RESUMO
Se obtuvo suero antiglobulínico (Coombs) con el empleo de un inóculo consistente en un inmunocomplejo (IC) inmunoglobulina (Ig) humana-antiglobulina humana en carnero, como opsonina para favorecer la respuesta inmune. Se inmunizaron 18 carneros divididos en 3 grupos de 6: el primero y el segundo destinados a producir anti-IgG y anti-C3, respectivamente. Estos, a su vez, subdivididos en subgrupo A: en el que se empleó el método tradicional de obtención de suero de Coombs; y B: en el que se usó el adyuvante completo de Freud en la dosis inicial y el IC en la fase de mantenimiento. Al tercer grupo solo se le administró el IC puro (subgrupo A) y en una dilución 1:200 (subgrupo B). En los carneros de los subgrupos 1B y 2B se obtuvieron títulos más elevados de anti-IgG y anti-C3dg, que en los inmunizados por el método tradicional. La respuesta de anticuerpos en los animales que se inmunizaron con los IC (3A y 3B), fue más rápida y de mayor título que las obtenidas por el método tradicional (1A y 2A) o el método combinado (1B y 2B). La respuesta en el subgrupo 3B fue más prolongada, al parecer por un efecto de dosis(AU)
An antiglobulin serum (Coombs) was obtained using a consistent inoculums in a immunocomplex (IC) the human immunoglobulin (Ig)/human antiglobulin in the seep by example, the opsonin to favor the immune response. Eighteen sheeps were immunized divided into three groups of 6 each: The first and second aimed to produce anti-IgG and anti-C3, respectively. In turn, these were divided into the A subgroup: in which we used the traditional method of Coombs's serum obtaining and B group in which we used the Freud's whole adjuvant in initial dose and the IC in the maintaining phase. Third group received the pure IC (A subgroup) and at a dilution of 1:200 (B subgroup). In sheeps from the 1B and 2B subgroups it was possible to obtain higher titration of anti-IgG and anti-C3dg than those immunized by means of the traditional method. The antibody response in animals immunized with the ICs (3A and 3B) was faster and of higher titration than those obtained by traditional method (1A and 2A) or the combined method (1B and 2B). The response in the 3B subgroup was lengthier apparently by a dose effect(AU)
Assuntos
Animais , Teste de Coombs/métodos , Soros Imunes , Proteínas Opsonizantes/imunologia , Imunoglobulinas , Adjuvante de Freund , Ovinos/sangue , Ovinos/imunologiaRESUMO
Se obtuvo suero antiglobulínico (Coombs) con el empleo de un inóculo consistente en un inmunocomplejo (IC) inmunoglobulina (Ig) humana-antiglobulina humana en carnero, como opsonina para favorecer la respuesta inmune. Se inmunizaron 18 carneros divididos en 3 grupos de 6: el primero y el segundo destinados a producir anti-IgG y anti-C3, respectivamente. Estos, a su vez, subdivididos en subgrupo A: en el que se empleó el método tradicional de obtención de suero de Coombs; y B: en el que se usó el adyuvante completo de Freud en la dosis inicial y el IC en la fase de mantenimiento. Al tercer grupo solo se le administró el IC puro (subgrupo A) y en una dilución 1:200 (subgrupo B). En los carneros de los subgrupos 1B y 2B se obtuvieron títulos más elevados de anti-IgG y anti-C3dg, que en los inmunizados por el método tradicional. La respuesta de anticuerpos en los animales que se inmunizaron con los IC (3A y 3B), fue más rápida y de mayor título que las obtenidas por el método tradicional (1A y 2A) o el método combinado (1B y 2B). La respuesta en el subgrupo 3B fue más prolongada, al parecer por un efecto de dosis
An antiglobulin serum (Coombs) was obtained using a consistent inoculums in a immunocomplex (IC) the human immunoglobulin (Ig)/human antiglobulin in the seep by example, the opsonin to favor the immune response. Eighteen sheeps were immunized divided into three groups of 6 each: The first and second aimed to produce anti-IgG and anti-C3, respectively. In turn, these were divided into the A subgroup: in which we used the traditional method of Coombs's serum obtaining and B group in which we used the Freud's whole adjuvant in initial dose and the IC in the maintaining phase. Third group received the pure IC (A subgroup) and at a dilution of 1:200 (B subgroup). In sheeps from the 1B and 2B subgroups it was possible to obtain higher titration of anti-IgG and anti-C3dg than those immunized by means of the traditional method. The antibody response in animals immunized with the ICs (3A and 3B) was faster and of higher titration than those obtained by traditional method (1A and 2A) or the combined method (1B and 2B). The response in the 3B subgroup was lengthier apparently by a dose effect
Assuntos
Animais , Adjuvante de Freund , Imunoglobulinas , Proteínas Opsonizantes/imunologia , Teste de Coombs/métodos , Soros Imunes , Ovinos/imunologia , Ovinos/sangueRESUMO
En este trabajo se evaluó la aplicación de la solución CM-95 tratada magnéticamente como adyuvante inmunológico, en comparación con el adyuvante de Freund, para la obtención del suero de Coombs en conejos, de gran demanda en bancos de sangre y hospitales, para el diagnóstico clínico de conflictos Rh y la enfermedad hemolítica del recién nacido, entre otras. Conejos Nueva Zelanda Blancos se inocularon por la vía subcutànea con suero humano obtenido de 30 donantes O+, unido con la solución CM-95 tratada magnéticamente como adyuvante inmunológico. Se empleó un esquema de inmunización de 40 días, donde se evaluó la dinàmica en el título de anticuerpos anti IgG humano por la técnica de hemoaglutinación en tubos. Al antisuero se le determinó la calidad inmunológica por el título de heteroaglutininas de los grupos sanguíneos A, B y O, de anticuerpos anticomplemento C3b, C3d y C4b y anti IgG, antes y después de su purificación. El suero de Coombs con la solución adyuvante CM-95 tratada magnéticamente mostró valores similares a los obtenidos con el adyuvante de Freund. En el mismo se cumplió con los requisitos establecidos por el Centro Estatal para el Control de la Calidad de los Medicamentos, según las normativas de la FDA para este diagnosticador. Estos resultados abren nuevas perspectivas para el uso de la solución adyuvante en la obtención del suero de Coombs(AU)
This paper assessed the application of the magnetically treated CM-95 solution as immunological adjuvant compared to Freund adjuvant for the obtainment of Coombs serum in rabbits. Among others, Coombs serum is very demanded in blood banks and hospitals for the clinical diagnosis of Rh conflicts and haemolytic disease of the newborn. New Zealand white rabbits were subcutaneously inoculated with human serum, obtained from 30 donors of O+ blood, together with the magnetically treated CM-95 adjuvant. The immunization schedule was of 40 days and dynamics in the titers of human anti IgG antibodies was assessed by the hemagglutination technique in tubes. The immunological quality of the antiserum was determined by the titers of heteroagglutins from A,B,O blood groups, of anti C3b¸ C3d and C4d and anti IgG, before and after purification. The Coombs serum with the magnetically treated CM-95 adjuvant solution showed values similar to those of Freund adjuvant. In addition, it meets the requirements of CECMED and FDA established for this diagnostic. These results open new perspectives to the use of the adjuvant Solution in the Coombs serum obtainment(AU)