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Drug-induced liver injury (DILI) is one of the leading causes of acute liver injury. While many factors may contribute to the susceptibility to DILI, obese patients with hepatic steatosis are particularly prone to suffer DILI. The secretome derived from mesenchymal stem cell has been shown to have hepatoprotective effects in diverse in vitro and in vivo models. In this study, we evaluate whether MSC secretome could improve DILI mediated by amiodarone (AMI) or tamoxifen (TMX). Hepatic HepG2 and HepaRG cells were incubated with AMI or TMX, alone or with the secretome of MSCs obtained from human adipose tissue. These studies demonstrate that coincubation of AMI or TMX with MSC secretome increases cell viability, prevents the activation of apoptosis pathways, and stimulates the expression of priming phase genes, leading to higher proliferation rates. As proof of concept, in a C57BL/6 mouse model of hepatic steatosis and chronic exposure to AMI, the MSC secretome was administered endovenously. In this study, liver injury was significantly attenuated, with a decrease in cell infiltration and stimulation of the regenerative response. The present results indicate that MSC secretome administration has the potential to be an adjunctive cell-free therapy to prevent liver failure derived from DILI caused by TMX or AMI.

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OBJECTIVE: To assess hepatic transcriptional signatures in infants with gestational alloimmune liver disease (GALD) compared with other etiologies of neonatal acute liver failure (ALF) and older pediatric patients with ALF. STUDY DESIGN: Neonates with ALF (international normalized ratio ≥2 within 30 days of life) and deceased neonates without liver disease (<30 days of age) with available liver tissue between 2010 and 2021 were identified at Ann & Robert H. Lurie Children's Hospital of Chicago. Clinical information, liver histology, and data from RNA-sequencing analysis was compared between neonates with GALD, non-GALD etiologies of neonatal ALF, and nondiseased neonatal liver. RESULTS: Quantification of trichrome staining showed an increase in fibrosis in patients with GALD vs those with non-GALD neonatal ALF (P = .012); however, quantification of α-cytokeratin 19-positive ductules did not differ between groups (P = .244). Gene set enrichment analysis of RNA-sequencing data identified the pathways of complement activation, fibrosis, and organogenesis to be upregulated in patients with GALD with ALF. In contrast, patients with non-GALD causes of neonatal ALF had increased gene expression for interferon-driven immune pathways. Individual genes upregulated in GALD included matrix metallopeptidase 7, hepatocyte growth factor, and chemokine ligand 14. CONCLUSIONS: We have identified distinct pathways that are significantly upregulated in patients with GALD and potential disease-specific diagnostic biomarkers. Future studies will aim to validate these findings and help identify GALD-specific diagnostic biomarkers to improve diagnostic accuracy and reduce GALD-associated patient mortality.

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BACKGROUND: To investigate the regeneration process of autologous implants of liver on the retroperitoneum. METHODS: Thirty male Fisher rats were used divided in to group 1 (G1): studied 60 d after surgery; group 2 (G2): studied 90 d after surgery; group 3 (G3): studied 180 d after surgery; and group C (GC): animals without surgery. Hepatic fragment was processed for histologic and biochemical analysis. RESULTS: There was inflammatory infiltrate, diffuse hydropic degeneration, necrosis, and moderate fibrosis that reduced in direct relation to the postsurgical time. The concentration of albumin was different between GC and G1 and between G1 and G3 (P = 0.0007). The Catalase (CAT) was related to the time of surgery with GC being different when compared with G1, G2, and G3 (P < 0.0001). The oxidative stress measured through the thiobarbituric acid reactive substances lipid peroxidation was different between the GC and the G2 groups (P = 0.0381). CONCLUSIONS: The analysis made showed hepatic regeneration in the fragment subjected to autologous transplant at the retroperitoneum.

