RESUMO
UNLABELLED: A rapid quantitative kinetic chromogenic test in an automated portable test system has been developed for in-process and end-product determination of bacterial endotoxins in water using the Limulus amebocyte lysate. The aim of this work was to validate the method for (18)F-FDG, (99m)Tc, and the lyophilized reagents methylene diphosphonic acid (MDP) and pyrophosphate for labeling with (99m)Tc radiopharmaceuticals with no interfering factors. METHODS: Experiments were performed on 3 consecutive batches of (18)F-FDG, (99m)Tc, MDP, and pyrophosphate produced at the Nuclear Energy and Research Institute of São Paulo, Brazil, using a portable test system. The maximum valid dilution (=500) was calculated to establish the extent of dilution to avoid interfering test conditions. RESULTS: Better results were obtained above a 1:5 dilution factor for (18)F-FDG and (99m)Tc, 1:20 for MDP, and 1:100 for pyrophosphate. The requirements of the test were satisfied (R ≤ 0.980, recovery of product positive control between 50% and 200%, and coefficient variation of samples < 25%), and the endotoxin concentration was lower than the lowest concentration of the standard curve (0.05 endotoxin unit mL(-1)) and therefore less than the established limit in pharmacopoeias. CONCLUSION: The portable test system is a rapid, simple, and accurate technique using the quantitative kinetic chromogenic method for bacterial endotoxin determination. For this reason, the test is practical for radiopharmaceutical uses and tends to be the method of choice for the pyrogen test. For (18)F-FDG, (99m)Tc, MDP, and pyrophosphate, the validation was successfully performed.
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Difosfatos/metabolismo , Difosfonatos/metabolismo , Endotoxinas/metabolismo , Fluordesoxiglucose F18/metabolismo , Marcação por Isótopo/métodos , Compostos de Organotecnécio/metabolismo , Animais , Liofilização , Caranguejos Ferradura/microbiologia , Indicadores e Reagentes/metabolismo , Cinética , Compostos Radiofarmacêuticos/metabolismo , Reprodutibilidade dos TestesRESUMO
The aim of the present study was to investigate the long-term effectiveness of and tolerance to Yttrium-90 and Samarium-153-particulate hydroxyapatite radiation synovectomy in patients with rheumatoid arthritis (RA) and chronic knee synovitis. Eight-four patients (90 knees) with chronic knee synovitis and RA (according to the American College of Rheumatology criteria) participated in a controlled, double-blinded trial. Patients were randomized to receive an intra-articular injection with either 5 mCi Yttrium-90 plus 40 mg of triamcinolone hexacetonide (Y/TH Group), 15 mCi Samarium-153 hydroxyapatite plus 40 mg of triamcinolone hexacetonide (Sm/TH Group), or 40 mg triamcinolone hexacetonide alone (Control Group). Blinded examination at baseline, 1, 4, 12, 32, and 48 weeks post-intervention included a visual analog scale for joint pain and swelling, morning stiffness, range of motion, knee circumference, Likert scale, percentage of improvement, Stanford Health Assessment Questionnaire, Lequesne index, use of non-steroidal anti-inflammatory drugs and corticosteroids, events and adverse effects, calls to the physician, and hospital visits. There were three withdrawals prior to the injections. Regarding the pain, there was a significantly better response in the Y/TH Group versus the Sm/TH Group at T1 (p = 0.025) and versus TH alone at T48 (p = 0.026). The Sm/TH group had more adverse effects (p = 0.042), but these were mild and transitory. For the pain parameter alone, Yttrium-90 radiosynovectomy associated to TH proved superior to Samarium-153 hydroxyapatite radiosynovectomy associated to TH at T1 and to synovectomy with TH at T48. No other statistically significant inter-group differences were detected.
