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The DNA mismatch repair (MMR) is a postreplicative system that guarantees genomic stability by correcting mispaired and unpaired nucleotides. In eukaryotic nuclei, MMR is initiated by the binding of heterodimeric MutS homologue (MSH) complexes to the DNA error or lesion. Among these proteins, MSH2-MSH6 is the most abundant heterodimer. Even though the MMR mechanism and proteins are highly conserved throughout evolution, physiological differences between species can lead to different regulatory features. Here, we investigated how light, sugar, and/or hormones modulate Arabidopsis thaliana MSH6 expression pattern. We first characterized the promoter region of MSH6. Phylogenetic shadowing revealed three highly conserved regions. These regions were analyzed by the generation of deletion constructs of the MSH6 full-length promoter fused to the ß-glucuronidase (GUS) gene. Combined, our in silico and genetic analyses revealed that a 121-bp promoter fragment was necessary for MSH6 expression and contained potential cis-acting elements involved in light- and hormone-responsive gene expression. Accordingly, light exposure or sugar treatment of four-day old A. thaliana seedlings triggered an upregulation of MSH6 in shoot and root apical meristems. Appropriately, MSH6 was also induced by the stem cell inducer WUSCHEL. Further, the stimulatory effect of light was dependent on the presence of phyA. In addition, treatment of seedlings with auxin or cytokinin also caused an upregulation of MSH6 under darkness. Consistent with auxin signals, MSH6 expression was suppressed in the GATA23 RNAi line compared with the wild type. Our results provide evidence that endogenous factors and environmental signals controlling plant growth and development regulate the MSH6 protein in A. thaliana.

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Effective protocols for in vitro rooting for woody fruit trees are still a challenge for in vitro seedling production, especially when there is a need to insert new cultivars or rootstocks. These protocols are essential to accelerate studies in plant breeding programs and for seedling distribution. This study evaluated the use of 6-Benzylaminopurine (IBA) in in vitro rooting of Pyruscomunnis rootstocks, clones 'OHxF87' and Pyrodwarf. Explant exposure times (0, 24, 48, 72, and 96 hours) to 20 mg L-1 IBA were tested for in vitro rooting. The exposure to IBA resulted in rooting rates above 80%, surpassing some results reported in the literature. The 24-hour treatment provided 81,81% survival, leading to an average growth of five roots with 19 mm length, for 'OHxF87' rootstock. The same exposure time resulted in the highest survival rate (75%) and the highest mean root number, seven roots per plant with 10 mm length, for 'PDW' rootstock. Root formation did not occur in the absence of synthetic auxin. Therefore, it can be concluded that a 24-hour exposure at 20 mg L-1 IBA was sufficient to promote in vitro rooting in 'OHxF87' and Pyrodwarf rootstocks'.

Protocolos eficazes de enraizamento in vitro de frutíferas lenhosas ainda são um desafio para produção de mudas in vitro, especialmente quando há necessidade de inserção de novas cultivares ou porta-enxerto. Esses protocolos são essenciais para acelerar estudos nos programas de melhoramento genético e também para distribuição posterior das mudas. Nesse sentido, o objetivo deste estudo foi avaliar a utilização da 6-Benzilaminopurina no enraizamento in vitro de porta-enxerto Pirus comunnis, clones 'OHxF87' e Pyrodwarf. Para o enraizamento, foi testado o tempo de exposição dos explantes ao AIB. Para tanto, foram utilizados 20 mg L-1 do fitohormônio nas horas 0, 24, 48, 72 e 96 horas. A exposição ao AIB resultou em taxas de enraizamento acima de 80%, superando alguns resultados encontrados na literatura. Para o porta-enxerto 'OHxF87', o tratamento de 24 horas proporcionou 81,81% de sobrevivência, promovendo em média cinco raízes com comprimento de 19 mm. O mesmo tratamento para o porta-enxerto 'PDW' resultou na maior taxa de sobrevivência (75%), bem como no maior número médio de raízes, sete raízes por planta, com comprimento de 10 mm. Na ausência de auxina sintética, a formação de raízes não ocorreu. Assim sendo, podemos concluir que o tempo de exposição de 24 horas a 20 mg L-1 de IBA foi suficiente para promover o enraizamento de porta-enxertos Pyrus communis de 'OHxF87' e 'PDW'.

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Emerging infectious diseases have become a major global problem with public health and economic consequences. It is an urgent need to develop new anti-infective therapies. The natural diterpene carnosol exhibit a wide variety of interesting antibacterial and antiviral properties, and it is considered a theoretical inhibitor of COVID-19 Mpro. However, this compound is present in the family Lamiaceae in low quantities. To obtain carnosol in concentrations high enough to develop pharmacological studies, we evaluated the efficiency of a micropropagation protocol of Rosmarinus officinalis using a solid medium and a temporary immersion system (TIS), as well as the effect of 6-benzylaminopurine (6-BAP) and α-naphthaleneacetic acid (NAA) on the growth of shoots. Moreover, we developed and validated an analytical method to quantify carnosol using the H-point standard additions method in the high-performance liquid chromatography diode array detector (HPLC-DAD). After 30 days of culture, TIS produced the maximum number of shoots per explant (24.33 ± 1.15) on a liquid medium supplemented with 6-BAP at 5.0 mg L-1. Next, we also evaluated the effect of immersion time and frequency for TIS. After 72 days of culture, the best results were obtained with an immersion cycle of 1 min every 12 h, yielding 170.33 ± 29.40 shoots. The quantification of carnosol on the samples was performed at a flow rate of 1.2 mL min-1 using binary isocratic mobile phase system 60:40 (v/v) 10 mM formic acid (pH 3.0) (A) and acetonitrile (B) on a reverse-phase column. The content of carnosol in the in vitro cultures was around 8-fold higher than in the wild plant. The present study represents an efficient alternative method to obtain carnosol for its pre-clinical and clinical development.

