RESUMO
Adjuvants play an important role in vaccine formulations by increasing their immunogenicity. In this study, the phenolic compound-rich J fraction (JFR) of a Brazilian green propolis methanolic extract stimulated cellular and humoral immune responses when co-administered with an inactivated vaccine against swine herpesvirus type 1 (SuHV-1). When compared to control vaccines that used aluminium hydroxide as an adjuvant, the use of 10 mg/dose of JFR significantly increased (p < 0.05) neutralizing antibody titres against SuHV-1, as well as the percentage of protected animals following SuHV-1 challenge (p < 0.01). Furthermore, addition of phenolic compounds potentiated the performance of the control vaccine, leading to increased cellular and humoral immune responses and enhanced protection of animals after SuHV-1 challenge (p < 0.05). Prenylated compounds such as Artepillin C that are found in large quantities in JFR are likely to be the substances that are responsible for the adjuvant activity.
Assuntos
Anticorpos Antivirais/imunologia , Herpesvirus Suídeo 1/imunologia , Vacinas contra Herpesvirus/imunologia , Própole/química , Pseudorraiva/prevenção & controle , Adjuvantes Imunológicos , Animais , Imunidade Celular/imunologia , Imunidade Humoral/imunologia , Camundongos , Camundongos Endogâmicos BALB C , Pseudorraiva/imunologia , Suínos , Vacinas de Produtos Inativados/imunologiaRESUMO
Adjuvants play an important role in vaccine formulations by increasing their immunogenicity. In this study, the phenolic compound-rich J fraction (JFR) of a Brazilian green propolis methanolic extract stimulated cellular and humoral immune responses when co-administered with an inactivated vaccine against swine herpesvirus type 1 (SuHV-1). When compared to control vaccines that used aluminium hydroxide as an adjuvant, the use of 10 mg/dose of JFR significantly increased (p < 0.05) neutralizing antibody titres against SuHV-1, as well as the percentage of protected animals following SuHV-1 challenge (p < 0.01). Furthermore, addition of phenolic compounds potentiated the performance of the control vaccine, leading to increased cellular and humoral immune responses and enhanced protection of animals after SuHV-1 challenge (p < 0.05). Prenylated compounds such as Artepillin C that are found in large quantities in JFR are likely to be the substances that are responsible for the adjuvant activity.
Assuntos
Animais , Camundongos , Anticorpos Antivirais/imunologia , Herpesvirus Suídeo 1/imunologia , Vacinas contra Herpesvirus/imunologia , Própole , Pseudorraiva , Adjuvantes Imunológicos , Imunidade Celular/imunologia , Imunidade Humoral/imunologia , Camundongos Endogâmicos BALB C , Pseudorraiva/imunologia , Suínos , Vacinas de Produtos Inativados/imunologiaRESUMO
The exposure of 13 Brazilian free-ranging nondomestic canids (five pampas fox - Pseudalopex gymnocercus and eight crab-eating fox -Cerdocyon thous) from Southern region of Brazil, to Canine distemper virus (CDV), canine parvovirus (CPV) and Canine coronavirus (CCoV) was investigated. Antibodies against CDV were detected in 38.5 percent (5/13) of the samples. There were anti-CDV antibodies in 60 percent (3/5) of P. gymnocercus and in 25 percent (2/8) of C. thous. The frequency was higher among the adults and males. Eleven canids (84.6 percent) presented antibodies against CPV, 80 percent (4/5) were from P. gymnocercus and 87.5 percent (7/8) were from C. thous. There was no difference in positivity rate against CPV between gender and age. Antibodies against CCoV were detected in 38.5 percent (5/13) of the samples, with 60 percent (3/5) of positivity in P. gymnocercus and 25 percent (2/8) in C. thous. The frequency of antibodies against CCoV was higher among the adults and males. The study showed that these canids were exposed to CDV, CPV and CCoV.
Foi investigada a ocorrência de exposição em 13 canídeos não domésticos de vida livre (cinco graxains-do-campo - Pseudalopex gymnocercus e oito graxains-do-mato - Cerdocyon thous) da região sul do Brasil ao vírus da cinomose canina (CDV), parvovírus canino (CPV) e coronavírus canino (CCoV). Anticorpos contra o CDV foram detectados em 38,5 por cento (5/13) das amostras. Haviam anticorpos anti-CDV em 60 por cento (3/5) dos P. gymnocercus e em 25 por cento (2/8) dos C. thous. A freqüência foi maior entre machos e adultos. Para CPV, 11 canídeos (84,6 por cento) apresentaram anticorpos, 80 por cento (4/5) eram da espécie P. gymnocercus e 87,5 por cento (7/8) eram C. thous. Não houve diferença de positividade para o CPV entre sexos e idades. Anticorpos contra o CCoV foram detectados em 38,5 por cento (5/13) das amostras, sendo 60 por cento (3/5) de positividade entre os P. gymnocercus e 25 por cento (2/8) entre os C. thous. A freqüência de anticorpos para CCoV foi maior entre os machos e adultos. O estudo revelou que estes canídeos foram expostos ao CDV, CPV e CCoV.