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OBJETIVO: Avaliar a regeneração hepática com modulação pelo pré-condicionamento isquêmico após isquemia, reperfusão e hepatectomia parcial. MÉTODOS: Foram usadas 24 ratas Wistar, de 12 semanas de idade, distribuídas randomicamente em quatro grupos: Grupo Controle (SHAM), Grupo Hepatectomia (HEP), Grupo Isquemia e Reperfusão (GIR) e Grupo Pré-condicionamento Isquêmico (PRE). Foi feita a análise das enzimas hepáticas ALT e AST, avaliação da regeneração através dos pesos inicial e final do fígado e da proliferação dos hepatócitos pela análise imunoistoquímica com o Proliferating Cell Nuclear Antigen (PCNA). RESULTADOS: Em todos os grupos ocorreu regeneração do fígado, não havendo significância estatística entre eles. Houve diferenças significativas em relação a ALT e AST entre os grupos HEP-SHAM, GIR-PRE, GIR-SHAM E PRE-SHAM (p< 0,05). Também houve diferença significativa em relação à marcação de PCNA do grupo SHAM quando comparado aos demais grupos (p< 0,05). CONCLUSÃO: O pré-condicionamento isquêmico diminuiu a lesão hepática, mas não influenciou na regeneração até 48 horas.

OBJECTIVE: To evaluate liver regeneration modulated by ischemic preconditioning after ischemia, reperfusion and partial hepatectomy. METHODS: We used 24 Wistar rats of 12 weeks of age, which were randomly assigned into four groups: control (SHAM), hepatectomy (HEP), ischemia and reperfusion (IRG) and Ischemic Preconditioning (SRG). Analyses were made on liver enzymes ALT and AST, assessment of regeneration through the initial and final weight of the liver and the proliferation of hepatocytes by immunohistochemical analysis with Proliferating Cell Nuclear Antigen (PCNA). RESULTS: In all groups there was liver regeneration, with no statistically significant difference between them. There were significant differences in ALT and AST between groups HEP and SHAM, PRE and GIR, GIR and SHAM and PRE and SHAM (p <0.05). There were also significant differences in the PCNA labeling of the SHAM group as compared to other groups (p <0.05). CONCLUSION: The ischemic preconditioning decreased liver injury, but did not influence the regeneration up to 48 hours.

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RACIONAL: O fígado adulto normal é quiescente e apenas uma pequena porcentagem das suas células é submetida à divisão celular em qualquer tempo, mas pode rapidamente iniciar a proliferação celular em resposta a um estímulo. Este processo pode ser desencadeado através da hepatectomia parcial. OBJETIVOS: Avaliar o efeito da hipertensão portal provocada pela oclusão parcial da drenagem venosa hepática sobre a regeneração do fígado remanescente de ratos submetidos à hepatectomia parcial. MÉTODOS: Foram realizadas hepatectomias a dois terços em 50 ratos Wistar machos adultos. Os animais foram divididos em cinco grupos: um grupo controle e quatro grupos de estudo que foram submetidos a diferentes graus de plicatura da veia cava inferior supra-hepática. Após 240 horas do estímulo para regeneração realizou-se nova laparotomia com aferição das pressões portal e de veia cava inferior, além de biópsia hepática. Analisaram-se os fragmentos por imunoistoquímica para os marcadores Ki-67 e fator de von Willebrand. A deposição de colágeno foi avaliada pela coloração tricrômico de Masson e a função hepática através de marcadores sorológicos. RESULTADOS: A proliferação celular nos animais submetidos à hepatectomia parcial e hipertensão portal de diversos graus persistiu mais elevada quando comparada ao grupo controle. O índice de proliferação para Ki-67 estava mais elevado nos grupos submetidos à elevação da pressão portal. A expressão do fator de von Willebrand estava acentuadamente elevada após a hepatectomia parcial nos grupos com maior grau de hipertensão portal. Houve pouco depósito de colágeno no tecido hepático nos animais dos quatro grupos com plicatura parcial da veia cava inferior supra-hepática, porém a deposição foi mais intensa nos grupos com níveis de pressão portal menores. CONCLUSÕES: Ratos submetidos à hepatectomia parcial a 70 por cento e hipertensão portal, após 240 horas, apresentam: 1. atraso no processo regenerativo diretamente proporcional aos...

