RESUMO

Resumen El síndrome de Turner (ST) es causado por la ausencia del segundo cromosoma sexual, dando lugar a individuos con fenotipo femenino. Se presenta en 1/2,500 recién nacidas vivas y se estima que solo el 1% de los embriones con ST logran llegar al término de su gestación. Estas pacientes presentan baja estatura, infertilidad, enfermedades cardiacas, renales y autoinmunes. Estudios han revelado alteraciones celulares y moleculares que explican la alta mortalidad en la etapa prenatal, complicaciones obstétricas y comorbilidades en estas pacientes. El objetivo de este estudio fue revisar el conocimiento actual sobre el desarrollo de embriones con ST y su impacto en la salud de las pacientes. Se consideró la literatura científica actualizada. Se han reportado diversas alteraciones celulares y moleculares en etapas prenatales en embriones con ST que impactan en la salud de estas pacientes. La comprensión de estos mecanismos nos permitirá brindar una mejor atención obstétrica que se verá reflejada hasta la vida adulta de estas.

Abstract Turner syndrome (TS) is caused by the absence of the second sex chromosome, giving rise to individuals with a female phenotype. It occurs in 1/2,500 live newborns, and it is estimated that only 1% of embryos with TS manage to reach the end of their gestation. These patients have short stature, infertility, cardiac, renal, and autoimmune diseases. Studies have revealed cellular and molecular alterations that explain the high mortality in the prenatal stage, obstetric complications, and comorbidities. The objective of this study was to review the current knowledge about the development of embryos with TS and its impact on the health of patients. The updated scientific literature was reviewed. Various cellular and molecular alterations have been reported in prenatal stages in embryos with TS, which have an impact on the health of these patients. The understanding of these mechanisms will allow us to provide better obstetric care that will be reflected until their adult life.

RESUMO

El cobayo es un modelo animal ampliamente utilizado en la investigación biomédica debido a sus similitudes biológicas con los seres humanos. El objetivo de nuestro estudio es proporcionar sustento morfológico para utilizar preparados histológicos de embriones de cobayo como modelo de estudio para comprender los procesos del desarrollo embrionario humano. Nuestros resultados muestran que los embriones de cobayo presentan características morfológicas similares a las observadas en los embriones humanos, lo que sugiere que pueden utilizarse como un modelo efectivo para estudiar el desarrollo embrionario humano. Este hallazgo tiene importantes implicancias para la investigación y la docencia utilizando este modelo animal. Se analizaron preparados histológicos de embriones de cobayo teñidos con hematoxilina eosina, adquiridos por la Universidad Autónoma de Chile. Se tomaron microfotografías de preparados histológicos de cobayo en diferentes estadios del desarrollo y se seleccionaron las mejores imágenes para la descripción de estructuras y establecer estimados de la embriogénesis. Del análisis de los preparados se desprende que órganos como esófago, médula espinal y corazón presentan similitudes anatómicas e histológicas que hacen posible compararlas con el desarrollo embrionario humano y la edad de gestación en etapas tempranas. El uso de preparados de embriones de cobayo y su análisis desde un aspecto histológico resulta ser una estrategia metodológica factible debido a las similitudes en la embriogénesis de los mamíferos y las concordancias morfológicas con el desarrollo de los órganos entre humanos y roedores. Esto permite implementar este modelo animal como una herramienta para comprender el desarrollo embrionario humano.

SUMMARY: The guinea pig is an animal model widely used in biomedical research due to its biological similarities with humans. The objective of our study is to provide morphological support to use histological preparations of guinea pig embryos as a study model to understand the processes of human embryonic development. Our results show that guinea pig embryos present morphological characteristics similar to those observed in human embryos, suggesting that they can be used as an effective model to study human embryonic development. This finding has important implications for research and teaching using this animal model. Histological preparations of guinea pig embryos stained with hematoxylin eosin, acquired by the Autonomous University of Chile, were analyzed. Photomicrographs of histological preparations of guinea pigs at different stages of development were taken and the best images were selected to describe structures and establish estimates of embryogenesis. From the analysis of the preparations it is clear that organs such as the esophagus, spinal cord and heart present anatomical and histological similarities that make it possible to compare them with human embryonic development and gestation age in early stages. The use of guinea pig embryo preparations and their analysis from a histological aspect turns out to be a feasible methodological strategy due to the similarities in mammalian embryogenesis and the morphological concordances with the development of organs between humans and rodents. This allows this animal model to be implemented as a tool to understand human embryonic development.

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Abstract This study aimed to evaluate whether skeletal development of the Pantanal Caiman (Caiman yacare) is similarly influenced by temperature variation and controlled increases in embryo motility. All eggs were incubated at 90% humidity and 29 °C for the first 45 days. Thereafter, the incubation temperature was either maintained at 29 °C and embryos were treated with 4-aminopyridine (4-AP) on days 46, 47, 48, and 49 (Group I, 29 °C 4-AP, n = 15); maintained at 29 °C (n = 14; Group II); or at 33 °C (n = 14, Group III). Embryonic movement was measured using an Egg Buddy® digital monitor on days 30, 35, 42, 49, 56, and 60, at which point embryos were euthanized and samples were collected for analysis. No differences were observed between groups with varying incubation temperatures. In contrast, embryonic motility was greater in embryos treated with 4-AP (P < 0.001) on day 49, and this was associated with higher proportions of snout-vent and hand lengths. This study demonstrates for the first time that pharmacologically induced increases in embryo motility result in phenotypic changes to the proportion of elements during prenatal ontogeny, thereby effectively altering the adaptation of the species to specific environments.

Resumo Este estudo objetivou avaliar os efeitos da temperatura e motilidade embrionária sobre o desenvolvimento esquelético de jacaré-do-pantanal (Caiman yacare). Os ovos foram incubados com 90% de umidade e empregou-se a temperatura de 29°C por 45 dias. Após, para a incubação do Grupo I a temperatura continuou em 29°C, mas associou-se à injeção de 4-aminopiridina (29°C-4AP, n = 15) aplicada nos dias 46, 47, 48 e 49, do Grupo II permaneceu em 29°C (n = 14) e do Grupo III elevou-se para 33°C (n = 14). A movimentação foi mensurada através do monitor digital Egg Buddy® nos dias 30, 35, 42, 49, 56 e 60 dias. Aos 60 dias, os embriões foram eutanasiados e coletadas amostras embrionárias. Na análise estatística não foram observadas diferenças entre os grupos para o fator temperatura sobre a motilidade embrionária no desenvolvimento esquelético. Em contraste, a motilidade evidenciou diferença estatística no dia 49 para o Grupo I (P < 0,001) e apresentou maiores proporções de nariz e mão. Esses dados demonstraram pela primeira vez que o aumento na motilidade, induzidos farmacologicamente resultam em divergências fenotípicas na proporção de segmentos anatômicos durante a ontogenia pré-natal, podendo alterar efetivamente a adaptação dos animais em ambientes específicos.