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Artrite Reumatoide/metabolismo , Durapatita/química , Articulação do Joelho/metabolismo , Radioisótopos/farmacologia , Samário/farmacologia , Sinovite/metabolismo , Radioisótopos de Ítrio/farmacologia , Doença Crônica , Método Duplo-Cego , Feminino , Humanos , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Inquéritos e Questionários , Sinovite/patologia , Triancinolona Acetonida/análogos & derivados , Triancinolona Acetonida/farmacologiaRESUMO
The labeling with 177Lu and quality control procedures to produced DOTA (1,4,7,10-N,N´,N´´,N´´´, tetraazaciclododecane tetraacetic acid) coupled octreotate labeled peptide was evaluated. The labeling was performed using 30µg of DOTA-Tyr3-octreotate and 500 and 1110 MBq of 177Lu, buffered with sodium acetate/acetic acid 0.4M pH 4.5 for 20 minutes at 100ºC. The radiochemical purity was determined by ITLC na HPLC. Biological distribution studies were performed on Nude mices with tumours (AR42J rat pancreatic tumour cells) by invasive method. The stability of the 177Lu-DOTA-Tyr3-octreotate was followed by 7 days, and in both labeling procedures, the radiochemical purity were superior than 98 percent. Biodistribution studies showed fast blood clearance and the kidneys were the critical organs. The uptake in tumour were significant after 24 hours and the labeled peptide showed high in vivo stability.
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Camundongos , Animais , Compostos Organometálicos/farmacocinética , Distribuição Tecidual , Estabilidade de Medicamentos , Compostos Radiofarmacêuticos/farmacocinética , Controle de Qualidade , Cromatografia Líquida de Alta Pressão , Células Tumorais Cultivadas , Lutécio/farmacocinética , Octreotida/farmacocinética , Radioisótopos/farmacocinética , Camundongos Nus , Somatostatina/análogos & derivados , Taxa de Depuração MetabólicaRESUMO
Lanreotide and Octreotide are cyclic octapeptide analogues of somatostatin that were labeled with the radioisotope Technetium-99m for use in diagnostic nuclear medicine. The peptides were processed in a tartrate/phthalate buffer solution containing reducing agent. The purpose of this investigation was to optimize direct labeling by varying some parameters, and to evaluate radiochemical stability and biodistribution in animals. The marked peptides were obtained with high labeling efficiency and no need for subsequent purification. best radiolabeling results corresponded to a molar ratio of SnCl2.H2O/peptide of 4.5. `ANTPOT. 99mTc'-peptides were radiochemically stable for 6 hours...
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Medicina Nuclear , Octreotida , Peptídeos , Tecnécio , Radioquímica , SomatostatinaRESUMO
The preparation of 99mTc labeled radiopharmaceuticals depends on the reduction of the technetium pertechnetate, commonly by stannous chloride (SnCl2). The determination of the Sn+2 contents in the lyophilized preparations represents an important quality control procedure that may be applied to the process and to the final product. The objective os this work is the optimization of an spectrophotometric assay to the determination os Sn+2 contents in a citrate-stannous lyophilized kit for 99mTc labeling. The spectrophotometric methodology employed is based in the colour development when Sn+2 reacts with sodium molibdate in the presence of potasium thiocianate in chloridric medium. The colourfull reaction studied showed high stability after 60 minutes of the mixtures preparation. The sequence of reagents introduction in the reaction mixture was determinant to the assay. The molibdenium-stannous-tiocianate sequence produces calibration curves with good correlations (R2 > 0.99). The concentrations of the molibdenium solution was also studied, in order to determine a ideal concentration for the Sn+2 range. The spectrophotometric method studied was usefull to the determination of Sn+2 content in different batches of citrate-stannous preparations. The method was fast and easy and can be applied to different stages of the production process, in order to guarantee the content of Sn+2 in the preparations.
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Espectrofotometria , Kit de Reagentes para Diagnóstico , Liofilização , TecnécioRESUMO
Some peptides are naturally occuring inflammatory mediators which specifically bind to receptors abundantly present in the area of inflammation, and owing to their small size, they rapidly clear from all non-target tissues. ForNleLFNleYK is a synthetic chemotactic peptide with high affinity to receptors on the white blood cell membranes. This hexapeptide contains a tyrosine residue susceptible to iodination by oxidative eletrophilic substitution - direct labeling. The aim of this study was the radioiodination of ForNleLFNleYK using the direct method (chloramine T) and its in vivo stability evaluation. The labeled compound was obtained in a short reaction time with high radiochemical purity (96.8 ± 0.84 por ciento) and remained stable over 48 hours when stored at low temperature. Biological distribution studies showed an uptake in inflammated tight significantly greater than the normal tight (p < 0.05, Student t test), and some in vivo dehalogenation of the compound.