BACKGROUND: The normal adult liver is quiescent and only a small percentage of its cells is subjected to cell division at any time, but can quickly initiate cell proliferation in response to a stimulus. This process can be triggered by partial hepatectomy. AIM: To evaluate the effect of portal hypertension caused by partial occlusion of hepatic venous drainage on regeneration of remnant liver of rats after partial hepatectomy. METHODS: It was performed two-thirds hepatectomy in 50 adult male Wistar rats. The animals were divided into five groups: a control group and four study groups were subjected to different degrees of plication of inferior vena cava-hepatic above. After 240 hours of the stimulus for regeneration took place relaparotomy with measurement of portal pressure and inferior vena cava, and liver biopsy. Fragments were analyzed by immunohistochemistry for the markers Ki-67 and von Willebrand factor. The collagen deposition was evaluated by Masson's trichrome staining and liver function using serological markers. RESULTS: Cell proliferation in animals subjected to partial hepatectomy and portal hypertension persisted in varying degrees higher when compared to the control group. The proliferation index for Ki-67 was higher in the groups submitted to the elevation of portal pressure. The expression of von Willebrand factor was markedly elevated after partial hepatectomy in groups with higher degree of portal hypertension. There was little collagen deposition in liver tissue in animals of the four groups with partial plication of the inferior vena cava above-liver, but the deposition was more intense in the group with lower portal pressure. CONCLUSIONS: Rats underwent 70 percent partial hepatectomy and portal hypertension, after 240 hours, presented: 1. delay in the regenerative process directly proportional to pressure levels in the portal system; 2. after ten days, there was the proliferation of hepatocytes proportionally more intense...

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A fibrose hepática é o resultado de uma lesão crônica, com a ativação de células inflamatórias e fibrogênicas no fígado, as quais levam a um acúmulo excessivo de proteínas de matriz extracelular (MEC). Essas alterações resultam na morte de células do fígado, com desorganização e perda da função do parênquima hepático. A cirrose é o estágio avançado da fibrose, e culmina na falência hepática, uma condição potencialmente fatal cujo único tratamento efetivo é o transplante de fígado, o qual é limitado pela disponibilidade de órgãos. Na busca por terapias alternativas visando a regeneração hepática, o transplante de células mononucleares de medula óssea (CMMO) mostrou resultados benéficos e promissores em modelos animais e alguns protocolos clínicos. Entre essas células, estão as células-tronco hematopoiéticas e mesenquimais, que apresentam potencial regenerativo e modulador da resposta inflamatória. Este estudo pretendeu avançar na compreensão dos mecanismos pelos quais as CMMO podem ajudar na regeneração hepática. Ratos com fibrose hepática induzida por ligadura do ducto biliar (LDB) foram transplantados com CMMO e comparados com ratos com fibrose sem transplante e ratos normais. Parâmetros hepáticos como componentes da MEC (colágeno total, colágenos tipos I e IV, laminina, metaloproteinases de matriz – MMPs), componentes celulares (células fibrogênicas, células de Kupffer e colangiócitos) e enzimas hepáticas foram analisados por microscopia de luz, microscopia confocal, western blotting e espectrofotometria. Os resultados mostraram que o transplante de CMMO contribui para a regeneração hepática de maneira global, (a) diminuindo o acúmulo de colágeno e laminina; (b) aumentando a produção de MMPs que favorecem o remodelamento da MEC, principalmente por células de Kupffer; (c) normalizando a quantidade de colangiócitos e diminuindo a quantidade de células fibrogênicas; e (d) normalizando os níveis sanguíneos das enzimas hepáticas...