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Abstract The objective of the current study was to investigate the synergistic impact of -Tocopherol and -Linolenic acid (100 µM) on IVM and IVC of Nili Ravi buffalo oocytes. Oocytes were obtained from the ovaries of slaughtered buffaloes within two hours after slaughter and brought to laboratory. Buffalo cumulus oocyte complexes were placed randomly in the five experimental groups included; GROUP 1: Maturation media (MM) + 100 µM ALA (control), GROUP 2: MM + 100 µM ALA + 50M -Tocopherol, GROUP 3: MM + 100 µM ALA + 100M -Tocopherol, GROUP 4: MM + 100 µM ALA + 200 M -Tocopherol and GROUP 5: MM + 100 µM ALA + 300 M -Tocopherol under an atmosphere of 5% CO2 in air at 38.5 °C for 22-24 h. Cumulus expansion and nuclear maturation status was determined (Experiment 1). In experiment 2, oocytes were matured as in experiment 1. The matured oocytes were then fertilized in Tyrodes Albumin Lactate Pyruvate (TALP) medium for about 20 h and cultured in synthetic oviductal fluid (SOF) medium to determine effect of -Linolenic acid (100 µM) and -Tocopherol in IVM medium on IVC of presumptive zygotes. To study the effect of -Linolenic acid (100 µM) in IVM media and increasing concentration of -tocopherol in the culture media on early embryo development (Experiment 3), the presumptive zygotes were randomly distributed into the five experimental groups with increasing concentration of -tocopherol in culture media. Higher percentage of MII stage oocytes in experiment 1(65.2±2.0), embryos at morula stage in experiment 2 (30.4±1.5) and experiment 3 (22.2±2.0) were obtained. However, overall results for cumulus cell expansion, maturation of oocyte to MII stage and subsequent embryo development among treatments remain statistically similar (P > 0.05). Supplementation of -tocopherol in maturation media having -Linolenic acid and/or in embryo culture media did not further enhance in vitro maturation of oocyte or embryo production.

Resumo O objetivo do presente estudo foi investigar o impacto sinérgico do -tocoferol e do ácido -linolênico (100 µM) na MIV e CIV de oócitos de búfala Nili Ravi. Os oócitos foram obtidos dos ovários de búfalos abatidos duas horas após o abate e levados ao laboratório. Complexos de oócitos cumulus de búfalo foram colocados aleatoriamente nos cinco grupos experimentais incluídos; GRUPO 1: Meio de maturação (MM) + 100 µM ALA (controle), GRUPO 2: MM + 100 µM ALA + 50 µM -tocoferol, GRUPO 3: MM + 100 µM ALA + 100 µM -tocoferol, GRUPO 4: MM + 100 µM ALA + 200 M -tocoferol e GRUPO 5: MM + 100 µM ALA + 300 M -tocoferol sob uma atmosfera de 5% de CO2 em ar a 38,5 °C por 22-24 h. A expansão cumulus e o estado de maturação nuclear foram determinados (Experimento 1). No experimento 2, os oócitos foram maturados como no experimento 1. Os oócitos maturados foram então fertilizados em meio de Tyrode's Albumina Lactato Piruvato (TALP) por cerca de 20 h e cultivados em meio de fluido oviductal sintético (SOF) para determinar o efeito do ácido -linolênico (100 µM) e -tocoferol em meio IVM em IVC de presumíveis zigotos. Para estudar o efeito do ácido -linolênico (100 µM) em meio IVM e aumentar a concentração de -tocoferol no meio de cultura no desenvolvimento inicial do embrião (Experimento 3), os presumíveis zigotos foram distribuídos aleatoriamente nos cinco grupos experimentais com concentração crescente de -tocoferol em meios de cultura. Maior porcentagem de oócitos em estágio MII no experimento 1 (65,2 ± 2,0), embriões em estágio de mórula no experimento 2 (30,4 ± 1,5) e experimento 3 (22,2 ± 2,0) foram obtidos. No entanto, os resultados gerais para a expansão das células do cumulus, maturação do oócito para o estágio MII e desenvolvimento embrionário subsequente entre os tratamentos permanecem estatisticamente semelhantes (P> 0,05). A suplementação de -tocoferol em meios de maturação com ácido -linolênico e / ou em meios de cultura de embriões não aumentou ainda mais a maturação in vitro de oócitos ou a produção de embriões.

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Abstract This study aimed to evaluate whether skeletal development of the Pantanal Caiman (Caiman yacare) is similarly influenced by temperature variation and controlled increases in embryo motility. All eggs were incubated at 90% humidity and 29 °C for the first 45 days. Thereafter, the incubation temperature was either maintained at 29 °C and embryos were treated with 4-aminopyridine (4-AP) on days 46, 47, 48, and 49 (Group I, 29 °C 4-AP, n = 15); maintained at 29 °C (n = 14; Group II); or at 33 °C (n = 14, Group III). Embryonic movement was measured using an Egg Buddy® digital monitor on days 30, 35, 42, 49, 56, and 60, at which point embryos were euthanized and samples were collected for analysis. No differences were observed between groups with varying incubation temperatures. In contrast, embryonic motility was greater in embryos treated with 4-AP (P 0.001) on day 49, and this was associated with higher proportions of snout-vent and hand lengths. This study demonstrates for the first time that pharmacologically induced increases in embryo motility result in phenotypic changes to the proportion of elements during prenatal ontogeny, thereby effectively altering the adaptation of the species to specific environments.

