RESUMO

El perfil molecular de los gliomas permite garantizar la precisión del diagnóstico, informar el pronóstico e identificar opciones de tratamiento. Esta revisión tiene como objetivo exponer que con la secuenciación de próxima generación (NSG) el diagnóstico de los pacientes con oligodendrogliomas puede ser más exacto. Además, con un dispositivo de diagnóstico in vitro, basado en la NSG (F1CDx), en el que se utilizan los bloques de parafina de gliomas para analizar hasta 395 genes relacionados con cáncer (incluido IDH 1 y 2), se puede también informar la pérdida de la totalidad del brazo corto del cromosoma 1 y del brazo largo del cromosoma 19 (codeleción 1p/19q), a diferencia de la hibridación fluorescente in situ (FISH) que detecta desde la más mínima deleción, lo cual los hace sensibles pero no específicos ya que el FISH es incapaz de distinguir entre la pérdida de la totalidad del brazo del cromosoma y una deleción focal. Esta distinción es importante ya que la sobrevida es inferior en tumores con deleción parcial en rela­ción con los oligodendrogliomas, que tienen por definición la pérdida total de ambos cromosomas. Se hace también alusión a otras plataformas genómicas como GlioSeq y GLIO-DNA panel, que pueden cumplir la misma función. En conclusión, la F1CDx puede determinar con precisión 1p/19q con una concordancia del 96.7% frente a FISH. Los casos en que el FISH dio positivo y no concordaban con F1CDx, era porque no se trataba de oligodendrogliomas. F1CDx también analiza todos los genes que permiten la aproximación más exacta al diagnóstico de oligodendroglioma.

Molecular profiling of gliomas helps ensure diagnostic accuracy, inform prognosis, and identify treatment options. This review aims to show that with next generation sequencing (NGS) the diagnosis of patients with oligodendrogliomas can be more accurate. In addition, with an in vitro diagnostic device, based on NSG (F1CDx), in which glioma paraffin blocks are used to analyze up to 395 cancer-related genes (including IDH 1 and 2), it is also possible to report the loss of the entire short arm of chromosome 1 and the long arm of chromosome 19 (1p/19q codeletion), unlike fluorescence in situ hybridization (FISH) that detects even the slightest deletion, making them sensitive but not specific, as FISH is unable to distinguish between the loss of the entire arm of the chromosome and a focal deletion. This distinction is important since survival is lower in tumors with partial deletion compared to oligodendrogliomas, which by definition have the total loss of both chromosomes. Reference is also made to other genomic platforms such as GlioSeq and GLIO-DNA panel, which can fulfill the same function. In conclusion, the F1CDx can accurately determine 1p/19q with a concordance of 96.7% against FISH. The cases in which the FISH was positive and did not agree with F1CDx, it was because they were not oligodendrogliomas. F1CDx also analyzes all the genes that allow the most accurate approach to the diagnosis of oligodendroglioma.

O perfil molecular de gliomas ajuda a garantir a precisão do diagnóstico, informar o prognóstico e identificar as opções de tratamento. Esta revisão tem como objetivo mostrar que com o sequenciamento de próxima geração (NSG) o diagnóstico de pacientes com oligodendrogliomas pode ser mais preciso. Além disso, com um dispositivo de diagnóstico in vitro baseado em NSG (F1CDx), no qual blocos de parafina de glioma são usados para analisar até 395 genes relacionados ao câncer (incluindo IDH 1 e 2), também é possível relatar a perda do todo o braço curto do cromossomo 1 e o braço longo do cromossomo 19 (codeleção 1p/19q), ao contrário da hibridização fluorescente in situ(FISH) que detecta desde a menor deleção, o que os torna sensíveis, mas não específicos, pois o FISH é incapaz de distinguir entre a perda de todo o braço do cromossomo e uma deleção focal. Essa distinção é importante, pois a sobrevida é menor nos tumores com deleção parcial em relação aos oligodendrogliomas, que por definição apresentam a perda total de ambos os cromossomos. Também é feita referência a outras plataformas genômicas, como GlioSeq e painel GLIO-DNA, que podem cumprir a mesma função. Em conclusão, o F1CDx pode determinar com precisão 1p/19q com uma concordância de 96,7% versus FISH. Os casos em que FISH foi positivo e não concordaram com F1CDx, foi porque não eram oligodendrogliomas. O F1CDx também analisa todos os genes que permitem a abordagem mais precisa para o diagnóstico de oligodendroglioma.

Assuntos

RESUMO

ABSTRACT Introduction: Exercise-induced muscle damage (EIMD) can occur from recent or unusual physical activity, leading to a temporary reduction in muscle function. And increased pain. Several articles indicate the positive impacts of creatine on EIMD. Objective: Evaluate the impact of creatine on EIMD. Methods: Online searches were performed in Scopus, Embase, Medline and Google scholar until March 2022. Results: Thirteen studies met the inclusion criteria. To assess the quality of the studies, the Cochrane collaboration system was used for risk and bias analysis. Due to the high heterogeneity of interventions and studies designed, a meta-analysis was not performed. The current paper reveals that creatine intake is preferable to inactive recovery and only a rest period between several harmful and exhausting physical activities. Conclusion: Benefits were attenuated in EIMD markers that reduce muscle operation and muscle strength loss after exercise. Level of evidence II; Therapeutic studies - Manuscript review.

RESUMO Introdução: O dano muscular induzido pelo exercício (EIMD) pode acontecer por atividade física recente ou não habitual e leva a uma redução temporária da função muscular. e aumento da dor. Vários artigos indicam impactos positivos da creatina sobre a EIMD. Objetivo: Avaliar o impacto da creatina sobre a EIMD. Métodos: Foram feitas pesquisas eletrônicas em Scopus, Embase, Medline e Google scholar até março de 2022. Resultados: Treze estudos preencheram os critérios de inclusão. Para avaliar a qualidade dos estudos, o sistema de colaboração Cochrane foi utilizado na análise de risco e viés. Devido à alta heterogeneidade de intervenções e estudos desenhados, a meta-análise não foi realizada. As informações do documento atual revelam que a ingestão de creatina é preferível a uma recuperação inativa e apenas um período de repouso entre diversas atividades físicas prejudiciais e exaustivas. Conclusão: Os benefícios evidenciaram-se atenuados nos marcadores EIMD que reduzem a operação muscular e a perda de força muscular após os exercícios. Nível de evidência II; Estudos terapêuticos - Revisão de manuscritos.

RESUMEN Introducción: el daño muscular inducido por el ejercicio (EIMD) puede producirse por una actividad física reciente o inusual y provoca una reducción temporal de la función muscular y un aumento del dolor. Varios artículos indican impactos positivos de la creatina en la EIMD. Objetivo: Evaluar el impacto de la creatina en la EIMD. Métodos: Se realizaron búsquedas electrónicas en Scopus, Embase, Medline y Google scholar hasta marzo de 2022. Resultados: Trece estudios cumplieron los criterios de inclusión. Para evaluar la calidad de los estudios, se utilizó el sistema de colaboración Cochrane para el análisis de riesgos y sesgos. Debido a la gran heterogeneidad de las intervenciones y de los estudios diseñados, no se realizó un metanálisis. La información del presente documento revela que la ingesta de creatina es preferible a una recuperación inactiva y sólo un período de descanso entre varias actividades físicas perjudiciales y agotadoras. Conclusión: Los beneficios se mostraron atenuados en los marcadores EIMD que reducen el funcionamiento muscular y la pérdida de fuerza muscular después del ejercicio. Nivel de evidencia II; Estudios terapéuticos - Revisión de manuscritos.

RESUMO

ABSTRACT Introduction: Vitamin E supplementation may protect against exercise-induced muscle damage (EIMD) through possible inhibition of free radical formation and cell membrane stabilization. However, there is no systematic review of this topic. This fact maintains academic stalemates that may have a resolution. Objective: This systematic review with meta-analysis aims to provide a comprehensive literature review on the hypothesis of the benefit of vitamin E supplementation on oxidative stress and muscle damage induced by aerobic exercise. Methods: A random-effects model was used, weighted mean difference (WMD) and 95% confidence interval (CI) were applied to estimate the overall effect. Results: The results revealed a significant effect of vitamin E supplementation on reducing creatine kinase (CK) and lactate dehydrogenase (LDH). In addition, a subgroup analysis resulted in a significant decrease in CK concentrations in trials with immediate and <24 hours post-exercise CK measurement; <1000 at daily vitamin E intake; ≤1 at weekly intake; 1 at six weeks and >6 weeks experimental duration, studies on aerobic exercise and training were part of the crossover study. Conclusion: Vitamin E can be seen as a priority agent for recovery from muscle damage. Evidence Level II; Therapeutic Studies - Investigating the results.

RESUMO Introdução: A suplementação de vitamina E pode ter um efeito protetor contra danos musculares induzidos pelo exercício (EIMD) através da possível inibição da formação radical livre e estabilização da membrana celular. Todavia, não há uma revisão sistemática sobre esse tema. Tal fato mantém empasses acadêmicos que podem ter uma resolução. Objetivo: Esta revisão sistemática com meta-análise objetiva fornecer uma análise bibliográfica abrangente na hipótese do benefício na suplementação de vitaminas E sobre o estresse oxidativo e os danos musculares induzidos pelo pelo exercício aeróbico. Métodos: Foi utilizado um modelo com efeitos aleatórios, diferença média ponderada (ADM) e intervalo de confiança de 95% (IC) foram aplicados para estimar o efeito geral. Resultados: Os resultados revelaram um efeito significativo da suplementação de vitamina E na redução da creatina-quinase (CK) e lactato-desidrogenase (LDH). Além disso, uma análise do subgrupo resultou em uma diminuição significativa das concentrações de CK em ensaios com medição imediata e <24 horas de CK após o exercício; <1000 no consumo diário de vitamina E; ≤1 no consumo semanal; 1 em 6 semanas e >6 semanas de duração experimental, estudos sobre exercício aeróbico e treinamento fizeram parte do estudo cruzado. Conclusão: A vitamina E pode ser vista como um agente prioritário de recuperação de danos musculares. Nível de evidência II; Estudos Terapêuticos - Investigação de Resultados.