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The objective of this study was to promote the establishment of an in vitro culture of Brassavola tuberculata, testing different concentrations of naphthalene acetic acid (NAA) and 6-benzylaminopurine (BAP) on multiplication and rooting, evaluating different substrates during acclimatization, as well as the effect of in vitro treatments. After germination, the seedlings of B. tuberculata were subjected to culture on MS medium supplemented with different concentrations of NAA and BAP, and multiplication and rooting were assessed. During acclimatization, different substrates were tested: S1, Plantmax® and vermiculite (1: 1); S2, Plantmax® and grit (1: 1); and S3, dust fern. Also the effect of the in vitro culture treatments was evaluated: T1, control; T5, (2.5 µM NAA +5 µM BAP); and T7, (5 µM NAA + 0 µM BAP). The favorable balance of cytokinins promoted by treatment T5 yielded the largest number of shoots and leaves in B. tuberculata. The greatest length of leaves and roots, and highest root number were observed in the treatment T7, favored by the presence of auxin. This treatment had a positive effect with respect to plant acclimatization: T7 associated with substrate S1 provided the most suitable conditions for acclimatization of seedlings of B. tuberculata, providing greater number and length of leaves, and high survival rate.

Objetivou-se, com este trabalho, promover o estabelecimento do cultivo in vitro de Brassavola tuberculata, testando diferentes concentrações de ANA e BAP na multiplicação e no enraizamento, e avaliar diferentes substratos e o efeito dos tratamentos de cultivo in vitro na aclimatização. Após a germinação das sementes, as plântulas de B. tuberculata foram submetidas ao cultivo em meio MS suplementado com diferentes concentrações de ácido naftaleno acético (ANA) e 6-benzilaminopurina (BAP), sendo avaliados a multiplicação e o enraizamento. Foram testados diferentes substratos: S1 (Plantmax e vermiculita (1:1)); S2 (Plantmax e areia (1:1)) e S3 (pó de xaxim) na aclimatização e, posteriormente, o efeito dos tratamentos do cultivo in vitro: T1 (controle), T5 (2,5 ANA + 5 BAP) e T7 (5 ANA + 0 BAP), na aclimatização. O balanço favorável às citocininas promovido pelo tratamento T5 (2,5 µM ANA + 5 µM BAP) promoveu maior número de brotos e de folhas em B. tuberculata. O maior comprimento das folhas, das raízes e maior número de raízes foi observado no tratamento T7 (5 µM ANA e 0 µM BAP), favorável a auxina. Este tratamento apresentou efeito positivo com relação a aclimatização das plantas: T7 associado ao substrato S1, Plantmax e vermiculita (1:1) proporcionou melhores condições para a aclimatização das plântulas de B. tuberculata, propiciando maior número e comprimento das folhas, e elevada taxa de sobrevivência.

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Micropropagation of Calophyllum brasiliense Cambess. (Clusiaceae) is a way to overcome difficulties in achieving large-scale plant production, given the recalcitrant nature of the seeds, irregular fructification and absence of natural vegetative propagation of the species. Cultures were established using nodal segments 2 cm in length, obtained from 1-2 year old seedlings, maintained in a greenhouse. Mercury chloride and Plant Preservative Mixture were used in the surface sterilizing stage, better results being achieved with Plant Preservative Mixture incorporation in culture medium, at any concentration. Polyvinylpyrrolidone, activated charcoal, cysteine, ascorbic acid or citric acid were added to the culture medium to avoid oxidation. After 30 days of culture, polyvinylpirrolidone and ascorbic acid gave better results, eliminating oxidation in most explants. For shoot multiplication, benzylaminopurine was used in concentrations of 4.4 and 8.8 µM in Woody Plant Medium, resulting in an average of 4.43 and 4.68 shoots per explant, respectively, after 90 days. Indole-3-butyric acid and -naphthalene acetic acid were used to induce root formation, reaching a maximum rooting rate of 24% with 20µM -naphthalene acetic acid. For acclimatization. the rooted plants were transferred to Plantmax® substrate and cultured in a greenhouse, reaching 79% of survival after 30 days and 60% after one year.(AU)

A micropropagação de Calophyllum brasiliense Cambess. (Clusiaceae) é uma maneira de superar dificuldades para sua produção em larga escala, devido à natureza recalcitrante das sementes, frutificação irregular e ausência de propagação vegetativa natural da espécie. Culturas foram estabelecidas utilizando segmentos nodais com 2 cm de comprimento, obtidos de plantas com 1 a 2 anos de idade, mantidas em casa de vegetação. Cloreto de mercúrio e Plant Preservative Mixture foram utilizados durante a etapa de desinfestação, com melhores resultados alcançados com a incorporação de Plant Preservative Mixture ao meio de cultura. Polivinilpirrolidona, carvão ativado, cisteína, ácido ascórbico ou ácido cítrico foram adicionados ao meio de cultura para evitar a oxidação dos explantes. Após 30 dias de cultivo, o uso de polivinilpirrolidona ou ácido ascórbico proporcionou melhores resultados, eliminando a oxidação na maioria dos explantes. Para multiplicação das brotações, benzilaminopurina foi usada em concentrações de 4.4 e 8.8 µM em meio WPM, resultando em uma média de 4.43 e 4.68 brotações por explante, respectivamente, após 90 dias. Ácido indol-3-butírico e ácido -naftaleno acético foram usados para a indução de raízes, alcançando um enraizamento máximo de 24% com o uso de 20µM de ácido -naftaleno acético. As plantas enraizadas foram transferidas para substrato Plantmax® e cultivadas em casa de vegetação, alcançando 79% de sobrevivência após 30 dias e 60% após um ano.(AU)

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Abstract Micropropagation of Calophyllum brasiliense Cambess. (Clusiaceae) is a way to overcome difficulties in achieving large-scale plant production, given the recalcitrant nature of the seeds, irregular fructification and absence of natural vegetative propagation of the species. Cultures were established using nodal segments 2 cm in length, obtained from 1-2 year old seedlings, maintained in a greenhouse. Mercury chloride and Plant Preservative Mixture™ were used in the surface sterilizing stage, better results being achieved with Plant Preservative Mixture™ incorporation in culture medium, at any concentration. Polyvinylpyrrolidone, activated charcoal, cysteine, ascorbic acid or citric acid were added to the culture medium to avoid oxidation. After 30 days of culture, polyvinylpirrolidone and ascorbic acid gave better results, eliminating oxidation in most explants. For shoot multiplication, benzylaminopurine was used in concentrations of 4.4 and 8.8 µM in Woody Plant Medium, resulting in an average of 4.43 and 4.68 shoots per explant, respectively, after 90 days. Indole-3-butyric acid and α-naphthalene acetic acid were used to induce root formation, reaching a maximum rooting rate of 24% with 20µM α-naphthalene acetic acid. For acclimatization. the rooted plants were transferred to Plantmax® substrate and cultured in a greenhouse, reaching 79% of survival after 30 days and 60% after one year.