Liver fibrosis results from a chronic injury, with the activation of hepatic inflammatory and fibrogenic cells, which lead to an excessive extracellular matrix (MEC) protein accumulation. These alterations result in the death of liver cells, along with disorganization and loss of function of the hepatic parenchyma. Cirrhosis is the advanced stage of fibrosis, and culminates in hepatic failure, a potentially fatal condition whose only effective treatment is liver transplantation, which is limited by organ shortage. Amid the search for alternative therapies aiming hepatic regeneration, bone marrow mononuclear cell (CMMO) transplantation has shown promising and benefic results in animal models and some clinical protocols. Amongst these cells are hematopoietic and mesenchymal stem cells, which present regenerative potential and modulate inflammatory response. This study aimed to add knowledge on the mechanisms by which CMMO may prompt hepatic regeneration. Rats with liver fibrosis induced by bile duct ligation (LDB) were transplanted with CMMO and compared to fibrotic and normal rats without transplantation. Hepatic parameters such as MEC components (total collagen, collagens types I and IV, laminin and matrix metalloproteinases – MMPs), cellular components (fibrogenic and Kupffer cells, cholangiocytes) and liver enzymes were analyzed through confocal, fluorescence and light microscopy, western blotting and spectrophotometry. Results showed that CMMO contribute to liver regeneration globally, (a) reducing collagen and laminin accumulation; (b) increasing MMP production, specially by Kupffer cells, that favor MEC remodeling; (c) normalizing cholangiocyte numbers and reducing fibrogenic cells; and (d) normalizing plasma levels of hepatic enzymes...

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INTRODUÇÃO: A regeneração hepática é um mecanismo para superar a perda de tecido funcional do fígado. Este processo é estudado através de diferentes métodos. OBJETIVO: Avaliar o efeito da oclusão parcial da drenagem venosa hepática sobre a regeneração do fígado remanescente de ratos submetidos à hepatectomia parcial. MÉTODO: Foram colhidas biópsias de fígado em 30 ratos Wistar machos, e a seguir realizada hepatectomia a dois terços. Os animais foram divididos em três grupos: um grupo controle e dois grupos de estudo, submetidos a diferentes graus de estenose da veia hepática direita. Após 96 horas do estímulo para regeneração hepática, todos submeteram-se à outra biópsia hepática. Analisaram-se os fragmentos por imunoistoquímica para os marcadores Ki-67 e fator de von Willebrand. Para a leitura das amostras utilizou-se o sistema SAMBA 4000. A deposição de colágeno foi avaliada pela coloração tricrômico de Masson. RESULTADOS: A proliferação celular dos animais submetidos à hepatectomia parcial e estenose moderada ou severa da veia hepática direita persistiu mais elevada quando comparada ao grupo controle. O Índice de Marcação para o Ki-67 foi significativamente mais elevado após a hepatectomia nos grupos submetidos à oclusão parcial da veia hepática, tanto moderada quanto severa. A expressão de fator de von Willebrand estava diminuída após a hepatectomia parcial nos três grupos. Houve pouco depósito de colágeno no tecido hepático nos animais dos dois grupos com estenose da veia hepática direita. CONCLUSÃO: A oclusão parcial da drenagem venosa hepática em ratos submetidos à hepatectomia parcial prolonga o tempo de proliferação de células hepáticas quando comparado aos animais com veias de calibre normal. Como consequência, também houve atraso na restauração da matriz extracelular e na formação de novos vasos sinusoidais.

BACKGROUND: Hepatic regeneration is a mechanism to overcome the loss of liver functional tissue. This process has been studied through different methods. AIM: To evaluate the effect of the partial occlusion of the hepatic venous drainage on the regeneration of the remainder livers in rats submitted to partial hepatectomy. METHOD: Liver biopsies from 30 male Wistar rats were collected, and after they were submitted two-third hepatectomy. The animals were divided in three groups: a control group and two study groups, which were submitted to different degrees of the right hepatic vein stenosis. After 96 hours of the stimulation for regeneration all rats were submitted to another hepatic biopsy. The analysis of the fragments was performed by immunohistochemistry for the Ki-67 and von Willebrand factor markers. The reading of the samples was done using the SAMBA 4000 system. Collagen deposition was evaluated by the trichromic Masson's staining. RESULT: The cellular proliferation of the animals submitted to partial hepatectomy and stenosis of the right hepatic vein persists higher when compared to control group. The Label Index for Ki-67 was significantly higher post-hepatectomy in groups submitted to hepatic vein partial occlusion. The expression of von Willebrand factor was strongly decreased after the hepatectomy in all groups. There was little deposit of collagen in the hepatic tissue of animals with hepatic vein stenosis. CONCLUSION: Partial occlusion of the hepatic venous drainage in rats submitted to partial hepatectomy prolongs the time of hepatic cells proliferation when compared to the animals with vein of normal caliber. Consequently, there will be also a delay in the restoration of the extracellular matrix and in the formation of new sinusoidal vessels.