RESUMEN Introducción: La suplementación con vitamina E puede tener un efecto protector contra el daño muscular inducido por el ejercicio (EIMD) a través de la posible inhibición de la formación de radicales libres y la estabilización de la membrana celular. Sin embargo, no existe ninguna revisión sistemática sobre este tema. Este hecho mantiene un impasse académico que puede tener resolución. Objetivo: Esta revisión sistemática con meta-análisis tiene como objetivo proporcionar una amplia revisión de la literatura sobre la hipótesis del beneficio de la suplementación con vitamina E sobre el estrés oxidativo y el daño muscular inducido por el ejercicio aeróbico. Métodos: Se utilizó un modelo de efectos aleatorios, se aplicó la diferencia de medias ponderada (DMP) y el intervalo de confianza (IC) del 95% para estimar el efecto global. Resultados: Los resultados revelaron un efecto significativo de la suplementación con vitamina E en la reducción de la creatina quinasa (CK) y la lactato deshidrogenasa (LDH). Además, un análisis de subgrupos dio como resultado una disminución significativa de las concentraciones de CK en los ensayos con medición de CK inmediata y <24 horas después del ejercicio; <1000 en la ingesta diaria de vitamina E; ≤1 en la ingesta semanal; 1 en 6 semanas y >6 semanas de duración experimental, los estudios sobre el ejercicio aeróbico y el entrenamiento formaron parte del estudio cruzado. Conclusión: La vitamina E puede resultar un agente prioritario para la recuperación del daño muscular. Nivel de evidencia II; Estudios terapéuticos - Investigación de resultados.

RESUMO

The objective of this study was to determine the effect of pre-slaughter time about some blood constituents used as stress indicators in the evaluation of animal welfare in cattle. In the practice of ethology, animal welfare is assessed through physiological and behavioral indicators. For the determination of serum biomarkers of animal stress, a total of 180 animals was used, divided into two major groups according to the time of pre-slaughter. In the acceptable group, the animals had a pre-slaughter time up to 24 hours and in the not acceptable group the pre-slaughter time was greater than 24 h. These two groups were split up into three animal categories (males, females and castrated males). In this study, 30 samples were collected from each animal category of the two groups, acceptable and not acceptable, totaling 180 samples. Samples were separated for analysis of muscle enzymes creatine kinase and lactate dehydrogenase (CK and LDH), glucose and cortisol. Physiological values, regardless of the animal category and pre-slaughter time, were higher than the normal values of reference, expressing the prior management effect on animal welfare. The data clearly show a need to update and adapt the entire production chain to animal welfare practices, with the objective of producing competitive quality meat in the world market.(AU)

O objetivo do estudo foi avaliar o efeito do tempo de pré-abate sobre alguns constituintes sanguíneos utilizados como indicadores de estresse na avaliação do bem-estar animal em bovinos. Na prática da etologia, o bem-estar animal é avaliado por meio de indicadores fisiológicos e comportamentais. Para a determinação sérica de biomarcadores de estresse animal utilizaram-se 180 animais, divididos em dois grupos de acordo com o tempo de pré-abate: até 24 horas ou acima de 24 horas. Esses dois grupos subdividiram-se em três categorias animais (machos não-castrados, machos castrados ou fêmeas). Foram coletadas 30 amostras de cada categoria animal nos dois grupos, totalizando 180 amostras. Foram separadas amostras para análise de enzimas musculares creatina quinase e lactato desidrogenase (CK e LDH), glicose e cortisol. Os valores fisiológicos, independentemente da categoria animal e do tempo de pré-abate, foram superiores aos valores de referência, expressando o efeito do manejo prévio sobre o bem-estar dos animais. Os dados evidenciam claramente a necessidade de atualização e adequação de toda a cadeia produtiva às práticas de bem-estar animal, com o objetivo de produzir carne de qualidade competitiva no mercado mundial.(AU)

Assuntos

RESUMO

Background: Aldehyde dehydrogenase-2 (ALDH2) is a mitochondrial enzyme responsible for detoxifying aldehydes generated from the lipid peroxidation. We previously showed that Alda-1, a small molecule that activates ALDH2, has a potent antinociceptive effect in a chronic neuropathic pain model induced by the chronic constriction injury of the sciatic nerve (CCI) in mice, by decreasing reactive aldehydes, such as 4-hydroxynonenal (4-HNE) at the injured site. One of the most important mechanisms involved in the neuropathic pain onset and chronification is the activation of immune and glial cells. Considering that reactive aldehydes are pro- inflammatory and pro-nociceptive, we hypothesized that 4-HNE is involved in the central sensitization in CCI-induced neuropathy model. Methods: The nociceptive threshold was assessed by the up and down method using von Frey filaments, before (0), 7-, and 14-days post-injury (DPI). The ALDH2 function was modulated by Alda-1 (16 mg/Kg/day, s.c. osmotic pump) or by using a transgenic mice model with an inactivating mutation found commonly in Asiatic populations that impairs ~95% in ALDH2 activity (ALDH2*2). The 4-HNE protein adducts and the activation of glial cells in the dorsal horn of the spinal cord was assessed by using immunofluorescence techniques, followed by microglia morphology, and co- localization analysis. Moreover, axonal degeneration was assessed by evaluating the cell infiltration and fragmentation of myelin in histological preparation of sciatic nerve. Results: CCI decreases the nociceptive threshold in 7 and 14DPI, in wildtype (WT) and ALDH2*2 animals, and Alda-1 prevents CCI-induced hypernociception in both periods and genotypes. Also, CCI increases the immunostaining for 4-HNE adducts, GFAP (astrocyte), Iba-1 (microglia) along with a change in microglia morphology to pro-inflammatory profile in wild type mice. Alda-1 prevents 4-HNE adducts formation and glial cells activation, as measured in microglia morphology. Interestingly, the impairment in ALDH2 activity contributes to changes in glial activation dynamic. Alda- 1 reduces 4-HNE levels in ALDH2*2 mice, without interfering with IBA-1 and GFAP expressions. However, the microglia morphology analysis revealed that Alda-1 might induce a shift from inflammatory to anti-inflammatory profile. The co-localization study showed that 4-HNE accumulates in afferent axons, Schwann cells, as well as spinal cord neurons and oligodendrocytes. Finally, we also showed that CCI induced sciatic nerve degeneration in both genotypes, which was prevented by the treatment with Alda-1. Conclusion: The data suggest that 4-HNE plays an important role in neuropathic hypernociception by controlling aldehyde levels and central neuroinflammation, as well as regulates axonal degeneration and peripheral inflammation in this model. Interestingly, the genetic impairment in ALDH2 activity changes the dynamics of glial activation upon nerve injury. Finally, Alda-1 is a promising molecule for neuropathic pain treatment.

A aldeído desidrogenase-2 (ALDH2) é uma enzima mitocondrial responsável pela detoxicação de aldeídos gerados a partir da peroxidação lipídica. Mostramos anteriormente que a Alda-1, uma pequena molécula ativadora a ALDH2, inibe a hipernocicepção em um modelo de dor neuropática induzida pela constrição crônica do nervo isquiático (CCI) em camundongos, por levar a diminuição de aldeídos reativos, como 4-hidroxinonenal (4-HNE) no local lesionado. Sabe-se que um dos principais mecanismos envolvidos na instalação e na cronificação da dor neuropática é a sensibilização central e periférica, que ocorre por ativação de células imunes e gliais. Considerando que os aldeídos reativos são pró-inflamatórios e pró- nociceptivos, levantamos a hipótese que o 4-HNE participa dos processos de sensibilização central e periférica no modelo de neuropatia induzida por CCI. Métodos: O limiar nociceptivo foi determinado pelo método up and down por meio de filamentos de von Frey, que foi aplicado antes (0), 7 e 14 dias após a cirurgia. A função da ALDH2 foi modulada pelo tratamento com a Alda-1 (16 mg/Kg/dia, s.c. por bomba osmótica), ou por meio de camundongos transgênicos contendo uma mutação encontrada em populações asiáticas que reduz (~ 95%) a atividade de ALDH2 (ALDH2*2). A análise dos níveis de adutos de 4-HNE, ativação de células imunes e gliais e liberação de citocinas foram avaliados por meio de western blot, imunofluorescência e ensaio de multiplex, respectivamente. Ainda, a degeneração axonal foi determinada pela infiltração celular e fragmentação de mielina no preparo histológico do nervo isquiático. Resultados: a CCI diminui o limiar nociceptivo em 7 e 14 dias após a cirurgia, em animais selvagens (WT) e ALDH2*2. A administração de Alda-1 previne a hipernocicepção induzida pela CCI em ambos os períodos e genótipos. Adicionalmente, demonstramos que a CCI aumenta a imunomarcação para adutos de 4-HNE, GFAP (astrócitos), Iba-1 (microglia), juntamente com uma mudança na morfologia da micróglia para um perfil pró-inflamatório, no corno dorsal da medula espinal de animais selvagens. A Alda-1 previne o aumento nos níveis de 4-HNE e na ativação de células gliais. Curiosamente, o prejuízo na atividade da ALDH2 contribui para mudanças na dinâmica de ativação glial, já que a Alda-1 reduz os níveis de 4-HNE em camundongos ALDH2*2, sem interferir nas expressões de IBA-1 e GFAP. No entanto, a análise da morfologia da micróglia revelou que Alda-1 pode induzir uma mudança para um perfil anti-inflamatório. O estudo de co- localização mostrou que o 4-HNE se acumula em axônios aferentes, células de Schwann e macrófagos na periferia, bem como neurônios e oligodendrócitos da medula espinal. Por fim, também mostramos que a CCI induziu degeneração do nervo isquiático em ambos os genótipos, que foi prevenida pelo tratamento com Alda-1. Conclusão: Os dados sugerem que o 4-HNE desempenha um papel importante na hipernocicepção neuropática controlando os níveis de aldeídos e a neuroinflamação central, bem como regula a degeneração axonal e a inflamação periférica neste modelo. Curiosamente, o comprometimento genético na atividade da ALDH2 altera a dinâmica da ativação glial frente à lesão do nervo. Finalmente, a Alda-1 é uma molécula promissora para o tratamento da dor neuropática.