Resumo A micropropagação de Calophyllum brasiliense Cambess. (Clusiaceae) é uma maneira de superar dificuldades para sua produção em larga escala, devido à natureza recalcitrante das sementes, frutificação irregular e ausência de propagação vegetativa natural da espécie. Culturas foram estabelecidas utilizando segmentos nodais com 2 cm de comprimento, obtidos de plantas com 1 a 2 anos de idade, mantidas em casa de vegetação. Cloreto de mercúrio e Plant Preservative Mixture™ foram utilizados durante a etapa de desinfestação, com melhores resultados alcançados com a incorporação de Plant Preservative Mixture™ ao meio de cultura. Polivinilpirrolidona, carvão ativado, cisteína, ácido ascórbico ou ácido cítrico foram adicionados ao meio de cultura para evitar a oxidação dos explantes. Após 30 dias de cultivo, o uso de polivinilpirrolidona ou ácido ascórbico proporcionou melhores resultados, eliminando a oxidação na maioria dos explantes. Para multiplicação das brotações, benzilaminopurina foi usada em concentrações de 4.4 e 8.8 µM em meio WPM, resultando em uma média de 4.43 e 4.68 brotações por explante, respectivamente, após 90 dias. Ácido indol-3-butírico e ácido α-naftaleno acético foram usados para a indução de raízes, alcançando um enraizamento máximo de 24% com o uso de 20µM de ácido α-naftaleno acético. As plantas enraizadas foram transferidas para substrato Plantmax® e cultivadas em casa de vegetação, alcançando 79% de sobrevivência após 30 dias e 60% após um ano.

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One main obstacle to the development and expansion of pear tree cultivation in Brazil has been the lack of cultivars adapted to the edaphoclimatic conditions of regions with the potential for pear production. Intending to overcome this hindrance, Embrapa Clima Temperado (Embrapa Temperate Climate) developed and released the cultivar Cascatense, with a low cold requirement (~400 h) better suited for Rio Grande do Sul`s and Santa Catarina`s climate. Still, seedlings of high genetic and sanitary quality are necessary for the establishment of a high-yield orchard. Plants with both sanitary quality and uniformity can be obtained through in vitro micropropagation. Thus, the present study aimed to assess the influence of different culture media (MS, MS¾, WPM, QL, and Himédia), concentrations of sucrose (0, 15, 30, 45, and 60 g L-1), and concentrations of benzylaminopurine (BAP) (0, 0.4, 0.8, 1.2, and 1.6 mg L-1) upon the in vitro multiplication of cultivar Cascatense, to establish an efficient protocol to enhance its propagation and reproducibility. The study included three sequential experiments in which the number of shoots per explant, the length of shoots, the number of axillary buds per shoot, fresh mass, and dry mass of shoots were evaluated. Cultivar Cascatense can be best propagated in vitro with the use of Himédia medium, supplemented with 0.8 mg L-1 of BAP and 30 g L-1 of sucrose.(AU)

Um dos principais entraves ao desenvolvimento e expansão da cultura da pereira no Brasil tem sido a falta de cultivares adaptadas às condições edafoclimáticas das regiões potencialmente produtoras. Visando sanar esta dificuldade, a Embrapa Clima Temperado desenvolveu e lançou a cv. Cascatense, com baixa exigência em frio (~400 h), mais adequada ao clima do Rio Grande do Sul e de Santa Catarina. No entanto, mudas com alta qualidade genética e sanitária são necessárias para garantir a boa formação de um pomar produtivo. Plantas com qualidade sanitária e uniformidade podem ser obtidas através da micropropagação in vitro. Assim, o presente trabalho teve como objetivo verificar a influência de diferentes meios de cultivo (MS, MS¾, WPM, QL e Himédia), concentrações de sacarose (0, 15, 30, 45 e 60 g L-1) e benzilaminopurina BAP (0; 0,4; 0,8; 1,2 e 1,6 mg L-1) na multiplicação in vitro da cv. Cascatense, visando obter um protocolo eficiente para potencializar sua propagação e reprodutibilidade. Os estudos foram conduzidos em três experimentos sequenciais, nos quais foram avaliados o número de brotações por explante, o comprimento das brotações, o número de gemas axilares por brotação, massa fresca e massa seca das brotações. A cv. Cascatense pode ser propagada in vitro com a utilização do meio Himédia suplementado com 0,8 mg L-1 de BAP e 30 g L-1 de sacarose.(AU)

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One main obstacle to the development and expansion of pear tree cultivation in Brazil has been the lack of cultivars adapted to the edaphoclimatic conditions of regions with the potential for pear production. Intending to overcome this hindrance, Embrapa Clima Temperado (Embrapa Temperate Climate) developed and released the cultivar Cascatense, with a low cold requirement (~400 h) better suited for Rio Grande do Sul`s and Santa Catarina`s climate. Still, seedlings of high genetic and sanitary quality are necessary for the establishment of a high-yield orchard. Plants with both sanitary quality and uniformity can be obtained through in vitro micropropagation. Thus, the present study aimed to assess the influence of different culture media (MS, MS¾, WPM, QL, and Himédia), concentrations of sucrose (0, 15, 30, 45, and 60 g L-1), and concentrations of benzylaminopurine (BAP) (0, 0.4, 0.8, 1.2, and 1.6 mg L-1) upon the in vitro multiplication of cultivar Cascatense, to establish an efficient protocol to enhance its propagation and reproducibility. The study included three sequential experiments in which the number of shoots per explant, the length of shoots, the number of axillary buds per shoot, fresh mass, and dry mass of shoots were evaluated. Cultivar Cascatense can be best propagated in vitro with the use of Himédia medium, supplemented with 0.8 mg L-1 of BAP and 30 g L-1 of sucrose.

