RESUMO
As neoplasias de glândulas salivares são um grupo heterogêneo de lesões que correspondem aproximadamente a 3-6% dos casos de neoplasias de cabeça e pescoço e apresentam características histológicas distintas. A grande variação no padrão histológico das lesões de glândulas salivares tem sido atribuída à presença de células mioepiteliais, que apresentam padrões distintos em cada neoplasia. O objetivo deste trabalho é avaliar a expressão de um painel de proteínas do citoesqueleto, adesão e proliferação celular, sendo elas: actina de músculo liso (AML), calponina, caldesmon, citoceratina 14 (CK14), E-caderina, vimentina, beta-catenina, Ki-67 e p63 em neoplasias malignas das glândulas salivares utilizando a técnica de imunoistoquímica (IHQ). Foram selecionadas retrospectivamente, um total de 15 amostras, sendo 08 amostras de carcinoma ex-adenoma pleomórfico, 04 de carcinoma mioepitelial, 03 de adenocarcinoma de células basais. Os casos foram analisados e os resultados, obtidos através da imumoistoquímica, comparados com os dados demográficos, clínicos e patológicos. A expressão das proteínas foi analisada qualitativamente e semi-quantitativamente, sendo classificada em negativo, positivo focal, positivo difuso ou positivo abundante. A actina de músculo liso (AML) foi observada em dois casos de adenocarcinoma de células basais (ACCB), três de carcinoma mioepitelial (CAME) e três de carcinoma ex-adenoma pleomórfico (CXAP). A calponina foi expressa em dois casos, tanto de ACCB quanto de CAME e em três casos de CXAP. A proteína caldesmon foi observada em dois casos de ACCB, os quatros casos de CAME e sete casos de CXAP. Três casos de ACCB e de CAME e cinco de CXAP apresentaram expressão de CK14. A E-caderina foi observada em todos os casos dos três tipos tumorais, assim como a beta-catenina. A proteína vimentina foi expressa em todos os casos de ACCB e CAME, e predominantemente nos casos de CXAP. Poucos casos, tanto de ACCB, CAME e CXAP apresentaram positividade para Ki-67. A proteína p63 foi observada em todos os casos de ACCB e CAME, sendo pouco expressa em CXAP. A análise de clusterização hierárquica demonstrou a formação de dois clusters, sendo um deles predominantemente composto por CXAP. A comparação da expressão das proteínas com as características demográficas, clínicas e patológicas demonstrou associação entre a perda de expressão das proteínas CK14 e p63 e a ocorrência de metástase. Os resultados sugerem que a expressão das proteínas beta-catenina, E-caderina, caldesmon e vimentina apresentou-se de forma muito similar, sugerindo um perfil equivalente de expressão entre essas neoplasias derivadas do ducto intercalar. Já a ausência de expressão de AML e calponina parece estar associada à separação dos grupos na análise de clusterização, sugerindo que deve ser considerada como um fator na diferenciação tumoral.
Salivary gland neoplasms are a heterogeneous group of lesions that account for approximately 3-6% of head and neck tumors, with distinct histological characteristics. The variation in the histological pattern of salivary gland lesions has been attributed to the presence of myoepithelial cells, that present different patterns in each neoplasm. The aim of the study was to evaluate the expression of a panel of cytoskeletal, cell adhesion and cell proliferation proteins, namely: smooth muscle actin (SMA), calponin, caldesmon, cytokeratin 14 (CK14), E-cadherin, vimentin, beta- catenin, Ki-67 and p63 in salivary glands malignant neoplasms, using immunohistochemical technique (IHC). Fifteen samples werer etrospectively selected, being 08 carcinoma ex-pleomorphic adenoma samples, 04 myoepithelial carcinoma samples, 03 basal cell adenocarcinoma samples. The immunohistochemical results were analyzed and compared with demographic, clinical and pathological data. Protein expression were qualitatively and semi-quantitatively analyzed and classified as negative and positive (focal, diffuse, or abundant). Smooth muscle actin (SMA) was observed in two cases of basal cell adenocarcinoma (BCAC), three cases