RESUMO

Acute Giardia infections often cause diarrhea and stomach upset. Chronic infections can lead to malnutrition, micronutrient deficiencies, malabsorption and weight loss. This study assessed the prevalence of G. lambia infection and assessed associated risk factors among immunocompomised patients undergoing chemotherapeutic treatment in southern Brazil. A total of 110 immunocompromised patients in Pelotas, RS, Brazil, consented to participate in this study and were recruited. Socioeconomic and epidemiological profile of patients was collected by questionnaire. The prevalence for Giardia were determined through microscopy by the centrifugation-flotation technique using stool samples of every patient. In addition, the genetic characterization of the parasite was carried out by amplifying and sequencing the glutamate dehydrogenase (gdh) gene. By microscopy, the prevalence of giardiasis was 17.3% (19/110). Furthermore, the DNA sequences revealed that 7 (36.8%) out of 19 isolates belonged to assemblage B, while 6 of them (31.6%) belonged to assemblage C, 5 (26.3%) to assemblage A and 1 (5.3%) to assemblage D. Risk factors (p ≤ 0.05) for giardiasis were schooling level (OR=8.0 (1.02 ­ 62.91) sharing a house with more than three people (OR=14.1 (3.77 ­ 52.51), water sources (OR=38.9 (10.4 ­ 145.7), sewage treatment (OR=14.2 (3.1 ­ 65.5), waste destination (OR=7.44 (2.0 ­ 27.3), owning pets (OR=4.6 (1.0 ­ 21.2) and cultivating a vegetable garden (OR=4.2 (1.3 ­ 13.6). The prevalence of G. lamblia in immunocompromised patients was considered elevate with the identification of four assemblage of the parasite (A, B, C and D).

As infecções agudas por Giardia geralmente causam diarreia e dores de estômago. As infecções crônicas podem levar à desnutrição, deficiências de micronutrientes, má absorção e perda de peso. Este estudo avaliou a prevalência da infecção por G. lambia e os fatores de risco associados em pacientes imunocomprometidos em tratamento quimioterápico no sul do Brasil. Um total de 110 pacientes imunocomprometidos de Pelotas, RS, Brasil, consentiram em participar deste estudo e foram recrutados. O perfil socioeconômico e epidemiológico dos pacientes foi coletado por meio de questionário. A prevalência de Giardia foi determinada através de microscopia pela técnica de centrifugação-flutuação utilizando amostras de fezes de cada paciente. Além disso, a caracterização genética do parasita foi realizada pela amplificação e sequenciamento do gene da glutamato desidrogenase (gdh). À microscopia, a prevalência de giardíase foi de 17,3% (19/110). Além disso, as sequências de DNA revelaram que 7 (36,8%) dos 19 isolados pertenciam ao agrupamento B, enquanto 6 deles (31,6%) pertenciam ao agrupamento C, 5 (26,3%) ao agrupamento A e 1 (5,3%) ao agrupamento D. Os fatores de risco (p ≤ 0,05) para giardíase foram, escolaridade (OR=8,0 (1,02 ­ 62,91), dividir casa com mais de três pessoas (OR=14,1 (3,77 ­ 52,51), fontes de água (OR=38,9 (10,4 ­ 145,7), tratamento de esgoto (OR=14,2 (3,1 ­ 65,5), destinação do lixo (OR=7,44 (2,0 ­ 27,3), possuir animais de estimação (OR=4,6 (1,0 ­ 21,2) e cultivar horta (OR=4,2 (1,3 ­ 13.6). A prevalência de G. lamblia em pacientes imunocomprometidos foi considerada elevada com a identificação de quatro conjuntos do parasito (A, B, C e D).

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Abstract: Introduction: The reference standard for the diagnosis of COVID-19 remains reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR)-positive, while plain chest computed tomography (CT) has been more sensitive and specific in severity classification. In defining the severity of SARS-CoV-2, clinical, imaging and laboratory criteria have been specified, mentioning several markers, including lactate dehydrogenase (LDH). Historically, LHD has been of interest as a biomarker associated with lung damage, with a greater peak during the influenza A H1N1 pandemic, and taken as a marker in the definition of severity. Objective: To determine the diagnostic performance of serum LHD levels on admission to the ICU as a marker of severity in patients with SARS-CoV-2 infection. Material and methods: Observational, analytical, longitudinal and prospective study, carried out in two stages, the first (April 1, 2020 to September 30, 2020) consisted of a correlation study between serum LHD levels at Intensive Care Unit (ICU) admission and simple chest CT, a moderate correlation was obtained between serum LHD levels and severity score by pulmonary tomography, with an r = 0.5 and p < 0.0001; a severity-associated serum LHD cut-off point of 396 U/dL was obtained (p < 0.001, sensitivity 86.02%, specificity 75%). The second stage was extended until December 31, 2020, in which analysis is performed for diagnostic test performance, in inferential statistics correlation tests are performed, a multiple linear regression model is built, analysis was performed for diagnostic tests by building two-by-two contingency Tables, determining sensitivity, specificity, positive predictive value, negative predictive value, likelihood ratios and Bayesian analysis. Results: 155 patients were included in the study to determine the diagnostic performance of serum LHD levels in patients with severe SARS-CoV-2 infection; by multiple linear regression analysis, it was determined that LHD levels on admission to the ICU is a predictor of severity in patients with SARS-CoV-2. A sensitivity of 0.92, specificity 0.41, with PPV 0.854, NPV 0.57 and an accuracy of 0.83, an LR + 1.57 and LR- 0.63 were obtained. In the post-test probability results, patients with DHL > 396 U/dL have a 86.3% probability of developing severe COVID-19. DHL levels have a direct correlation with ICU days of stay and days of invasive mechanical ventilation with statistical significance (p = 0.001, p = 0.033 respectively). Conclusion: Serum LHD levels have a high sensitivity to diagnose COVID-19 severity; and in the absence of simple chest CT, it can predict severe lung damage. It constitutes a test with high screening power in severe cases of COVID-19; with a probability of almost double (LR + 1.6) that of predicting a severe case.

Resumo: Introdução: O padrão de referência para o diagnóstico de COVID-19 continua sendo a reação em cadeia da polimerase com transcriptase reversa positiva (RT-PCR), enquanto a tomografia computadorizada (TC) de tórax simples tem se mostrado mais sensível e específica na classificação de gravidade. Na definição da gravidade do SARS-CoV-2, foram especificados critérios clínicos, de imagem e laboratoriais, mencionando vários marcadores, incluindo a desidrogenase láctica (DHL). A DHL ao longo da história tem sido de interesse como biomarcador associado a danos pulmonares, com maior boom durante a pandemia de influenza A H1N1, e tomado como marcador na definição de gravidade. Objetivo: Determinar o desempenho diagnóstico de dois níveis séricos de DHL na admissão à UTI como marcador de gravidade em pacientes com infecção por SARS-CoV-2. Métodos: Estudo observacional, analítico, longitudinal e prospectivo, realizado em duas etapas, a primeira (01 de abril de 2020 a 30 de setembro de 2020) consistiu em um estudo de correlação entre os níveis séricos de DHL na admissão na UTI e TC simples de tórax, um foi obtida correlação entre os níveis séricos de DHL e o escore de gravidade pela tomografia pulmonar, com r 0.5 ep < 0.0001; um ponto de corte para DHL sérico associado à gravidade de 396 U/dL foi obtido (p < 0.001, sensibilidade 86.02%, especificidade 75%). A segunda etapa foi estendida até 31 de dezembro de 2020, na qual são realizadas análises para realização de testes diagnósticos, testes de correlação em estatística inferencial, construção de um modelo de regressão linear múltipla, análise para testes diagnósticos, construção tabelas de contingência dois a dois, determinando sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo, valor preditivo negativo, razões de verossimilhança e análise Bayesiana. Resultados: 155 pacientes foram incluídos no estudo para determinar o desempenho diagnóstico dos níveis séricos de DHL em pacientes com infecção grave por SARS-CoV-2; pela análise de regressão linear múltipla, determina-se que os níveis de DHL na admissão à UTI é um preditor de gravidade em pacientes com SARS-CoV-2. Obteve-se sensibilidade de 0.92, especificidade de 0.41, com VPP 0.854, VPN 0.57 e exatidão de 0.83, LR+ 1.57 e LR- 0.63. Nos resultados de probabilidade pós-teste, pacientes com DHL > 396 U/Dl têm probabilidade de 86.3% de desenvolver doença grave por COVID-19. Os níveis de DHL têm correlação direta com os dias de permanência na UTI e os dias de tratamento invasivo ventilação mecânica com significância estatística (p = 0.001, p = 0.33 respectivamente). Conclusão: Os níveis séricos de DHL têm alta sensibilidade para diagnosticar gravidade por COVID-19; e na ausência de TC simples de tórax, pode predizer danos pulmonares graves. Constitui um teste com alto poder de escrutínio em casos graves de COVID-19; com quase o dobro da probabilidade (LR + 1.6) de predizer uma condição grave.