Resumo Este estudo objetivou avaliar os efeitos da temperatura e motilidade embrionária sobre o desenvolvimento esquelético de jacaré-do-pantanal (Caiman yacare). Os ovos foram incubados com 90% de umidade e empregou-se a temperatura de 29°C por 45 dias. Após, para a incubação do Grupo I a temperatura continuou em 29°C, mas associou-se à injeção de 4-aminopiridina (29°C-4AP, n = 15) aplicada nos dias 46, 47, 48 e 49, do Grupo II permaneceu em 29°C (n = 14) e do Grupo III elevou-se para 33°C (n = 14). A movimentação foi mensurada através do monitor digital Egg Buddy® nos dias 30, 35, 42, 49, 56 e 60 dias. Aos 60 dias, os embriões foram eutanasiados e coletadas amostras embrionárias. Na análise estatística não foram observadas diferenças entre os grupos para o fator temperatura sobre a motilidade embrionária no desenvolvimento esquelético. Em contraste, a motilidade evidenciou diferença estatística no dia 49 para o Grupo I (P 0,001) e apresentou maiores proporções de nariz e mão. Esses dados demonstraram pela primeira vez que o aumento na motilidade, induzidos farmacologicamente resultam em divergências fenotípicas na proporção de segmentos anatômicos durante a ontogenia pré-natal, podendo alterar efetivamente a adaptação dos animais em ambientes específicos.

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Termites are known as social insects worldwide. Presently in China 473 species, 44 genera and 4 families of termites have been reported. Of them, 111 Reticulitermes species are widely spread in different zones of China. The dispersion flight season of these Chinese Reticulitermes species are usually started from February to June, but in some regions different species are distributed, sharing their boundaries and having overlapping flight seasons. These reasons become important sources of hybridization between two different heterospecific populations of termites. It was confirmed that the fertilized eggs and unfertilized eggs of some Reticulitermes termites have the capacity of cleavage. While the unfertilized eggs of R. aculabialis, R. chinensis and R. labralis cleaved normally and the only R. aculabialis unfertilized eggs develop in embryos. While, the R. flaviceps and R. chinensis were observed with their abnormal embryonic development, and not hatching of eggs parthenogenetically. They were reported more threatening to Chinese resources as they propagate with parthenogenesis, hybridization and sexual reproduction. Eggshell and macrophiles of eggs play important roles in species identification and control. Although, they are severe pests and cause a wide range of damages to wooden structures and products in homes, buildings, building materials, trees, crops, and forests in China's Mainland.

Os cupins são conhecidos como insetos sociais em todo o mundo. Atualmente na China foram relatadas 473 espécies, 44 gêneros e 4 famílias de cupins. Destas, 111 espécies de Reticulitermes estão amplamente distribuídas em diferentes zonas da China. A temporada de voo de dispersão dessas espécies chinesas de Reticulitermes geralmente começa de fevereiro a junho, mas em algumas regiões diferentes espécies são distribuídas, compartilhando seus limites e tendo temporadas de voo sobrepostas. Essas razões tornam-se importantes fontes de hibridização entre duas populações heteroespecíficas de cupins. Foi confirmado que os ovos fertilizados e não fertilizados de alguns cupins Reticulitermes possuem capacidade de clivagem. Já os ovos não fertilizados de R. aculabialis, R. chinensis e R. labralis clivaram normalmente, e os únicos ovos não fertilizados de R. aculabialis se desenvolvem em embriões. R. flaviceps e R. chinensis foram observados com desenvolvimento embrionário anormal, e não eclosão de ovos por partenogênese. Eles foram relatados como mais ameaçadores para os recursos chineses à medida que se propagam com partenogênese, hibridização e reprodução sexual. Casca de ovo e macrófilos de ovos desempenham papéis importantes na identificação e controle de espécies, embora sejam pragas graves e causem uma ampla gama de danos a estruturas e produtos de madeira em residências, edifícios, materiais de construção, árvores, plantações e florestas na China continental.

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SUMMARY: Telocytes are a cell population described in 2011 with a multitude of functions such as tissue support, regulation of stem cell niches or intercellular signal transmission. However, there are no studies about their embryonic origin, their function in development, or their moment of appearance. The objective of this work is to try to answer these questions through histological and immunofluorescence studies with samples from the embryological collection of the Department of Anatomy of the University of Granada. In the results obtained, as demonstrated by immunofluorescence for CD34, the presence of these cells can be seen in the fourth week of embryonic development in the perinotochordal region. Its presence is evident from the sixth week of development in a multitude of organs such as the heart, skeletal muscle tissue and supporting tissue of various organs such as the kidney, brain or pericardium. Its function seems to be when the embryonic histological images are analyzed in an evolutionary way, to act as a scaffold or scaffold for the subsequent population by mature tissue elements. In conclusion, telocytes appear at a very early stage of embryonic development and would have a fundamental role in it as scaffolding and directors of organ and tissue growth.

Los telocitos son una población celular descrita en 2011 con multitud de funciones como el sostén tisular, la regulación de los nichos de células madre o la transmisión de señales intercelulares. Sin embargo, no existen estudios acerca del origen embrionario de los mismos, su función en el desarrollo ni su momento de aparición. El objetivo de este trabajo es tratar de responder a estos interrogantes mediante estudios histológicos y por inmunofluorescencia con muestras de la colección embriológica del Departamento de Anatomía de la Universidad de Granada. En los resultados se puede observar como se demuestra mediante inmunofluorescencia para CD34, la presencia de estas células en la cuarta semana del desarrollo embrionario en la región perinotocordal. Su presencia se evidencia a partir de la sexta semana del desarrollo en multitud de órganos como corazón, tejidos músculo esqueléticos y tejidos de sostén de diversos órganos como riñón, encéfalo o pericardio. Su función parece ser al ser analizadas las imágenes histológicas embrionarias de forma evolutiva, la de actuar como un andamiaje o scafold para el posterior poblamiento por elementos tisulares maduros. Como conclusión, los telocitos aparecen en un momento muy precoz del desarrollo embrionario y presentarían una función fundamental en el mismo como andamiajes y directores del crecimiento de los órganos y tejidos.

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The objective of the present study is to point out tensions of the theoretical/practical universe that Bioethics is facing in Brazil, in the search for a praxis for the destination of surplus embryos. We consider that Bioethics analyzes the implications of such practices in society and in relationships between individuals. Brief data from other countries were presented to compare the Brazilian situation progressively from the conceptual point of view and the adoption of measures. The research is a scoping review on the main points that have been hindering the progress of discussions on the subject and consequently the respective solution. The legal status of the embryo was described from several perspectives and theories, with the resulting proposals for the destination of surplus embryos in their positive and negative aspects. The tensions of Bioethics were presented in the context of post-modernity and the consequent social and moral plurality, together with the difficulties of identifying a secular bioethical morality. In the end, we conclude the possibility of proclaiming a consensus on the destination of surplus embryos based on secular morality, supported by the figure of the "moral strangers".