RESUMO
Meningoencephalitis caused by Bovine herpesvirus type 5 (BoHV-5) is responsible for heavy economic losses in the cattle industry. As in other Alphaherpesviruses, the envelope glycoprotein IV (gD), which mediates penetration into host cells, is one of the major candidate antigens for a recombinant vaccine, since it induces a strong and persistent immune response. The DNA coding for a truncated form of BoHV-5 gD (tgD) has been cloned into the Pichia pastoris expression vector pPICZalphaB to allow protein secretion into the medium. After induction with methanol, a approximately 55kDa protein was obtained. Enzyme deglycosylation with Endo H showed a smaller size band in SDS-PGAE, with approximately 50kDa, suggesting that tgD has N-linked oligosaccharides and that it is not hyperglycosylated. The approximately 55kDa protein was recognized by several polyclonal antibodies, including polyclonal antibody anti-tgD and polyclonal antibodies of different animal species immunized with BoHV-5 and BoHV-1. This is the first report of BoHV-5 gD expression in yeast. It was shown that the recombinant truncated form of BoHV-5 gD has antigenic and immunogenic properties similar to the native BoHV-5 gD. Expression of tgD as a secreted protein allows simple and inexpensive purification methods that can be used for further studies to evaluate its immunogenicity in cattle.
Assuntos
Herpesvirus Bovino 5/genética , Proteínas do Envelope Viral/genética , Animais , Anticorpos Antivirais/imunologia , Bovinos , Clonagem Molecular , Eletroforese em Gel de Poliacrilamida , Expressão Gênica , Glicosilação , Peso Molecular , Pichia/genética , Proteínas Recombinantes/química , Proteínas Recombinantes/genética , Proteínas Recombinantes/imunologia , Proteínas Recombinantes/isolamento & purificação , Proteínas do Envelope Viral/química , Proteínas do Envelope Viral/imunologia , Proteínas do Envelope Viral/isolamento & purificaçãoRESUMO
Vacinação tem sido uma prática comum para prevenir ou minimizar os sintomas de doenças causadas por agentes infecciosos. Vacinas têm sido desenvolvidas utilizando-se microrganismos atenuados ou inativados. Recentemente peptídeos sintéticos e proteínas recombinantes constituem a base da nova geração de vacinas. Entretanto, ainda há necessidade de associação destes antíg¬enos a adjuvantes para potencializar seu efeito imunológico. Embora várias substâncias tenham sido avaliadas para sua utilização em vacinas de uso veterinário, a produção de vacinas continua atrelada à utilização dos sais de alumínio ou de emulsões oleosas. O polissacarídeo produzido pela bactéria Xanthomonas sp. é uma nova alternativa para utilização como adjuvante vacinal. O objetivo deste estudo foi avaliar a ação adjuvante da Xantana na resposta humoral de camundongos a uma vacina de herpes suíno tipo 1 (SuHV-1). Os animais foram divididos em cinco grupos, utilizando adjuvantes diferentes para cada grupo. Os títulos de anticorpos foram determinados por ELISA, utilizando como antígeno a respectiva cepa vacinal. O adjuvante à base de Xantana apresentou a maior soroconversão dentre os adjuvantes todos adjuvantes testados. Este efeito foi mais pro¬nunciado quando a via subcutânea foi utilizada. Baseado nos resultados obtidos, conclui-se que o polissacarídeo produzido pela bactéria Xanthomonas sp. possui ação adjuvante superior ou igual aos adjuvantes utilizados em vacinas comerciais(AU)
Vaccination has been a common practice to prevent or minimize the symptoms of diseases caused by infectious agents. Vaccines have been developed using an attenuated or inactivated microorganisms. Recently, synthetic peptides and recombinant proteins form the basis of the new generation of vaccines. However, there is need the association of these antigens wich adjuvants to increase its immunological effect. Although several substances have been evaluated for use in vaccines for veterinary use the production of vaccine remains tied to the use of aluminum salts or oily emulsions. The polysaccharide produced by the bacterium Xanthomonas sp. is a new alternative for use as an adjuvant vaccine. This study aimed to evaluate the effect of adjuvant xanthan in humoral response of mice to a vaccine for pig herpes type 1 (SuHV-1). The animals were divided into five groups, using different adjuvants for each group. The titles of antibodies were determined by ELISA, using as antigen the vaccine strain. The adjuvant-based xanthan had the highest seroconversion among all tested adjuvants. This effect was more pronounced when subcutaneous via was used. Based on the results, we conclude that the adjuvant action of the polysaccharide produced by the bacterium Xanthomonas sp. has greater than or equal to the adjuvant used in commercial vaccines(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , PolissacarídeosRESUMO
Vacinação tem sido uma prática comum para prevenir ou minimizar os sintomas de doenças causadas por agentes infecciosos. Vacinas têm sido desenvolvidas utilizando-se microrganismos atenuados ou inativados. Recentemente peptídeos sintéticos e proteínas recombinantes constituem a base da nova geração de vacinas. Entretanto, ainda há necessidade de associação destes antíg¬enos a adjuvantes para potencializar seu efeito imunológico. Embora várias substâncias tenham sido avaliadas para sua utilização em vacinas de uso veterinário, a produção de vacinas continua atrelada à utilização dos sais de alumínio ou de emulsões oleosas. O polissacarídeo produzido pela bactéria Xanthomonas sp. é uma nova alternativa para utilização como adjuvante vacinal. O objetivo deste estudo foi avaliar a ação adjuvante da Xantana na resposta humoral de camundongos a uma vacina de herpes suíno tipo 1 (SuHV-1). Os animais foram divididos em cinco grupos, utilizando adjuvantes diferentes para cada grupo. Os títulos de anticorpos foram determinados por ELISA, utilizando como antígeno a respectiva cepa vacinal. O adjuvante à base de Xantana apresentou a maior soroconversão dentre os adjuvantes todos adjuvantes testados. Este efeito foi mais pro¬nunciado quando a via subcutânea foi utilizada. Baseado nos resultados obtidos, conclui-se que o polissacarídeo produzido pela bactéria Xanthomonas sp. possui ação adjuvante superior ou igual aos adjuvantes utilizados em vacinas comerciais
