RESUMO

Leptospirosis is a zoonosis that can infect buffaloes and other mammalians, and it's caused by Gram-negative bacteria of the genus Leptospira spp. The infection occurs through contact with urine or a contaminated environment with the mucous membranes of the animals, and the disease has two phases: leptospiremia and leptospiruria. The objective of this study was to determine the frequency of leptospirosis in buffaloes in the state of Paraná, Brazil, as well as the main serovars present in this area. A total of 276 blood samples were collected from buffaloes from 18 properties located in different cities and mesoregions of Paraná state. A microscopic agglutination test (MAT) was performed to detect the presence of anti-Leptospira spp. antibodies and to identify its serovars. The prevalence was 77.17% (213/276) of buffaloes seropositive for at least one serovar. The most frequent serovar was Icterohaemorrhagiae, followed by the Pomona serovar and serovar Hardjo. This study seems to be the first to determine the frequency of buffaloes with leptospirosis in the state of Paraná. Prevention and control measures are important to control the disease in herds.

Leptospirose é uma zoonose que infecta búfalos e outros mamíferos e é causada por bactérias Gram-negativas do gênero Leptospira spp. A infecção ocorre por meio do contato com a urina ou ambiente contaminado com as membranas mucosas dos animais e a doença possui duas fases: leptospiremia e leptospirúria. O objetivo deste trabalho foi determinar a frequência da leptospirose em bubalinos provenientes do estado do Paraná, assim como determinar os principais sorovares presentes no estado. Um total de 276 amostras de sangue foram coletados de búfalos provenientes de 18 propriedades localizadas em 14 municípios de diferentes mesorregiões do estado do Paraná. O teste de soroaglutinação microscópica (SAM) foi realizado para detecção da presença de anticorpos anti-Leptospira spp. e identificação dos respectivos sorovares. A prevalência de búfalos soropositivos para ao menos um sorovar foi de 77,17% (213/276). O sorovar mais frequente identificado nestes búfalos foi o Icterohaemorrhagiae, seguido pelos sorovares Pomona e Hardjo. Este é o primeiro estudo a determinar a frequência de búfalos com leptospirose no estado do Paraná. Medidas de controle e prevenção são importantes para o controle do agente nos rebanhos.

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Leptospirosis affects several animal species, including man. This study aimed to evaluate the prevalence of Leptospira spp. and to identify factors associated with the risk of Leptospira spp. in dairy cattle in the municipality of Ji-Paraná, RO, Brazil, sampled by rural sector, from September 2012 to November 2013. Blood samples from 627 dairy cows were randomly collected from 63 farms belonging to six rural sectors. Leptospirosis was diagnosed by the microscopic serum agglutination technique. Of the 627 animals tested, 255 had anti-Leptospira antibodies (40.48%, 95% CI: 36.64-44.31) and 57 of the 63 studied dairy farms (90.5%, 95% CI: 83.23-97.72) had at least one reactive animal. The results indicate that serovar Hardjo had the highest (12.38%. 95% CI: 10.03-15.18) followed by serovars Shermani, Wolffi, Hebdomadis and Canicola occurrence in dairy cows. Additionally, infection was also associated with abortion occurrences in cows of 36 farms (57.14%) and the presence of dogs roaming free with access to pasture, water and cattle in 47 farms (74.60%). Therefore, free-roaming animals are considered a predisposing factor, highlighting the need for adopting prophylactic measures while raising the awareness from rural producers about the importance and the economic losses that leptospirosis may cause.

A leptospirose acomete diversas espécies animais, inclusive o homem. Este estudo teve como objetivo avaliar a prevalência de anticorpos contra Leptospira spp., bem como identificar fatores associados ao risco da infecção por Leptospira spp. em bovinos de leite do município de Ji-Paraná - RO, amostrados por setor rural, de setembro de 2012 a novembro de 2013. Amostras de sangue foram coletadas sistematicamente de 627 fêmeas leiteiras, oriundas de 63 propriedades pertencentes a seis setores rurais. O diagnóstico da leptospirose foi realizado por meio da soroaglutinação microscópica. Constatou-se que 255 animais possuíam anticorpos anti-Leptospira (40,48%, IC95%: 36,64-44,31). Das 63 propriedades estudadas, 57 (90,5%, IC95%: 83,23-97,72) apresentavam pelo menos um animal reagente. Observou-se maior ocorrência do sorovar Hardjo nas fêmeas bovinas (12,38%, IC95%: 10,03-15,18), seguido dos sorovares Shermani, Wolffi, Hebdomadis e Canicola. Observaram-se, como fatores associados à infecção por sorovar, a ocorrência de aborto em fêmeas de 36 propriedades estudadas (57,14%), bem como a existência de cães criados livres em 47 propriedades (74,60%) e com acesso ao pasto, à água e aos bovinos, o que reforça a necessidade de adoção de medidas profiláticas e a conscientização dos produtores rurais sobre a importância e os prejuízos que podem ser causados pela leptospirose.