El objetivo del presente estudio es señalar las tensiones del universo teórico/práctico que la bioética enfrenta en Brasil, en la búsqueda de una praxis para el destino de los embriones sobrantes. Consideramos que la bioética analiza las implicaciones de tales prácticas en la sociedad y en las relaciones entre los individuos. Se presentaron breves datos de otros países para comparar progresivamente la situación brasileña desde el punto de vista conceptual y de la adopción de medidas. La investigación es una revisión del alcance de los principales puntos que han obstaculizado el avance de las discusiones sobre el tema y, en consecuencia, la respectiva solución. Se describió el estatuto jurídico del embrión desde diversas perspectivas y teorías, con las consiguientes propuestas para el destino de los embriones sobrantes en sus aspectos positivos y negativos. Se presentaron las tensiones de la bioética en el contexto de la posmodernidad y la consecuente pluralidad social y moral, junto con las dificultades de identificar una moral bioética laica. Al final, se concluye la posibilidad de proclamar un consenso sobre el destino de los embriones sobrantes basado en una moral laica, apoyada en la figura de los "extraños morales".

O objetivo do presente estudo é destacar as tensões do universo teórico/prático que a Bioética está enfrentando no Brasil, na busca de uma praxis para a destinação de embriões excedentes. Nós consideramos que a Bioética analisa as implicações de tais práticas na sociedade e nas relações entre indivíduos. Dados resumidos de outros países são apresentados para comparar a situação brasileira progressivamente de um ponto de vista conceitual para a adoção de medidas. A pesquisa é uma revisão de escopo sobre os pontos principais que vem atrapalhando o andamento das discussões sobre o assunto e consequentemente a solução respectiva. O status legal do embrião foi descrito a partir de diversas perspectivas e teorias, com as propostas resultantes para a destinação dos embriões excedentes em seus aspectos positivos e negativos. As tensões da Bioética foram apresentadas no contexto da pós-modernidade e a consequente pluralidade social e moral, juntamente com as dificuldades de identificar uma moralidade bioética secular. Ao final, nós concluímos pela possibilidade de proclamar um consenso sobre a destinação de embriões excedentes baseado na moralidade secular, apoiado pela figura dos "estranhos morais".

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SUMMARY: The domestic chicken is a species of bird that has been extensively studied in regard to its biology and as a model organism for science. The reproduction of the species is by the laying of fertilized eggs, which in a period of 21 days will develop a chick inside. Several methods have been described to develop embryos ex-ovo, allowing the observation and manipulation of the organism. This work has the propose to standardize a method that allows the development of the embryos inside the artificial incubation system, which has a low cost and is easy to make. In this work, 100 chicken eggs were used to study the effects of humidity, mineral supplementation, and the preincubation time of the egg on the incubation ex-ovo of the embryos. Embryo development was documented through the different days. Pulverized eggshell was selected as an optimal source to provide calcium, magnesium, phosphorus, and other minerals to the developing embryo. By providing 900-1200 mg of pulverized eggshell, 40 mL of the 0.001 % solution of benzalkonium chloride, and a preincubation time of approximately 56 h, the embryos were able to develop until 19 days, and even though they did not reach hatching, the incubation conditions that allowed the survival and development of embryos until late stages were achieved. Thus, due to the conditions established for calcium, humidity and preincubation time, in the present work, the chicks reached 19 days of development.

El pollo doméstico es una especie de ave que ha sido ampliamente estudiada en cuanto a su biología y como organismo modelo para la ciencia. La reproducción de la especie es por la puesta de huevos fecundados, que en un período de 21 días desarrollarán un polluelo en su interior. Se han descrito varios métodos para desarrollar embriones ex-ovo, permitiendo la observación y manipulación del organismo. Este trabajo tuvo como objetivo estandarizar un método que permita el desarrollo de los embriones dentro del sistema de incubación artificial, el cual tiene un bajo costo y es fácil de realizar. En este trabajo se utilizaron 100 huevos de gallina para estudiar los efectos de la humedad, la suplementación mineral y el tiempo de preincubación del huevo sobre la incubación ex-ovo de los embriones. El desarrollo embrionario se documentó a través de los diferentes días. Se seleccionó la cáscara de huevo pulverizada como una fuente óptima para proporcionar calcio, magnesio, fósforo y otros minerales al embrión en desarrollo. Al suministrar 900-1200 mg de cáscara de huevo pulverizada, 40 mL de la solución de cloruro de benzalconio al 0.001 % y un tiempo de preincubación de aproximadamente 56 h, los embriones lograron desarrollarse hasta los 19 días, y aunque no llegaron a eclosionar, los embriones lograron desarrollarse hasta los 19 días. Se lograron condiciones de incubación que permitieron la supervivencia y desarrollo de los embriones hasta etapas tardías. Así, debido a las condiciones establecidas de calcio, humedad y tiempo de preincubación, en el presente trabajo los pollitos alcanzaron los 19 días de desarrollo.

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Introducción: los tumores de células germinales son comunes en hombres jóvenes, tienden a ser sensibles a la quimioterapia citotóxica y las recurrencias tardías no son tan frecuentes. Caso Clínico: presentamos el caso de un paciente de 53 años con antecedente de carcinoma del testículo derecho no seminomatoso, específicamente un carcinoma embrionario más teratoma inmaduro y tumor de senos endodérmicos, Estadio Clínico IIIC debido a que presentó metástasis retroperitoneales, supraclaviculares y pulmonares a sus 24 años y que presentó una recurrencia tardía supraclavicular izquierda y pulmonares bilaterales 22 años después. Fue tratado con un esquema de quimioterapia alternativo no convencional con respuesta completa permaneciendo así hasta la actualidad. Conclusión: Existe tratamiento de quimioterapia no convencional que son útiles el tratamiento de tumores de células germinales que muchas veces no se exploran en la práctica oncológica. (provisto por Infomedic International)

Introduction: germ cell tumors are common in young men, they tend to be sensitive to cytotoxic chemotherapy and late recurrences are not so frequent. Case report: we present the case of a 53-year-old male patient with a history of non-seminomatous right testicular carcinoma, specifically embryonal carcinoma plus immature teratoma and endodermal sinus tumor, Clinical Stage IIIC because he presented retroperitoneal, supraclavicular and pulmonary metastases at the age of 24 years and presented a late left supraclavicular and bilateral pulmonary recurrence 22 years later. He was treated with an alternative non-conventional chemotherapy scheme with complete response and remains so until the present. Conclusion: There are non-conventional chemotherapy treatments that are useful in the treatment of germ cell tumors that are often not explored in oncologic practice. (provided by Infomedic International)