Vaccination has been a common practice to prevent or minimize the symptoms of diseases caused by infectious agents. Vaccines have been developed using an attenuated or inactivated microorganisms. Recently, synthetic peptides and recombinant proteins form the basis of the new generation of vaccines. However, there is need the association of these antigens wich adjuvants to increase its immunological effect. Although several substances have been evaluated for use in vaccines for veterinary use the production of vaccine remains tied to the use of aluminum salts or oily emulsions. The polysaccharide produced by the bacterium Xanthomonas sp. is a new alternative for use as an adjuvant vaccine. This study aimed to evaluate the effect of adjuvant xanthan in humoral response of mice to a vaccine for pig herpes type 1 (SuHV-1). The animals were divided into five groups, using different adjuvants for each group. The titles of antibodies were determined by ELISA, using as antigen the vaccine strain. The adjuvant-based xanthan had the highest seroconversion among all tested adjuvants. This effect was more pronounced when subcutaneous via was used. Based on the results, we conclude that the adjuvant action of the polysaccharide produced by the bacterium Xanthomonas sp. has greater than or equal to the adjuvant used in commercial vaccines
Assuntos
Feminino , Animais , PolissacarídeosRESUMO
This study aim to evaluate the quality of boar semen stored at different temperatures and media on PIGPEL5 extender, using egg yolk as an external membrane protector, and on PIGPEL5Plus, containing low density lipoprotein (LDL) as protector. In the experiment 1, the semen doses were stored in a semen container at 5 and 17 C and the results were compared with semen stored at 17 C in BTS extender. In the experiment 2, the doses with the PIGPEL5 and PIGPEL5Plus extenders were stored in a commercial refrigerator and in semen container, both at 5 C. The use of extenders with extracellular cryoprotectant (PIGPEL5 e PIGPEL5Plus) showed higher (p 0.05) motility values in comparison to BTS until 48 h. Furthermore, the use of extracellular cryoprotectant was good to maintenance of membrane integrity and normal morphology at 5 oC similarly to 17 oC extenders. There was no difference (p > 0.05) in the motility, membrane integrity and morphology for the substitution of egg yolk (PIGPEL5) for LDL (PIGPEL5Plus). In experiment 2, also there was no difference (p > 0.05) in motility, membrane integrity and morphology between extenders and type of container until 72 h. The conservation of semen on PIGPEL5 extender and commercial refrigerator (5 ºC) allowed patterns of sperm quality according recommended for AI.
Este estudo avaliou a qualidade do sêmen suíno preservado em diferentes temperaturas e meios de conservação no diluente PIGPEL5, utilizando gema de ovo como protetor externo de membrana, e no diluente PIGPEL5Plus, utilizando lipoproteína de baixa densidade (LDL) como protetor. No experimento 1, as doses de sêmen foram conservadas em refrigerador de sêmen a 5 e 17 C nos diluentes PIGPEL5 e PIGPEL5Plus e comparadas ao diluente BTS a 17 C. Já no experimento 2, foi comparada a conservação do sêmen nos diluentes PIGPEL5 e PIGPEL5Plus em geladeira convencional ou em refrigerador de sêmen a 5 ºC. Observou-se que o uso de diluidores com crioprotetor extracelular (PIGPEL5 e PIGPEL5Plus) apresentou maiores (p 0,05) resultados de motilidade com relação ao BTS até 48 h. Além do mais, o uso de crioprotetor extracelular foi benéfico para a manutenção da integridade e morfologia normais a temperatura de 5 ºC em níveis similares aos diluidores a 17 ºC. Não houve diferença (p > 0,05) na motilidade, integridade de membrana e morfologia para a substituição da gema de ovo (PIGPEL5) pela LDL (PIGPEL5Plus). No experimento 2, também não houve diferença na motilidade, integridade de membrana e morfologia espermática entre os diluentes e formas de acondicionamento testados até 72 h (p > 0,05). O acondicionamento do sêmen no diluente PIGPEL5 em geladeira doméstica (5 ºC) proporcionou padrõ
RESUMO
This study aim to evaluate the quality of boar semen stored at different temperatures and media on PIGPEL5 extender, using egg yolk as an external membrane protector, and on PIGPEL5Plus, containing low density lipoprotein (LDL) as protector. In the experiment 1, the semen doses were stored in a semen container at 5 and 17 C and the results were compared with semen stored at 17 C in BTS extender. In the experiment 2, the doses with the PIGPEL5 and PIGPEL5Plus extenders were stored in a commercial refrigerator and in semen container, both at 5 C. The use of extenders with extracellular cryoprotectant (PIGPEL5 e PIGPEL5Plus) showed higher (p 0.05) motility values in comparison to BTS until 48 h. Furthermore, the use of extracellular cryoprotectant was good to maintenance of membrane integrity and normal morphology at 5 oC similarly to 17 oC extenders. There was no difference (p > 0.05) in the motility, membrane integrity and morphology for the substitution of egg yolk (PIGPEL5) for LDL (PIGPEL5Plus). In experiment 2, also there was no difference (p > 0.05) in motility, membrane integrity and morphology between extenders and type of container until 72 h. The conservation of semen on PIGPEL5 extender and commercial refrigerator (5 ºC) allowed patterns of sperm quality according recommended for AI.