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Leptospirosis is a global zoonotic bacterial disease which is a threat for humans and most mammals. Bacterin vaccines for leptospirosis are available however they are severely limited in cross protection between serogroups. Leptospira typically colonize the kidneys of reservoir hosts where they are subsequently shed in the urine and persist in the environment and can thus be indirectly or directly transmitted to incidental hosts. Leptospira borgpetersenii serovar Hardjo is the primary cause of leptospirosis in cattle which can result in abortion, unhealthy calves, and rebreed problems. This dataset comprises proteomic profiles of four strains of L. borgpetersenii serovar Hardjo propagated at the routinely utilized culture temperature of 29 °C, and a newly achieved culture temperature of 37 °C, which more closely emulates the temperature of an infected host. The strains analyzed include JB197 (established strain that causes Hardjo atypical acute disease in the hamster model of leptospirosis), HB203 (established strain, causes typical chronic disease in hamsters), as well as TC129 and TC273 (recently isolated strains from the central United States). Differential expression profiles were detected not only between strains but also within strains between culture temperatures. Mass spectrometry data are available via ProteomeXchange with identifier PXD032831.

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Resumen Se describe el primer aislamiento y la tipificación molecular de Leptospira borgpetersenii serovar Hardjo Bovis en Argentina, obtenido a partir de orina de vacas abortadas de unrodeo de cría ubicado en Saladillo, provincia de Buenos Aires. Los abortos coincidieron con unperíodo de importantes inundaciones, en el que varios animales presentaron títulos serológicossospechosos y posterior seroconversión. El porcentaje de abortos alcanzó el 3,5% del total delrodeo, compuesto por 1700 vacas, y se aisló el microorganismo en 7 de 20 muestras de orinaobtenidas.

Abstract We here describe the first isolation and molecular typing of Leptospira borgpe-tersenii serovar Hardjo Bovis in Argentina, obtained from urine of aborted cows from abreeding herd located in Saladillo, Buenos Aires Province. The abortions occurred in coincidence with important floods with many cows presenting suspicious serological titers and subsequentseroconversion. The percentage of abortions was 3.5% of a herd of 1700 cows and the microor-ganism was isolated from 7 of the 20 urine samples obtained.

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We here describe the first isolation and molecular typing of Leptospira borgpetersenii serovar Hardjo Bovis in Argentina, obtained from urine of aborted cows from a breeding herd located in Saladillo, Buenos Aires Province. The abortions occurred in coincidence with important floods with many cows presenting suspicious serological titers and subsequent seroconversion. The percentage of abortions was 3.5% of a herd of 1700 cows and the microorganism was isolated from 7 of the 20 urine samples obtained.

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Bovine leptospirosis is often associated with host-adapted leptospires infections, such as strains belonging to the Sejroe serogroup. Although bovine leptospirosis by adapted strains may result in abortions, fetal death, premature births and the birth of weak and/or low-weight calves, this infection is more closely associated with subtler syndromes, such as subfertility and early embryonic death. In this way, this silent disease can go unnoticed and undiagnosed, compromising reproductive efficiency with a consequent decrease in the productivity of herds over long periods. For many years, genital tract infection has been considered a secondary effect of renal infection with the assumption being that leptospires are found in the genital tract due to bacteremia caused by renal colonization. In contrast to this hypothesis, there is some evidence in the literature that suggests that genital leptospirosis should be considered a specific syndrome dissociated from renal/systemic disease. Therefore, this paper aims to gather and critically analyze information about genital leptospirosis in cattle, considering the disease a distinct syndrome, herein denominated bovine genital leptospirosis (BGL), that requires a unique approach to diagnosis and treatment.

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This study investigated the risk factors associated with seroreactivity to Leptospira sp. in horses from Brazilian Amazon. Blood samples were collected and microscopic agglutination test was performed, and univariate and multivariate analyses were conducted for association with risk factors. General seroprevalence was 32.7% and the most prevalent serogroup observed was Sejroe (5.9%). Seroreactivity was associated with age, sex, activity (work, leisure, or both), feed supplementation, trash accumulation, and presence of felines. Epidemiology of leptospirosis remains poorly understood in Amazon region, particularly in livestock, requiring more studies to improve control and prevention measures.

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This study investigated the effects of rainfall on incidental and host-maintained leptospiral infections in cattle in a tropical region. Serum and urine specimens were collected from 582 bovines in a slaughterhouse. Seropositivity during rainy seasons was 43.6% (158/362) and during dry seasons was 31.8% (70/220; P = 0.0047). Positivity by urine PCR in rainy seasons was 42.3% (153/362) and 33.2% (73/220; P = 0.0296) in dry seasons. Additionally, increases in rainfall rates had different effects on host-adapted (serogroup Sejroe) and incidental (all other serogroups) leptospiral infections. There was a significant increase in the number of cattle shedding Leptospira during the rainy season (CI 1.04-2.09; P = 0.0296), suggesting temporary (transient) urinary shedding of incidental serogroups. Incidental and host-maintained Leptospira infections in cattle require different diagnostic techniques and control strategies.

