staphylococcus aureus, isolados do leite de animais com mastite. O diterpeno ácido ent-kaur-16-en-18-óico foi avaliado quanto à capacidade de erradicação da biomassa e também à redução da população bacteriana sob o biofilme. O antibiótico sulfato de gentamicina foi utilizado como tratamento comparativo. A atividade antibiofilme foi determinada por meio dos métodos do Cristal Violeta e da Contagem de Unidades Formadoras de Colônia. Os resultados obtidos demonstraram que o ácido ent-kaur-16-en-18- óico, na concentração de 250 µg/mL, reduziu 56% da biomassa formada, enquanto a gentamicina, na concentração de 30 mg/mL, apenas 13%. Quanto à atividade nas células bacterianas sob o biofilme, não houve diferença estatística significativa entre os tratamentos, que minimizaram cerca de 3 logs da população de S. aureus. Portanto, nas condições ensaiadas, o diterpeno ent-kaur-16-en-18-óico destacou-se por apresentar atividade antibiofilme significativa contra S. aureus, em concentração 120 vezes menor quando comparado ao antibiótico gentamicina.
The present study aimed to evaluate the potential antimicrobial activity of diterpene isolated from Croton antisyphiliticus, native species of the Cerrado, against biofilm of Staphylococcus aureus isolated from milk from animals with mastitis. The diterpene ent-Kaur-16-on-18-oic acid were evaluated for their ability to eradicate biomass and also reducing the bacterial population in the biofilm. The antibiotic gentamicin was used as a comparative treatment. Antibiofilm activity was determined by the methods of Crystal Violet and Count of Colony Forming Units. The results demonstrated that the ent-Kaur-16-on-18-oic acid, at a concentration of 250 μg/mL, reduced 56% of the biomass formed, while gentamicin, at a concentration of 30 mg/ml, only 13%. Regarding the activity in bacterial cells in the biofilm, there was no statistically significant difference between treatments, that minimized about 3 logs of the population of S.aureus. Therefore, in the conditions tested, the diterpene ent-kaur-16-on-18-oic highlighted for presenting antibiofilm significant activity against S. aureus, at a concentration 120 times lower when compared to the gentamicin antibiotic.
Assuntos
Animais , Croton/crescimento & desenvolvimento , Croton/química , Diterpenos/intoxicação , Staphylococcus aureus/fisiologiaRESUMO
A Mastite em éguas é considerada uma doença rara sendo o Streptococcus equi. Staphylococcus sp., Corynebacterium sp., Actinobacillus sp., Nocardia sp. e as enterobacterias os micro-organismos mais frequentemente envolvidos. A doença está relacionada a injúrias e traumas nas mamas e tetos. Edema e fibrose da glândula mamária, leite com aspecto viscoso ou muco-purulento são observados nos casos de mastite clínica. O diagnóstico é baseado no exame clínico da mama associado ao cultivo microbiológico do leite. Os métodos indiretos para o diagnóstico de mastite subclínica como California Mastits Test e Contagem de Células Somáticas não são padronizados para a espécie em questão. A terapia para a mastite equina é baseada no uso sistêmico de antimicrobianos, com base nos resultados obtidos no teste "in vitro" de sensibilidade microbiana. Não há medidas de controle específicas para a mastite equina. Objetivou-se neste estudo revisar os principais aspectos relacionados a mastite em éguas com ênfase na etiologia, epidemiologia, sinais clínicos, diagnóstico, tratamento, medidas de controle e profilaxia.
Mastits is considered uncommon disease in mares. Streptococcus equi. Staphylococcus sp., Corynebacterium sp., Actinobacillus sp., Nocardia sp. and enterobacterias are major microorganisms involved in equine mammary infections. The disease is commonly related to traumatic lesions in mammary glands and teats. Edema, fibrosis, masses to palpation of glands, and viscous to seropurulent milk are mainly clinical signs observed in affected animals. The diagnosis is based on clinical exam of mammary glands and microbiological culture of the milk. There are no standard to use of indirect exams on diagnosis, including California Mastits Test and Somatic Cell Count. Systemic antimicrobials are recommended in therapy, based on previous "in vitro" susceptibility microbiological test. No specific control measures are indicated in equine mastits. The present study reviewed the mastits in mares, with emphasis to etiology, epidemiology findings, clinical manifestation, diagnosis, treatment and control aspects.