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The authors prepared a detaile review of experimental surgical models of acute liver failure. They comment on the aspects of experimental induction, the advantages and disadvantages of the different models, as well as on the possibilities of diagnosis and treatment.

Os autores fazem uma revisão pormenorizada sobre os principais modelos cirúrgicos experimentais de falência hepática fulminante. Abordam aspectos da indução experimental das vantagens e desvantagens dos diferentes modelos, tecendo comentários sobre os modelos de indução da falência hepática, e das possíveis formas de diagnóstico e tratamento.

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The authors prepared a detaile review of experimental surgical models of acute liver failure. They comment on the aspects of experimental induction, the advantages and disadvantages of the different models, as well as on the possibilities of diagnosis and treatment.

Os autores fazem uma revisão pormenorizada sobre os principais modelos cirúrgicos experimentais de falência hepática fulminante. Abordam aspectos da indução experimental das vantagens e desvantagens dos diferentes modelos, tecendo comentários sobre os modelos de indução da falência hepática, e das possíveis formas de diagnóstico e tratamento.

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Many substances have been used after partial hepatectomy in order to determine how they act on the process of hepatic regeneration. An adequate blood flow seems to be very important in this process. Increased plasma histamine levels after hepatectomy in rats have been reported by some investigators. Substances that inhibit histidine-decarboxylase and histaminase lead to an elevation in endogenous histamine with sinusoid vasodilation and acceleration of hepatic regeneration. The objective of the present study was to determine the effect of exogenous histamine administered to partially hepatectomized rats. Thirty two Wistar rats were submitted to approximately 67% hepatectomy. The animals in the experimental group received subcutaneously 0.5 mg/kg/day of histamine and the controls received an equal volume of isotonic saline. Determinations were made after 36 hours and after 7 days. Liver weight did not differ between groups. The number of mitotic figures in 10 fields was higher in the experimental group after 36 hours (p=0.010). On the seventh day, the number of mitotic figures was similar for both groups. We conclude that the administration of exogenous histamine, perhaps due to the short half-life of the substance, increases the number of mitotic figures at the beginning of the process but has no effect on regeneration after 7 days.

Muitas substâncias têm sido utilizadas após hepatectomias parciais a fim de conhecer como elas atuam sobre o processo de regeneração hepática. Adequado fluxo sangüíneo parece ter muita importância neste processo. Autores descreveram, após hepatectomias em ratos, elevação dos níveis plasmáticos de histamina. Substâncias inibidoras da histidina-decarboxilase e da histaminase leva a elevação da histamina endógena com vasodilatação sinusoidal e aceleração da regeneração hepática. No presente estudo busca-se conhecer a influência da histamina exógena administrada à ratos parcialmente hepatectomizados. Utilizaram-se 32 ratos Wistar que sofreram hepatectomia de aproximadamente 67% da víscera. Os animais do grupo experimento receberam por via subcutânea 0,5 mg/Kg/dia de histamina e os do grupo controle igual volume de solução salina isotônica. As aferições foram realizadas com 36 horas e 7 dias. A avaliação do peso da víscera não mostrou diferença entre os grupos. O número de figuras de mitose em 10 campos foi maior no grupo experimento com 36 horas (p=0,010). No sétimo dia o número delas era semelhante nos dois grupos. Concluiu-se que a administração de histamina exógena, talvez pela sua vida média curta, aumenta o número de figuras de mitose no início do processo, não interferindo na regeneração ao final de 7 dias.