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Buscando suplir la carencia de informaciones sobre la prevalencia de los serotipos de Leptospira spp. en la microrregión de Francisco Beltrão, el objetivo de este trabajo fue mostrar la importancia económica de la leptospirosis. Para esto, fueron analizadas 312 muestras de suero de vacas de la raza Holandesa localizadas en la microrregión de Francisco Beltrão, en el estado de Paraná, Brasil. El resultado fue una frecuencia de 41,35% de vacas positivas para por lo menos en uno de los serotipos. Del total de muestras reactivas para los variados serotipos, la frecuencia fue la siguiente: Icterohaemorrhgiae 4,65%, Pomona 3,10%, Hardjo 81,39%, Wolffi 29,46%, Grippotyphosa 6,98%, y Butembo 5,43%. Estos datos revelan que vacas de leche de la microrregión de Francisco Beltrão, presentan frecuencia elevada de varios serotipos de Leptospira spp., mostrando la importancia del conocimiento serológico de esta enfermedad.(AU)

The aim of this study was to assess the prevalence of serovars of Leptsopira spp. in the microregion of Francisco Beltrão, providing new information and demonstrating the economical importance of the Leptospirosis. Sera samples (n = 312) collected in bovines Holstein Friesian breed reared at the microregion of Francisco Beltrão, state of Paraná (Brazil), were used in this study. A frequency of 41.35% of reagent animals for at least one serovar was detected. The overall frequency for all serovars was the follows: Icterohaemorrhagiae 4.65%, Pomona 3.10%, Hardjo 81.39%, Wolffi 29.46%, Grippotyphosa 6.98%, Butembo 5.43%. These data revealed that cows milk from the microregion of Francisco Beltrão present a high number of serovars of Leptospira spp. showing the importance of the serological knowledge of this disease.(AU)

Buscando suprir a carência de informações sobre a prevalência dos sorovares de Leptospira spp. na microrregião de Francisco Beltrão, objetivou-se nesse trabalho mostrar a importância econômica da leptospirose. Para tanto, foram analisadas 312 amostras de soro de vacas da raça Holandesa localizadas na microrregião de Francisco Beltrão no estado do Paraná, Brasil. O resultado foi uma frequência de 41,35% de vacas positivas para pelo menos um dos sorovares. Do total de amostras reagentes para os variados sorovares, a frequência foi a seguinte: Icterohaemorrhgiae 4,65%, Pomona 3,10%, Hardjo 81,39%, Wolffi 29,46%, Grippotyphosa 6,98%, Butembo 5,43%. Esses dados revelam que vacas de leite da microrregião de Francisco Beltrão apresentam frequência elevada de vários sorovares de Leptospira spp. mostrando a importância do conhecimentos sorológico desta enfermidade.(AU)

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Um surto de leptospirose foi observado em bovinos leiteiros em Santo Antônio do Monte, Minas Gerais. O rebanho apresentava reações positivas anti-leptospira sorovar Hardjo no teste de microaglutinação (MAT) e havia sido vacinado anteriormente com vacina experimental contendo a sorovariedade Hardjo. O MAT revelou 48,06% dos bovinos positivos para sorovariedade Hardjo genótipo Hardjobovis, 36,82% para sorovariedade Hardjo genótipo Hardjoprajitno. Os animais apresentavam aborto e mastite com presença de sangue no leite. A presente pesquisa teve como objetivos isolar as sorovariedades existentes a partir da urina de vacas sorologicamente positivas, elaborar uma vacina experimental com as sorovariedades isoladas no rebanho, avaliar a eficiência do programa de vacinação por um período de dois anos por meio da sorologia do rebanho. Foi isolada Leptospira spp. a partir da urina de duas vacas com sinais sugestivos da doença. As amostras isoladas foram identificadas pela sorologia com anticorpos monoclonais e seqüenciamento do gene 16S rRNA como pertencentes à espécie Leptospira interrogans, sorogrupo Sejroe, sorovariedade Hardjo e genótipo Hardjoprajitno. O uso da vacina autógena foi eficaz no controle da leptospirose no rebanho no período de dois anos. Os resultados da sorologia revelaram ausência de animais positivos na última prova realizada no rebanho.(AU)

An outbreak of leptospirosis in dairy cattle was observed in Santo Antonio do Monte, Minas Gerais. The herd had positive reactions in anti-Leptospira serovar Hardjo agglutination test (MAT) and had been previously vaccinated with a vaccine containing serovars Hardjo. The MAT showed 48.06% of cattle positive for serovars Hardjo genotype Hardjobovis, 36.82% for serovars Hardjo genotype Hardjoprajitno. The animals had abortions and mastitis with blood in the milk. This study aimed to isolate the existing serovars from the urine of serologically positive cows, produce an experimental vaccine with the serovars isolated in the herd, evaluating the effectiveness of the vaccination program for a period of two years through the herd serology. Leptospira spp. was isolated from the urine of two cows with signs suggestive of the disease. The strains were identified by serology with monoclonal antibodies and 16S rRNA gene sequencing as belonging to the Leptospira interrogans species Sejroe serogroup Hardjo serovars and Hardjoprajitno genotype. Use of the autochthonous vaccine was effective in leptospirosis controlling in the herd in two years. The serology results showed the absence of positive animals in the last race held in the herd.(AU)

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Um surto de leptospirose foi observado em bovinos leiteiros em Santo Antônio do Monte, Minas Gerais. O rebanho apresentava reações positivas anti-leptospira sorovar Hardjo no teste de microaglutinação (MAT) e havia sido vacinado anteriormente com vacina experimental contendo a sorovariedade Hardjo. O MAT revelou 48,06% dos bovinos positivos para sorovariedade Hardjo genótipo Hardjobovis, 36,82% para sorovariedade Hardjo genótipo Hardjoprajitno. Os animais apresentavam aborto e mastite com presença de sangue no leite. A presente pesquisa teve como objetivos isolar as sorovariedades existentes a partir da urina de vacas sorologicamente positivas, elaborar uma vacina experimental com as sorovariedades isoladas no rebanho, avaliar a eficiência do programa de vacinação por um período de dois anos por meio da sorologia do rebanho. Foi isolada Leptospira spp. a partir da urina de duas vacas com sinais sugestivos da doença. As amostras isoladas foram identificadas pela sorologia com anticorpos monoclonais e seqüenciamento do gene 16S rRNA como pertencentes à espécie Leptospira interrogans, sorogrupo Sejroe, sorovariedade Hardjo e genótipo Hardjoprajitno. O uso da vacina autógena foi eficaz no controle da leptospirose no rebanho no período de dois anos. Os resultados da sorologia revelaram ausência de animais positivos na última prova realizada no rebanho.