RESUMO

Poor storage conditions provide favorable environment to stored grain pests for their growth. The bio-pesticides are the best alternatives to synthetic pesticides. Present study was conducted to compare toxicity of Rubus fruticosus and Valeriana jatamansi against granary weevil, Sitophilus granarius and subsequent changes in enzyme activity responsible for grain damage. In current research 5 g of R. fruticosus fruit and V. jatamansi rhizome powders were tested separately against S. granarius, in 50 g wheat whole grains for seven days in comparison with the control. The enzymatic activity of malate dehydrogenase and alpha-amylase was observed in the cellular extracts of S. granarius. The insects were crushed and homogenized in phosphate-buffer solution and centrifuged at 10000 rpm for 5 minutes. For the enzymatic measurement supernatant was tested; the spectrophotometer was adjusted at 340 nm. The reagents were mixed and incubated at 25 °C for five minutes. The cuvettes were placed in the experimental and reference sites of spectrophotometer and recorded the change in absorbance for 3-4 minutes. There was 5.60% and 14.92% reduction in the activity of malate dehydrogenase in R. fruticosus and V. jatamansi, treated insects, respectively. The alpha amylase enzyme activity was 6.82% reduced and 63.63% increase in R. fruticosus and V. jatamansi, treated insects, respectively. Present study addresses that both plant powders are effective against granary weevil by altering enzyme activities so both the plant powders can be used as bio-pesticides against the stored grains pests.(AU)

As más condições de armazenamento proporcionam um ambiente favorável às pragas armazenadas para o crescimento. Os biopesticidas são as melhores alternativas aos pesticidas sintéticos. O presente estudo foi conduzido para comparar a toxicidade de Rubus fruticosus e Valeriana jatamansi contra gorgulhos, Sitophilus granarius e subsequentes alterações na atividade enzimática responsáveis por danos aos grãos. Na pesquisa atual, 5 g de frutos de R. fruticosus e pós de rizoma de V. jatamansi foram testados separadamente contra S. granarius, em 50 g de grãos integrais de trigo por sete dias, em comparação com o controle. A atividade enzimática da malato desidrogenase e alfa-amilase foi observada nos extratos celulares de S. granarius. Os insetos foram esmagados e homogeneizados em solução tampão fosfato e centrifugados a 10000 rpm por 5 minutos. Para a medição enzimática, o sobrenadante foi testado; o espectrofotômetro foi ajustado a 340 nm. Os reagentes foram misturados e incubados a 25 °C por cinco minutos. As cubetas foram colocadas nos locais experimentais e de referência do espectrofotômetro e registradas as alterações na absorbância por 3-4 minutos. Houve redução de 5,60% e 14,92% na atividade da malato desidrogenase em R. fruticosus e V. jatamansi, insetos tratados, respectivamente. A atividade da enzima alfa amilase foi reduzida em 6,82% e aumento de 63,63% em R. fruticosus e V. jatamansi, insetos tratados, respectivamente. O presente estudo aborda que ambos os pós de plantas são eficazes contra o gorgulho do celeiro, alterando as atividades enzimáticas, de modo que ambos os pós de plantas possam ser usados como biopesticidas contra pragas de grãos armazenados.(AU)

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INTRODUCCIÓN: la Leucemia Mieloide Aguda es la neoplasia hematológica más común, caracterizada por una proliferación incontrolada de células madre hematopoyéticas. La mutación FLT3/ITD se presenta en aproximadamente el 30% de todos los pacientes con ésta patología, se asocia con mayor riesgo de recaída y menor supervivencia. El FLT3-ITD puede usarse como un factor pronóstico de la gravedad de ésta patología, importante para predecir los resultados clínicos en pacientes con LMA. OBJETIVO: el objetivo de este estudio fue relacionar la mutación FLT3/ITD con variables hematológicas y clínicas en pacientes diagnosticados con Leucemia Mieloide Aguda atendidos en la Sociedad de Lucha contra el Cáncer (SOLCA) de la ciudad de Cuenca, periodo 2013 ­2020. MÉTODOS: se obtuvieron los datos a partir de registros secundarios registrados una base de datos del hospital, el universo de la muestra lo constituyeron 63 pacientes, diagnosticados con LMA, se les analizó la mutación FLT3/ITD por PCR Convencional. RESULTADOS: se encontró la presencia de la mutación en un 9.5% y una asociación significativamente estadística con alteraciones hematológicas relacionados con niveles de hemoglobina anormal (p=0,037) y ratio 6,63 y LDH elevada en 1,21 veces (p=0,024); recuento elevado de leucocitos y blastos (p=0,031). Los individuos portadores de la mutación se presentó con mayor incidencia en el sexo masculino y grupo etario adulto mediano (45-64 años). CONCLUSIONES: la literatura internacional afirma que la mutación FLT3/ITD en un importante marcador pronóstico; debido a su baja frecuencia, no se pudo determinar una relación estadísticamente significativa con otras variables clínicas en este estudio.(AU)

INTRODUCTION: acute Myeloid Leukemia is the most common hematological neoplasm, characterized by an uncontrolled proliferation of hematopoietic stem cells. The FLT3 / ITD mutation occurs in approximately 30% of all patients with this pathology, it is associated with a higher risk of relapse and lower survival. FLT3-ITD can be used as a poor prognostic factor, important for predicting clinical outcomes in patients with AML. OBJECTIVE: the objective of this study was to characterize the FLT3 / ITD mutation and its relationship with hematological and clinical variables in patients diagnosed with Acute Myeloid Leukemia treated at SOLCA in the city of Cuenca, period 2013-2020. METHODS: data were obtained from secondary records in a hospital database, the universe of the sample was made up of 63 patients, diagnosed with AML, and the FLT3 / ITD mutation was analyzed by Conventional PCR. RESULTS: the presence of the mutation was found in 9.5% and a statistically significantly association with hematological alterations related to abnormal hemoglobin levels (p = 0.037) and ratio 6.63 and LDH elevated in 1.21 times (p =0.024); Elevated leukocyte and blast count (p = 0.031). Individuals carrying the mutation had a higher incidence in males and in the middle adult age group (45-64 years). CONCLUSIONS: the international literature affirms that the FLT3 / ITD mutation is an important prognostic marker; Due to its low frequency, it was not possible to determine a statistically significant relationship with other clinical variables in our study, for which it is suggested to expand the unirverse of the sample.(AU)

INTRODUÇÃO: a Leucemia Mielóide Aguda é a malignidade hematológica mais comum, caracterizada pela proliferação descontrolada de células-tronco hematopoiéticas. A mutação FLT3/ITD está presente em aproximadamente 30% de todos os pacientes com esta patologia, e está associada a um maior risco de recaída e menor sobrevida. O FLT3-ITD pode ser usado como um fator prognóstico para a gravidade desta patologia, importante para prever os resultados clínicos em pacientes com LMA. OBJETIVO: o objetivo deste estudo foi relacionar a mutação FLT3/ITD com variáveis hematológicas e clínicas em pacientes diagnosticados com leucemia mielóide aguda tratados na Sociedade de Luta contra o Câncer (SOLCA) na cidade de Cuenca, período 2013 - 202020. Métodos. Os dados foram obtidos de registros secundários registrados em um banco de dados hospitalar, o universo da amostra consistiu de 63 pacientes diagnosticados com AML, eles foram analisados para a mutação FLT3/ITD por PCR convencional. RESULTADOS: a presença da mutação foi encontrada em 9,5% e uma associação estatística significativa com alterações hematológicas relacionadas a níveis anormais de hemoglobina (p=0,037) e relação 6,63 e LDH elevada em 1,21 vezes (p=0,024); contagem elevada de leucócitos e explosões (p=0,031). Os individuos portadores da mutação ocorreram com maior incidência no sexo masculino e na faixa etária média adulta (45-64 anos). CONCLUSÕES: a literatura internacional afirma que a mutação FLT3/ITD em um marcador prognóstico importante; devido a sua baixa freqüência, uma relação estatisticamente significativa com outras variáveis clínicas não pôde ser determinada neste estudo.(AU)

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ABSTRACT Introduction Blood biomarkers are measurable metabolic products that allow objective monitoring of the training process, and their analysis provides an opportunity to improve athletic performance. Objective To evaluate blood lactate concentrations in a group of the Valle League weightlifting athletes as a tool to determine the effects of training and its direct relationship to performance during competition. Methods This is an observational cross-sectional study. Lactate levels of 32 weightlifting athletes belonging to the Valle Weightlifting League were evaluated. Blood samples were taken from the ear lobe to quantify the lactate concentration, using a Scout Lactate analyzer. Samples were taken before and after a high intensity training section consisting of four maximum repetition (MR) sports gestures, in which 5 series and 15 repetitions were performed for each sports gesture, with a rest period of 40 seconds between each exercise. The software program SPSS, version 25, was used to determine the lactate concentrations. Results An average lactate concentration 22.46 mg/dL was obtained for the athletes at rest, and an average of 98.30 mg/dL in the final lactate concentration, after high intensity exercise. Significant differences were found between the initial and final lactate concentrations. Conclusion Lactate concentration increases with physical activity; it varies from one individual to another; and it can be used as a biomarker of intensity of physical activity in the field of sports. Level of evidence; II type of study: Prognostic Studies Investigating the Effect of a Patient Characteristic on a disease outcome.

RESUMO Introdução Os biomarcadores sanguíneos são produtos metabólicos mensuráveis que permitem a monitorização objetiva do processo de treino, e sua análise é uma oportunidade para melhorar o desempenho atlético. Objetivos Avaliar as concentrações de lactato no sangue de um grupo de atletas de halterofilismo da Liga Valle como ferramenta para determinar os efeitos do treino e sua relação direta com o desempenho durante a competição. Métodos Este é um estudo transversal e observacional. Foram avaliados os níveis de lactato em 32 atletas da Liga de Halterofilismo Valle. A amostra de sangue foi retirada do lóbulo da orelha com o intuito de quantificar a concentração de lactato com o analisador Scout Lactate. As amostras foram colhidas antes e depois de uma seção de treino de alta intensidade, que consistiu em quatro gestos esportivos de repetição máxima (RM), nos quais foram realizadas 5 séries e 15 repetições para cada gesto esportivo, com um período de repouso de 40 segundos entre cada exercício. O software SPSS, versão 25 foi usado para determinar as concentrações de lactato. Resultados A concentração média de lactato nos atletas em repouso foi 22,46 mg/dl e a concentração média final foi de 98,30 mg/dl depois de exercício de alta intensidade. Foram encontradas diferenças significativas ao comparar a concentração inicial com a concentração final de lactato. Conclusões A concentração de lactato aumenta com a realização da atividade física, é variável de um indivíduo para outro e pode ser usada como biomarcador de intensidade da atividade física na área dos esportes. Nível de Evidência II; Estudos prognósticos - Investigação do efeito de característica de um paciente sobre o desfecho da doença.