Este estudo avaliou a qualidade do sêmen suíno preservado em diferentes temperaturas e meios de conservação no diluente PIGPEL5, utilizando gema de ovo como protetor externo de membrana, e no diluente PIGPEL5Plus, utilizando lipoproteína de baixa densidade (LDL) como protetor. No experimento 1, as doses de sêmen foram conservadas em refrigerador de sêmen a 5 e 17 C nos diluentes PIGPEL5 e PIGPEL5Plus e comparadas ao diluente BTS a 17 C. Já no experimento 2, foi comparada a conservação do sêmen nos diluentes PIGPEL5 e PIGPEL5Plus em geladeira convencional ou em refrigerador de sêmen a 5 ºC. Observou-se que o uso de diluidores com crioprotetor extracelular (PIGPEL5 e PIGPEL5Plus) apresentou maiores (p 0,05) resultados de motilidade com relação ao BTS até 48 h. Além do mais, o uso de crioprotetor extracelular foi benéfico para a manutenção da integridade e morfologia normais a temperatura de 5 ºC em níveis similares aos diluidores a 17 ºC. Não houve diferença (p > 0,05) na motilidade, integridade de membrana e morfologia para a substituição da gema de ovo (PIGPEL5) pela LDL (PIGPEL5Plus). No experimento 2, também não houve diferença na motilidade, integridade de membrana e morfologia espermática entre os diluentes e formas de acondicionamento testados até 72 h (p > 0,05). O acondicionamento do sêmen no diluente PIGPEL5 em geladeira doméstica (5 ºC) proporcionou padrõ
RESUMO
The Nicotiana glauca is a native plant species from Argentina, but found all over South América, being used against headaches, rheumatism, injuries, ulcers, and so on. Researchers have considered it as having immunomodulation effect. This study was conducted to investigate the use of a aqueous extract of Nicotiana glauca Graham as an immunomodulator (adjuvant) of a Newcastle disease vaccine.. A total of 56 broilers were distributed into 4 experimental groups. Each one of them received 3 dosages of this vaccine with or without the addition of different concentrations of the extract Using hemmoaglutination inhibition techniques , the results have shown differences (P 0.05) in the third sera collection. An increase in the antibody titer with the inclusion of 5 mg/dosage of the extract (Treatment 3) as compared to 1 mg/dosage (Treatment 2) and 10 mg/dosage of the extract (Treatment 4) was observed, However, birds from Treatment 3 did not differ (P> 0.05) from Treatment 1. These results indicated that further investigations are required, including the use of cytotoxicity tests in vitro, to evaluate the immunomodulation effect of this extract. KEY WORDS: Immunomodulation effect, Nicotiana glauca Graham, vaccine.
A Nicotiana glauca Graham é uma espécie nativa da Argentina, bem distribuída na América do Sul, sendo empregada, popularmente, contra dores de cabeça, dores reumáticas, cicatrização de feridas e úlceras, entre outros. Pesquisas têm avaliado a sua ação na potencialização da resposta imune. Assim, com este estudo, buscou-se avaliar a ação de um extrato aquoso de Nicotiana glauca Graham como coadjuvante imunológico em uma vacina contra a doença de Newcastle (DNC). Utilizaram-se 56 frangos de corte, distribuídos em quatro grupos experimentais, que receberam três doses da vacina, com ou sem adição de diferentes quantidades do extrato. Os resultados sorológicos, obtidos através do teste de inibição da hemaglutinação, demonstraram diferença estatística (P 0,05) aos 60 dias de idade dos frangos, com incremento dos níveis de anticorpos contra a DNC, quando houve a inclusão de 5 mg/dose (Tratamento 3) do extrato, em relação à inclusão de 1 mg/dose (Tratamento 2) e 10 mg/dose (Tratamento 4), do mesmo extrato, porém sem diferir estatisticamente do controle (Tratamento 1). Estes resultados estimulam a realização de outros trabalhos, incluindo a realização do teste de citotoxicidade in vitro deste extrato, a fim de avaliar a sua ação efetiva como um coadjuvante imunológico. PALAVRAS-CHAVES: Coadjuvante imunológico, Nicotiana glauca Graham, vacina.
RESUMO
The Nicotiana glauca is a native plant species from Argentina, but found all over South América, being used against headaches, rheumatism, injuries, ulcers, and so on. Researchers have considered it as having immunomodulation effect. This study was conducted to investigate the use of a aqueous extract of Nicotiana glauca Graham as an immunomodulator (adjuvant) of a Newcastle disease vaccine.. A total of 56 broilers were distributed into 4 experimental groups. Each one of them received 3 dosages of this vaccine with or without the addition of different concentrations of the extract Using hemmoaglutination inhibition techniques , the results have shown differences (P 0.05) in the third sera collection. An increase in the antibody titer with the inclusion of 5 mg/dosage of the extract (Treatment 3) as compared to 1 mg/dosage (Treatment 2) and 10 mg/dosage of the extract (Treatment 4) was observed, However, birds from Treatment 3 did not differ (P> 0.05) from Treatment 1. These results indicated that further investigations are required, including the use of cytotoxicity tests in vitro, to evaluate the immunomodulation effect of this extract. KEY WORDS: Immunomodulation effect, Nicotiana glauca Graham, vaccine.