Assuntos
Animais , Doenças dos Cavalos , Mastite/diagnóstico , Mastite/etiologia , Mastite/terapia , Mastite/veterináriaRESUMO
Routine diagnosis methods used in bovine mastitis were studied in 55 mares in lactation. The findings of strip cup test, California Mastitis Test-CMT, electronic somatic cell count-CCS, microbiological culture, and in vitro antimicrobial susceptibility profile of isolates were discussed. Streptococcus spp., Staphylococcus spp, and enterobacteria were the most common microorganisms isolated in health and CMT-positive mammary glands. Staphylococcus aureus and Arcanobacterium pyogenes were identified in two mares presenting clinical mastitis. Mean somatic cell count of eight mares without presence of microorganisms in milk was 247.57x10³/mL and 1.621,86x10³/mL in 47 mares with positive microbiological culture. Moderate concordance (63.8 percent) between positive reactions in CMT (1 to 3+) and microbiological culture was observed. Amicacin (78.9 percent), ceftiofur (74.7 percent), sulpha-trimetoprim (69,0 percent) and norfloxacin (69.0 percent), were the most effective drugs, while resistance of isolates was mainly observed against penicillin (64.8 percent), gentamycin (35.2 percent), azithromycin (35.2 percent), enrofloxacin (28.2 percent), and florfenicol (28.2 percent).(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Mastite/veterinária , Mastite/diagnóstico , Mastite/terapia , Cavalos , Contagem de Células/veterináriaRESUMO
Routine diagnosis methods used in bovine mastitis were studied in 55 mares in lactation. The findings of strip cup test, California Mastitis Test-CMT, electronic somatic cell count-CCS, microbiological culture, and in vitro antimicrobial susceptibility profile of isolates were discussed. Streptococcus spp., Staphylococcus spp, and enterobacteria were the most common microorganisms isolated in health and CMT-positive mammary glands. Staphylococcus aureus and Arcanobacterium pyogenes were identified in two mares presenting clinical mastitis. Mean somatic cell count of eight mares without presence of microorganisms in milk was 247.57x10³/mL and 1.621,86x10³/mL in 47 mares with positive microbiological culture. Moderate concordance (63.8 percent) between positive reactions in CMT (1 to 3+) and microbiological culture was observed. Amicacin (78.9 percent), ceftiofur (74.7 percent), sulpha-trimetoprim (69,0 percent) and norfloxacin (69.0 percent), were the most effective drugs, while resistance of isolates was mainly observed against penicillin (64.8 percent), gentamycin (35.2 percent), azithromycin (35.2 percent), enrofloxacin (28.2 percent), and florfenicol (28.2 percent).
Assuntos
Animais , Feminino , Mastite/diagnóstico , Mastite/terapia , Mastite/veterinária , Contagem de Células/veterinária , CavalosRESUMO
ABSTRACT Mastits is considered uncommon disease in mares. Streptococcus equi. Staphylococcus sp., Corynebacterium sp., Actinobacillus sp., Nocardia sp. and enterobacterias are major microorganisms involved in equine mammary infections. The disease is commonly related to traumatic lesions in mammary glands and teats. Edema, fibrosis, masses to palpation of glands, and viscous to seropurulent milk are mainly clinical signs observed in affected animals. The diagnosis is based on clinical exam of mammary glands and microbiological culture of the milk. There are no standard to use of indirect exams on diagnosis, including California Mastits Test and Somatic Cell Count. Systemic antimicrobials are recommended in therapy, based on previous in vitro susceptibility microbiological test. No specific control measures are indicated in equine mastits. The present study reviewed the mastits in mares, with emphasis to etiology, epidemiology findings, clinical manifestation, diagnosis, treatment and control aspects.
RESUMO A Mastite em éguas é considerada uma doença rara sendo o Streptococcus equi. Staphylococcus sp., Corynebacterium sp., Actinobacillus sp., Nocardia sp. e as enterobacterias os micro-organismos mais frequentemente envolvidos. A doença está relacionada a injúrias e traumas nas mamas e tetos. Edema e fibrose da glândula mamária, leite com aspecto viscoso ou muco-purulento são observados nos casos de mastite clínica. O diagnóstico é baseado no exame clínico da mama associado ao cultivo microbiológico do leite. Os métodos indiretos para o diagnóstico de mastite subclínica como California Mastits Test e Contagem de Células Somáticas não são padronizados para a espécie em questão. A terapia para a mastite equina é baseada no uso sistêmico de antimicrobianos, com base nos resultados obtidos no teste in vitro de sensibilidade microbiana. Não há medidas de controle específicas para a mastite equina. Objetivou-se neste estudo revisar os principais aspectos relacionados a mastite em éguas com ênfase na etiologia, epidemiologia, sinais clínicos, diagnóstico, tratamento, medidas de controle e profilaxia.