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SUMMARY: Neuropeptide calcitonin gene-related peptide (CGRP) is a neurotransmitter related to vasculogenesis during organ development. The vascular endothelial growth factor A (VEGF-A) is also required for vascular patterning during lung morphogenesis. CGRP is primarily found in organs and initially appears in pulmonary neuroendocrine cells during the early embryonic stage of lung development. However, the relationship between CGRP and VEGF-A during lung formation remains unclear. This study investigates CGRP and VEGF-A mRNA expressions in the embryonic, pseudoglandular, canalicular, saccular, and alveolar stages of lung development from embryonic day 12.5 (E12.5) to postnatal day 5 (P5) through quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) and in situ hybridization. Further, we analyzed the expression of CGRP via immunohistochemistry. The VEGF-A mRNA was mainly scattered across the whole lung body from E12.5. CGRP was found to be expressed in a few epithelial cells of the canalicular and the respiratory bronchiole of the lung from E12.5 to P5. An antisense probe for CGRP mRNA was strongly detected in the lung from E14.5 to E17.5. Endogenous CGRP may regulate the development of the embryonic alveoli from E14.5 to E17.5 in a temporal manner.

El péptido relacionado con el gen de la calcitonina (CGRP) es un neurotransmisor vinculado con la vasculogénesis durante el desarrollo de órganos. El factor de crecimiento endotelial vascular A (VEGF-A) también se requiere para el patrón vascular durante la morfogénesis pulmonar. El CGRP se encuentra principalmente en los órganos y aparece inicialmente en las células neuroendocrinas pulmonares durante la etapa embrionaria temprana del desarrollo pulmonar. Sin embargo, la relación entre CGRP y VEGF-A durante la formación de los pulmones sigue sin estar clara. Este estudio investiga las expresiones de ARNm de CGRP y VEGF-A en las etapas embrionaria, pseudoglandular, canalicular, sacular y alveolar del desarrollo pulmonar desde el día embrionario 12,5 (E12,5) hasta el día postnatal 5 (P5) a través de la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa en tiempo real. (qRT-PCR) e hibridación in situ. Además, analizamos la expresión de CGRP mediante inmunohistoquímica. El ARNm de VEGF-A se dispersó principalmente por todo parénquima pulmonar desde E12,5. Se encontró que CGRP se expresaba en unas pocas células epiteliales de los bronquiolos canaliculares y respiratorios del pulmón desde E12,5 a P5. Se detectó fuertemente una sonda antisentido para ARNm de CGRP en el pulmón de E14,5 a E17,5. El CGRP endógeno puede regular el desarrollo de los alvéolos embrionarios de E14,5 a E17,5 de manera temporal.

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Por ser uma célula altamente especializada, o espermatozoide apresenta diferentes mecanismos epigenéticos, sendo os principais as metilações do DNA, o código de histonas, os ncRNAs (RNAs não codificadores), e a alta condensação da cromatina pela presença das protaminas. Estes mecanismos interagem entre si, contribuindo para a formação do epigenoma espermático, que modela a carga molecular espermática, que, por sua vez, pode impactar sobre as características do desenvolvimento embrionário e da progênie. Dessa forma, atualmente é consenso que o papel do espermatozoide ultrapassa a entrega de DNA de qualidade para o oócito no momento da fecundação. Pesquisas recentes de diversos grupos, incluindo o nosso, mostram que além da contribuição com DNA de qualidade, o espermatozoide entrega moléculas ao oócito no momento da fecundação que influenciam o desenvolvimento do embrião. Recentemente, essas moléculas de origem espermática (Em inglês: sperm-borne) também são associadas com alterações metabólicas e cognitivas da progênie. Embora ainda pouco se entenda como esses mecanismos podem persistir mesmo com o ciclo de reprogramação celular que ocorre logo após a fecundação, é evidente que estes podem impactar as características da progênie. Nesta revisão abordaremos sobre a modulação do epigenoma espermático e seus efeitos no desenvolvimento embrionário.(AU)

Since it is a highly specialized cell, the spermatozoa display different epigenetic mechanisms; the main ones are DNA methylation, histone code, ncRNAs (non-coding RNAs), and high chromatin condensation by the presence of protamines. These mechanisms act in synergy contributing to forming the sperm epigenome, which modulates the spermatic molecular cargo, and, may impact embryo and offspring development features. Thus, it is currently a consensus that the role of spermatozoa goes beyond delivering quality DNA to the oocyte at fertilization. Relevant findings from several research groups, including ours, have shown that sperm delivers several molecules to the oocyte at fertilization, beyond the contribution to DNA, which influences the development of the embryo. Recently, these sperm-borne molecules have also been associated with metabolic and cognitive changes in the offspring. Although the mechanism by which these changes can persist even after embryo reprogramming is not completely understood, evidence shows that sperm cell molecular content impacts embryo and offspring development. This review will mainly focus on the modulation of the sperm epigenome and its effects on embryo development.(AU)

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Resumen El rabdomiosarcoma es una neoplasia maligna de origen mesenquimal con diferenciación muscular estriada esquelética. Es el sarcoma más común de la infancia y presenta cuatro subtipos: embrio nario, alveolar, pleomórfico y de células ahusadas/esclerosante. De todos ellos el embrionario es el de mayor prevalencia y presenta una variante, botrioide, que suele comprometer órganos huecos en forma de una masa polipoide multilobulada. Presentamos el caso de una mujer de 27 años que consultó por sangrado vaginal y en quien se evidenció en la colposcopia, una lesión polipoide blanquecina que se exteriorizaba a través del orificio cervical externo. El estudio histológico reveló sectores celulares alternados por áreas laxas, mixoides, junto a glándulas ístmico-endometriales típicas. La proliferación fusocelular atípica, se disponía en nidos, constituidos por células de amplio citoplasma eosinófilo con estriaciones citoplasmáticas transversales y núcleos excéntricos con cromatina homogénea. Se exhibían áreas de células densamente condensadas inmediatas y próximas al revestimiento epitelial intacto, pero separadas de él, por una fina capa de estroma laxo (capa cambial). El perfil de inmunomarcación resultó positivo para desmina, actina músculo específico y miogenina, y negativo para actina músculo liso. Se realizó diagnóstico de rabdomiosarcoma embrionario botroide de cuerpo uterino.