of myoepithelial carcinoma (MECA) and three cases of carcinoma ex-pleomorphic adenocarcinoma (CXPA). Calponin was expressed in two cases of BCAC, two cases of MECA, and three cases of CXPA. Caldesmon protein was observed in two cases of BCAC, four cases of MECA and seven cases of CXPA. Three cases of BCAC and MECA and five of CXPA presented CK14 expression. E-cadherin was observed in all cases of the three tumor types, as well as beta-catenin. Vimentin protein was expressed in all BCAC and MECA cases, and predominantly in CXPA cases. Few cases of BCAC, MECA and CXPA were positive for Ki-67. p63 protein was observed in all cases of BCAC and MECA, and present low expression in CXPA. The hierarchical clustering analysis demonstrated the formation of two clusters, one of them being predominantly composed of CXPA. Protein expression comparison with demographic, clinical and pathological characteristics demonstrated an association between loss of expression of CK14 and p63 proteins and the occurrence of metastasis. The results suggest that the expression of beta-catenin, E-cadherin, caldesmon and vimentin proteins was very similar, suggesting an equivalent expression profile among these neoplasms derived from the intercalated duct of the salivary gland. The absence of SMA and calponin expression seems to be associated with the separation of groups in the clustering analysis, suggesting that it should be considered as a factor in tumor differentiation
Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Idoso , Neoplasias das Glândulas Salivares/diagnóstico , Adenocarcinoma , Adenoma Pleomorfo , Vimentina , Proteínas de Ligação a Calmodulina , Carcinoma , Caderinas , Actinas , Antígeno Ki-67 , beta Catenina , QueratinasRESUMO
Introdução: O carcinoma ductal in situ de mama, apesar de consistir em doença inicial e de bom prognóstico, tem na terapêutica a mesma agressividade utilizada em tumores invasivos. O tratamento geralmente é multimodal, trazendo impacto às pacientes. O presente estudo tem por objetivo avaliar características morfológicas e marcadores imuno-histoquímicos do carcinoma ductal in situ de mama, correlacionando-os com evolução e prognóstico dos pacientes. Método: Foram revisados 565 prontuários de pacientes com CDIS tratados no A.C.Camargo Cancer Center, no período de 2000 a 2008. Destes, selecionamos 12 casos de CDIS recidivados ou novos carcinomas ductais de mama, pareados com 24 controles. Realizamos avaliação de variáveis epidemiológicas e morfológicas tradicionais, além da análise imuno-histoquímica para marcadores de metaloproteinases (MMP 1, MMP 2 e MMP9) e marcadores de células mioepiteliais (CD 10, AML, P63, Calponina, CK 5/6), com objetivo de correlacioná-los com recorrência da doença. Resultados: Observamos a seguinte distribuição de variáveis imuno-histoquímicas nos 12 casos estudados: P63 2 negativos, 9 positivos focais, 0 positivos contínuos e 1 indeterminado; CK 5/6 3 negativos, 9 positivos focais, 0 positivos contínuos, CD10 2 negativos, 8 positivos focais e 2 positivos contínuos, AML 3 negativos, 3 positivos fracos, 3 positivos intermediários, 2 positivos fortes e 1 indeterminado, MMP1 0 negativos, 4 positivos fracos, 7 positivos intermediários e 1 positivo forte, MMP2 4 negativos, 7 positivos fracos, 1 positivo intermediário e 0 positivos fortes, MMP9 0 negativos, 7 positivos fracos, 4 positivos intermediários e 1 positivo forte. Não houve correlação estatisticamente significativa entre as variáveis estudadas com recorrência local ou novos eventos de câncer de mama. Conclusão: Os índices de recidiva nas pacientes com diagnóstico de CDIS no A.C.Camargo Cancer Center são baixos (5,98%), observando-se seguimento mínimo de 60 meses. Não foram identificados fatores clinico-patológicos associados com as recidivas locais de CDIS ou outros eventos de câncer de mama. A expressão de metaloproteinases e marcadores de CME no microambiente tumoral dos CDIS de mama não apresentou correlação estatisticamente significativa com índices de recorrência local e novos eventos de câncer de mama.