An outbreak of leptospirosis in dairy cattle was observed in Santo Antonio do Monte, Minas Gerais. The herd had positive reactions in anti-Leptospira serovar Hardjo agglutination test (MAT) and had been previously vaccinated with a vaccine containing serovars Hardjo. The MAT showed 48.06% of cattle positive for serovars Hardjo genotype Hardjobovis, 36.82% for serovars Hardjo genotype Hardjoprajitno. The animals had abortions and mastitis with blood in the milk. This study aimed to isolate the existing serovars from the urine of serologically positive cows, produce an experimental vaccine with the serovars isolated in the herd, evaluating the effectiveness of the vaccination program for a period of two years through the herd serology. Leptospira spp. was isolated from the urine of two cows with signs suggestive of the disease. The strains were identified by serology with monoclonal antibodies and 16S rRNA gene sequencing as belonging to the Leptospira interrogans species Sejroe serogroup Hardjo serovars and Hardjoprajitno genotype. Use of the autochthonous vaccine was effective in leptospirosis controlling in the herd in two years. The serology results showed the absence of positive animals in the last race held in the herd.

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A infecção por Leptospira spp. sorovar Hardjo é endêmica nos rebanhos bovinos brasileiros. A introdução de animal infectado em rebanhos livres, acesso a aguadas e pastejo consorciado entre ovinos e bovinos têm sido apontados como os principais fatores de risco. Objetivou-se investigar quais fatores de risco envolvem a infecção pelo sorovar Hardjo em rebanhos exclusivos de ovinos e consorciados com bovinos nas condições criatórias extensivas e semi-intensivas adotadas na região de Sorocaba, São Paulo. Amostras sorológicas de oito rebanhos, não vacinados contra leptospirose: cinco com criação consorciada entre ovinos e bovinos e três exclusivas de ovinos foram examinadas pela reação de soroaglutinação microscópica. Um questionário epidemiológico foi aplicado considerando-se manejos sanitário e zootécnico e condições ambientais. Todos os rebanhos apresentaram animais reatores para Leptospira spp.: 51,16% (22/43) dos animais consorciados e 70,83% (17/24) dos ovinos (p = 0,191), mas apenas os rebanhos consorciados apresentaram pelo menos um animal reator ao sorovar Hardjo. A condição consorciada foi a única com significância para a presença sorológica do sorovar Hardjo (p = 0,018). Quando avaliado o total de ovinos em condições criatórias exclusivas frente aos ovinos consorciados com bovinos, o risco associado à consorciação foi significante para a presença do sorovar Hardjo (p = 0,005). Conclui-se que o sorovar Hardjo estava relacionado à presença de bovinos e independente de outros fatores de risco.

Leptospira spp. serovar Hardjo infection is endemic in Brazilian cattle herds. The main risk factors for infection by serovar Hardjo are introduction of infected bovine into free herds, access to surface water and grazing sheep and cattle together. The present study investigated the risk factors involved in serovar Hardjo infection in sheep-only herds and in sheep grazing together with cattle herds in the region of Sorocaba, state of São Paulo, Brazil. Serum samples from eight herds not vaccinated against leptospirosis, five consisting of cattle and sheep and three with sheep only, were examined by microscopic agglutination test. An epidemiological questionnaire was applied taking into account sanitary and zootechnical management and environmental conditions. All herds showed reactors to Leptospira spp.: 51.16% (22/43) in cattle-sheep herds and 70.83% (17/24) in sheep-only herds (p = 0.191); but only the cattle-sheep herds showed at least one reactor to the serovar Hardjo, which was absent in all the sheep-only herds. Grazing cattle and sheep together was the only significant risk factor for serovar Hardjo infection (p = 0.018). When the total of sheep raised in sheep-only herds was compared with those raised with cattle, the risk associated with grazing these species together was significant for the presence of serovar Hardjo (p = 0.005). It was concluded that serovar Hardjo in sheep was directly related to the presence of bovines, regardless of other risk factors.

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Detection of Leptospira by PCR had not yet been described in snakes. This study investigated, by microscopic agglutination test (MAT) and PCR, the presence of antibodies to Leptospira spp. and Leptospira spp., respectively, in venomous and non-venomous wildlife and captivity snakes. All snakes were divided into three groups to be compared: Group 1 (wildlife snakes - WS); Group 2 (snakes in intensive captivity - IC), and Group 3 (collective semi-extensive captivity -CC). Of the 147 snakes studied, 52 (35.4 percent) were positive for leptospirosis by MAT, 8 (15.4 percent) belonging to Group 1 (WS), 34 (65.4 percent) to Group 2 (IC) and 10 (19.2 percent) to Group 3 (CC). Jararaca (Bothrops jararaca) presented the highest average titer (66.7 percent, N=22/33) among the three group studied, and Hardjo prajtino was the most prevalent serovar (88.5 percent, N=46/52), with titers varying from 100 to 3200. Leptospira interrogans was revealed by PCR in kidney and liver of caiçaca (Bothrops moojeni) and jararaca-pintada (Bothrops pauloensis), showing 100 percent and 93 percent identity respectively. Future studies should be carried out for better understanding of the role of snakes as a reservoir of Leptospira in nature.