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Fatores Quimiotáticos , Inflamação , Peptídeos , Células Sanguíneas , Tiroxina/efeitos da radiaçãoRESUMO
Brain SPECT tracers, such as [123I]-labeled amines and technetium-labeled compounds, offer high resolution SPECT images after intravenous injection using conventional rotating gamma cameras. The aim of this study was to optimize labeling conditions to produce N-isopropyl-p-[123I]-iodoamphetamine) and to propose an easy, rapid and inexpensive chromatography quality control procedure to determine radiochemical purity. [123I]-IMP was produced by isotopic exchange in presence of Cu(II) as catalyst and an excess of ascorbic acid as reducing agent. In order to obtain good radiochemical yield in a minimal reaction time, labeling reaction parameters were evaluated, with the study of different reaction temperatures and time, mass of ascorbic acid, reaction pH and [131I]NaI/IMP ratio. [123I]-IMP was obtained with radiochemical yield greater than 97 per cent using 3 mg of IMP.HCl, 3.15 mol of Cu++ and an excess of ascorbic acid in acid medium (pH 2.0) at 175oC and 30 minutes. Radiochemical purity was determined by paper chromatography with high resolution. Biological distribution studies in animals showed high and persistent cerebral uptake and in vivo stability of the compound
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Humanos , Quimioterapia do Câncer por Perfusão Regional , Iofetamina , Circulação Cerebrovascular/efeitos da radiação , Rotulagem de MedicamentosRESUMO
O radiofármaco 20l TlCl é usado em Medicina Nuclear para visualizaçäo da perfusäo miocárdica. A soluçäo de 20lTlCl, obtida no IPEN-CNEN/SP, pelo método direto de preparaçäo de 20lTl irradiando mercúrio natural com prótons, foi submetida a vários controles de qualidade para verificaçäo do seu grau de pureza e possibilidade de uso médico. Investigou-se a presença dos radionuclídeos 200Tl, 20lTl e 202Tl; a forma química do radionuclídeo de interesse (20lTl+l), a concentraçäo de hidrazina, de mercúrio e de fosfato; a esterilidade e a ausência de pirogênios; a distribuiçäo biológica nos órgäos de ratos Wistar e sua toxicidade. Verificou-se que a soluçäo de cloreto de tálio obtida era sob forma de cloreto taloso e que pode fornecer boa imagem do coraçäo de animais, mas que devido à contaminaçäo de 20lTl com 200Tl só poderá ser usada no homem quando for utilizado o 202Hg (95// a 98// enriquecido) como alvo de irradiaçäo
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Humanos , Animais , Ratos , Tálio , Controle de Qualidade , Ratos EndogâmicosRESUMO
A partir do fluido ascítico de camundongo, contendo o anticorpo monoclonal anti-CEA 4C11, subclasse IgG2a, doado pelo Instituto Ludwig/Brasil, desenvolveu-se procedimentos imunoquímicos objetivando a: separaçäo da imunoglobulina IgG2a, clivagem pepsínica da IgG2a para obtençäo de fragmentos bivalentes e monitoraçäo por eletroforese de gel de poliacrilamida na presença de dodecil sulfato de sódio, como uma metodologia preliminar indispensável ao alcance de um reagente imunológico adequado ao uso clínico
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Animais , Camundongos , Imunoglobulina G/isolamento & purificação , Anticorpos Monoclonais/isolamento & purificação , Eletroforese em Gel de Poliacrilamida , Camundongos Endogâmicos BALB C , Química FarmacêuticaRESUMO