Um dos principais entraves ao desenvolvimento e expansão da cultura da pereira no Brasil tem sido a falta de cultivares adaptadas às condições edafoclimáticas das regiões potencialmente produtoras. Visando sanar esta dificuldade, a Embrapa Clima Temperado desenvolveu e lançou a cv. Cascatense, com baixa exigência em frio (~400 h), mais adequada ao clima do Rio Grande do Sul e de Santa Catarina. No entanto, mudas com alta qualidade genética e sanitária são necessárias para garantir a boa formação de um pomar produtivo. Plantas com qualidade sanitária e uniformidade podem ser obtidas através da micropropagação in vitro. Assim, o presente trabalho teve como objetivo verificar a influência de diferentes meios de cultivo (MS, MS¾, WPM, QL e Himédia), concentrações de sacarose (0, 15, 30, 45 e 60 g L-1) e benzilaminopurina – BAP (0; 0,4; 0,8; 1,2 e 1,6 mg L-1) na multiplicação in vitro da cv. Cascatense, visando obter um protocolo eficiente para potencializar sua propagação e reprodutibilidade. Os estudos foram conduzidos em três experimentos sequenciais, nos quais foram avaliados o número de brotações por explante, o comprimento das brotações, o número de gemas axilares por brotação, massa fresca e massa seca das brotações. A cv. Cascatense pode ser propagada in vitro com a utilização do meio Himédia suplementado com 0,8 mg L-1 de BAP e 30 g L-1 de sacarose.

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Abstract Micropropagation of Calophyllum brasiliense Cambess. (Clusiaceae) is a way to overcome difficulties in achieving large-scale plant production, given the recalcitrant nature of the seeds, irregular fructification and absence of natural vegetative propagation of the species. Cultures were established using nodal segments 2 cm in length, obtained from 1-2 year old seedlings, maintained in a greenhouse. Mercury chloride and Plant Preservative Mixture were used in the surface sterilizing stage, better results being achieved with Plant Preservative Mixture incorporation in culture medium, at any concentration. Polyvinylpyrrolidone, activated charcoal, cysteine, ascorbic acid or citric acid were added to the culture medium to avoid oxidation. After 30 days of culture, polyvinylpirrolidone and ascorbic acid gave better results, eliminating oxidation in most explants. For shoot multiplication, benzylaminopurine was used in concentrations of 4.4 and 8.8 µM in Woody Plant Medium, resulting in an average of 4.43 and 4.68 shoots per explant, respectively, after 90 days. Indole-3-butyric acid and -naphthalene acetic acid were used to induce root formation, reaching a maximum rooting rate of 24% with 20µM -naphthalene acetic acid. For acclimatization. the rooted plants were transferred to Plantmax® substrate and cultured in a greenhouse, reaching 79% of survival after 30 days and 60% after one year.

Resumo A micropropagação de Calophyllum brasiliense Cambess. (Clusiaceae) é uma maneira de superar dificuldades para sua produção em larga escala, devido à natureza recalcitrante das sementes, frutificação irregular e ausência de propagação vegetativa natural da espécie. Culturas foram estabelecidas utilizando segmentos nodais com 2 cm de comprimento, obtidos de plantas com 1 a 2 anos de idade, mantidas em casa de vegetação. Cloreto de mercúrio e Plant Preservative Mixture foram utilizados durante a etapa de desinfestação, com melhores resultados alcançados com a incorporação de Plant Preservative Mixture ao meio de cultura. Polivinilpirrolidona, carvão ativado, cisteína, ácido ascórbico ou ácido cítrico foram adicionados ao meio de cultura para evitar a oxidação dos explantes. Após 30 dias de cultivo, o uso de polivinilpirrolidona ou ácido ascórbico proporcionou melhores resultados, eliminando a oxidação na maioria dos explantes. Para multiplicação das brotações, benzilaminopurina foi usada em concentrações de 4.4 e 8.8 µM em meio WPM, resultando em uma média de 4.43 e 4.68 brotações por explante, respectivamente, após 90 dias. Ácido indol-3-butírico e ácido -naftaleno acético foram usados para a indução de raízes, alcançando um enraizamento máximo de 24% com o uso de 20µM de ácido -naftaleno acético. As plantas enraizadas foram transferidas para substrato Plantmax® e cultivadas em casa de vegetação, alcançando 79% de sobrevivência após 30 dias e 60% após um ano.

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Azadirachta indica, es una planta con múltiples aplicaciones tanto forestal como farmacológica. Por ende, el establecimiento del sistema de cultivo in vitro por embriogénesis somática ofrece diversas y variadas ventajas, tales como obtener plantas altamente productivas en metabolitos. En este estudio, se utilizaron secciones foliares y cotiledonares, inducidas en medios MS (1962) suplementados con: BAP sólo y combinado con ANA / 2,4-D, TDZ sólo y con ABA. La regeneración fue con MS sólo o con K + AIA y BAP + AIA. Como resultado se estableció un sistema eficiente con secciones de cotiledones, observándose organogénesis a bajas concentraciones de BAP, mientras a altos niveles de BAP (2,5 mg.L-1), así como con TDZ + ABA (0,02 + 1 mg.L-1) respectivamente favorecieron la embriogénesis somática primaria y secundaria en un 96 % y 71 % respectivamente. La regeneración fue 71 % con MS, mientras que el enraizamiento fue de 86,67 % con MS½, obteniéndose plantas completas a corto plazo.

Azadirachta indica, is a plant with multiple forest and pharmacological application. Therefore, the establishment of in vitro culture system for somatic embryogenesis offers several distinct advantages such as obtaining highly productive plant metabolites. In this study, were used sections cotyledon and leaf, induced on MS medium (1962) supplemented with: BAP alone and combined with NAA / 2,4-D, TDZ alone and ABA. Regeneration was with MS alone or with K + BAP + IAA and IAA. As a result was established an efficient system with cotyledon sections, being observed organogenesis at low concentrations of BAP, while high levels of BAP (2.5 mg.L-1) with 96 % and TDZ + ABA (0.02 + 1 mg.L-1) with 71 %, favoring the primary and secondary somatic embryogenesis. Regeneration was 71 % with MS; rooting was 86.67 % with MS½, presenting whole plants obtained short term.

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Existen varios protocolos de regeneración de plantas vía embriogénesis somática de Sorghum bicolor (L.) Moench, sin embargo los porcentajes de formación de callos con estructuras embriogénicas y regeneración de plantas son bajos. Es por ello que esta investigación tuvo como objetivo generar embriones somáticos en sorgo rojo variedad CIAP 132-R. Se ensayaron diferentes concentraciones de 2,4-D para la formación de callos, así como tres concentraciones de ácido ascórbico para eliminar la exudación de compuestos fenólicos por el explante. También para la formación de los embriones somáticos a partir de los callos se evaluaron diferentes concentraciones de 2,4-D y 6-BAP. El mayor porcentaje de formación de callos (57,5 %) se alcanzó con 18,1 µM de 2,4-D. Con la adición al medio de cultivo de 50,0 mg.l-1 de ácido ascórbico fue posible eliminar los compuestos fenólicos en el explante y en el medio de cultivo, además permitió incrementar el porcentaje de formación de callos con estructuras embriogénicas hasta un 95 %. El número mayor de embriones somáticos por callo se alcanzó en el medio de cultivo con concentraciones de 4,52 µM de 2,4- D, combinada con 2,22 µM de 6-BAP. Por primera vez, se logró la formación eficiente de embriones somáticos a partir de los callos obtenidos de semillas inmaduras germinadas como explante inicial en la variedad CIAP 132-R.