Abstract Rhabdomyosarcoma is a malignant neoplasm of mesenchymal origin with skeletal striated mus cular differentiation. It is the most common sarcoma of childhood and has four subtypes: embryonal, alveolar, pleomorphic and spindle cell/sclerosing. Of all of them, the embryonal one is the most prevalent and presents a variant, botryoid, which usually involves hollow organs in the form of a multilobed polypoid mass. We pres ent the case of a 27-year-old woman who consulted for vaginal bleeding and in whom colposcopy revealed a whitish polypoid lesion that was externalized through the external cervical os. Histological examination revealed cellular sectors alternated by lax, myxoid areas, together with typical isthmic-endometrial glands. The atypical spindle cell proliferation was arranged in nests, made up of ce lls with large eosinophilic cytoplasm with transverse cytoplasmic striations and eccentric nuclei with homogeneous chromatin. Areas of densely packed cells were exhibited immediately, but separated from, the intact epithelial lining by a thin layer of loose stroma (cambium layer). The immunostaining profile was positive for desmin, muscle-specific actin and myogenin, and negative for smooth muscle actin. A diagnosis of embryonal botryoid rhabdomyosarcoma of the uterine corpus was made.

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Background: Comparative features of embryos developed under in vitro and in vivo conditions are particularly important in designing embryo transfer procedures that fulfil embryo-recipient synchronization requirements. Objective: To determine the degree of asynchrony in rabbit embryo development between cultured and in vivo embryos. Methods: A total of 55 non- lactating multiparous female rabbits were used. Embryos were classified as 16-cells or early morulae at 48 hours post-coitum (hpc). Embryos were cultured during 30 or 32 h and embryo development was compared with in vivo embryos of 72 hpc. In vitro and in vivo embryos at 72 hpc were classified as early or compacted morulae. Bayesian statistics was used. Difference between in vivo and in vitro embryos and the actual probability of the difference between the in vivo and in vitro embryo higher than zero (P) was estimated. Results: The percentage of compacted morulae was higher in in vivo embryos than in in vitro embryos with +6 h of asynchrony (73.5 and 32.8%, P=1.00). But the percentage of compacted morulae was similar with +8 h asynchrony. Conclusions: In vitro embryos delay their development by + 8 hours compared to in vivo embryos.

Antecedentes: El desarrollo comparativo de embriones producidos in vitro e in vivo es particularmente importante para el diseño de procedimientos de transferencia de embriones cuando se requiere sincronización entre el embrión y la hembra receptora. Objetivo: Determinar el grado de asincronía en el desarrollo embrionario entre embriones in vivo y cultivados. Métodos: Un total de 55 conejas multiparas no lactantes fueron utilizadas. Los embriones se clasificaron en 16 células o mórulas tempranas a las 48 horas después del coito (hpc). Los embriones se cultivaron durante 30 ó 32 horas y el desarrollo embrionario se comparó con embriones de 72 hpc obtenidos in vivo. Los embriones in vitro e in vivo a 72 hpc se clasificaron como mórulas tempranas o compactas. Se utilizó estadística bayesiana. Se estimó la diferencia entre embriones in vivo e in vitro y la probabilidad de que la diferencia sea superior a cero (P). Resultados: El porcentaje de mórulas compactas fue mayor en embriones in vivo que en embriones in vitro con +6 horas de asincronía (73,5 y 32,8%, P=1,00), pero el porcentaje de mórulas compactas fue similar con asincronía de +8 horas. Conclusión: Los embriones cultivados retrasan +8 horas su desarrollo en comparación con los embriones in vivo.

Antecedentes: A aquisição do desenvolvimento de embriões produzidos in vitro e in vivo é particularmente importante na concepção de procedimentos de transferência de embriões em que a sincronização entre o embrião e a fêmea receptora é necessária. Objetivo: Determinar o grau de assincronia no desenvolvimento embrionário entre embriões cultivados e in vivo. Métodos: Um total de 55 coelhos multíparos não lactantes foram usados. Os embriões foram classificados em 16 células ou mórulas iniciais 48 horas de gestação (hpc). Os embriões foram cultivados por 30 ou 32 horas e o desenvolvimento embrionário foi comparado com embriões de 72 hpc obtidos in vivo. Embriões in vitro e in vivo a 72 hpc foram classificados como mórulas precoces ou compactadas. Estatísticas bayesianas foram usadas. A diferença entre embriões in vivo e in vitro e a probabilidade de que a diferença seja maior que zero (P) foi estimada. Resultados: A porcentagem de mórulas compactadas foi maior em embriões in vivo do que em embriões in vitro com +6 horas de assincronia (73,5 e 32,8%, P=1,00). Mas a porcentagem de mórulas compactadas foi semelhante com assincronia de +8 horas. Conclusão: Embriões cultivados atrasam seu desenvolvimento em +8 horas em comparação com embriões in vivo.

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ABSTRACT Ambystoma mexicanum is a urodele amphibian endemic to Xochimilco Lake in Mexico, it belongs to the salamander family Ambystomatidae. This species has frequently been used as model organism in developmental biology and regeneration laboratories around the world due to its broad regenerative capacities and adaptability to laboratory conditions. In this review we describe the establishment of the first colony of axolotls in Colombia to study tissue regeneration and our perspectives on the use A. mexicanum as a model organism in Colombia are discussed emphasizing its possible uses in regeneration and developmental biology.

RESUMEN Ambystoma mexicanum es un anfibio urodelo endémico del lago Xochimilco en México, perteneciente a la familia de salamandras Ambystomatidae. Esta especie se ha empleado frecuentemente como organismo modelo en laboratorios de biología del desarrollo y regeneración alrededor del mundo, dadas sus amplias capacidades regenerativas y adaptabilidad en condiciones de laboratorio. En esta revisión, se describe el establecimiento de la primera colonia de ajolotes en Colombia, para adelantar estudios de regeneración de tejidos, y se discuten las perspectivas de A. mexicanum como organismo modelo en el país, enfatizando sus posibles usos en regeneración y biología del desarrollo.