RESUMEN Introducción Los biomarcadores sanguíneos son productos metabólicos mensurables que permiten la monitorización objetiva del proceso de entrenamiento, y su análisis es una oportunidad para mejorar el desempeño atlético. Objetivos Evaluar las concentraciones de lactato en la sangre de un grupo de atletas de halterofilia de la Liga Valle como herramienta para determinar los efectos del entrenamiento y su relación directa con el desempeño durante la competición. Métodos Este es un estudio transversal y observacional. Fueron evaluados los niveles de lactato en 32 atletas de la Liga de Halterofilia Valle. La muestra de sangre fue retirada del lóbulo de la oreja con el objetivo de cuantificar la concentración de lactato con el analizador Scout Lactate. Las muestras fueron tomadas antes y después de una sección de entrenamiento de alta intensidad, que consistió en cuatro gestos deportivos de repetición máxima (RM), en los que se realizaron 5 series y 15 repeticiones para cada gesto deportivo, con un período de descanso de 40 segundos entre cada ejercicio. El software SPSS versión 25 fue usado para determinar las concentraciones de lactato. Resultados La concentración promedio de lactato en los atletas en reposo fue 22,46 mg/dl y la concentración promedio final fue de 98,30 mg/dl después del ejercicio de alta intensidad. Fueron encontradas diferencias significativas al comparar la concentración inicial con la concentración final de lactato. Conclusiones La concentración de lactato aumenta con la realización de actividad física, es variable de un individuo para otro, y puede ser usada como biomarcador de intensidad de la actividad física en el área de los deportes. Nivel de evidencia II; Estudios pronósticos - Investigación del efecto de característica de un paciente sobre el resultado de la enfermedad

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Poor storage conditions provide favorable environment to stored grain pests for their growth. The bio-pesticides are the best alternatives to synthetic pesticides. Present study was conducted to compare toxicity of Rubus fruticosus and Valeriana jatamansi against granary weevil, Sitophilus granarius and subsequent changes in enzyme activity responsible for grain damage. In current research 5 g of R. fruticosus fruit and V. jatamansi rhizome powders were tested separately against S. granarius, in 50 g wheat whole grains for seven days in comparison with the control. The enzymatic activity of malate dehydrogenase and α-amylase was observed in the cellular extracts of S. granarius. The insects were crushed and homogenized in phosphate-buffer solution and centrifuged at 10000 rpm for 5 minutes. For the enzymatic measurement supernatant was tested; the spectrophotometer was adjusted at 340 nm. The reagents were mixed and incubated at 25 °C for five minutes. The cuvettes were placed in the experimental and reference sites of spectrophotometer and recorded the change in absorbance for 3-4 minutes. There was 5.60% and 14.92% reduction in the activity of malate dehydrogenase in R. fruticosus and V. jatamansi, treated insects, respectively. The alpha amylase enzyme activity was 6.82% reduced and 63.63% increase in R. fruticosus and V. jatamansi, treated insects, respectively. Present study addresses that both plant powders are effective against granary weevil by altering enzyme activities so both the plant powders can be used as bio-pesticides against the stored grains pests.

As más condições de armazenamento proporcionam um ambiente favorável às pragas armazenadas para o crescimento. Os biopesticidas são as melhores alternativas aos pesticidas sintéticos. O presente estudo foi conduzido para comparar a toxicidade de Rubus fruticosus e Valeriana jatamansi contra gorgulhos, Sitophilus granarius e subsequentes alterações na atividade enzimática responsáveis ​​por danos aos grãos. Na pesquisa atual, 5 g de frutos de R. fruticosus e pós de rizoma de V. jatamansi foram testados separadamente contra S. granarius, em 50 g de grãos integrais de trigo por sete dias, em comparação com o controle. A atividade enzimática da malato desidrogenase e α-amilase foi observada nos extratos celulares de S. granarius. Os insetos foram esmagados e homogeneizados em solução tampão fosfato e centrifugados a 10000 rpm por 5 minutos. Para a medição enzimática, o sobrenadante foi testado; o espectrofotômetro foi ajustado a 340 nm. Os reagentes foram misturados e incubados a 25 °C por cinco minutos. As cubetas foram colocadas nos locais experimentais e de referência do espectrofotômetro e registradas as alterações na absorbância por 3-4 minutos. Houve redução de 5,60% e 14,92% na atividade da malato desidrogenase em R. fruticosus e V. jatamansi, insetos tratados, respectivamente. A atividade da enzima alfa amilase foi reduzida em 6,82% e aumento de 63,63% em R. fruticosus e V. jatamansi, insetos tratados, respectivamente. O presente estudo aborda que ambos os pós de plantas são eficazes contra o gorgulho do celeiro, alterando as atividades enzimáticas, de modo que ambos os pós de plantas possam ser usados ​​como biopesticidas contra pragas de grãos armazenados.

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Os cistos e tumores odontogênicos constituem lesões heterogêneas que se originam de algum remanescente da odontogênese. Dentre essas, o cisto dentígero (CD), o ceratocisto odontogênico (CO), o ameloblastoma (AM) e o tumor odontogênico adenomatóide (TOA) são lesões odontogênicas de origem epitelial apresentando diversos perfis biológicos e sendo alvos de constantes investigações. As células-tronco (CT) são a principal fonte para a geração e manutenção da diversidade celular e distúrbios na regulação podem levar a produção de CT alteradas, as células-tronco tumorais (CTT). Entre os marcadores das CTT, a ALDH1 vem sendo usada em estudos em diversas neoplasias e a sua alta expressão esteve associada a informações de diagnóstico e prognóstico. O objetivo deste estudo foi analisar a presença, quantidade e distribuição de CTT no parênquima tumoral, cápsula cística e estroma, através do padrão de expressão imuno-histoquímico da proteína ALDH-1 em cistos e tumores odontogênicos de origem epitelial. A amostra foi constituida por 80 casos (20 CDs, 20 COs, 20 AMs e 20 TOAs). O sistema de pontuação de imunorreatividade, utilizado foi o de percentual de células positivas e de intensidade da imunomarcação, com escores de 0 a 3. O escore final foi determinado através da fórmula ''Escore de imunoexpressão = intensidade × percentual de células'', sendo definido como baixa expressão, os escores de 0 a 4 e, alta expressão, os escores de 6 a 9 para a cápsula cística e parênquima tumoral. Também, foi analisada a expressão da proteína no estroma das lesões, sendo estabelecido 0 = negativo e 1 = positivo. Em todas as variáveis, os testes não-paramétricos de Kruskal-Wallis (KW) e Mann-Whitney (U) foram realizados com nível de significância de 5% (p < 0,05). A imunoexpressão da ALDH-1 exibiu marcação no núcleo e núcleo-citoplasma. As medianas dos escores obtidos, do padrão de expressão e da intensidade de imunoexpressão de ALDH-1 no componente epitelial das lesões, demonstrou expressão significativamente superior de ALDH-1 em COs em comparação aos AMs (p < 0,0001) e aos TOAs (p < 0,0001). Foi observada maior expressão de ALDH-1 em CDs em comparação aos AMs (p < 0,0001) e TOAs (p < 0,0001). No estroma e na cápsula cística, foi evidenciada imunoreatividade em todos os casos de cistos odontogênicos estudados e em 85% e 90% dos AMs e TOAs, respectivamente. A expressão da ALDH-1 nas lesões odontogênicas estudadas sugere a presença de células com perfil de CT nas mesmas, destacando-se os cistos odontogênicos que apresentaram expressões epiteliais muito superiores aos tumores (AU).

Odontogenic cysts and tumors are heterogeneous lesions that arise from remnants of odontogenesis. Among these, the dentigerous cyst (DC), the odontogenic keratocyst (OK), the ameloblastoma (AM), and the adenomatoid odontogenic tumor (AOT) are odontogenic lesions of epithelial origin that have different biological profiles and have been extensively investigated. Stem cells (SC) are the main source for the generation and maintenance of cell diversity and disturbances in their regulation can lead to the production of altered SC, the socalled tumor stem cells (TSC). Among the markers of TSC, the aldehyde dehydrogenase-1 protein (ALDH1) has been evaluated in several neoplasms and its high expression has been associated with diagnostic and prognostic information. The aim of this study was to analyze the presence, quantity and distribution of TSC in the tumor parenchyma, cystic capsule and stroma, through the immunohistochemical expression of ALDH1 in odontogenic cysts and tumors of epithelial origin. The sample consisted of 80 cases (20 DCs, 20 OKs, 20 AMs and 20 AOTs) and the immunoreactivity was evaluated through the percentage of positive cells and intensity of immunostaining, with scores from 0 to 3. The final score was determined by the formula ''immunoexpression score = intensity × percentage of cells '', being defined as low expression the scores from 0 to 4 and high expression the scores from 6 to 9, in cystic capsule and tumor parenchyma. The expression of ALDH1 was also analyzed in the stroma of the lesions, with scores 0 = negative and 1 = positive. The data were submitted to nonparametric tests, considering a level of significance of 5% (p<0.05). Immunoexpression of ALDH-1 exhibited nuclear and nucleo-cytoplasmic marking. When the lesions were compared regarding the medians of the obtained scores, the expression pattern and the intensity of immunoexpression of ALDH-1 in the epithelial component of the lesions, a significantly higher expression of ALDH-1 was observed in KOs compared to AMs (p < 0.0001) and AOTs (p <0.0001), and higher expression of ALDH-1 was observed in DCs compared to AMs (p <0.0001) and AOTs (p <0.0001). When evaluating stroma and cystic capsule, immunoreactivity was observed in all cases of odontogenic cysts studied and in 85% and 90% of AMs and AOTs, respectively. The expression of ALDH-1 in the odontogenic lesions studied suggests the presence of SCs in them, highlighting the odontogenic cysts for presenting higher epithelial expressions compared to odontogenic tumors (AU).