A detecção de Leptospira pela técnica de PCR não havia sido descrita em serpentes. Este estudo investigou pelo teste de aglutinação microscópica (MAT) e PCR, a presença de anticorpos anti-Leptospira spp. e Leptospira spp., respectivamente, em serpentes peçonhentas e não peçonhentas de vida livre e de cativeiro. As serpentes foram divididas em três grupos para comparação: Grupo 1 (serpentes recém-chegadas da natureza - WS); Grupo 2 (serpentes em regime de cativeiro intensivo -IC) e Grupo 3 (serpentes em regime de cativeiro coletivo semi-extensivo - CC). Do total de 147 serpentes estudadas, 52 (35,4 por cento) foram positivas para leptospirose pelo MAT, as quais 8 (15,4 por cento) pertenciam ao Grupo 1 (WS), 34 (65,4 por cento) ao Grupo 2 (IC) e 10 (19,2 por cento) ao Grupo 3 (CC). Das espécies estudadas, a jararaca (Bothrops jararaca) apresentou maior soropositividade (66,7 por cento, N=22/33). O sorovar mais prevalente foi o Hardjo prajtino (88,5 por cento, N=46/52) e os títulos variaram de 100 a 3200. Leptospira interrogans foi revelada por PCR nos rins e no fígado de caiçaca (Bothrops moojeni) e de jararaca-pintada (Bothrops pauloensis), mostrando 100 por cento e 93 por cento de identidade, respectivamente. Futuros estudos devem ser realizados para melhor compreensão do papel das serpentes como reservatório de leptospiras na natureza.

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Detection of Leptospira by PCR had not yet been described in snakes. This study investigated, by microscopic agglutination test (MAT) and PCR, the presence of antibodies to Leptospira spp. and Leptospira spp., respectively, in venomous and non-venomous wildlife and captivity snakes. All snakes were divided into three groups to be compared: Group 1 (wildlife snakes - WS); Group 2 (snakes in intensive captivity - IC), and Group 3 (collective semi-extensive captivity -CC). Of the 147 snakes studied, 52 (35.4 percent) were positive for leptospirosis by MAT, 8 (15.4 percent) belonging to Group 1 (WS), 34 (65.4 percent) to Group 2 (IC) and 10 (19.2 percent) to Group 3 (CC). Jararaca (Bothrops jararaca) presented the highest average titer (66.7 percent, N=22/33) among the three group studied, and Hardjo prajtino was the most prevalent serovar (88.5 percent, N=46/52), with titers varying from 100 to 3200. Leptospira interrogans was revealed by PCR in kidney and liver of caiçaca (Bothrops moojeni) and jararaca-pintada (Bothrops pauloensis), showing 100 percent and 93 percent identity respectively. Future studies should be carried out for better understanding of the role of snakes as a reservoir of Leptospira in nature.(AU)

A detecção de Leptospira pela técnica de PCR não havia sido descrita em serpentes. Este estudo investigou pelo teste de aglutinação microscópica (MAT) e PCR, a presença de anticorpos anti-Leptospira spp. e Leptospira spp., respectivamente, em serpentes peçonhentas e não peçonhentas de vida livre e de cativeiro. As serpentes foram divididas em três grupos para comparação: Grupo 1 (serpentes recém-chegadas da natureza - WS); Grupo 2 (serpentes em regime de cativeiro intensivo -IC) e Grupo 3 (serpentes em regime de cativeiro coletivo semi-extensivo - CC). Do total de 147 serpentes estudadas, 52 (35,4 por cento) foram positivas para leptospirose pelo MAT, as quais 8 (15,4 por cento) pertenciam ao Grupo 1 (WS), 34 (65,4 por cento) ao Grupo 2 (IC) e 10 (19,2 por cento) ao Grupo 3 (CC). Das espécies estudadas, a jararaca (Bothrops jararaca) apresentou maior soropositividade (66,7 por cento, N=22/33). O sorovar mais prevalente foi o Hardjo prajtino (88,5 por cento, N=46/52) e os títulos variaram de 100 a 3200. Leptospira interrogans foi revelada por PCR nos rins e no fígado de caiçaca (Bothrops moojeni) e de jararaca-pintada (Bothrops pauloensis), mostrando 100 por cento e 93 por cento de identidade, respectivamente. Futuros estudos devem ser realizados para melhor compreensão do papel das serpentes como reservatório de leptospiras na natureza.(AU)