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La fecundación consiste en la fusión de los gametos masculino y femenino en el tercio externo de la trompa uterina para constituir el cigoto, que inicia su división celular, viaja al útero, se implanta como blastocito en el endometrio a los siete días y comienzan los procesos de embriogénesis y morfogénesis. Concepción es la acción o efecto de quedar embarazada una mujer. En el tema de los derechos establecidos al concebido, el inicio de la vida humana plantea amplia discusión entre las definiciones que plantea la ciencia frente a las de grupos de la sociedad civil. No siendo el cigoto una persona humana, de acuerdo con la Corte Interamericana de Derechos Humanos (CIDH) y otros no sería sujeto de los derechos establecidos para la persona, los cuales estarían íntimamente relacionados a los derechos de la mujer embarazada. La concepción ocurriría cuando el embrión se implanta en el útero y no aplicaría el artículo 4 de la CIDH. La doctrina, la legislación y la jurisprudencia peruana establecen amplia tutela jurídica a favor del concebido e instauran el inicio de la vida a partir de la fecundación. La Sentencia de la CIDH para el caso Artavia Murillo contra Costa Rica introduce la figura española del preembrión, al cual no se le otorga tutela jurídica hasta los 14 días, momento en que la ciencia médica establece la implantación del embrión en el endometrio materno. Para consideraciones éticas actuales, el embarazo humano empieza con la implantación del blastocisto en el endometrio y no existe sustento para aceptar el derecho del concebido desde el momento de la fecundación como si fuera una persona. Empero se señala que la vida humana posee una continuidad ininterrumpida desde su concepción hasta su fin natural, la muerte. El cigoto es vida que se inicia con dotación genética propia diferente a la de sus progenitores. El embrión preimplantatorio solo podrá originar un ser humano que se gesta y desarrolla dentro del cuerpo de otra persona, con propia dinámica vital.

Fertilization consists of the fusion of the male and female gametes in the outer third of the uterine tube to form the zygote, which begins its cell division, travels to the uterus, implants as a blastocyst in the endometrium after seven days and begins the processes of embryogenesis and morphogenesis. Conception is the action or effect of a woman becoming pregnant. About the rights established for the conceived, the beginning of human life raises a wide discussion between the definitions proposed by science and those of civil society groups. Not being the zygote a human person, according to the Inter-American Court of Human Rights (IACHR) and others, it would not be subject to the rights established for the person, which would be closely related to the rights of the pregnant woman. Conception would occur when the embryo implants in the uterus and Article 4 of the IACHR would not apply. Peruvian doctrine, legislation and jurisprudence establish broad legal protection in favor of the conceived and indicate the beginning of life from the moment of fertilization. The Judgment of the IACHR in the case of Artavia Murillo v. Costa Rica introduces the Spanish figure of the pre-embryo, which is not granted legal protection until 14 days, when medical science establishes the implantation of the embryo in the maternal endometrium. For current ethical considerations, human pregnancy begins with the implantation of the blastocyst in the endometrium and there is no basis for accepting the right of the conceived from the moment of fertilization as if it were a person. However, it is pointed out that human life has an uninterrupted continuity from conception to its natural end, death. The zygote is life that begins with its own genetic endowment different from that of its progenitors. The preimplantation embryo can only give rise to a human being that is gestated and develops within the body of another person, with its own vital dynamics.

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Introducción: los quistes de rafe medio (QRM) son lesiones infrecuentes del aparato genital masculino, pueden localizarse desde la parte distal del pene hasta la zona perianal. Se deben a defectos del cierre del rafe medio durante el desarrollo embrionario. Objetivo: presentar un lactante con el diagnóstico de QRM, discutir el diagnóstico, tratamiento y seguimiento. Caso clínico: niño de 1 año y 3 meses de edad con 7 lesiones quísticas de 0.5 cm cada una en el rafe medio escrotal desde el nacimiento, la ecografía de partes blandas reporta imagen sólida hipoecogénica de borde definidos y sin vascularización al doppler. Se realizó exéresis quirúrgica y la patología confirmó el diagnóstico de quiste de rafe medio perineal, con buena evolución en el seguimiento. Discusión: 75% de los casos de los QRM son asintomáticos es por ello que muchas veces su diagnóstico es tardío, además su desconocimiento produce confusión con patologías quísticas o tumorales similares. El diagnóstico es clínico, aunque la ecografía puede ayudar para excluir otras anomalías como las vasculares. El tratamiento de elección debe ser la extirpación quirúrgica para evitar episodios de sobreinfección o molestias locales derivadas de su localización y tamaño. Conclusión: debido a lo infrecuente de esta patología es importante darla a conocer. Se recomienda realizar la valoración integral del paciente pediátrico para lograr un adecuado diagnóstico, ofrecer el mejor tratamiento y brindar información adecuada a los padres.

Introduction: median raphe cysts (MRC) are uncommon lesions of the male genitalia. They can be found anywhere from the distal penis to the perianal area. They are caused by an incomplete closure of the median raphe during embryologic development. Objective: to present a case of MRC in an infant and provide a review on diagnosis, treatment and follow-up. Case report: one year and three months old boy, with seven 0.5 cm sized cystic lesions along the scrotum median raphe, noticed since birth. A soft tissue ultrasound demonstrated a well-circumscribed hypoechogenic solid image without any evidence of vascularity at Doppler ultrasound. Surgical excision was conducted and histopathology confirmed the diagnosis of a median raphe cyst of the perineum, showing good progression in follow-up. Discussion: 75% of cases of MRC are asymptomatic, thus their diagnosis is often delayed. Not knowing this condition leads to confuse MRC with other similar cysts or tumors. The diagnosis is mostly clinical, although ultrasound may help to exclude other anomalies such as vascular anomalies. Surgical excision is the treatment of choice to prevent superinfection or local discomfort due to its location and size. Conclusion: Recognition of this uncommon pathology is imperative. A comprehensive evaluation of the pediatric patient is recommended to achieve an adequate diagnosis and treatment and provide appropriate information to the parents.

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Abstract Hylorina sylvatica (Anura: Batrachyidae), or the emerald frog, is a pond-breeding anuran endemic to the austral temperate forests of Chile and Argentina. It is considered a vulnerable species in Argentina, where it has a narrow distribution; records and biological information relating to the frog in this area are scarce. In this study, conducted in 2016, the reproductive parameters of the emerald frog were investigated in detail in a ­semi-temporary wetland of Northwestern Patagonia, Argentina. During the spring, the wetland was visited weekly in search of calling males, adults and individuals in amplexus. When amplexus was observed, eggs and larvae were collected from among the aquatic vegetation using dip-nets. Egg size and larval stage at hatching were registered. Calling males were registered during the second week of October, and the first couples were observed on 26 October. Three pairs of emerald frogs were captured and placed in enclosures within the wetlands in the afternoon. The males were smaller than the females. After 24 h the number of eggs laid in each enclosure was counted, and the males and females were released. The eggs were kept in each enclosure until hatching. Hatching occurred after 10-14 days in the enclosures. This information contributes to our knowledge of the biology of the emerald frog in Patagonia, Argentina, and is the only information currently available on this species in Nahuel Huapi National Park, where the species breeds in various aquatic environments, from semi-temporary wet meadows to large permanent ponds.