Several protocols of plant regeneration via somatic embryogenesis from Sorghum bicolor (L.) Moench have been development, however the percentage of calluses with embryogenic structures and plant regeneration are low. Therefore this study aimed to generate somatic embryos in red sorghum variety CIAP 132-R. Different concentrations of 2,4-D for callus formation, and three concentrations of ascorbic acid to remove phenolics exudation were assayed by explant. For the formation of embryos different concentrations of 2,4-D and 6-BAP were evaluated. The highest percentage of callus formation (57.5 %) was achieved with 18.1 µM 2,4-D. With the addition to the culture medium of 50.0 mg.l-1 of ascorbic acid was possible to eliminate the phenolic compounds in the explant and in the culture medium; also it allows increasing the percentage of calluses with embryogenic structures up to 95 %. The highest number of somatic embryos per callus was achieved with a reduction in the culture medium of 2,4-D to 4.52 µM in combination with 2.22 µM 6-BAP. For the first time, the efficiency of somatic embryo formation was obtained from the freshly germinated sprouts of immature seeds as initial explant CIAP 132-R.

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El objetivo de esta investigación fue lograr el establecimiento in vitro de la especie Terminalia amazonia y Vochysia allenii debido a la dificultad de propagarlas sexual y asexualmente con técnicas convencionales. Se logró establecer segmentos nodales de ambas especies en condiciones in vitro empleando el HgCl2 0,1 % con un tiempo de exposición de 5 minutos. El mejor medio de cultivo para nudos fue el WPM 100 % de sales para T.amazonia y para V. allenii fue el WPM 50 % de sales. Después de 28 días de cultivo se obtuvo un 42 % de nudos establecidos para T. amazonia y 10% para V. allenii. En ambas especies se evaluó el efecto sobre la brotación de cinco concentraciones de 6-bencilaminopurina (6-BAP) (0,0; 2.22, 4.44, 6.66, 8.88 μM L-1) y cinco de tidiazuron (TDZ) (0,0; 0.22, 0.45, 0.68, 0.90 μM L-1). Se obtuvó en promedio un brote por explante en los cinco tratamientos de BAP y TDZ utilizados.

The objective of this research was to achieve the in vitro establishment of the species Terminalia amazonia and Vochysia allenii due to the difficulty propagate sexually and asexually with conventional techniques. It was possible to establish the nodal segments of both species in in vitro conditions using 0.1 % HgCl2 with an exposure time of 5 minutes. The best nodal culture medium was 100 % WPM salts in T. amazonia and V. allenii was WPM 50% salts. After 28 days of culture 42 % of nodal segments to T. amazonia and V. allenii 10% was obtained. In both species, the effect on sprouting of five concentrations of 6-benzylaminopurine (6-BAP) (0.0, 2.22, 4.44, 6.66, 8.88 μM L-1) and five thidiazuron (TDZ) (0.0, 0.22, 0.45, 0.68, 0.90 μM L-1) was evaluated. Outbreak was scored on average per explant in the five treatments of BAP and TDZ used.

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Normania triphylla is an endemic species from Madeira island (Portugal) extinct in the wild since 1991. The aim of this work was to culture the meristems of this species in vitro and to multiply its shoots in order to preserve this endangered species. The best results in terms of multiplication were obtained in Murashige and Skoog medium supplemented with 10 µM 6‑benzylaminopurine (BAP). The number of shoots, the number of nodes and the number of leaves were the most important in this medium. However, the best results concerning the total shoot length were obtained when BAP was not supplemented into the medium and in the presence of 5 or 7.5 µM 1-naphtalene acetic acid (NAA). This is the first report on the in vitro culture of N. triphylla which could brings new avenues for the development of this species.

RESUMO

Visando promover a proliferação de brotações em segmentos apicais e nodais de Ocimum selloi em diferentes concentrações de BAP, plantas jovens de 60 dias serviram de doadoras de segmentos apicais e nodais. Os segmentos foram inoculados em meio MS preparado com a metade da concentração dos sais, e acrescido de 1,5% de sacarose e diferentes concentrações de BAP. O experimento foi conduzido no delineamento fatorial, 3 x 4, sendo 3 as posições dos segmentos de O. selloi (segmento apical, primeiro e segundo segmentos nodais) e 4 concentrações de BAP (0 - controle; 2; 4 e 6 mg L-1). Aos 30 dias, foram avaliados o número, comprimento e biomassa fresca e seca de brotos e raízes. Os primeiros e segundos segmentos apresentaram melhores resultados na indução de brotos de O. selloi, 7 e 8 brotos/explante, nas diferentes concentrações de BAP; porém, não houve formação de raízes na presença da citocinina. Nas condições testadas, recomenda-se o uso do primeiro e segundo segmento nodal suplementando o meio de cultivo com BAP para a proliferação in vitro de brotações de O. selloi.

The present study was undertaken to develop the proliferation of sprouts in apical and nodal segments of Ocimum selloi with different BAP levels. Young plants aged 60 days were used as donors of nodal and apical segments. The segments were inoculated in MS medium at half the concentration of salts supplemented with 1.5% of sucrose and different BAP levels. The experiment was in 3 x 4 factorial arrangement, 3 positions of O. selloi segments (apical segment; first and second nodal segment) and 3 BAP levels (0 - control; 2; 4 and 6 mg L-1). After 30 days, the number, the length, and the fresh and dry biomass of sprouts and roots were evaluated. The first and the second segments showed better results in inducing O. selloi sprouts, 7 and 8 sprouts/explant, at the different BAP levels, but there was not root formation in the presence of the cytokinin. Under the tested conditions, use of the first and the second nodal segments is recommended in addition to supplementing the culture medium with BAP for in vitro proliferation of O. selloi sprouts.