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Abstract Poor storage conditions provide favorable environment to stored grain pests for their growth. The bio-pesticides are the best alternatives to synthetic pesticides. Present study was conducted to compare toxicity of Rubus fruticosus and Valeriana jatamansi against granary weevil, Sitophilus granarius and subsequent changes in enzyme activity responsible for grain damage. In current research 5 g of R. fruticosus fruit and V. jatamansi rhizome powders were tested separately against S. granarius, in 50 g wheat whole grains for seven days in comparison with the control. The enzymatic activity of malate dehydrogenase and -amylase was observed in the cellular extracts of S. granarius. The insects were crushed and homogenized in phosphate-buffer solution and centrifuged at 10000 rpm for 5 minutes. For the enzymatic measurement supernatant was tested; the spectrophotometer was adjusted at 340 nm. The reagents were mixed and incubated at 25 °C for five minutes. The cuvettes were placed in the experimental and reference sites of spectrophotometer and recorded the change in absorbance for 3-4 minutes. There was 5.60% and 14.92% reduction in the activity of malate dehydrogenase in R. fruticosus and V. jatamansi, treated insects, respectively. The alpha amylase enzyme activity was 6.82% reduced and 63.63% increase in R. fruticosus and V. jatamansi, treated insects, respectively. Present study addresses that both plant powders are effective against granary weevil by altering enzyme activities so both the plant powders can be used as bio-pesticides against the stored grains pests.

Resumo As más condições de armazenamento proporcionam um ambiente favorável às pragas armazenadas para o crescimento. Os biopesticidas são as melhores alternativas aos pesticidas sintéticos. O presente estudo foi conduzido para comparar a toxicidade de Rubus fruticosus e Valeriana jatamansi contra gorgulhos, Sitophilus granarius e subsequentes alterações na atividade enzimática responsáveis por danos aos grãos. Na pesquisa atual, 5 g de frutos de R. fruticosus e pós de rizoma de V. jatamansi foram testados separadamente contra S. granarius, em 50 g de grãos integrais de trigo por sete dias, em comparação com o controle. A atividade enzimática da malato desidrogenase e -amilase foi observada nos extratos celulares de S. granarius. Os insetos foram esmagados e homogeneizados em solução tampão fosfato e centrifugados a 10000 rpm por 5 minutos. Para a medição enzimática, o sobrenadante foi testado; o espectrofotômetro foi ajustado a 340 nm. Os reagentes foram misturados e incubados a 25 °C por cinco minutos. As cubetas foram colocadas nos locais experimentais e de referência do espectrofotômetro e registradas as alterações na absorbância por 3-4 minutos. Houve redução de 5,60% e 14,92% na atividade da malato desidrogenase em R. fruticosus e V. jatamansi, insetos tratados, respectivamente. A atividade da enzima alfa amilase foi reduzida em 6,82% e aumento de 63,63% em R. fruticosus e V. jatamansi, insetos tratados, respectivamente. O presente estudo aborda que ambos os pós de plantas são eficazes contra o gorgulho do celeiro, alterando as atividades enzimáticas, de modo que ambos os pós de plantas possam ser usados como biopesticidas contra pragas de grãos armazenados.

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G6PD deficiency is associated with erythrocyte deficiency in the X-chromosome enzyme. It causes a hematologic syndrome called hemolytic anemia that connects G6PD deficiency with X-linked condition. In the Middle East, including Saudi Arabia, G6PD deficiency is the most dominant genetic blood disorders. It results in higher rates of mortality and morbidity due to its incurable long-lasting nature and prevalence of physical and psychological incapacities. In this study, an attempt was made to evaluate the prevalence of G6PD deficiency among the Saudi population in Riyadh city. A cross-sectional retrospective study was conducted at King Saud University Medical City in Riyadh, Saudi Arabia. The population of the study comprised randomly chosen males and females who visited the hospital from January 2017 to January 2018. Statistical analyses were performed using SPSS, and descriptive analysis was used to find the frequency of G6PD-deficient patients. Out of the 209 patients, 62.2% were males (n=130) and 37.8% were females (n=79). Twenty males and 6 females were found to have G6PD deficiency, with the male to female ratio being 1:3. Out of the total 130 male participants, 20 patients were found to be enzyme deficient and 6 patients of 79 female patients were found to be G6PD deficient. There were 38.4% (n=10) patients with G6PD level <4 units/gram hemoglobin, 26.9% (n=7) patients had G6PD levels of 4.1­7.0 units/gram hemoglobin, and 34.6% (n=9) patients had >7 units/gram hemoglobin. Among the G6PD patients, 23.07% patients were severely anemic, and 5 (19.2%) patients were reported to have high bilirubin. The present study revealed the G6PD prevalence to be 12.4% among the Saudi population; this value is significantly higher than that found in France, Spain, India, and Singapore. In the Saudi population, males are more vulnerable to G6PD-deficient than females. Hence, attention should be paid to G6PD-deficient patients while prescribing antimalarial medication. Such patients may be advised to avoid certain foods to minimize the risk of having hemolytic episodes.

A deficiência de G6PD está associada à deficiência de eritrócitos na enzima do cromossomo X. Causa uma síndrome hematológica chamada anemia hemolítica que conecta a deficiência de G6PD à condição ligada ao X. No Oriente Médio, incluindo a Arábia Saudita, a deficiência de G6PD é o distúrbio genético do sangue mais dominante. Isso resulta em maiores taxas de mortalidade e morbidade devido à sua natureza incurável e duradoura e à prevalência de incapacidades físicas e psicológicas. Neste estudo, foi feita uma tentativa de avaliar a prevalência de deficiência de G6PD entre a população saudita na cidade de Riade. Um estudo retrospectivo transversal foi realizado na cidade médica da Universidade King Saud, em Riade, na Arábia Saudita. A população do estudo compreendeu homens e mulheres escolhidos aleatoriamente que visitaram o hospital entre janeiro de 2017 e janeiro de 2018. As análises estatísticas foram realizadas com o SPSS e a análise descritiva foi utilizada para determinar a frequência de pacientes com deficiência de G6PD. Dos 209 pacientes, 62,2% eram do sexo masculino (n = 130) e 37,8% eram do sexo feminino (n = 79). Verificou-se que 20 homens e 6 mulheres apresentavam deficiência de G6PD, sendo a proporção homem/mulher de 1:3. Do total de 130 participantes do sexo masculino, 20 pacientes apresentaram deficiência de enzima e 6 de 79 pacientes do sexo feminino apresentaram deficiência de G6PD. Havia 38,4% (n = 10) pacientes com nível de G6PD < 4 unidades/grama de hemoglobina, 26,9% (n = 7) pacientes tinham níveis de G6PD de 4,1-7,0 unidades/grama de hemoglobina e 34,6% (n = 9) pacientes tinham > 7 unidades/grama de hemoglobina. Entre os pacientes com G6PD, 23,07% eram severamente anêmicos e cinco (19,2%) pacientes relataram ter alta bilirrubina. O presente estudo revelou que a prevalência de G6PD é de 12,4% na população saudita; esse valor é significativamente maior que o encontrado na França, Espanha, Índia e Cingapura. Na população saudita, os homens são mais vulneráveis à deficiência de G6PD do que as mulheres. Portanto, deve-se prestar atenção aos pacientes com deficiência de G6PD durante a prescrição de medicamentos antimaláricos. Esses pacientes podem ser aconselhados a evitar certos alimentos para minimizar o risco de episódios hemolíticos.

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The objective of this study was to evaluate the physiological quality allied to biochemical quality of lettuce seeds by germination and enzymes expression at 20, 25, 30, 35, 40 and 42ºC. Germination speed index and percentage of germination were estimated. Isoenzyme expressions were assessed by alcohol dehydrogenase (ADH), malate dehydrogenase (MDH), catalase (CAT), esterase (EST), pyruvate decarboxylase (PDC) and glutamate oxaloacetate transferase (GOT). The experiment consisted of a completely randomized design in a factorial scheme 4x6, with four cultivars and six different temperatures, with four replications. The highest germination and vigor were observed for cv. 'Everglades' at 35°C, which proved that this cultivar is thermotolerant. Catalase can be considered a genetic marker for the identification ofthermotolerant lettuce cultivars. Cultivar 'Everglades' has potential to be used in lettuce breeding programs aimed at cultivars tolerant to high temperatures during germination.

O objetivo deste estudo foi avaliar a qualidade fisiológica e bioquímica de sementes de alface por meio da germinação e expressão de enzimas a 20, 25, 30, 35, 40 e 42ºC. As variáveis velocidade de germinação e o índice de velocidade de germinação foram estimadas. As expressões das enzimas alcool desidrogenase (ADH), malato desidrogenase (MDH), catalase (CAT), esterase (EST), piruvate descarboxilase (PDC) e glutamato oxaloacetato transferase (GOT) foram avaliadas. Para análise dos genótipos foi empregado o delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 4x6, testando quatro cultivares e seis diferentes temperaturas, com quatro repetições. A maior germinação e vigor foram observadas para a cv. 'Everglades' a 35°C, o que prova que esta cultivar é termotolerante. A catalase pode ser considerada um marcador para a identificação de cultivares de alface termotolerantes. A cultivar 'Everglades' tem potential para uso em programas de melhoramento visando tolerância à alta temperatura durante a germinação.

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A atividade enzimática do solo reflete a atividade dos microrganismos que decompõem a matéria orgânica e liberam nutrientes às plantas. O objetivo foi avaliar a atividade enzimática no solo em pastagens de cultivares de Urochloa manejados sob as ofertas de forragem de 4, 7, 10 e 13 kg de matéria seca (MS)/100 kg de peso corporal (PC). O método de pastejo adotado foi mob-stocking, com quatro ciclos de pastejo (entre dezembro de 2008 e fevereiro de 2009). Também foi realizada uma amostragem em junho de 2009 para melhor caracterização, pois a mineralização da matéria orgânica no solo ocorre em longo prazo. Assim, as datas de coleta de solo para análise foram descritas como dias de avaliações e não como pastejos: 1 (de 17 a 20 de dezembro de 2008), 21 (de 07 a 10 de janeiro de 2009), 42 (de 28 a 31 de janeiro de 2009), 63 (de 18 a 21 de fevereiro de 2009), 183 (de 18 a 20 de junho de 2009). Foi avaliada a atividade enzimática no solo da desidrogenase, protease, arilsulfatase e celulase. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com três repetições por oferta. Foi realizada a análise de variância e teste de Tukey ao nível de 5% de probabilidade, para comparação de médias, utilizando-se o procedimento o programa estatístico R. As análises foram realizadas de maneira individual para cada cultivar. De modo geral, nas pastagens das três cultivares estudadas, a atividade da desidrogenase foi maior (P<0,05) aos 63 dias e da protease no último dia de avaliação. O decorrer do período experimental implicou em mudanças na atividade da arilsulfatase e da celulase em relação às ofertas de forragem, mas sem um padrão de comportamento definido. As ofertas de forragem mostraram efeito sobre a atividade das enzimas ao longo do período de avaliação, porém sem padrão de comportamento definido, sendo observadas oscilações cíclicas da atividade dessas enzimas. As ofertas de forragem estudadas afetaram a atividade enzimática da desidrogenase, protease, arilsulfatase e...

