RESUMO
BACKGROUND: Clinical diagnosis of human brucellosis (HB) is often difficult due to non-specific symptoms. Immunological tests have been the most common method used in HB diagnosis, but molecular methods based on quantitative polymerase chain reaction (qPCR) have largely replaced these diagnostic methods. The aim of this study was to validate a HB diagnostic qPCR method; assessing different target Brucella genes, and the influence of biological matrices (serum vs. whole blood) on analytical parameters. MATERIAL AND METHODS: Two target genes, IS711 and bcsp31, for HB molecular diagnosis were evaluated, together with biological matrix type (whole blood and serum) using samples spiked with Brucella abortus. In addition, diagnostic parameters of this qPCR method were evaluated in paired whole blood and serum samples from patients with suspected HB. RESULTS: Both genes could be potential diagnostic targets, but IS711 showed a lower limit of detection. In spiked matrix experiments, whole blood showed a lower limit of detection than serum after probit regression (224 vs. 3681 CFU/mL) and ANOVA analysis showed a significant (p < 0.001) difference between the Cq of whole blood at all dilutions and that of serum. In 12 paired clinical samples, no serum samples and only one whole blood sample tested positive for Brucella using this qPCR detection method. CONCLUSIONS: This standardized qPCR-based Brucella detection method could improve diagnosis of HB, serving as a rapid, highly sensitive, and specific test. Whole blood is better suited to qPCR-based HB diagnosis due to the presence of higher target DNA loads in this matrix, compared to serum.
Assuntos
Proteínas de Bactérias/genética , Sangue/microbiologia , Brucella/isolamento & purificação , Brucelose/microbiologia , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Soro/microbiologia , Brucella/classificação , Brucella/genética , Brucelose/sangue , Brucelose/diagnóstico , DNA Bacteriano/sangue , DNA Bacteriano/genética , HumanosRESUMO
A cinomose é uma doença altamente contagiosa causada por um RNA vírus de fita simples da família Paramyxoviridae, podendo acometer mamíferos de várias espécies, principalmente até os dois anos de idade devido a baixa resposta imunológica. Sua transmissão ocorre principalmente por meio de gotículas de aerossóis provenientes de todas as excreções corpóreas de animais infectados. Os animais infectados podem apresentar alterações oculares, cardíacas, neurológicas, dentárias e alguns sintomas sistêmicos como febre, diarreia, vômito, desidratação e anorexia. O diagnóstico baseia-se no histórico detalhado do animal, no exame físico e nos exames laboratoriais. A pesquisa demonstrou normalidade no hemograma e alterações significativas na bioquímica sérica apresentando linfopenia, eosinopenia e leucocitose por neutrofilia. A profilaxia ocorre através de vacinas atenuadas ou recombinantes administradas de forma correta a partir de 6 e 12 semanas de idade e o reforço feito a cada 3 a 4 semanas até atingir 14 a 16 semanas de idade, sendo necessário reforço anual.(AU)
Distemper is a highly contagious disease caused by a simple tapes RNA virus of the Paramyxoviridae family and can affect several species of mammals especially before the age of two years because the immune response is to low. It is transmitted primarily through aerosol droplets from all bodily excretions from infected animals. Infected animals may have ocular, cardiac, neurological, dental and some systemic symptoms like fever, diarrhea, vomiting, desydration and anorexy. The diagnosis is based on history of the animal, physical examination and laboratory tests. The research showed normal blood count and significant changes in serum chemistry presenting lymphopenia , eosinophenia and leukocytosis by neutrophils. Prophylaxis occurs through attenuated or recombinant vaccines administred correctly from 6 to 12 weeks of age and the reinforcing done every 3 to 4 weeks until 14 to 16 weeks of age, annual conjugate being required.(AU)
Assuntos
Animais , Cães , Técnicas de Laboratório Clínico , Prevenção de Doenças , Cinomose/diagnóstico , ParamyxoviridaeRESUMO
A cinomose é uma doença altamente contagiosa causada por um RNA vírus de fita simples da família Paramyxoviridae, podendo acometer mamíferos de várias espécies, principalmente até os dois anos de idade devido a baixa resposta imunológica. Sua transmissão ocorre principalmente por meio de gotículas de aerossóis provenientes de todas as excreções corpóreas de animais infectados. Os animais infectados podem apresentar alterações oculares, cardíacas, neurológicas, dentárias e alguns sintomas sistêmicos como febre, diarreia, vômito, desidratação e anorexia. O diagnóstico baseia-se no histórico detalhado do animal, no exame físico e nos exames laboratoriais. A pesquisa demonstrou normalidade no hemograma e alterações significativas na bioquímica sérica apresentando linfopenia, eosinopenia e leucocitose por neutrofilia. A profilaxia ocorre através de vacinas atenuadas ou recombinantes administradas de forma correta a partir de 6 e 12 semanas de idade e o reforço feito a cada 3 a 4 semanas até atingir 14 a 16 semanas de idade, sendo necessário reforço anual.