Assuntos

RESUMO

La propagación de material de ñame de buena calidad es esencial para incrementar la producción sostenible de este cultivo. El presente trabajo tuvo como propósito optimizar el medio de cultivo de micropropagación de Dioscorea alata L. clon Caraqueño a través de los siguientes objetivos: determinar el efecto de diferentes antioxidantes (carbón activado 0,5 g/L-1 ; carbón activado 1,0 g/L-1; cisteína 10 mg/L-1, 20 mg/L-1 y 30 mg/L-1) y concentraciones de sales de Murashige y Skoog (MS) (25, 50, 75 y 100 %) en el medio de cultivo durante el establecimiento y la multiplicación de las plantas in vitro, y evaluar la utilización de distintas combinaciones de ácido naftalenacético (0,01; 0,1 mg/L-1) y bencilaminopurina (0,01; 0,1 mg/L-1) en el mejor medio de cultivo de multiplicación obtenido en el experimento anterior. A los 35 días se seleccionaron 40 plantas in vitro, a las cuales se les determinaron las siguientes variables: longitud en cm del vástago; número de nudos de novo por explantes; número de hojas por explante y porcentaje de fenolización. Se evaluó además, en el experimento con los reguladores de crecimiento, el número de raíces y longitud de la raíz de mayor tamaño. Se aplicó un diseño experimental completamente aleatorio con análisis de varianza bifactorial y clasificación simple. Se realizó la prueba de comparación de medias de Tukey para un nivel de significación del 5%. Los resultados obtenidos mostraron que las sales MS al 75% de su concentración, el carbón activado (0,5 g/L-1) o la cisteína (10 mg/L-1), en combinación con los reguladores de crecimiento ANA/BAP (0,01/0,01 mg/L-1) en el medio de cultivo MS, incrementaron los indicadores de desarrollo de las plantas in vitro tales como número de nudos de novo (3,5), longitud del vástago (4,1 cm), número de hojas (3,8), número de raíces (5,7) y longitud de las raíces (6 cm).

The material propagation of good quality yam is essential to increase the sustainable production of this cultivation. In the present work the optimization of culture medium of Dioscorea alata L. clone Caraqueño micropropagation was carried out through the following objectives: to determine the effect of different anti-oxydants (activated charcoal 0,5 g.L-1; activated charcoal 1,0 g.L-1; cysteine 10 mg.L-1, 20 mg.L-1 and 30 mg.L-1) and Murashige and Skoog salts concentrations (25, 50, 75 and 100%) in the culture medium during the in vitro plants establishment and the multiplication, and to evaluate the use of different combinations of naftalenacetic acid (0,01; 0,1 mg.L-1) and benzylaminopurine (0,01; 0,1 mg.L-1) in the best multiplication medium obtained in the above experiment. At 35 days, 40 in vitro plants were selected. The following variables were determined in these plants: shoot length, cm; leaf and bud explant number; and oxydation phenolic percentage. In the experiment of plant growth regulators was also evaluated, the roots number and greater size root length. A totally randomized experimental design with one and two factor variance analysis and the Tukey test for means comparison at 5% significance level were applied. The obtained results showed that the salts MS at 75% concentration, the activated charcoal (0,5 g. L-1) or the cysteine (10 mg. L-1), in combination with the growth regulators ANA/BAP (0,01/0,01 mg.L-1) in the MS culture medium, increase the development of the in vitro plants, number of novo buds (3,5), shoot length (4,1 cm), number of leaves (3,8), number of roots (5,7) and greater size root length (6 cm).

Assuntos

RESUMO

Realizou-se um estudo para avaliar o efeito de fontes de luz na micropropagação de morangueiro, com níveis crescentes de BAP no meio de cultivo. Para tanto, inocularam-se gemas de brotações da cultivar 'Sabrosa' em meio MS com 30g L-1 de sacarose, 100mg L-1 de mio-inositol, 7g L-1 de ágar e BAP (0; 0,3; 0,6; 0,9; e 1,5mg L-1), em pH 5,8. Os explantes foram cultivados a 25+2°C, com 16 horas de fotoperíodo e luminosidade de 20µmol m-2 s-1, esta última fornecida por diferentes fontes de luz (LED azul-EDEB 3LA1, LED verde-EDET 3LA1, LED vermelho-EDER 3LA3, lâmpada fluorescente Growlux e lâmpada fluorescente branca). Os tratamentos foram dispostos em delineamento inteiramente ao acaso em um fatorial 5x5 (concentrações de BAP x fontes de luz), com seis repetições. O experimento foi repetido em três subcultivos sucessivos de 35 dias cada. Nestes avaliaram-se o número de brotações por explante e a altura das brotações. Ao final do terceiro subcultivo, determinaram-se, ainda, as concentrações de carotenoides e de clorofilas a e b, independentemente do nível de BAP. Maior número de brotações por explante foi obtido sob LEDs vermelhos e verdes. Concentrações de BAP no meio de cultura entre 0,82 e 1,22mg L-1, dependendo da fonte de luz, proporcionaram maior multiplicação in vitro de brotações. Sob todas as fontes de luz foram obtidas brotações de maior comprimento em meio isento de BAP. Brotações cultivadas sob LEDs vermelhos apresentaram maior quantidade de pigmentos fotossintéticos, enquanto aquelas sob LEDs verdes e lâmpadas Growlux apresentaram a menor.

The objective of this research was to evaluate the effect of different sources of light in strawberry micropropagation, under increasing levels of BAP in culture medium. 'Sabrosa' shoots were inoculated in MS medium supplemented with 30g L-1 sucrose, 100mg L-1 myo-inositol, 7 agar g L-1 and BAP (0; 0.3; 0.6; 0.9; e 1.5mg L-1), pH 5.8. The explants were cultivated at 25+2°C, 16 hours photoperiod and 20µmol m-2 s-1. The luminosity was supplied by different sources of light (blue-EDEB 3LA1 LED, green-EDET 3LA1 LED, red-EDER 3LA3 LED, Growlux fluorescent lamp and white fluorescent lamp). The experimental design was a factorial entirely randomized (5 concentrations of BAP x 5 light sources) with six replications. The experiment was repeated in three successive subcultures of 35 days each, being evaluated the shoot number per explant and shoot height. The carotenoids and chlorophyll a and b determinations were carried out after the third subculture, independently of BAP concentration. Shoot number per explant was higher under red and green LEDs. BAP concentrations between 0.82 and 1.22mg L-1 in culture medium showed higher multiplication rate depending on the light source. Shoot length was highest in culture medium without BAP under all light sources. Shoots cultivated under red LEDs showed higher concentration of photosynthetic pigments, while those under green LEDs and Growlux light bulbs showed the lowest.