Introduction: Ductal carcinoma (DCIS) of the breast has historically been treated as aggressively as invasive breast cancer, despite its good prognosis. Treatment is multimodal, which impacts the physical, psychological and social aspects of the patient. To date, there is no prognostic factor able to advocate for less morbid treatment in DCIS. The present study aims to assess the prognostic value of different markers for DCIS. Methods: We revised 565 medical records of DCIS patients treated at A.C.Ca margo Cancer Center, from 2000 to 2008. We located 12 patients with local recurrence or other cancer events and paired them with 24 controls, according to age, nuclear grade, follow up duration, treatment type and prophylactic hormone therapy. The immunohistochemical staining targeted metalloproteinases (MMP 1, MMP 2 and MMP) and myoepithelial cell markers (CD 10, AML, P63, Calponin, CK 5/6). Results: We observed the following immunohistochemical distribution in our cases: P63 2 negative, 9 focal positive, 0 continuous positive and 1 indefinite; CK 5/6 3 negative, 9 focal positive and 0 continuous positive, CD10 2 negative, 8 focal positive and 2 continuous positive, AML 3 negative, 3 weak positive, 3 intermediate positive, 2 strong positive and 01 indefinite, MMP1 0 negative, 4 weak positive, 7 intermediate positive and 1 strong positive, MMP2 4 negative, 7 weak positive, 1 intermediate positive and 0 strong positive, MMP9 0 negative, 7 weak positive, 4 1 intermediate positive and 1 strong positive There was no statistically significant correlation between the immunohistochemical staining and local recurrence or new breast cancer events. Conclusion: The recurrence rates at A.C.Camargo Cancer Center are lower than literature results (5,98%, follow up 60 months). There were no identifiable clinicopathological factors related to local recurrence. The metalloproteinases and myoepithelial cell markers expression was not correlated with local recurrence or new breast cancer events.
Assuntos
Humanos , Feminino , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Idoso , Idoso de 80 Anos ou mais , Neoplasias da Mama , Mama , Carcinoma DuctalRESUMO
Introdução: O carcinoma ductal in situ de mama, apesar de consistir em doençainicial e de bom prognóstico, tem na terapêutica a mesma agressividade utilizada em tumores invasivos. O tratamento geralmente é multimodal, trazendo impacto às pacientes. O presente estudo tem por objetivo avaliar características morfológicas e marcadores imuno-histoquímicos do carcinoma ductal in situ de mama, correlacionando-os com evolução e prognóstico dos pacientes. Método: Foram revisados 565 prontuários de pacientes com CDIS tratados no A.C.Camargo Cancer Center, no período de 2000 a 2008. Destes, selecionamos 12 casos de CDIS recidivados ou novos carcinomas ductais de mama, pareados com 24 controles. Realizamos avaliação de variáveis epidemiológicas e morfológicas tradicionais, além da análise imuno-histoquímica para marcadores de metaloproteinases (MMP 1, MMP 2 e MMP9) e marcadores de células mioepiteliais (CD 10, AML, P63, Calponina, CK 5/6), com objetivo de correlacioná-los com recorrência da doença. Resultados: Observamos a seguinte distribuição de variáveis imuno-histoquímicas nos 12 casos estudados: P63 2 negativos, 9 positivos focais, 0 positivos contínuos e 1 indeterminado; CK 5/6 3 negativos, 9 positivos focais, 0 positivos contínuos, CD10 2 negativos, 8 positivos focais e 2 positivos contínuos, AML 3 negativos, 3 positivos fracos, 3 positivos intermediários, 2 positivos fortes e 1 indeterminado, MMP1 0negativos, 4 positivos fracos, 7 positivos intermediários e 1 positivo forte, MMP2 4negativos, 7 positivos fracos, 1 positivo intermediário e 0 positivos fortes, MMP9 0negativos, 7 positivos fracos, 4 positivos intermediários e 1 positivo forte. Não houve correlação estatisticamente significativa entre as variáveis estudadas com recorrência local ou novos eventos de câncer de mama. Conclusão: Os índices de recidiva nas pacientes com diagnóstico de CDIS no A.C.Camargo Cancer Center são baixos (5,98%), observando-se seguimento mínimo de 60 meses...