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Foram identificadas diferenças no perfil protéico das amostras de Sponselee, Norma e Hardjoprajitno, com bandas protéicas entre 175, 47 kDA e 12,10 kDa. A amostra Sponselee foi a que apresentou maior número de bandas (12), seguida da Norma que apresentou 11 bandas e de Hardjoprajitno que apresentou 9 bandas. Todas as bandas observadas na amostra Sponselee possuíam correspondentes nas outras duas amostras. A amostra Norma não apresentou uma banda em torno de 35,77 kDa e a Hardjoprajitno não apresentou bandas em torno de 89,59 kDa, 35,77 kDa e 12,10 kDa. O reconhecimento dessas proteínas por soros hiperimunes contra cada uma das amostras também mostrou diferenças, sendo que o maior número de proteínas reconhecido em todas as amostras por todos os soros se encontrou entre 35,83 kDa e 29,19 kDa. Os soros contra bovino na amostra Norma só reconheceu proteínas de baixa massa molecular nas amostras Norma (6,80 kDa) e Hardjoprajitno (6,80 kDa e 5,30 kDa). Soro bovino contra a amostra Hardjoprajitno reconheceu uma proteína de 44,33 kDa todas às amostras e proteínas de 4,22 kDa nas amostras Sponselee e Norma e de 10,49 kDa e 6,16 kDa na Hardjoprajitno. As diferentes proteínas identificadas poderiam se constituir em alvos específicos para o desenvolvimento de testes diagnósticos e vacinas contra leptospirose bovina.(AU)

Differences in the protein profile of Leptospira sp. strains Sponselee, Norma and Hardjoprajitno were observed, with bands ranging from 175.47 kDa to 12.10 kDa. Strain Sponselee presented a 12-band profile, while strain Norma showed 11 and strain Hardjoprajitno showed 9 bands in the profile. All bands observed in Sponselee strain profile could match bands in the other two strains. Strain Norma lacks a band at 35.77 kDa and strain Hardjoprajitno lacks the bands at 89.59 kDa, 35.77 kDa and 12.10 kDa. The recognition profile from hyperimmune sera was also different for the studied serovar Hadjo strains. The majority of recognized proteins was in the range of 35.83 kDa to 29.19 kDa. Cattle sera against strain Norma only recognized low molecular mass proteins in strains Norma (6.80 kDa) and Hardjoprajitno (6.80 kDa and 5.30 kDa). Bovine sera against strain Hardjoprajitno recognized a 44.33 kDa protein in all studied strains and proteins of 4.22 kDa in strains Sponselee and Norma and of 10.49 kDa and 6.16 kDa in strain Hadjoprajitno. The different identified proteins could become specific targets to the development of diagnostic tests and vaccines against bovine leptospirosis.(AU)

Assuntos

RESUMO

Foram identificadas diferenças no perfil protéico das amostras de Sponselee, Norma e Hardjoprajitno, com bandas protéicas entre 175, 47 kDA e 12,10 kDa. A amostra Sponselee foi a que apresentou maior número de bandas (12), seguida da Norma que apresentou 11 bandas e de Hardjoprajitno que apresentou 9 bandas. Todas as bandas observadas na amostra Sponselee possuíam correspondentes nas outras duas amostras. A amostra Norma não apresentou uma banda em torno de 35,77 kDa e a Hardjoprajitno não apresentou bandas em torno de 89,59 kDa, 35,77 kDa e 12,10 kDa. O reconhecimento dessas proteínas por soros hiperimunes contra cada uma das amostras também mostrou diferenças, sendo que o maior número de proteínas reconhecido em todas as amostras por todos os soros se encontrou entre 35,83 kDa e 29,19 kDa. Os soros contra bovino na amostra Norma só reconheceu proteínas de baixa massa molecular nas amostras Norma (6,80 kDa) e Hardjoprajitno (6,80 kDa e 5,30 kDa). Soro bovino contra a amostra Hardjoprajitno reconheceu uma proteína de 44,33 kDa todas às amostras e proteínas de 4,22 kDa nas amostras Sponselee e Norma e de 10,49 kDa e 6,16 kDa na Hardjoprajitno. As diferentes proteínas identificadas poderiam se constituir em alvos específicos para o desenvolvimento de testes diagnósticos e vacinas contra leptospirose bovina.

Differences in the protein profile of Leptospira sp. strains Sponselee, Norma and Hardjoprajitno were observed, with bands ranging from 175.47 kDa to 12.10 kDa. Strain Sponselee presented a 12-band profile, while strain Norma showed 11 and strain Hardjoprajitno showed 9 bands in the profile. All bands observed in Sponselee strain profile could match bands in the other two strains. Strain Norma lacks a band at 35.77 kDa and strain Hardjoprajitno lacks the bands at 89.59 kDa, 35.77 kDa and 12.10 kDa. The recognition profile from hyperimmune sera was also different for the studied serovar Hadjo strains. The majority of recognized proteins was in the range of 35.83 kDa to 29.19 kDa. Cattle sera against strain Norma only recognized low molecular mass proteins in strains Norma (6.80 kDa) and Hardjoprajitno (6.80 kDa and 5.30 kDa). Bovine sera against strain Hardjoprajitno recognized a 44.33 kDa protein in all studied strains and proteins of 4.22 kDa in strains Sponselee and Norma and of 10.49 kDa and 6.16 kDa in strain Hadjoprajitno. The different identified proteins could become specific targets to the development of diagnostic tests and vaccines against bovine leptospirosis.

RESUMO

ABSTRACT Leptospira spp. serovar Hardjo infection is endemic in Brazilian cattle herds. The main risk factors for infection by serovar Hardjo are introduction of infected bovine into free herds, access to surface water and grazing sheep and cattle together. The present study investigated the risk factors involved in serovar Hardjo infection in sheep-only herds and in sheep grazing together with cattle herds in the region of Sorocaba, state of São Paulo, Brazil. Serum samples from eight herds not vaccinated against leptospirosis, five consisting of cattle and sheep and three with sheep only, were examined by microscopic agglutination test. An epidemiological questionnaire was applied taking into account sanitary and zootechnical management and environmental conditions. All herds showed reactors to Leptospira spp.: 51.16% (22/43) in cattle-sheep herds and 70.83% (17/24) in sheep-only herds (p = 0.191); but only the cattle-sheep herds showed at least one reactor to the serovar Hardjo, which was absent in all the sheep-only herds. Grazing cattle and sheep together was the only significant risk factor for serovar Hardjo infection (p = 0.018). When the total of sheep raised in sheep-only herds was compared with those raised with cattle, the risk associated with grazing these species together was significant for the presence of serovar Hardjo (p = 0.005). It was concluded that serovar Hardjo in sheep was directly related to the presence of bovines, regardless of other risk factors.