A Nicotiana glauca Graham é uma espécie nativa da Argentina, bem distribuída na América do Sul, sendo empregada, popularmente, contra dores de cabeça, dores reumáticas, cicatrização de feridas e úlceras, entre outros. Pesquisas têm avaliado a sua ação na potencialização da resposta imune. Assim, com este estudo, buscou-se avaliar a ação de um extrato aquoso de Nicotiana glauca Graham como coadjuvante imunológico em uma vacina contra a doença de Newcastle (DNC). Utilizaram-se 56 frangos de corte, distribuídos em quatro grupos experimentais, que receberam três doses da vacina, com ou sem adição de diferentes quantidades do extrato. Os resultados sorológicos, obtidos através do teste de inibição da hemaglutinação, demonstraram diferença estatística (P 0,05) aos 60 dias de idade dos frangos, com incremento dos níveis de anticorpos contra a DNC, quando houve a inclusão de 5 mg/dose (Tratamento 3) do extrato, em relação à inclusão de 1 mg/dose (Tratamento 2) e 10 mg/dose (Tratamento 4), do mesmo extrato, porém sem diferir estatisticamente do controle (Tratamento 1). Estes resultados estimulam a realização de outros trabalhos, incluindo a realização do teste de citotoxicidade in vitro deste extrato, a fim de avaliar a sua ação efetiva como um coadjuvante imunológico. PALAVRAS-CHAVES: Coadjuvante imunológico, Nicotiana glauca Graham, vacina.
RESUMO
O presente estudo teve como objetivo estimar a prevalência e determinar os principais fatores associadosà infecção pelo vírus da diarréia viral bovina (BVDV) no rebanho bovino dos municípios de Santa Vitóriado Palmar e Chuí, na região sul do estado do Rio Grande do Sul. Amostras de soro foram submetidas àprova de soroneutralização e, em cada propriedade avaliada, aplicou-se um questionário epidemiológicopara investigar fatores que poderiam estar associados à infecção. As amostras de soro foram coletadasem 85 propriedades, cujos animais apresentavam ou não sinais clínicos de infecção pelo BVDV. Das1.734 amostras de soro analisadas, 1.150 (66,32%) foram positivas com a detecção de bovinossorologicamente positivos em 70 (82,35%) propriedades. Dentre os fatores avaliados, exploração mista,criação extensiva, realização de ordenha mecânica, uso de inseminação artificial ou de inseminaçãoartificial associada à monta natural, uso de piquete de parição e ausência de assistência veterinária,apresentaram significância estatística (P<0,05) associada à soropositividade. Os resultados obtidosdemonstram a expressiva disseminação do BVDV no rebanho bovino dessa região do Rio Grande do Sul.
This study was performed in order to estimate the prevalence of bovine viral diarrhea virus (BVDV), andto determine the main factors related to the prevalence of the infection in cattle of Santa Vitória do Palmarand Chuí counties, in Rio Grande do Sul State. Sera were submitted to the serum neutralization test andan epidemiological questionnaire was filled out in each herd to investigate variables that could beassociated with this infection. The sera samples were collected in 85 farms, with or without clinical signsof BVDV infection. From 1.734 serum samples examined, 1.150 (66.32%) in 70 (82.35%) herds were positive.Variables that were identified as risk factors to seropositivity were mixed (dairy and beef) herds, extensive production, use of mechanical milking, use of artificial insemination or artificial insemination associated with natural service, use of the maternity unit at calving and absence of veterinarian assistance (P<0.05).The results demonstrate the expressive dissemination of the BVDV in cattle of this region in Rio Grande do Sul
Assuntos
Bovinos , Epidemiologia , Infecções por Flaviviridae/veterinária , Vírus da Diarreia Viral Bovina Tipo 1RESUMO
Despite recent technological advances in vaccine production, most vaccines depend on the association with adjuvant substances. In this study, propolis, which has been attracting the attention of researchers due to its bioactive properties, was evaluated as an immunological adjuvant. The association of 40mg/dose of an ethanolic extract of green propolis with an inactivated oil vaccine against bovine herpesvirus type 5 (BoHV-5), resulted in a significant increase (P<0.01) in the neutralizing antibody levels, comparing to the bovines that received the same vaccine without propolis. Besides, propolis increased the percentage of animals with high antibody titers (above 32). Phenolic compounds such as artepillin C (3,5-diprenyl-4-hydroxycinnamic acid) and the derivatives of cinnamic acid besides other flavonoid substances were abundant in the propolis extract used, and they could be the main substances with adjuvant action. The effect of the green propolis extract on the humoral immune response can be exploited in the development of new vaccines.
Assuntos
Adjuvantes Imunológicos/farmacologia , Doenças dos Bovinos/imunologia , Encefalite Viral/veterinária , Infecções por Herpesviridae/veterinária , Herpesvirus Bovino 5/imunologia , Vacinas contra Herpesvirus/imunologia , Meningoencefalite/veterinária , Própole/farmacologia , Animais , Anticorpos Antivirais/sangue , Bovinos , Doenças dos Bovinos/prevenção & controle , Doenças dos Bovinos/virologia , Encefalite Viral/imunologia , Encefalite Viral/prevenção & controle , Encefalite Viral/virologia , Feminino , Infecções por Herpesviridae/imunologia , Infecções por Herpesviridae/prevenção & controle , Infecções por Herpesviridae/virologia , Vacinas contra Herpesvirus/farmacologia , Imunização/métodos , Imunização/veterinária , Masculino , Meningoencefalite/imunologia , Meningoencefalite/prevenção & controle , Meningoencefalite/virologia , Testes de Neutralização/veterinária , Própole/imunologiaRESUMO
Despite recent technological advances in vaccine production, most the vaccines depend on the association with adjuvant substances. This work evaluated the adjuvant capacity of an ethanol extract of green propolis associated to inactivated Suid herpesvirus type 1 (SuHV-1) vaccine preparations. Mice inoculated with SuHV-1 vaccine plus aluminum hydroxide and 5mg/dose of propolis extract presented higher levels of antibodies when compared to animals that received the same vaccine without propolis. The use of SuHV-1 vaccine with propolis extract alone did not induce significant levels of antibodies, however it was able to increase the cellular immune response, evidenced by the increase in the expression of mRNA to IFN-gamma. Besides, propolis increased the percentage of protected animals against challenge with a lethal dose of SuHV-1. The effect of green propolis extract on the humoral and cellular immune responses may be exploited for the development of effective vaccines.