Introduction: Ductal carcinoma (DCIS) of the breast has historically been treatedas aggressively as invasive breast cancer, despite its good prognosis. Treatment ismultimodal, which impacts the physical, psychological and social aspects of thepatient. To date, there is no prognostic factor able to advocate for less morbidtreatment in DCIS. The present study aims to assess the prognostic value of differentmarkers for DCIS. Methods: We revised 565 medical records of DCIS patientstreated at A.C.Camargo Cancer Center, from 2000 to 2008. We located 12 patients with local recurrence or other cancer events and paired them with 24 controls, according to age, nuclear grade, follow up duration, treatment type and prophylactic hormone therapy. The immunohistochemical staining targeted metalloproteinases (MMP 1, MMP 2 and MMP) and myoepithelial cell markers (CD 10, AML, P63, Calponin, CK 5/6). Results: We observed the following immunohistochemical distribution in our cases: P63 2 negative, 9 focal positive, 0 continuous positive and 1 indefinite; CK 5/6 3 negative, 9 focal positive and 0 continuous positive, CD10 2 negative, 8 focal positive and 2 continuous positive, AML 3 negative, 3 weak positive, 3 intermediate positive, 2 strong positive and 01 indefinite, MMP1 0 negative, 4 weak positive, 7 intermediate positive and 1 strong positive, MMP2 4 negative, 7 weak positive, 1 intermediate positive and 0 strong positive, MMP9 0 negative, 7 weak positive, 4 1 intermediate positive and 1 strong positive There was no statistically significant correlation between the immunohistochemical staining and local recurrence or new breast cancer events. Conclusion: The recurrence rates at A.C.Camargo Cancer Center are lower than literature results (5,98%, follow up 60 months). There were no identifiable clinicopathological factor related to local recurrence...
Assuntos
Carcinoma Ductal de Mama , Matriz Extracelular , MetaloproteasesRESUMO
As células do microambiente tumoral apresentam papel fundamental no processo de invasão. Muitos estudos têm demonstrado, em tumores de mama, que as células mioepiteliais normais exercem efeitos parácrinos de supressão tumoral no epitélio glandular. As células mioepiteliais neoplásicas de tumores de glândula salivar também parecem atuar como supressoras naturais de tumor devido a algumas características, tais como expressão de altos níveis de inibidores de proteases. Desta maneira, o objetivo deste trabalho foi avaliar in vitro a influência das células mioepiteliais neoplásicas benignas de glândula salivar na invasão de células malignas. Para isso, células de melanoma (M2, ATCC) foram plaqueadas no compartimento superior das câmaras transwell com membrana de polietileno terefelato, com poros de 8µm de diâmetro, recoberto com Matrigel (BD). Após a aderência celular (4h), meio condicionado de células mioepiteliais provenientes de três adenomas pleomórficos de glândula salivar (AP3, AP4 e AP8) foi colocado no compartimento superior e meio DMEM (Sigma) no inferior do transwell. Após 48h, as células foram coradas em HE e o potencial de invasão e o número absoluto de células invadidas foram calculados em 1/3 da área da membrana (25 campos aleatórios, objetiva 20x), por meio de fotomicrografias em microscópio de luz. A análise de variância foi realizada aplicando o teste estatístico ANOVA seguido pelo teste de Tukey. Os resultados mostraram que a presença do meio condicionado de células mioepiteliais teve caráter supressor na invasão das células do melanoma. O índice de invasão foi estatisticamente significante no grupo AP8 (p<0,05) e os números absolutos de células invadidas, nos grupos AP3 e AP8 (p<0,05) quando comparados ao grupo controle. Desta maneira, pode-se concluir que, neste modelo de estudo, as células mioepiteliais neoplásicas benignas apresentaram efeito supressor na invasão das células do melanoma
Cells in the tumoral microenvironment have an important role in the invasion process. Many studies have shown, in breast tumors, that normal myoepithelial cells have paracrine effects as a tumor suppressor factor in the glandular epithelium. Myoepithelial cells from neoplastic salivary gland tumors also appear to act as natural suppressor tumor due to many characteristics, such as high levels expression of protease inhibitors. The aim of this study was an in vitro evaluation of the influence of neoplastic benign myoepithelial cells from salivary gland on the invasion of malignant cells. For this, melanoma cells (M2, ATCC) were plated on the upper compartment of transwell chambers with polyethylene terephthalate membrane with pore size diameter of 8 μm, coated with Matrigel (BD). After cell adherence (4 h), conditioned medium of myoepithelial cells from three salivary gland pleomorphic adenomas (AP3, AP4 and AP8) was added in the upper chamber and DMEM medium (Sigma) under the transwell. After 48 h, cells were stained with HE and the invasion potential and the absolute number of invaded cells were calculated in 1/3 part of the membrane area (25 random area, 20x objective), through photomicrographs by light microscopy. The analysis of variance was performed by ANOVA test followed by Tukey. The results showed that the conditioned medium of myoepithelial cells had a suppressor role in the melanoma cell invasion. The invasion potential was statistically significant in AP8 group (p <0.05) and also the absolute numbers of invaded cells in AP3 and AP8 groups (p <0.05) when compared with the control group. It can be concluded that in this model study, neoplastic benign myoepithelial cells showed suppressive effect on melanoma cells invasion