O objetivo deste estudo é a análise de um sistema adequado para a iodaçäo de anticorpos monoclonais, rápido, simples, eficiente e reprodutivo, próprio aos laboratórios radiofarmacêuticos. É importante lembrar que os anticorpos säo moléculas bioquímicas sensíveis, sujeitas durante a iodaçäo à perda da atividade que é essencial ao seu modo de açäo, especialmente a habilidade de ligaçäo específica ao antígeno. O advento de agentes de iodaçäo em fase sólida, conduziu a uma série de técnicas de iodaçäo, branda, útil oara marcaçäo de material biológico sensível. O agente mais largamente usado é o Iodogen (1,3,4,6 tetracloro 3a,6a difenilglicoluril). Anti-CEA 4C IgG2a,K (preparado no Instituto Ludwig de Pesquisa sobre o Câncer-Säo Paulo-Brasil) é usado, após a purificaçäo em Proteína A-Sepharose, como modelo para avaliar a metodologia do Iodogen. Elaborou-se um sistema de cromatografia miniaturizada também rápido, simples, eficiente para determinar a eficiência de marcaçäo, incorporaçäo do iodo na imunoglobulina e a pureza radioquímica do 131I-anti-CEA
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Anticorpos Monoclonais/efeitos da radiação , Radioisótopos do IodoRESUMO
O ácido o-iodohippurico (hippuran) marcado com radionuclídeo do iodo é um dos radiofármacos usado com maior frequência para avaliar a funçäo renal. Preparam-se conjuntos de reativos, do hippuran, para marcar com 131I. O conjunto de reativo consta de dois frascos contendo: 1) 120mg de ácido o-iodohippúrico e 2 µg de CuCl2 em 2 mL, pH = 4,6 - 4,9. 2) Soluçäo tampäo fosfato EDTA pH = 6,0. Adicionaram-se 0,1-0,2mL de uma soluçäo de Na131I no frasco 1 levando-o em banho maria (100ºC) durante 30 minutos. Após esfriamento adiconaram-se o,5 mL de soluçäo 2 a fim de acertar o pH a 6,0. Realizaram-se controle de pureza radioquímica em papel Whatman 3 MM (6,5 x 1cm) em clorofármio a ácido acético (90:10) como solvente. Os rendimentos da pureza radioquímica foram 98,7 e 97,7// no primeiro e 15§ dia, respectivamente, após a marcaçäo. O conjunto de reativo de hipuran foi conservado a 4ºC durante 60 dias, neste período de tempo realizaram-se determinaçöes da pureza radioquímica, verificando que o fármaco manteve-se estável apresentando um alto rendimento de marcaçäo. Este produto possue características adequadas para ser formulado em forma líquida, para marcaçäo "in situ" com radioisótopos de meia-vida curta (123I)
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Ácido Iodoipúrico/síntese química , Radioisótopos do Iodo , Cromatografia em Papel , MétodosRESUMO
Este trabalho apresenta a preparaçäo de Dextran-500, sob forma de Conjunto de Reativo Liofilizado, para ser marcado com Tecnécio-99m, utilizado em Medicina Nuclear para estudos do sistem linfático. Cada frasco contendo 100 mg de Dextram-500 e 1,5 mg de Cloreto Estanoso foi submetido a análises cromatográficas em ITLC para determinaçäo da pureza radioquímica e estabilidade do produto. Realizaram-se estudos da biodistribuiçäo em ratos e avaliaçäo clínica em humanos. Os resultados obtidos permitiram incorporar a formulaçäo de Dextran-500, como agente rotineiro, ideal para linfocintilografia radioisotópica
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Humanos , Animais , Ratos , Dextranos , Pertecnetato Tc 99m de Sódio , Sistema Linfático , Ratos EndogâmicosRESUMO
O uso de radioisótopos com alta atividade específica é de grande importância nos estudos de distribuiçäo de substâncias radioativas em seres vivos. Nos países que possuem reatores de baixo fluxo de nêutrons, a produçäo de cobre-64 com alta atividade específica é realizada utilizando-se o processo de ruptura de ligaçöes químicas induzidas por transformaçöes nucleares (n, lambida) conhecida como processo de Szilard-Chalmers. Neste trabalho, realizaram-se experimentos irradiando o composto bis-[N-benzoil-fenilhidroxilaminato]cobre(II) no Reator Nuclear 'IEA-R1, em fluxo de nêutrons têrmicos de 5x10**12n/cm2s., utilizando-se amostras sem e com tratamento térmico antes e/ou depois da irradiaçäo. Quando se irradiam amostras sem pré-aquecimento e com recozimento térmico por 6,5 horas obteve-se uma atividade específica em torno de 3.900 MBq/mg Cu, 21 hs após a irradiaçäo. Os resultados obtidos neste trabalho, mostram ser este composto viável à obtençäo de cobre-64, com alta atividade específica. A sua aplicabilidade dependerá da otimizaçäo do método e da preparaçäo do radiocobre na forma adequada para uso médico