Assuntos
Adjuvantes Imunológicos , Formação de Anticorpos/efeitos dos fármacos , Herpesvirus Suídeo 1/imunologia , Imunidade Celular/efeitos dos fármacos , Própole/farmacologia , Animais , Eletroforese em Gel de Ágar , Etanol , Feminino , Imunização , Interferon gama/biossíntese , Camundongos , Camundongos Endogâmicos BALB C , Testes de Neutralização , Pseudorraiva/imunologia , Pseudorraiva/prevenção & controle , RNA Mensageiro/análise , RNA Mensageiro/biossíntese , SolventesRESUMO
This study was performed in order to estimate the prevalence of bovine viral diarrhea virus (BVDV), and to determine the main factors related to the prevalence of the infection in cattle of Santa Vitória do Palmar and Chuí counties, in Rio Grande do Sul State. Sera were submitted to the serum neutralization test and an epidemiological questionnaire was filled out in each herd to investigate variables that could be associated with this infection. The sera samples were collected in 85 farms, with or without clinical signs of BVDV infection. From 1.734 serum samples examined, 1.150 (66.32%) in 70 (82.35%) herds were positive. Variables that were identified as risk factors to seropositivity were mixed (dairy and beef) herds, extensive production, use of mechanical milking, use of artificial insemination or artificial insemination associated with natural service, use of the maternity unit at calving and absence of veterinarian assistance (P 0.05). The results demonstrate the expressive dissemination of the BVDV in cattle of this region in Rio Grande do Sul.
O presente estudo teve como objetivo estimar a prevalência e determinar os principais fatores associados à infecção pelo vírus da diarréia viral bovina (BVDV) no rebanho bovino dos municípios de Santa Vitória do Palmar e Chuí, na região sul do estado do Rio Grande do Sul. Amostras de soro foram submetidas à prova de soroneutralização e, em cada propriedade avaliada, aplicou-se um questionário epidemiológico para investigar fatores que poderiam estar associados à infecção. As amostras de soro foram coletadas em 85 propriedades, cujos animais apresentavam ou não sinais clínicos de infecção pelo BVDV. Das 1.734 amostras de soro analisadas, 1.150 (66,32%) foram positivas com a detecção de bovinos sorologicamente positivos em 70 (82,35%) propriedades. Dentre os fatores avaliados, exploração mista, criação extensiva, realização de ordenha mecânica, uso de inseminação artificial ou de inseminação artificial associada à monta natural, uso de piquete de parição e ausência de assistência veterinária, apresentaram significância estatística (p 0,05) associada à soropositividade. Os resultados obtidos demonstram a expressiva disseminação do BVDV no rebanho bovino dessa região do Rio Grande do Sul.
RESUMO
The present study describes the evaluation of a filter paper blood sampling technique for assessment of the level of antibodies against the Newcastle disease virus (NDV) by hemagglutination inhibition (HI) test. Blood samples were collected from ninety eigth chickens with a known history of vaccination against NDV and analyzed by HI method. The blood was impregnated onto Whatman no. 1 filter paper with 3cm2 and also collected in tubes for obtaining serum. The papers were stored at room temperature and tested within fourty five days. The resulting sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value of the filter paper HI compared to serum HI was 89%, 73%, 76% and 87%, respectively. It was found index precision of the 80% and the correlation coefficient r = 0.81%. The overall average geometrical titer of antibodies was 33.1 and 33.6 in eluates and in sera, respectively. Association between the two methods was found to be highly significant (p 0.001) when analyzed by Fishers test. The results indicate the potential use of filter paper blood sampling technique as an alternative to serum for detection of the antibodies against NDV. KEY-WORDS: Chicken, hemagglutination inhibition, serology.
O presente trabalho descreve a utilização de sangue total em papel-filtro para avaliação dos níveis de anticorpos específicos contra o vírus da doença de Newcastle (NDV) através da técnica de inibição da hemaglutinação (HI). Coletaram-se e analisaram-se por HI amostras de sangue de noventa e oito galinhas, com um histórico conhecido de vacinação contra o NDV HI. O sangue foi impregnado em papel-filtro Wathman n 1 com 3cm2 e também coletado em tubos para a obtenção de soro. Armazenaram-se os papéis à temperatura ambiente e procedeu-se a sua análise num período de até quarenta e cinco dias. A sensibilidade, a es¬pecificidade, o valor preditivo positivo e o valor preditivo negativo do HI mediante o uso de papel-filtro, comparado com o HI em que se utilizou soro, foram de 89%, 73%, 76% e 87 %, respectivamente. Detectaram-se um índice de pre¬cisão de 80% e um coeficiente de correlação r = 0,81%. O título médio geométrico de anticorpos foi 33,1% e 33,6 para eluídos de papel-filtro e os soros, respectivamente. A asso¬ciação entre os dois métodos foi altamente significativa (p 0.001) quando analisada pelo teste de Fisher. Os resultados indicam o potencial da utilização do sangue em papel-filtro como uma alternativa ao soro para detecção de anticorpos contra o NDV. PALAVRAS-CHAVES: Galinha, inibição da hemaglutinação, sorologia.
