RESUMO
El consumo crónico de alcohol en Uruguay es un problema creciente, sin embargo, las determinaciones de biomarcadores consensuados no se realizan sistemáticamente ni se investigan otros marcadores potenciales. Para validar la hipótesis de que las metaloproteinasas de matriz con actividad gelatinasa son biomarcadores de consumo crónico de alcohol, se evaluaron muestras de sangre de 100 alcohólicos que comenzaron a atenderse en la Unidad de Trastornos Relacionados con el Alcohol y de 50 donantes sanos no alcohólicos. Las muestras de alcohólicos presentaron actividad de gelatinasas que triplicaron la de los controles y aumentos pequeños pero significativos en los niveles de γ-glutamil transferasa, aspartato-aminotransferasa y volumen corpuscular medio. Los valores de transferrina deficiente en carbohidratos fueron menores en alcohólicos que en controles. Estos resultados permiten proponer a las gelatinasas como los indicadores más sensibles del consumo sostenido de alcohol en la población analizada, ya que las enzimas hepáticas y el volumen corpuscular medio muestran una tendencia acorde con la literatura pero no alcanzaron valores asociados a la patología. Dado que la transferrina deficiente en carbohidratos es considerada el biomarcador indirecto más sensible y específico de consumo crónico de alcohol, los valores menores obtenidos en alcohólicos respecto de controles sugieren problemas metodológicos que podrían subsanarse aplicando otras técnicas de medida o por la presencia de interferencias que deben ser identificadas. Finalmente, estos hallazgos justifican una extensión de este trabajo piloto, así como estudios adicionales centrados en la participación de las metaloproteinasas de matriz con actividad gelatinasa en las cascadas de daño asociadas al consumo crónico de alcohol.
Chronic alcohol consumption in Uruguay is a growing problem, however, determinations of consensual biomarker are not performed systematically neither potential markers are explored. To validate the hypothesis that matrix metalloproteinases with gelatinase activity are biomarkers of chronic alcohol consumption, blood samples of 100 alcoholics that began medical treatment at the Unidad de Trastornos Relacionados con el Alcohol and 50 healthy non-alcoholic donors were evaluated. Alcoholic samples showed gelatinase activity that tripled that of controls and small but significant increases in levels of γ-glutamyl transferase, aspartate-aminotransferase and mean cellular volume. Carbohydrate deficient transferrin values were lower in alcoholics than in controls. These results allow proposing gelatinases as the most sensitive indicators of sustained alcohol consumption in the population analyzed since hepatic enzymes and mean cellular volume showed a tendency consistent with the literature but did not reach values associated with the pathology. Since carbohydrate-deficient transferrin is considered the most sensitive and specific indirect biomarker of chronic alcohol consumption, lower values in alcoholics related to controls suggest methodological problems that could be solved by applying other measurement techniques or by the presence of yet unknown interferences. Finally, these findings justify an extension of this pilot work, as well as additional studies focused on the participation of matrix metalloproteinases with gelatinase activity in the cascades of damage associated with chronic alcohol consumption.
O consumo crônico de álcool no Uruguai é um problema crescente, no entanto, as determinações consensuais de biomarcadores não são realizadas sistematicamente ou os potenciais marcadores são explorados. Para validar a hipótese de que as metaloproteinases de matriz com atividade gelatinase são biomarcadores do consumo crônico de álcool, foram avaliadas amostras de sangue cd 100 alcoólatras que começaram a ser tratadas na Unidad de Trastornos Relacionados con el Alcohol e 50 doadores não-alcoólatras saudáveis. As amostras alcoólicas apresentaram atividade de gelatinase que triplicou a dos controles e pequenos más significativos aumentos nos níveis de γ-glutamil transferase, aspartato-aminotransferase e volume médio celular. Os valores de transferrina deficientes em carboidratos foram menores nos alcoolistas que nos controles. Esses resultados permitem que as gelatinases sejam propostas como os indicadores mais sensíveis do consumo sustentado de álcool na população analisada, uma vez que as enzimas hepáticas e o volume celular médio apresentam uma tendência consistente com a literatura, mas não alcançaram valores associados à patologia. Como a transferrina deficiente em carboidratos é considerada o biomarcador indireto mais sensível e específico do consumo crônico de álcool, os valores mais baixos em alcoólatras do que em controles sugerem problemas metodológicos que poderiam ser sanados pela aplicação de outras técnicas de mensuração pela presença de interferências que deben ser identificadas. Finalmente, esses achados justificam uma extensão deste trabalho piloto, bem como estudos adicionais voltados para a participação de metaloproteinases de matriz com atividade de gelatinase nas cascatas de danos associados ao consumo crônico de álcool.
Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Idoso , Metaloproteinase 2 da Matriz/sangue , Metaloproteinase 9 da Matriz/sangue , Alcoolismo/diagnóstico , Aspartato Aminotransferases/sangue , Biomarcadores/sangue , Estudos de Casos e Controles , Método Duplo-Cego , Estudos Transversais , Estudos de Coortes , Sensibilidade e Especificidade , Alcoolismo/enzimologia , Alcoolismo/sangue , Índices de Eritrócitos , gama-Glutamiltransferase/sangueRESUMO
[...] Os objetivos desse estudo foram avaliar quantitativamente os efeitos do consumo crônico de álcool no peso, reparo ósseo e densidade óssea em ratos Wistar, além de observarmos qualitativamente as fibras colágenas e a expressão de OPG e RANKL. Para isso, separamos aleatoriamente 30 ratos Wistar em dois grupos , sendo (G1) 15 ratos consumindo solução de aguardente diluída em água por 100 dias com concentração progressiva e controlada (10ºGL, 15ºGL, 20ºGL, 25ºGL e 30ºGL) e 15 ratos não alcoólatras consumindo como dieta líquida somente água (G2). Após o 92º dia do período de indução do alcoolismo, ambos os grupos foram submetidos a um defeito ósseo realizado na tíbia com um motor rotacional contendo uma broca com tamanho de 3 mm de diâmetro. Após 8 dias após o procedimento cirúrgico os animais foram eutanasiados em câmara de C02, as tíbias foram removidas e aparadas nas proximidades do defeito ósseo para que fossem processadas através de secções histológicas descalcificadas. A porcentagem de osso neoformado e a densidade óssea foram avaliadas histometricamente. Através da imunohistoquimica observamos a expressão de OPG e RANKL e através de reação histoquímica pelo método Picro-sirius Red, estudamos o padrão de birrefringência das fibras colágenas. Como resultados, pudemos observar que o peso dos animais, a densidade e remodelação ósseas foram menores no grupo alcoólico. Encontramos também efeitos negativos em relação à qualidade e organização das fibras colágenas, bem como diferenciação na expressão de RANKL e OPG nos diferentes grupos. Nossos resultados demonstram que o protocolo proposto de ingestão de álcool exerce efeitos negativos no ganho de peso e qualidade óssea quando comparado ao grupo controle
[...] The objective of this study was to verify quantitatively the effects of chronic alcohol consumption on body weight, bone healing and density in rats. It was also observed quantitatively the collagenous fibers and the expression of OPG and RANKL. For this purpose, 30 Wistar rats were randomly divided into two groups: G1 (group 1) consisted in 15 rats which had, for 100 days, a liquid diet of liquor diluted in water with a progressive and controlled concentration (10°GL, 15°GL, 20°GL, 25°GL and 30°GL); G2 (group 2) consisted in 15 rats on a liquid diet of only water and free of alcohol. After the 92nd day of the induction period of alcoholism, tibial defects of 3 mm in diameter were created in both groups and after 8 days from this surgery procedure the animals were euthanized in a CO2 chamber. The tibiae were removed and cut next to the bone defect in order to be processed through decalcified histological sections. The percentage of renovated bone and osseous density were submitted to histometric analysis. Through immunohistochemistry, the expression of OPG and RANKL were analyzed and using Picrosirius red staining method, the birefringence pattern of the collagen fibers was studied. As a result, it was verified that the body weight of the animals, the osseous density and bone remodeling were smaller in G1; negative effects regarding to the collagen fibers quality and organization and a differentiation in the expression of OPG and RANKL were also found in both groups. Conclusion: these results show that the proposed protocol of alcohol intake produces negative effects in the gain of body weight and bone quality when compared to the control group