RESUMO

The objective of this research was to evaluate the effect of different sources of light in strawberry micropropagation, under increasing levels of BAP in culture medium. 'Sabrosa' shoots were inoculated in MS medium supplemented with 30g L-1 sucrose, 100mg L-1 myo-inositol, 7 agar g L-1 and BAP (0; 0.3; 0.6; 0.9; e 1.5mg L-1), pH 5.8. The explants were cultivated at 25+2°C, 16 hours photoperiod and 20µmol m-2 s-1. The luminosity was supplied by different sources of light (blue-EDEB 3LA1 LED, green-EDET 3LA1 LED, red-EDER 3LA3 LED, Growlux fluorescent lamp and white fluorescent lamp). The experimental design was a factorial entirely randomized (5 concentrations of BAP x 5 light sources) with six replications. The experiment was repeated in three successive subcultures of 35 days each, being evaluated the shoot number per explant and shoot height. The carotenoids and chlorophyll a and b determinations were carried out after the third subculture, independently of BAP concentration. Shoot number per explant was higher under red and green LEDs. BAP concentrations between 0.82 and 1.22mg L-1 in culture medium showed higher multiplication rate depending on the light source. Shoot length was highest in culture medium without BAP under all light sources. Shoots cultivated under red LEDs showed higher concentration of photosynthetic pigments, while those under green LEDs and Growlux light bulbs showed the lowest.

Realizou-se um estudo para avaliar o efeito de fontes de luz na micropropagação de morangueiro, com níveis crescentes de BAP no meio de cultivo. Para tanto, inocularam-se gemas de brotações da cultivar 'Sabrosa' em meio MS com 30g L-1 de sacarose, 100mg L-1 de mio-inositol, 7g L-1 de ágar e BAP (0; 0,3; 0,6; 0,9; e 1,5mg L-1), em pH 5,8. Os explantes foram cultivados a 25+2°C, com 16 horas de fotoperíodo e luminosidade de 20µmol m-2 s-1, esta última fornecida por diferentes fontes de luz (LED azul-EDEB 3LA1, LED verde-EDET 3LA1, LED vermelho-EDER 3LA3, lâmpada fluorescente Growlux e lâmpada fluorescente branca). Os tratamentos foram dispostos em delineamento inteiramente ao acaso em um fatorial 5x5 (concentrações de BAP x fontes de luz), com seis repetições. O experimento foi repetido em três subcultivos sucessivos de 35 dias cada. Nestes avaliaram-se o número de brotações por explante e a altura das brotações. Ao final do terceiro subcultivo, determinaram-se, ainda, as concentrações de carotenoides e de clorofilas a e b, independentemente do nível de BAP. Maior número de brotações por explante foi obtido sob LEDs vermelhos e verdes. Concentrações de BAP no meio de cultura entre 0,82 e 1,22mg L-1, dependendo da fonte de luz, proporcionaram maior multiplicação in vitro de brotações. Sob todas as fontes de luz foram obtidas brotações de maior comprimento em meio isento de BAP. Brotações cultivadas sob LEDs vermelhos apresentaram maior quantidade de pigmentos fotossintéticos, enquanto aquelas sob LEDs verdes e lâmpadas Growlux apresentaram a menor.

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The objective of this research was to evaluate the effect of different sources of light in strawberry micropropagation, under increasing levels of BAP in culture medium. 'Sabrosa' shoots were inoculated in MS medium supplemented with 30g L-1 sucrose, 100mg L-1 myo-inositol, 7 agar g L-1 and BAP (0; 0.3; 0.6; 0.9; e 1.5mg L-1), pH 5.8. The explants were cultivated at 25+2°C, 16 hours photoperiod and 20µmol m-2 s-1. The luminosity was supplied by different sources of light (blue-EDEB 3LA1 LED, green-EDET 3LA1 LED, red-EDER 3LA3 LED, Growlux fluorescent lamp and white fluorescent lamp). The experimental design was a factorial entirely randomized (5 concentrations of BAP x 5 light sources) with six replications. The experiment was repeated in three successive subcultures of 35 days each, being evaluated the shoot number per explant and shoot height. The carotenoids and chlorophyll a and b determinations were carried out after the third subculture, independently of BAP concentration. Shoot number per explant was higher under red and green LEDs. BAP concentrations between 0.82 and 1.22mg L-1 in culture medium showed higher multiplication rate depending on the light source. Shoot length was highest in culture medium without BAP under all light sources. Shoots cultivated under red LEDs showed higher concentration of photosynthetic pigments, while those under green LEDs and Growlux light bulbs showed the lowest.

Realizou-se um estudo para avaliar o efeito de fontes de luz na micropropagação de morangueiro, com níveis crescentes de BAP no meio de cultivo. Para tanto, inocularam-se gemas de brotações da cultivar 'Sabrosa' em meio MS com 30g L-1 de sacarose, 100mg L-1 de mio-inositol, 7g L-1 de ágar e BAP (0; 0,3; 0,6; 0,9; e 1,5mg L-1), em pH 5,8. Os explantes foram cultivados a 25+2°C, com 16 horas de fotoperíodo e luminosidade de 20µmol m-2 s-1, esta última fornecida por diferentes fontes de luz (LED azul-EDEB 3LA1, LED verde-EDET 3LA1, LED vermelho-EDER 3LA3, lâmpada fluorescente Growlux e lâmpada fluorescente branca). Os tratamentos foram dispostos em delineamento inteiramente ao acaso em um fatorial 5x5 (concentrações de BAP x fontes de luz), com seis repetições. O experimento foi repetido em três subcultivos sucessivos de 35 dias cada. Nestes avaliaram-se o número de brotações por explante e a altura das brotações. Ao final do terceiro subcultivo, determinaram-se, ainda, as concentrações de carotenoides e de clorofilas a e b, independentemente do nível de BAP. Maior número de brotações por explante foi obtido sob LEDs vermelhos e verdes. Concentrações de BAP no meio de cultura entre 0,82 e 1,22mg L-1, dependendo da fonte de luz, proporcionaram maior multiplicação in vitro de brotações. Sob todas as fontes de luz foram obtidas brotações de maior comprimento em meio isento de BAP. Brotações cultivadas sob LEDs vermelhos apresentaram maior quantidade de pigmentos fotossintéticos, enquanto aquelas sob LEDs verdes e lâmpadas Growlux apresentaram a menor.