RESUMO
The present study describes the evaluation of a filter paper blood sampling technique for assessment of the level of antibodies against the Newcastle disease virus (NDV) by hemagglutination inhibition (HI) test. Blood samples were collected from ninety eigth chickens with a known history of vaccination against NDV and analyzed by HI method. The blood was impregnated onto Whatman no. 1 filter paper with 3cm2 and also collected in tubes for obtaining serum. The papers were stored at room temperature and tested within fourty five days. The resulting sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value of the filter paper HI compared to serum HI was 89%, 73%, 76% and 87%, respectively. It was found index precision of the 80% and the correlation coefficient r = 0.81%. The overall average geometrical titer of antibodies was 33.1 and 33.6 in eluates and in sera, respectively. Association between the two methods was found to be highly significant (p 0.001) when analyzed by Fishers test. The results indicate the potential use of filter paper blood sampling technique as an alternative to serum for detection of the antibodies against NDV. KEY-WORDS: Chicken, hemagglutination inhibition, serology.
O presente trabalho descreve a utilização de sangue total em papel-filtro para avaliação dos níveis de anticorpos específicos contra o vírus da doença de Newcastle (NDV) através da técnica de inibição da hemaglutinação (HI). Coletaram-se e analisaram-se por HI amostras de sangue de noventa e oito galinhas, com um histórico conhecido de vacinação contra o NDV HI. O sangue foi impregnado em papel-filtro Wathman n 1 com 3cm2 e também coletado em tubos para a obtenção de soro. Armazenaram-se os papéis à temperatura ambiente e procedeu-se a sua análise num período de até quarenta e cinco dias. A sensibilidade, a es¬pecificidade, o valor preditivo positivo e o valor preditivo negativo do HI mediante o uso de papel-filtro, comparado com o HI em que se utilizou soro, foram de 89%, 73%, 76% e 87 %, respectivamente. Detectaram-se um índice de pre¬cisão de 80% e um coeficiente de correlação r = 0,81%. O título médio geométrico de anticorpos foi 33,1% e 33,6 para eluídos de papel-filtro e os soros, respectivamente. A asso¬ciação entre os dois métodos foi altamente significativa (p 0.001) quando analisada pelo teste de Fisher. Os resultados indicam o potencial da utilização do sangue em papel-filtro como uma alternativa ao soro para detecção de anticorpos contra o NDV. PALAVRAS-CHAVES: Galinha, inibição da hemaglutinação, sorologia.
RESUMO
Quatro vacinas inativadas, produzidas com uma amostra do herpesvírus bovino tipo 5 (BHV-5) isolada de um surto de meningoencefalite no Rio Grande do Sul, foram administradas em quarenta bovinos visando a avaliar a sua capacidade imunogênica. As vacinas A e B foram formuladas com adjuvante oleoso e as vacinas C e D com hidróxido de alumínio [Al 2(OH)3]. O título da suspensäo viral utilizada nas vacinas foi de 10 elevado a 7,5 DICT 50 / 2,5µL. Immunostin, um imunoestimulante derivado de Mycobacterium, foi adicionado às vacinas B e D. Após receberem três doses de vacina com intervalos de 30 dias, somente os animais dos grupos A (90 por cento) e B (100 por cento) desenvolveram uma resposta sorológica significativa. As respostas sorológicas às vacinas A e B foram ajustadas por regressäo linear, demonstrando que os títulos de anticorpos aumentaram significativamente à medida que foram repetindo-se as aplicaçöes das vacinas. O Immunostin potencializou a capacidade imunogênica da vacina D mas, aparentemente, näo foi eficiente na vacina B. Concluiu-se que as vacinas inativadas, produzidas a partir de suspensöes virais de BHV-5 com títulos altos e com adjuvante oleoso induzem a produçäo de níveis consideráveis de anticorpos neutralizantes em mais de 80 por cento dos animais vacinados após a terceira dose.
Assuntos
Animais , Bovinos , Adjuvantes Imunológicos , Doenças dos Bovinos/imunologia , Herpesvirus Bovino 1/imunologia , Infecções por Herpesviridae/imunologia , Infecções por Herpesviridae/veterinária , Vacinas/imunologiaRESUMO
Four inactivated vaccines formulated with a bovine herpesvirus tipe 5 (BHV-5) strain isolated from an outbreak of bovine meningoencephalitis in Rio Grande do Sul, Brazil, were administred in forty cattle as to evaluate its immunogenicity. The vaccines A and B used mineral oil and vaccines C and D used aluminum hydroxide (Al2(OH)3) as adjuvant. The titer of the viral suspension used in all vaccines was 10(7.50) TCID50 / 25 mul. Immunostin®, a Mycobacterium derived immunostimulant, was added to vaccines B and D. After receiving three doses of vaccines, at 30 days intervals, only the animals of the groups A (90%) and B (100%) developed significant antibody titers. The responses to these vaccines were adjusted to linear regression, showing that the antiboby titers increased progressively with the number of immunizations. The use of Immunostin® enhanced the immunogenicity of the vaccine with aluminum hidroxide but was ineffective when associated with oil adjuvants. It was concluded that inactivated BHV-5 vaccines prepared with high titer viral suspensions and oil adjuvants induce adequate levels of antibodies in a high proportion of the vaccinees after the third dose.