Distemper is a highly contagious disease caused by a simple tapes RNA virus of the Paramyxoviridae family and can affect several species of mammals especially before the age of two years because the immune response is to low. It is transmitted primarily through aerosol droplets from all bodily excretions from infected animals. Infected animals may have ocular, cardiac, neurological, dental and some systemic symptoms like fever, diarrhea, vomiting, desydration and anorexy. The diagnosis is based on history of the animal, physical examination and laboratory tests. The research showed normal blood count and significant changes in serum chemistry presenting lymphopenia , eosinophenia and leukocytosis by neutrophils. Prophylaxis occurs through attenuated or recombinant vaccines administred correctly from 6 to 12 weeks of age and the reinforcing done every 3 to 4 weeks until 14 to 16 weeks of age, annual conjugate being required.
Assuntos
Animais , Cães , Cinomose/diagnóstico , Prevenção de Doenças , Técnicas de Laboratório Clínico , ParamyxoviridaeRESUMO
Antiphospholipid syndrome (APS) is an acquired autoimmune thrombophilia characterized by the presence of a heterogeneous family of antibodies that bind to plasma proteins with affinity for phospholipid surfaces. The two major protein targets of antiphospholipid antibodies are prothrombin and β2-glycoprotein I (β2GPI). APS leads to aprothrombotic state, and it is characterized by the occurrence of arterial, venous or microvascular thrombosis or recurrent fetal loss. The diagnosis of APS is based on a set of clinical criteria and the detection of lupus anticoagulant (LA), anticardiolipin antibodies (ACA) or anti-β2GPI in plasma. Although laboratory tests are essential for APS diagnosis, these tests have limitations associated with the robustness, reproducibility and standardization. The standardization of diagnostic tests for detection of APLAs has been a challenge and a variety of results have been obtained using different commercial kits and in-house techniques. An increased sensitivity of the ELISA kits for detection of ACA effectively has contributed to APS diagnosis. However, the lack of specificity associated with a high number of false-positive results is a clinical and laboratorial challenge, since such results may lead to mistaken clinical decisions, such as prescription of oral anticoagulant, leading to the risk of hemorrhaging. Furthermore, clinicians are often unfamiliar with these tests and have difficulty interpreting them, requiring interaction between clinical and laboratory professionals in order to ensure their correct interpretation.
A síndrome do anticorpo antifosfolípide (SAAF) é uma trombofilia autoimune adquirida, caracterizada pela presença de uma família heterogênea de anticorpos que se ligam a proteínas plasmáticas com afinidade, por superfícies fosfolipídicas. As duas principais proteínas-alvo dos anticorpos antifosfolípides (AAF) são a protrombina e a β2-glicoproteína 1 (β2GP1). A SAAF está associada a um estado protrombótico e é clinicamente caracterizada pela ocorrência de trombose arterial, venosa ou microvascular ou perda fetal recorrente. O diagnóstico da SAAF é baseado em um conjunto de critérios clínicos e na detecção plasmática de anticoagulante lúpico (AL), anticorpo anticardiolipina (ACA) ou antiβ2GP1. Embora os testes laboratoriais sejam de fundamental importância para o diagnóstico da SAAF, eles apresentam limitações associadas à robustez, à reprodutibilidade e à padronização. A padronização de testes diagnósticos para a pesquisa de AAF tem sido um desafio, pois uma variedade de resultados pode ser obtida utilizando diferentes kits comerciais e técnicas in-house. Um aumento da sensibilidade dos kits de ELISA para a detecção do ACA contribuiu efetivamente para o diagnóstico da SAAF. No entanto, a falta de especificidade, associada a um número elevado de resultados falso-positivos, é um desafio clínico e laboratorial, uma vez que tais resultados podem levar a decisões clínicas erradas, como a prescrição de anticoagulante oral, levando ao risco de hemorragia. Além disso, os clínicos muitas vezes não estão familiarizados com esses testes e têm dificuldade em interpretá-los, sendo necessária a interação da clínica e dos profissionais do laboratório para assegurar sua correta interpretação.