RESUMO

O objetivo deste trabalho foi estimar os parâmetros da análise de crescimento em função de diferentes reguladores vegetais aplicados na parte aérea de plantas de Salvia officinalis L. Para tanto,o experimento foi instalado em casa de vegetação do Departamento de Botânica, Instituto de Biociências, da Universidade Estadual Paulista, Botucatu, SP. Os tratamentos consistiram na pulverização da solução de 100mg L-1 de ácido giberélico (GA3); 100mg L-1 de benzilaminopurina (BAP); 100mg L-1 de ácido 2-cloroetil-fosfônico (ethephon); Stimulate® a 2 por cento (90mg L-1 de cinetina, 50mg L-1 de ácido giberélico e 50mg L-1 de ácido indolilbutírico) e água (testemunha). As aplicações foram realizadas em três épocas, aos 15, 25 e 35 dias após o transplante (d.a.t.) e o crescimento foi avaliado em cinco épocas de coletas a intervalos de 21 dias, sendo a primeira realizada aos 47 (d.a.t.). Foram determinados os parâmetros fisiológicos da análise de crescimento: razão de área foliar (RAF), área foliar específica (AFE), taxa assimilatória líquida (TAL) e taxa de crescimento relativo (TCR). Os resultados mostram que os reguladores de crescimento vegetal influenciaram os parâmetros fisiológicos da análise de crescimento. As plantas tratadas com BAP apresentaram maiores valores de RAF aos 47 d.a.t., já as plantas tratadas com GA3, a TAL apresentou aumento até o 131 d.a.t. A TCR é decrescente para todos os tratamentos com reguladores de crescimento vegetal testados e a testemunha.

The objective of this study was to estimate the effects of different plant regulators on the index growth analysis application of sage plants. An experiment was conducted in a greenhouse with controlled temperature and relative humidity, at the Departmento de Botânica, Instituto de Biociências, Universidade Estadual Paulista, UNESP, Botucatu, SP, Brazil. The experimental design was completely randomized, with five treatments containing three replicates. Treatments consisted of the spraying of the solution of 100mg L-1 of gibberellic acid (GA3); 100mg L-1 of benzylaminopurine (BAP); 100mg L-1 of 2-chloroethyl phosphonic acid (ethephon); Stimulate® at 2 percent (90mg L-1 of kinetin, 50mg L-1 of gibberellic acid and 50mg L-1 of indolylbutyric acid) and water (control). Applications of plant growth regulators were performed in 3 times, at 15, 25, and 35 days after transplanting, and growth was evaluated in five successive harvests at 21-day intervals, performed at 47, 68, 89, 110, and 131 days after transplanting. The following growth index were determined: leaf area ratio (LAR), specific leaf area (SLA), net assimilation rate (NAR), and relative growth rate (RGR). These results suggest that the plant growth regulators influence the index growth analysis. The plants treated with BAP presented increase values of LAR to the 47 days after transplanting. The plants treated with GA3 to NAR presented increase until the 131 days after transplanting. The RGR is decreasing for all the treatments with vegetal regulators tested and the control.

RESUMO

The objective of this study was to estimate the effects of different plant regulators on the index growth analysis application of sage plants. An experiment was conducted in a greenhouse with controlled temperature and relative humidity, at the Departmento de Botânica, Instituto de Biociências, Universidade Estadual Paulista, UNESP, Botucatu, SP, Brazil. The experimental design was completely randomized, with five treatments containing three replicates. Treatments consisted of the spraying of the solution of 100mg L-1 of gibberellic acid (GA3); 100mg L-1 of benzylaminopurine (BAP); 100mg L-1 of 2-chloroethyl phosphonic acid (ethephon); Stimulate® at 2% (90mg L-1 of kinetin, 50mg L-1 of gibberellic acid and 50mg L-1 of indolylbutyric acid) and water (control). Applications of plant growth regulators were performed in 3 times, at 15, 25, and 35 days after transplanting, and growth was evaluated in five successive harvests at 21-day intervals, performed at 47, 68, 89, 110, and 131 days after transplanting. The following growth index were determined: leaf area ratio (LAR), specific leaf area (SLA), net assimilation rate (NAR), and relative growth rate (RGR). These results suggest that the plant growth regulators influence the index growth analysis. The plants treated with BAP presented increase values of LAR to the 47 days after transplanting. The plants treated with GA3 to NAR presented increase until the 131 days after transplanting. The RGR is decreasing for all the treatments with vegetal regulators tested and the control.

O objetivo deste trabalho foi estimar os parâmetros da análise de crescimento em função de diferentes reguladores vegetais aplicados na parte aérea de plantas de Salvia officinalis L. Para tanto,o experimento foi instalado em casa de vegetação do Departamento de Botânica, Instituto de Biociências, da Universidade Estadual Paulista, Botucatu, SP. Os tratamentos consistiram na pulverização da solução de 100mg L-1 de ácido giberélico (GA3); 100mg L-1 de benzilaminopurina (BAP); 100mg L-1 de ácido 2-cloroetil-fosfônico (ethephon); Stimulate® a 2% (90mg L-1 de cinetina, 50mg L-1 de ácido giberélico e 50mg L-1 de ácido indolilbutírico) e água (testemunha). As aplicações foram realizadas em três épocas, aos 15, 25 e 35 dias após o transplante (d.a.t.) e o crescimento foi avaliado em cinco épocas de coletas a intervalos de 21 dias, sendo a primeira realizada aos 47 (d.a.t.). Foram determinados os parâmetros fisiológicos da análise de crescimento: razão de área foliar (RAF), área foliar específica (AFE), taxa assimilatória líquida (TAL) e taxa de crescimento relativo (TCR). Os resultados mostram que os reguladores de crescimento vegetal influenciaram os parâmetros fisiológicos da análise de crescimento. As plantas tratadas com BAP apresentaram maiores valores de RAF aos 47 d.a.t., já as plantas tratadas com GA3, a TAL apresentou aumento até o 131 d.a.t. A TCR é decrescente para todos os tratamentos com reguladores de crescimento vegetal testados e a testemunha.