Resumen Hylorina sylvatica (Anura: Batrachyidae) o rana esmeralda, es un anuro que se reproduce en estanques, endémico de los bosques templados australes de Chile y Argentina. Actualmente es considerada una especie vulnerable en Argentina. La distribución es estrecha en Argentina con pocos registros de la especie y muy limitada información sobre la biología de esta especie en la región. En este estudio realizado durante 2016, investigué en detalle los parámetros reproductivos de la rana esmeralda en un humedal semitemporal del Noroeste de la Patagonia Argentina. Durante la primavera de 2016, visité el humedal semanalmente en busca de coros, adultos y amplexos. También después de que se observaron amplexos, recolecté huevos y larvas entre la vegetación acuática utilizando un muestreo con redes de mano. Se registró el tamaño del huevo y el estado larvario al eclosionar. Los coros de machos se registraron durante la tercera semana de octubre y los primeros amplexos se observaron el 26 de octubre. Tres parejas de rana esmeralda fueron capturadas y colocadas en clausuras dentro de los humedales durante la tarde. Los machos eran más pequeños que las hembras. Después de 24 h conté el número de huevos puestos en cada recinto y luego se liberaron machos y hembras. Los huevos se mantuvieron en cada clausura hasta que eclosionaron. La eclosión se produjo entre 10-14 días en las clausuras. Esta información contribuye al conocimiento de la biología de la rana esmeralda que habita la Patagonia Argentina y es la única información disponible al momento de esta especie en el Parque Nacional Nahuel Huapi, donde la especie se reproduce en diferentes ambientes acuáticos, desde humedales semitemporales hasta lagos y lagunas permanentes.

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BACKGROUND: Undifferentiated embryonal sarcoma of the liver accounts for 9-13% of malignant tumors in the pediatric age group, and is the third primary malignant neoplasm of the liver in children. However, few cases are reported in the literature. It may manifest with fever, weight loss, pain, and abdominal tumor sensation. In addition to pathology and immunohistochemistry, imaging studies are the appropriate tools for diagnosis. CASE REPORT: We present the case of a 6-year-old female patient diagnosed with undifferentiated embryonal sarcoma of the liver by surgery and subsequent biopsy results. CONCLUSIONS: When reviewing the literature, we found that this type of malignant neoplasm is not frequent in children. However, it is important to consider this type of tumor as a cause in those cases of hepatomegaly in the pediatric age.

INTRODUCCIÓN: El sarcoma hepático embrionario indiferenciado representa el 9-13% de los tumores hepáticos malignos en la edad pediátrica y es la tercera neoplasia maligna primaria de hígado en la infancia. Sin embargo, son pocos los casos reportados en la literatura. Se puede manifestar con fiebre, pérdida de peso, dolor y sensación de tumor abdominal. Los estudios de imagen, además de los estudios anatomopatológico e inmunohistoquímico, son las herramientas adecuadas para el diagnóstico. CASO CLÍNICO: Se presenta el caso de una paciente de 6 años de edad con diagnóstico de sarcoma hepático embrionario indiferenciado mediante cirugía y posterior resultado de la biopsia. CONCLUSIONES: Al revisar la literatura se encontró que este tipo de neoplasia maligna no es frecuente en la infancia. Sin embargo, es importante considerar este tipo de tumor como causa en aquellos casos de hepatomegalia en la edad pediátrica.

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SUMMARY: The rabbit is considered an ideal animal model for studies that describe abnormalities in the testicles due to the similar morphogenetic mechanisms of sexual development and diseases commonly found in humans. The aim of this study was to determine the male sexual differentiation of the New Zealand rabbit (Oryctolagus cuniculus) through development. The gestational age was estimated and classified as 9, 12, 14, 16, 18, 20, 23 and 28 gestational days. The morphological and sexual determination were performed by histological analysis of the reproductive tract in the embryos and fetuses (9-28 days) as well as by immunohistochemistry- Desert hedgehog-Dhh- (testis-specific protein on Y chromosome- 16, 20, 23 days and adult rabbits). Gonads were observed from the 14th day in an undifferentiated stage and with homogeneous aspect. Sexual differentiation was observed from the 16th day with presence of cells forming gonadal cords and Dhh+ cells in the gonadal parenchyma. From the 18th gestational day testicular cords were observed, which evolved into organized seminiferous tubules. The formation of the efferent ducts and ductus deferens and epididymis was observed on the 20th and 23rd days, respectively. The differentiation of the external genitalia occurred from the 23rd days from the anogenital distance and was identified to identify the penile structures. In summary, the features of the sexual differentiation were determined by observation of the Dhh+ protein in embryos from the 16th day to adulthood, and the morphological particularities observed from the 18th gestational day, determined by differentiation of the external genitalia from the 23rd day.

RESUMEN: El conejo se considera un modelo animal ideal para estudios que describen anomalías a nivel testícular debido a que presenta mecanismos morfogenéticos similares al desa- rrollo sexual y enfermedades que se encuentran comúnmente en los seres humanos. El objetivo de este estudio fue determinar la diferenciación sexual masculina del conejo de Nueva Zelanda (Oryctolagus cuniculus) a través del desarrollo. La edad gestacional se estimó y clasificó en 9, 12, 14, 16, 18, 20, 23 y 28 días gestacionales. La determinación morfológica y sexual se realizó mediante análisis histológico del tracto reproductivo en los embriones y fetos (9 - 28 días) así como mediante inmunohistoquímica -Desert hedgehog-Dhh- (proteína testicular específica en el cromosoma Y- 16, 20, 23 días y conejos adultos). Las gónadas se observaron a partir del día 14 en un estadio indiferenciado y con aspecto homogéneo. Se observó diferenciación sexual a partir del día 16 con presencia de células formadoras de cordones gonadales y células Dhh+ en el parénquima gonadal. A partir del día 18 de gestación se observaron cordones testiculares, que evolucionaron a túbulos seminíferos organizados. La formación de los conductos eferentes, deferentes y del epidídimo se observó a los 20 y 23 días, respectivamente. La diferenciación de los genitales externos ocurrió a partir del día 23 desde la distancia anogenital y se utilizó para identificar las estructuras del pene. En conclusión, las características de la diferenciación sexual se determinaron mediante la observación de la proteína Dhh en embriones desde el día 16 hasta la edad adulta, y las particularidades morfológicas observadas a partir del día 18 de gestación, determinadas por diferenciación de los genitales externos a partir del día 23.

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