RESUMO A infecção por Leptospira spp. sorovar Hardjo é endêmica nos rebanhos bovinos brasileiros. A introdução de animal infectado em rebanhos livres, acesso a aguadas e pastejo consorciado entre ovinos e bovinos têm sido apontados como os principais fatores de risco. Objetivou-se investigar quais fatores de risco envolvem a infecção pelo sorovar Hardjo em rebanhos exclusivos de ovinos e consorciados com bovinos nas condições criatórias extensivas e semi-intensivas adotadas na região de Sorocaba, São Paulo. Amostras sorológicas de oito rebanhos, não vacinados contra leptospirose: cinco com criação consorciada entre ovinos e bovinos e três exclusivas de ovinos foram examinadas pela reação de soroaglutinação microscópica. Um questionário epidemiológico foi aplicado considerando-se manejos sanitário e zootécnico e condições ambientais. Todos os rebanhos apresentaram animais reatores para Leptospira spp.: 51,16% (22/43) dos animais consorciados e 70,83% (17/24) dos ovinos (p = 0,191), mas apenas os rebanhos consorciados apresentaram pelo menos um animal reator ao sorovar Hardjo. A condição consorciada foi a única com significância para a presença sorológica do sorovar Hardjo (p = 0,018). Quando avaliado o total de ovinos em condições criatórias exclusivas frente aos ovinos consorciados com bovinos, o risco associado à consorciação foi significante para a presença do sorovar Hardjo (p = 0,005). Conclui-se que o sorovar Hardjo estava relacionado à presença de bovinos e independente de outros fatores de risco.

RESUMO

ABSTRACT A survey was conducted to estimate the frequency of Leptospira sp. infection in cattle in the State of Paraíba, Brazil. A random sample of 6 municipalities was chosen from each of 3 ecoregions of the state: the Agreste/Litoral, the Cariri/Curimatau and the Sertão. These 18 municipalities were broken down into quadrants and one property was selected at random from each quadrant. Random samples were collected from at least eight animals at each property, in four-age categories, summing at least 32 animals per property. All municipalities that were included in the study (100%) and 87.75% of the properties had at least one positive sample for one of the 15 different Leptospira sp. serovars (16 strains) studied. From 2,343 samples, 759 showed positive reaction to, at least, one of the 16 strains tested. Four hundred and seventy animals were positive to multiple strains. The serovar Hardjo, of the Sejroe serogroup, was the most frequent and accounted for 16.05% (95% CI 12.69% to 19.41%) of the positive results (376 positive reactions). There were differences in the frequency of positive results according to the two strains of serovar Hardjo used: strain Norma (15.62% 95% CI 12.38% to 18.86%), isolated in Brazil, and reference strain Hardjoprajitino (2.43% 95% CI 1.12% to 3.75%). The remaining serovars tested had frequencies lower than 2.8%. Results obtained in the present study confirmed that Leptospira interrogans serovar Hardjo is widely spread in the State of Paraíba, Brazil.

RESUMO Foi realizada a estimativa de freqüência de infecção por Leptospira sp. em bovinos do Estado da Paraíba, Brasil. Seis municípios foram escolhidos ao acaso em cada uma das 3 ecorregiões do Estado: Agreste/Litoral, Cariri/Curimatau e Sertão. Estes 18 municípios foram divididos em quadrantes e uma propriedade foi selecionada por quadrante. As amostras de sangue foram coletadas aleatoriamente de, pelo menos, 32 animais por propriedade. Todos os municípios incluídos no estudo (100%) e 87,75% das propriedades apresentaram no mínimo uma amostra positiva para pelo menos uma das 15 diferentes sorovariedades de Leptospira sp. (16 amostras) testadas. Dos 2.343 animais examinados, 759 reagiram positivamente para pelo menos uma das 16 amostras de Leptospira sp. testadas. Quatrocentos e setenta animais reagiram positivamente para múltiplas amostras. A sorovariedade Hardjo, do sorogrupo Sejroe, foi a mais freqüente com 16,05% (95% IC 12,69% a 19,41%) dos resultados positivos (376 reações positivas). Houve diferenças na freqüência dos resultados positivos para as amostras da sorovariedade Hardjo testadas: amostra Norma (15,62% 95% IC 12,38% a 18,86%), isolada no Brasil, e a amostra de referência Hardjoprajitino (2,43% 95% IC 1,12% a 3,75%). As demais sorovariedades apresentaram freqüências inferiores a 2,8%. Os resultados obtidos no presente estudo confirmam que Leptospira interrogans serovar Hardjo é amplamente distribuída no Estado da Paraíba, Brasil.