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We performed an experimental study with the purpose to verify if the use of pilocarpine produces a difference in the velocity of the hepatic regeneration. Its known that in salivectomized rats the regeneration of the liver gets decreased. Its also known that the pilocarpine increases the salivation of this animals. In the first phase we determined the dose of pilocarpine to be used. In the second phase of the project we realized the hepactomies, parching 52,8% of the liver on average. Our results demonstrated that the pilocarpine decreases the total loss of body wheight at the end of 48 hours after partial hepactomies (p=0,55) and also decreases the hepatic edema during its regeneration (p= 0,11), but we observed a greater wheight of the liver in regeneration in the control group in the first day (p=0,016).

Com o objetivo de verificar se o uso da pilocarpina produz diferença na velocidade da regeneração hepática empreendemos um estudo experimental. Sabe-se que em ratos salivectomizados a regeneração do fígado fica diminuída. Sabe-se também que a pilocarpina aumenta a salivação destes animais. Na primeira etapa determinamos a dose de pilocarpina a ser utilizada. Na segunda etapa do projeto foram realizadas as hepatectomias ressecando em média 52,8% do fígado. Nossos resultados demonstraram que a pilocarpina diminui a perda de peso corporal total ao final de 48 horas pós hepatectomia parcial ( p=0,55 ) e também diminui o edema hepático durante sua regeneração (p= 0,11 ), mas observamos um peso maior do fígado em regeneração no grupo controle no primeiro dia (p= 0,016).

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Over the past 6 years we have used the Sangenstaken-Blackmore balloon to tamponade transfixing hepatic lesions. To replace this foreign body, we have considered the use of type I collagen, manufactured at Univ. Campinas, which can be molded to the entire wounded area, thus tamponading all surface irregularities. In this way, a complete tamponade may be achieved, and bile loss is prevented. Complete absorption of the material removes the problem of a foreign body. Twenty mongrel dogs received a perforating transfixing lesion in the central region of the liver, similar to that caused by a firearm bullet. Into the wounded tunnel type I collagen was introduced. Evaluations were made in the 4th, 7th, 15th and 30th day after the intervention, when animals were sacrificed. Polarizing microscope evaluation induced a homogeneous scar formation, with early, organized hepatic regeneration evident from the 7th day onward. It is therefore believed that the use of type I collagen is an effective and safe method to be used in this type of hepatic wounds.

Nos últimos seis anos temos utilizado o balão de SANGESTAKEN-BLACKMORE para o tamponamento de lesões transfixantes hepáticas. Para substituir este corpo estranho, consideramos o uso de colágeno tipo I produzido na UNICAMP, o qual pode ser injetado e moldado ocupando toda a área lesada e o trajeto anfractuoso ou irregular. Desta forma, pode-se conseguir um tamponamento completo, coibindo a hemorragia e sustando a perda de bile. O colágeno será posteriormente reabsorvido não funcionando como corpo estranho. Vinte cães foram submetidos a lesão transfixante na região central do fígado, procurando simular uma lesão produzida por um projétil de arma de fogo. Quatro destes animais, não receberam tratamento e foram a óbito por choque hemorrágico. Em todos os outros 16 animais, aplicou-se o colágeno tipo I em toda a extensão do túnel formado pela lesão, através de injeção do material. Foram realizadas avaliações clínicas no pós-operatório, sendo os cães sacrificados, em grupo de quatro, aos quatro, sete, 15 e 30 dias de pós-operatório. O estudo macroscópico e o microscópico, tanto à microscopia óptica quanto à de polarização, revelou uma formação cicatricial homogênea, com regeneração hepática intensa, precoce e organizada, a partir do 7º dia de pós-operatório. Conclui-se que a aplicação do colágeno tipo I, nestes tipos de ferimentos, são de aplicação simples e segura.