Assuntos
Humanos , Anticorpos Anticardiolipina/sangue , Síndrome Antifosfolipídica/diagnóstico , Inibidor de Coagulação do Lúpus/sangue , /sangue , Anticorpos Anticardiolipina , Síndrome Antifosfolipídica/imunologia , Técnicas de Laboratório Clínico/métodos , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática/métodos , Inibidor de Coagulação do Lúpus , Reprodutibilidade dos Testes , Sensibilidade e EspecificidadeRESUMO
Justificativa e objetivos: Existe associação entre anemias hemolíticas autoimunes (AHA) e doença neoplásica, com consequente incompatibilidade sanguínea que dificulta a transfusão destes pacientes. Os autores descrevem e discutem a conduta em três casos com Teste de Coombs Direto (TCD) positivo e impossibilidade de determinação de grupo sanguíneo propostos para intervenção cirúrgica por doença neoplásica. Relato dos casos: 1º caso: paciente do sexo masculino, 87 anos, ASA III, para intervenção cirúrgica por neoplasia do cólon. Apresentou TCD positivo, foi tratado com corticoide, imunoglobulina (Ig) e eritropoietina, tendo-se conseguido tipar. No intraoperatório, administrou-se uma unidade de concentrado eritrocitário (UCE) sem incidentes. Faleceu 24 horas depois por acidente vascular encefálico isquêmico. 2º caso: paciente do sexo masculino, 77 anos, ASA III, para intervenção cirúrgica de carcinoma gástrico. Apresentou TCD positivo, realizou tratamento com corticoide e Ig, não se conseguindo tipar. A intervenção cirúrgica decorreu sem incidentes. Faleceu ao 18º dia pós-operatório após parada cardiorrespiratória. 3º caso: paciente do sexo feminino, 80 anos, ASA IV, para laparotomia exploradora de urgência. Apresentou também TCD positivo. A intervenção cirúrgica (hemicolectomia) decorreu sem incidentes. Faleceu às 48 horas do pós-operatório com acidente vascular encefálico isquêmico. Conclusões: Os autoanticorpos (Ac) circulantes nas AHA podem impossibilitar tipagem sanguínea e disponibilidade de sangue compatível para transfusão. O tratamento correto da AHA visa à remissão dos Ac e ao tratamento da anemia. Na urgência em transfundir sem possibilidade de tipagem, a transfusão sanguínea surge como medida life-saving.
Background and objectives: Neoplasias can be associated with autoimmune hemolytic anemia (AHA) with the consequent blood incompatibility that hinders blood transfusion. The authors describe and discuss the conduct in three patients undergoing surgical intervention for neoplastic disease with positive Coombs Test (CT), and the impossibility to determine the blood type. Case report: 1st case: 87-year old male patient, ASA III, scheduled for surgery for colon neoplasia. The patient had positive CT, being treated with corticosteroids, immunoglobulin (Ig), and erythropoietin, after which it was possible to determine his blood type. One unit of packed-red blood cells (PRBC) was transfused intraoperatively without intercurrences. Twenty four hours after the transfusion, the patient died due to an ischemic stroke. 2nd case: 77-year old male patient, ASA III, scheduled for surgery for a gastric carcinoma. The patient had a positive CT, being treated with corticosteroids and Ig, but we were unable to determine his blood type. The surgery was performed without intercurrences. The patient died on the 18th postoperative day after a cardiorespiratory arrest. 3rd case: 80-year old female patient, ASA IV, undergoing emergency exploratory laparotomy. She also had a positive CT. The surgery (hemicolectomy) was performed without intercurrences. The patient died 48 hours after the surgery from an ischemic stroke. Conclusions: Circulating autoantibodies in AHA can make it impossible to determine the blood type to transfuse compatible blood. Proper treatment of AHA is aimed at remission of autoantibodies and anemia. When it is not possible to determine the blood type, the procedure should be a life-saving blood transfusion.