Quatro vacinas inativadas, produzidas com uma amostra do herpesvírus bovino tipo 5 ( BHV-5) isolada de um surto de meningoencefalite no Rio Grande do Sul, foram administradas em quarenta bovinos visando a avaliar a sua capacidade imunogênica. As vacinas A e B foram formuladas com adjuvante oleoso e as vacinas C e D com hidróxido de alumínio [ Al2 (OH)3] . O título da suspensão viral utilizada nas vacinas foi de 10(7,5) DICT 50 / 25miL. Immunostin®, um imunoestimulante derivado de Mycobacterium, foi adicionado às vacinas B e D. Após receberem três doses de vacina com intervalos de 30 dias, somente os animais dos grupos A (90%) e B (100%) desenvolveram uma resposta sorológica significativa. As respostas sorológicas às vacinas A e B foram ajustadas por regressão linear, demonstrando que os títulos de anticorpos aumentaram significativamente à medida que foram repetindo-se as aplicações das vacinas. O Immunostin® potencializou a capacidade imunogênica da vacina D mas, aparentemente, não foi eficiente na vacina B. Concluiu-se que as vacinas inativadas, produzidas a partir de suspensões virais de BHV-5 com títulos altos e com adjuvante oleoso induzem a produção de níveis consideráveis de anticorpos neutralizantes em mais de 80% dos animais vacinados após a terceira dose.
RESUMO
Four inactivated vaccines formulated with a bovine herpesvirus tipe 5 (BHV-5) strain isolated from an outbreak of bovine meningoencephalitis in Rio Grande do Sul, Brazil, were administred in forty cattle as to evaluate its immunogenicity. The vaccines A and B used mineral oil and vaccines C and D used aluminum hydroxide (Al2(OH)3) as adjuvant. The titer of the viral suspension used in all vaccines was 10(7.50) TCID50 / 25 mul. Immunostin®, a Mycobacterium derived immunostimulant, was added to vaccines B and D. After receiving three doses of vaccines, at 30 days intervals, only the animals of the groups A (90%) and B (100%) developed significant antibody titers. The responses to these vaccines were adjusted to linear regression, showing that the antiboby titers increased progressively with the number of immunizations. The use of Immunostin® enhanced the immunogenicity of the vaccine with aluminum hidroxide but was ineffective when associated with oil adjuvants. It was concluded that inactivated BHV-5 vaccines prepared with high titer viral suspensions and oil adjuvants induce adequate levels of antibodies in a high proportion of the vaccinees after the third dose.
Quatro vacinas inativadas, produzidas com uma amostra do herpesvírus bovino tipo 5 ( BHV-5) isolada de um surto de meningoencefalite no Rio Grande do Sul, foram administradas em quarenta bovinos visando a avaliar a sua capacidade imunogênica. As vacinas A e B foram formuladas com adjuvante oleoso e as vacinas C e D com hidróxido de alumínio [ Al2 (OH)3] . O título da suspensão viral utilizada nas vacinas foi de 10(7,5) DICT 50 / 25miL. Immunostin®, um imunoestimulante derivado de Mycobacterium, foi adicionado às vacinas B e D. Após receberem três doses de vacina com intervalos de 30 dias, somente os animais dos grupos A (90%) e B (100%) desenvolveram uma resposta sorológica significativa. As respostas sorológicas às vacinas A e B foram ajustadas por regressão linear, demonstrando que os títulos de anticorpos aumentaram significativamente à medida que foram repetindo-se as aplicações das vacinas. O Immunostin® potencializou a capacidade imunogênica da vacina D mas, aparentemente, não foi eficiente na vacina B. Concluiu-se que as vacinas inativadas, produzidas a partir de suspensões virais de BHV-5 com títulos altos e com adjuvante oleoso induzem a produção de níveis consideráveis de anticorpos neutralizantes em mais de 80% dos animais vacinados após a terceira dose.
RESUMO
Foram avaliadas três alternativas de controle da infecçäo pelo vírus da Leucose Bovina: a) eliminaçäo dos animais soropositivos; b) segregaçäo dos animais soropositivos; c) manejo misto dos animais, com adoçäo de medidas recomendadas para evitar a transmissäo do vírus. O primeiro teste sorológico realizado em oito propriedades leiteiras revelou a presença da infecçäo com índices que variaram entre 2,5 porcento (1/40) e 58,1 porcento (18/31).Duas propriedades com baixo nível de infecçäo inicial (<10 porcento) optaram pela eliminaçäo total dos animais positivos. Uma dessas propriedades apresentou resultados imediatos, com taxa de incidência nula (0/39) durante o período de doze meses, enquanto a outra, que näo eliminou prontamente o animal positivo, apresentou incidência de 20,0 porcento (3/15) no mesmo período. A eliminaçäo dos animais reagentes, nas propriedades que apresentaram um baixo nível de infecçäo, demonstrou ser uma forma eficiente para a erradicaçäo da infecçäo. A segregaçäo dos animais soropositivos, com a formaçäo de dois rebanhos, foi implantada em uma propriedade, onde apenas um animal soroconverteu durante o experimento, observando-se uma incidência de 4,5 porcento (1/22) ao final do estudo. As propriedades que adotaram o programa de controle através do manejo misto de animais infectados e näo infectados apresentaram resultados muito variados, demonstrando índices de soroconversäo entre 2,6 porcento (1/38) a 50,0 porcento (4/8), indicando que esse tipo de controle necessitaria de um tempo maior para alcançar os objetivos. Foi possível a obtençäo de descendentes soronegativos através da substituiçäo ou inativaçäo pelo calor do leite materno administrado aos terneiros. A reduçäo dos níveis de infecçäo em um rebanho, sem a necessidade do descarte imediato os animais infectados, é possível a partir da substituiçäo de ventres pelas novilhas da própria granja.