Soil enzymatic activity reflects the activity microorganisms that decompose the organic matter and release nutrients into the soil that can be used by plants. The objective of this study was to evaluate soil enzymatic activity in Urochloa cultivar pastures managed under forage allowances of 4, 7, 10 and 13 kg dry matter/100 kg body weight. The grazing method adopted was mob-stocking, with four grazing cycles (between December 2008 and February 2009). Soil sampling was performed in June 2009 for better characterization since the mineralization of soil organic matter is a long-term process. Thus, the dates of soil sampling for analysis are reported as evaluation days and not as grazing: 1 (December 17 to 20, 2008), 21 (January 7 to 10, 2009), 42 (January 28 to 31, 2009), 63 (February 18 to 21, 2009), 183 (June 18 to 20, 2009). The soil enzymatic activity of dehydrogenase, protease, arylsulfatase, and cellulase was evaluated. The experimental design was completely randomized, with three replications per forage allowance. Analysis of variance and Tukey’s test at the 5% probability level were applied to compare means using the R statistical program. The analyses were performed individually for each cultivar. Overall, in pastures of the three cultivars studied, dehydrogenase activity was higher (P<0.05) on day 63 and protease on the last day of evaluation. The experimental period implied changes in the activity of arylsulfatase and cellulase according to forage allowance, but without a defined pattern. Forage allowances exerted an effect on the activity of the enzymes throughout the evaluation period, but there was no defined pattern. Cyclic oscillations in the activity of these enzymes were observed. The forage allowances studied affected the soil enzymatic activity of dehydrogenase, protease, arylsulfatase and cellulase in Urochloa pastures of the Marandu, Xaraes and Mulato varieties, but no pattern was found in...

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Multiple sclerosis (MS) is a neurodegenerative autoimmune disease characterized by chronic inflammation and demyelination of the central nervous system. The neuroinflammatory response is a combination of factors such as oxidative stress, activation of cells from the immune system and axonal demyelination. MS is an incurable and disabling disease that affects more than 2.5 million people worldwide and induces motor, cognitive and sensory changes, including persistent chronic pain. Considering the progressive characteristic of MS and the lack of an effective a deeper understanding of this pathology and the discovery of new therapies are necessary. The aldehyde dehydrogenase-2 (ALDH2) is a mitochondrial enzyme responsible for controlling the aldehydic load, such as the 4-hydroxynonenal (4-HNE). The 4-HNE is widely involved in nociception and neurodegeneration by forming adducts with receptors located in the nociceptive neurons or myelin proteins. We previously demonstrated that Alda-1, a small molecule that selectively activates ALDH2, induces analgesia in inflammatory and neuropathic pain models. However, the role role of ALDH2 in the neurodegeneration-induced nociception is unknown. The aim of this project was to evaluate the role of ALDH2 in the hypernociception and the disease progression in a model of experimental autoimune encefalomyielitis (EAE). In orderto achieve this goal, we used two strategies: a) gain of ALDH2 function, by using a pharmacological treatment with Alda-1 and b) loss of function, by using a carrier mutation mice that confers a loss of about 90% in its activity (ALDH2 *2). The long lasting treatment with Alda-1 reduces hypernociception and improves the motor clinical signs. This effect is accompanied by a reduction in the central neuroinflammatory response, since we detected less immunostaining for glial cells (microglia and astrocytes), as well as lower neuronal activation in the dorsal horn of the spinal cord. Although ALDH2*2 do not display worse clinical signs, these animals present higher spinal neuroinflammation and 4-HNE adducts with proteins of the spinal cord and peripheral blood when compared to wild animals. These phenomenons are blocked by Alda-1. Taken together, our results indicate that ALDH2 participates, at least in part, in hypernociception and motor clinical signs in EAE, by controlling neuroinflammation, particularly 4-HNE levels. Alda-1 confers neuroprotection and contributes for the improvement of EAE-induced motor impairment. Therefore, ALDH2 may be a novel therapeutic target for multiple sclerosis.

A esclerose múltipla (EM) é uma doença autoimune neurodegenerativacaracterizada por inflamação crônica e desmielinização do sistema nervoso central. A resposta neuroinflamatória é um conjunto de fatores como estresse oxidativo, ativação de células do sistema imune e desmielinização axonal. A EM é uma doença incurável, incapacitante, que acomete mais de 2,5 milhões de pessoas no mundo e induz alterações motoras, cognitivas e sensoriais, incluindo dor crônica persistente. Considerando a característica progressiva da EM e a falta de uma terapia eficaz, tanto frente à melhora do quadro doloroso como frente à evolução da doença, faz-se necessário um entendimento mais aprofundado dessa patologia assim como a busca de novas terapias. A aldeído desidrogenase-2 é uma enzima mitocondrial responsável pela eliminação de aldeídos reativos produzidos pelo seu metabolismo, como o 4- hidroxinonenal (4-HNE). O 4-HNE é um aldeído amplamente envolvido na nocicepção e neurodegeneração, por formar ligações de alta afinidade com receptores expressos em neurônios nociceptivos ou proteínas que compõem a mielina, alterando a sua função. Demonstramos anteriormente que a Alda-1, uma pequena molécula que ativa seletivamente ALDH2 induz analgesia em modelos de dor inflamatória e neuropática. Contudo, o papel desta enzima no desenvolvimento da dor de origem neurodegenerativa ainda é desconhecido. Assim, o objetivo desse projeto foi avaliar o papel da ALDH2 na hipernocicepção e progressão da encefalomielite autoimune experimental (EAE), um modelo animal que mimetiza a EM. Para tanto, utilizamos duas estratégias: a) ganho de função da ALDH2, por meio do tratamento farmacológicco com a Alda-1 e b) perda de função, utilizando camundongos transgênicosportadores de uma mutação que confere perda de cerca de 90% na sua atividade (ALDH2*2). A progressão doença foi avaliada por meio do desenvolvimento de hipernocicepção, ou seja, diminição do limiar nociceptivo dos animais e o comprometimento motor por meio de escores. Os resultados mostraram que o tratamento prolongado com a Alda-1 reduziu a hipernocicepção e melhorou os sinais clínicos motores induzidos pela doença. Este efeito foi acompanhado de redução na resposta neuroinflamatória central, uma vez que detectamos menor imunomarcação para células da glia (micróglia e astrócitos), bem como menor ativação neuronal no corno posterior da medula espinal, importante região envolvida na nocicepção. Apesar de não apresentarem piora no quadro clínico com relação aos selvagens, os animais ALDH2*2 apresentaram neuroinflamação espinal acentuada e maior formação de mais adutos de 4-HNE com proteínas da medula espinal e do sangue periférico. Esses fenômenos foram bloqueados pela Alda-1. Em conjunto, nossos resultados indicam que a ALDH2 participa, pelo menos em parte, na hipernocicepção e nos sinais clínicos motores na EAE, por controlar a neuroinflamação, particularmente pelo controle dos níveis de 4-HNE, conferindo neuroproteção e contribuindo para a melhora do quadro da EAE. Portanto, a ALDH2 pode ser um novo alvo terapêutico para a esclerose múltipla.

RESUMO

Neuropathie pain control is a chall.enge and unmet clinical need. Aldehyde dehydrogenase-2 (ALOH2) is a mitochondrial enzyme responsible for the metabolism of reactive aldehydes, such as acetaldehydes, 4-hidroxinonenal (4-HNE) and malondialdehyde (MOA). The endogenous generation of reactive aldehydes occurs upon oxidative stress and lipid peroxidation. Our group demonstrated that reactive aldehydes are directly involved with the genesis of acute pain, once that Alda-1, a small molecule that selectively activates the ALOH2 induces analgesia by reducing the levels of these reactive aldehydes in the inflamed tissue. However, the role of this enzyme in neuropathie pain is still unknow. Therefore, the aim of this project was to investigate if the sustained activation of ALOH2 is able to control the development of neuropathie pain in mice. Thus, we used two strategies: (a) ALOH2 loss of function, by using a transgenic mice that carriers an inactivating point mutation in ALOH2 (ALOH2*2) or pharmacological inhibition of ALOH2 (Aldi) and (b) gain of function, by giving Alda-1 to mice. Wild type mice C57/BL were used as control group. Neuropathy was induced by the chronic constriction of the sciatic nerve (CCI). The nociceptive threshold was determined before and during 28 days after surgery, by the von-Frey filaments method. After the nociceptive evaluation, samples of tissues involved in the nociceptive pathway, such as spinal cord, dorsal root ganglia (ORG), sciatic nerve and blood were obtained for the detection of 4-HNE adducts by Western Blot or competitive ELISA assay. MOA was quantified by detection of reactive substances to thiobarbituric acid (TSARS). Our results showed that the CCI reduces the nociceptive threshold (hyperalgesia), both on wild type mice and ALOH2*2, for the entire period of observation (28 days). Alda-1 blocks the hyperalgesia-induced by CCI in the wild type mice. This effect persists for 14 days and is no longer detected on days 21th and 28th. Regarding the ALOH2*2 animals, Alda-1 induces analgesia for 14 days. This effect is partial on 21th and 28th days. The biochemical assays demonstrated that the CCI did not alter the levels of 4-HNE adducts with proteins from the spinal cord, sciatic nerve or ORG. Interestingly, elevation on the levels of 14 these aldehyde were evaluated in serum, 7 days after CCI. The systemic increasing in 4-HNE is accompanied by the elevation of MD.A in the sciatic nerve. These alterations are controlled by the sustained activation of ALDH2 by Alda-1. Alterations of this aldehydes were not detected in ALDH2*2 mice. On the other hand, the inhibition of ALDH2 by Aldi, contributed for the MOA sciatic nerve accumulation in the of operated mice, 28 days afterwards. Together, our data indicates that Alda-1 presents analgesic effect in neuropathie pain models. This effect seems to be due the inhibition of circulating aldehydes and accumulation at the injury site. Thereby, ALDH2 could be a new therapeutic for the neuropathie pain control.