Justificativa y objetivos: Existe una asociación entre las anemias hemolíticas autoinmunes (AHA) y la enfermedad neoplásica, con la consecuente incompatibilidad sanguínea que dificulta la transfusión de esos pacientes. Los autores describen y discuten la conducta en tres casos propuestos para la intervención quirúrgica por una enfermedad neoplásica, con el Test de Coombs Directo (TCD), positivo y la imposibilidad de la determinación de un grupo sanguíneo. Relato de los casos: 1º caso: paciente del sexo masculino, 87 años, ASA III, listo para la intervención quirúrgica por neoplasia del colon. Presentó un TCD positivo, fue tratado con corticoide, inmunoglobulina (Ig) y eritropoyetina, siendo posible la tipificación. En el intraoperatorio, se administró una unidad de concentrado eritrocitario (UCE) sin incidentes. La El paciente falleció 24 horas después por accidente vascular encefálico isquémico. 2º caso: paciente del sexo masculino, 77 años, ASA III, listo para intervención quirúrgica de carcinoma gástrico. Presentó un TCD positivo, realizó tratamiento con corticoide e Ig, sin haber logrado la tipificación. La intervención quirúrgica transcurrió sin incidentes. Falleció al 18º día del postoperatorio, después de una parada cardiorrespiratoria. 3º caso: paciente del sexo femenino, 80 años, ASA IV, para laparotomía exploradora de urgencia. También presentó un TCD positivo. La intervención quirúrgica (hemicolectomía), transcurrió sin incidentes. Falleció a las 48 horas del postoperatorio con un accidente vascular encefálico isquémico. Conclusiones: Los autoanticuerpos (Ac) circulantes en las AHA, pueden imposibilitar la tipificación sanguínea y la disponibilidad de sangre compatible para la transfusión. El tratamiento correcto de la AHA, tiene el objetivo de alcanzar la remisión de los Ac y de realizar el tratamiento de la anemia. Si tenemos la urgencia de transfundir sin la posibilidad de tipificar, la transfusión sanguínea...
Assuntos
Idoso , Idoso de 80 Anos ou mais , Feminino , Humanos , Masculino , Anestesia , Tipagem e Reações Cruzadas Sanguíneas , Teste de Coombs , Neoplasias/sangue , Neoplasias/cirurgiaRESUMO
Atualmente a doença renal é um grande problema de saúde pública, que acomete milhares de pessoas no Brasil e no mundo. O estudo da função e dos diversos processos patológicos renais tem despertado o interesse de muitos pesquisadores, principalmente no campo do desenvolvimento de testes que auxiliem os médicos a estabelecer um diagnóstico precoce, classificar a doença de base, obter prognóstico seguro e monitorar terapêutica medicamentosa. Neste artigo sete marcadores de função e de lesão renal são avaliados: uréia, creatinina, cistatina C, proteinúria, dismorfismo eritrocitário, microalbuminúria e fração hepática das proteínas ligadas a ácidos graxos. É apresentado um breve histórico da utilização clínica e da fisiopatologia de cada um deles, seguidas de sua aplicabilidade e dos avanços técnicos e metodológicos disponíveis. Apesar de melhorias terem sido conseguidas e incorporadas à prática laboratorial, nenhum marcador atualmente disponível é completamente eficaz em analisar a função e/ou a lesão renal de forma precisa, sendo imprescindível o conhecimento de todos eles para uma correta avaliação desses testes comuns na rotina laboratorial.
Nowadays, renal disease is an important public health problem, affecting millions of people in Brazil and in the world. The study of renal function and renal pathologic processes has aroused the interest of researchers, mainly in the field of development of new assays that could aid physicians in establishing early diagnosis, better classifying the disease, obtaining better outcome and monitoring drug therapeutics. In this article, seven laboratory markers of renal function or damage are evaluated: urea, creatinine, cystatin C, proteinuria, dysmorphic erythrocytes, microalbuminuria and liver-type fatty acid binding protein (L-FABP). For each one of them, a short historical report of its clinical utility and physiopathology is presented. Then technical and methodological approaches are described as well as its utility in clinical management of kidney patients. Although improvements have been reached and incorporated in laboratorial practice, none of these markers is effective enough to define precisely kidney function and/or damage and an extensive understanding of all of these markers is crucial to correct evaluate renal function.