RESUMO

O objetivo desse trabalho foi avaliar a performance reprodutiva de um rebanho bovino de corte, criado extensivamente, naturalmente infectado pelo herpes vírus bovino 1 (BoHV-1), pelo vírus da diarréia viral bovina (BVDV) e pela Leptospira hardjo. No rebanho, constituído por 1.331 fêmeas, foram selecionados aleatoriamente 208 animais que foram subdivididos em três grupos: i) 60 novilhas virgens; ii) 60 vacas de primeira cria; iii) 88 vacas com duas ou mais crias. No período correspondente a uma estação de reprodução, obtida por inseminação artificial (IA) seguida por repasse com touro, foram avaliados o desempenho reprodutivo e os perfis sorológicos para a rinotraqueíte infecciosa bovina (IBR), a diarréia viral bovina (BVD) e a leptospirose. As taxas de animais soropositivos para IBR, BVD e leptospirose nos grupos avaliados foram de 68,3, 98,0 e 78,8, respectivamente. O grupo de animais com duas ou mais crias apresentaram baixo desempenho reprodutivo com 35,6 de repetições de cio; 18,6 de abortamentos; 2,3 doses de sêmen por bezerro nascido e 35,6 de animais nascidos de IA. A mais baixa performance reprodutiva foi observada no grupo de novilhas. A análise do perfil sorológico anterior à estação de monta, em associação com os resultados de alguns parâmetros de eficiência reprodutiva sugere a provável participação do BoHV-1 e da L. hardjo no baixo desempenho reprodutivo do rebanho avaliado.

The aim of this study was the evaluation of some reproductive rates of a beef cattle herd that werenaturally infected by the bovine herpesvirus 1 (BoHV-1), bovine viral diarrhea virus (BVDV) andLeptospirahardjo. In a herd with 1331 females, we randomly selected 208 animals that were distributedin three groups: i) 60 virgin heifers; ii) 60 first suckling cows; iii) 88 cows with two or more sucklings. Allgroups were evaluated for infectious bovine rinothracheitis (IBR), bovine viral diarrhea (BVD), andleptospirosis serological profile, and the reproductive performance in a breeding station that had artificialinsemination (AI) followed by bull repass. The IBR, BVD and leptospirosis seropositive rates in thethree groups were 68.3%, 98.0% and 78.8%, respectively. The highest seropositives rates for the threeinfections simultaneously were obtained in the cows with two or more sucklings. The three groupspresented low reproductive performance with 35.6% of repeat breeding; 18.6% of abortions, 2.3 semendoses by born calf, and 35.6% of born calves by AI. The lowest reproductive performance was observedin the virgin heifers group. The serological profile analysis before the breeding time with associationwith the results of some reproductive efficiency rates suggest the BoHV-1 and L. hardjo participation inthe low reproductive performance observed in the beef cattle herd studied

Assuntos

RESUMO

The aim of this study was the evaluation of some reproductive rates of a beef cattle herd that were naturally infected by the bovine herpesvirus 1 (BoHV-1), bovine viral diarrhea virus (BVDV) and Leptospira hardjo. In a herd with 1331 females, we randomly selected 208 animals that were distributed in three groups: i) 60 virgin heifers; ii) 60 first suckling cows; iii) 88 cows with two or more sucklings. All groups were evaluated for infectious bovine rinothracheitis (IBR), bovine viral diarrhea (BVD), and leptospirosis serological profile, and the reproductive performance in a breeding station that had artificial insemination (AI) followed by bull repass. The IBR, BVD and leptospirosis seropositive rates in the three groups were 68.3%, 98.0% and 78.8%, respectively. The highest seropositives rates for the three infections simultaneously were obtained in the cows with two or more sucklings. The three groups presented low reproductive performance with 35.6% of repeat breeding; 18.6% of abortions, 2.3 semen doses by born calf, and 35.6% of born calves by AI. The lowest reproductive performance was observed in the virgin heifers group. The serological profile analysis before the breeding time with association with the results of some reproductive efficiency rates suggest the BoHV-1 and L. hardjo participation in the low reproductive performance observed in the beef cattle herd stud

O objetivo desse trabalho foi avaliar a performance reprodutiva de um rebanho bovino de corte, criado extensivamente, naturalmente infectado pelo herpesvírus bovino 1 (BoHV-1), pelo vírus da diarréia viral bovina (BVDV) e pela Leptospira hardjo. No rebanho, constituído por 1.331 fêmeas, foram selecionados aleatoriamente 208 animais que foram subdivididos em três grupos: i) 60 novilhas virgens; ii) 60 vacas de primeira cria; iii) 88 vacas com duas ou mais crias. No período correspondente a uma estação de reprodução, obtida por inseminação artificial (IA) seguida por repasse com touro, foram avaliados o desempenho reprodutivo e os perfis sorológicos para a rinotraqueíte infecciosa bovina (IBR), a diarréia viral bovina (BVD) e a leptospirose. As taxas de animais soropositivos para IBR, BVD e leptospirose nos grupos avaliados foram de 68,3%, 98,0% e 78,8%, respectivamente. O grupo de animais com duas ou mais crias apresentou as maiores taxas de animais soropositivos para as três infecções simultaneamente. Os três grupos presentaram baixo desempenho reprodutivo com 35,6% de repetições de cio; 18,6% de abortamentos; 2,3 doses de sêmen por bezerro nascido e 35,6% de animais nascidos de IA. A mais baixa performance reprodutiva foi observada no grupo de novilhas. A análise do perfil sorológico anterior à estação de monta, em associação com os resultados de alguns parâmetros de eficiênci