O controle da dor neuropática é um desafio e uma necessidade clínica não atendida. A aldeído-desidrogenase 2 (ALDH2) é uma enzima mitocondrial responsável pelo metabolismo de aldeídos reativos, incluindo o acetaldeído, 4-hidroxinonenal (4-HNE) e malondialdeído (MOA). A geração endógena de aldeídos reativos ocorre sob estresse oxidative e peroxidação lipídica. Nosso grupo demonstrou que aldeídos reativos estão diretamente relacionados com a gênese da dor aguda inflamatória, uma vez que a Alda-1, uma pequena molécula que ativa seletivamente a ALDH2 induz analgesia por reduzir os níveis desses aldeídos no tecido inflamado. No entanto, o papel dessa enzima na dor neuropática é desconhecido. Portanto, o objetivo deste projeto foi investigar se a ativação sustentada da ALDH2 seria capaz de controlar a dor neuropática em camundongos. Para tanto, utilizamos duas estratégias: (a) perda de função da ALDH2, por meio da utilização de camundongos transgênicos portadores de uma mutação que inativa a ALDH2 (ALDH2*2) ou inibição farmacológica da ALDH2 (Aldi) e (b) ganho de função da ALDH2, por meio da administração de Alda-1. Animais selvagens C57/BL foram utilizados como controle. A neuropatia foi induzida pela constrição crônica do nervo isquiático (CCI). O limiar nociceptive foi determinado, antes e por 28 dias após a cirurgia, utilizando o método de filamentos de von Frey. Após a avaliação nociceptiva, amostras de tecidos envolvidos nas vias nociceptivas como a medula espinal, gânglio da raiz dorsal (DRG), nervo isquiático e sangue foram obtidas para detecção de adutos de 4-HNE por Western blot ou ensaio de ELISA competitivo. O MOA foi quantificado por detecção de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). Nossos resultados mostraram que CCI diminuiu o limiar nociceptive (hiperalgesia), tanto nos camundongos selvagens quanto ALDH2*2, por todo o período de observação, ou seja, 28 dias). A Alda-1 bloqueia a hiperalgesia induzida pela CCI nos animais selvagens por 14 dias. Esse efeito não é mais detectado no 21º e 28° dias. Com relação aos animais ALDH2*2, a Alda-1 induz analgesia por 14 dias. Este efeito analgésico é parcial no 21° e 28° dias. Os ensaios bioquímicos demonstraram que a 12 CCI não alterou os níveis de adutos de 4-HNE com proteínas da medula espinhal, nervo isquiático ou DRG. lnteressantemente, detectamos aumento nos níveis deste aldeído no soro de animais, 7 dias após a CCI. A elevação sistêmica de 4-HNE é acompanhada de aumento de MOA no nervo isquiático. A elevação desses aldeídos é controlada pela ativação sustentada da ALDH2 pela Alda-1. Não detectamos alteração significante nos níveis desses aldeídos em animais ALDH2*2. Por outro lado, a inibição da ALDH2 pela Aldi favoreceu o acúmulo de MOA no nervo isquiático de animais operados, 28 dias após a CCI. Em conjunto, nossos resultados indicam que a Alda-1 apresenta efeito analgésico em modelo de neuropatia. Esse efeito parece ser decorrente da inibição de aldeídos circulantes e do seu acúmulo no local da lesão. Assim, a ALDH2 pode ser um novo alvo terapêutico para o controle da dor neuropática.

RESUMO

Neuropathie pain control is a chall.enge and unmet clinical need. Aldehyde dehydrogenase-2 (ALOH2) is a mitochondrial enzyme responsible for the metabolism of reactive aldehydes, such as acetaldehydes, 4-hidroxinonenal (4-HNE) and malondialdehyde (MOA). The endogenous generation of reactive aldehydes occurs upon oxidative stress and lipid peroxidation. Our group demonstrated that reactive aldehydes are directly involved with the genesis of acute pain, once that Alda-1, a small molecule that selectively activates the ALOH2 induces analgesia by reducing the levels of these reactive aldehydes in the inflamed tissue. However, the role of this enzyme in neuropathie pain is still unknow. Therefore, the aim of this project was to investigate if the sustained activation of ALOH2 is able to control the development of neuropathie pain in mice. Thus, we used two strategies: (a) ALOH2 loss of function, by using a transgenic mice that carriers an inactivating point mutation in ALOH2 (ALOH2*2) or pharmacological inhibition of ALOH2 (Aldi) and (b) gain of function, by giving Alda-1 to mice. Wild type mice C57/BL were used as control group. Neuropathy was induced by the chronic constriction of the sciatic nerve (CCI). The nociceptive threshold was determined before and during 28 days after surgery, by the von-Frey filaments method. After the nociceptive evaluation, samples of tissues involved in the nociceptive pathway, such as spinal cord, dorsal root ganglia (ORG), sciatic nerve and blood were obtained for the detection of 4-HNE adducts by Western Blot or competitive ELISA assay. MOA was quantified by detection of reactive substances to thiobarbituric acid (TSARS). Our results showed that the CCI reduces the nociceptive threshold (hyperalgesia), both on wild type mice and ALOH2*2, for the entire period of observation (28 days). Alda-1 blocks the hyperalgesia-induced by CCI in the wild type mice. This effect persists for 14 days and is no longer detected on days 21th and 28th. Regarding the ALOH2*2 animals, Alda-1 induces analgesia for 14 days. This effect is partial on 21th and 28th days. The biochemical assays demonstrated that the CCI did not alter the levels of 4-HNE adducts with proteins from the spinal cord, sciatic nerve or ORG. Interestingly, elevation on the levels of 14 these aldehyde were evaluated in serum, 7 days after CCI. The systemic increasing in 4-HNE is accompanied by the elevation of MD.A in the sciatic nerve. These alterations are controlled by the sustained activation of ALDH2 by Alda-1. Alterations of this aldehydes were not detected in ALDH2*2 mice. On the other hand, the inhibition of ALDH2 by Aldi, contributed for the MOA sciatic nerve accumulation in the of operated mice, 28 days afterwards. Together, our data indicates that Alda-1 presents analgesic effect in neuropathie pain models. This effect seems to be due the inhibition of circulating aldehydes and accumulation at the injury site. Thereby, ALDH2 could be a new therapeutic for the neuropathie pain control.

O controle da dor neuropática é um desafio e uma necessidade clínica não atendida. A aldeído-desidrogenase 2 (ALDH2) é uma enzima mitocondrial responsável pelo metabolismo de aldeídos reativos, incluindo o acetaldeído, 4-hidroxinonenal (4-HNE) e malondialdeído (MOA). A geração endógena de aldeídos reativos ocorre sob estresse oxidative e peroxidação lipídica. Nosso grupo demonstrou que aldeídos reativos estão diretamente relacionados com a gênese da dor aguda inflamatória, uma vez que a Alda-1, uma pequena molécula que ativa seletivamente a ALDH2 induz analgesia por reduzir os níveis desses aldeídos no tecido inflamado. No entanto, o papel dessa enzima na dor neuropática é desconhecido. Portanto, o objetivo deste projeto foi investigar se a ativação sustentada da ALDH2 seria capaz de controlar a dor neuropática em camundongos. Para tanto, utilizamos duas estratégias: (a) perda de função da ALDH2, por meio da utilização de camundongos transgênicos portadores de uma mutação que inativa a ALDH2 (ALDH2*2) ou inibição farmacológica da ALDH2 (Aldi) e (b) ganho de função da ALDH2, por meio da administração de Alda-1. Animais selvagens C57/BL foram utilizados como controle. A neuropatia foi induzida pela constrição crônica do nervo isquiático (CCI). O limiar nociceptive foi determinado, antes e por 28 dias após a cirurgia, utilizando o método de filamentos de von Frey. Após a avaliação nociceptiva, amostras de tecidos envolvidos nas vias nociceptivas como a medula espinal, gânglio da raiz dorsal (DRG), nervo isquiático e sangue foram obtidas para detecção de adutos de 4-HNE por Western blot ou ensaio de ELISA competitivo. O MOA foi quantificado por detecção de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). Nossos resultados mostraram que CCI diminuiu o limiar nociceptive (hiperalgesia), tanto nos camundongos selvagens quanto ALDH2*2, por todo o período de observação, ou seja, 28 dias). A Alda-1 bloqueia a hiperalgesia induzida pela CCI nos animais selvagens por 14 dias. Esse efeito não é mais detectado no 21º e 28° dias. Com relação aos animais ALDH2*2, a Alda-1 induz analgesia por 14 dias. Este efeito analgésico é parcial no 21° e 28° dias. Os ensaios bioquímicos demonstraram que a 12 CCI não alterou os níveis de adutos de 4-HNE com proteínas da medula espinhal, nervo isquiático ou DRG. lnteressantemente, detectamos aumento nos níveis deste aldeído no soro de animais, 7 dias após a CCI. A elevação sistêmica de 4-HNE é acompanhada de aumento de MOA no nervo isquiático. A elevação desses aldeídos é controlada pela ativação sustentada da ALDH2 pela Alda-1. Não detectamos alteração significante nos níveis desses aldeídos em animais ALDH2*2. Por outro lado, a inibição da ALDH2 pela Aldi favoreceu o acúmulo de MOA no nervo isquiático de animais operados, 28 dias após a CCI. Em conjunto, nossos resultados indicam que a Alda-1 apresenta efeito analgésico em modelo de neuropatia. Esse efeito parece ser decorrente da inibição de aldeídos circulantes e do seu acúmulo no local da lesão. Assim, a ALDH2 pode ser um novo alvo terapêutico para o controle da dor neuropática.