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Radioisótopos de Cobre , Química FarmacêuticaRESUMO
Fêz-se um estudo comparativo entre os anestésicos éter etílico e uretana, em ratos (Wistar). Observou-se uma variaçäo significativa nos resultados apresentados, quando investigados radiofármacos para vias renais. Com uretana, a captaçäo renal aumenta progressivamente em virtude da inibiçäo da filtraçäo renal e esta começa a ser restabelecida com a eliminaçäo do efeito da anestesia. Utilizando-se éter etílico observa-se que o radiofármaco é eliminado rapidamente dos rins (filtraçäo tubular ou glomerular), evidenciando a preservaçäo da funçäo renal
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Animais , Ratos , Uretana/farmacologia , Rim/efeitos dos fármacos , Éter/farmacologia , Anestésicos/farmacologia , Biomarcadores , Ratos EndogâmicosRESUMO
Estudou-se o comportamento biológico da IMP-131I injetando-se o radiofármaco, por via endovenosa, em ratos. A captaçäo no cérebro e pulmäo foi rápida, aos 5 min. e manteve-se constante de 15 até 240min. No fígado a captaçäo foi mais lenta que nos demais órgäos, atingindo o pico máximo aos 60 min. Na medula espinhal observou-se uma captaçäo maior entre 15 e 60 min. e um declínio aos 240 min. e 24 horas. No estudo da correlaçäo com a medula espinhal verificou-se apenas uma captaçäo maior no pulmäo aos 5 min. com um rápido descréscimo após 15 min. A estabilidade do produto durante 12 dias foi de 94,12// a 4ºC e à temperatura ambiente a IMP-131I pode ser usada até o 7§ dia quando a percentagem de pureza radioquímica é de 93,07//
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Animais , Ratos , Medula Espinal/metabolismo , Anfetaminas/farmacocinética , Estabilidade de Medicamentos , Ratos EndogâmicosRESUMO
Prepararam-se conjuntos de reativos liofilizados do ácido trimetil iodoacetanilido iminodiacético (IODOFENIN) para marcar com 99mTc, contendo em cada frasco 20 mg de iodofenin 0,2 mg de SnCl2.2H2O, pH5,5. Realizaram-se controles de qualidade radioquímico e biológico. No controle de pureza radioquímica analisaram-se os seguintes parâmetros: a) volume de 99mTc(1,3 e 5 mL), b) atividade de 99mTc (37, 370, 1110 e 1850 MBq) e c) tempo de estocagem do conjunto de reativo (1, 3, 6 e 12 meses). Os resultados demonstraram que o produto apresenta uma pureza radioquímica de 95-99// nos parâmetros estudados, com uma estabilidade de 12 meses para seu uso. Utilizaram-se ratos (Wistar) de peso médio 200 g para avaliar o comportamento biológico. Neste estudo observou-se uma captaçäo de 67// pelo fígado, aos 5 minutos decrescendo em 2 horas e apresentando no decorrer do metabolismo uma alta captaçäo gastro-intestinal (98//). Na bilis, o produto manteve a sua integridade (93//) até 20 minutos após sua eliminaçäo
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Animais , Ratos , Iminoácidos/farmacocinética , Controle de Qualidade , Bioensaio , Cromatografia em Papel , Compostos de Organotecnécio/farmacocinética , Ratos EndogâmicosRESUMO
Estudaram-se sistemas cromatográficos em papel com diferentes solventes a fim de determinar o melhor método para o controle radioquímico rotineiro da MIBG-131I produzido no IPEN-CNEN/SP. Compararam-se os resultados com aqueles obtidos por eletroforese realizada em tampäo acetato, pH = 4,5, 350V, durante 40 min. Estudou-se também a estabilidade do produto marcado, estocado a 4ºC durante 15 dias após a sua preparaçäo. Estabeleceu-se a cromatografia ascendente em papel Whatman 3MM (1 X 8 cm) utilizando como solvente n-butanol: acido acético e H2) (5:2:1) para o controle rotineiro. Os valores encontrados para os Rfs foram: 0,3 para o iodeto e 1,0 para a MIBG-131I. A pureza radioquímica do produto marcado no dia da preparaçäo foi de 99,3 e 99,2//, dados obtidos na eletroforese e cromatografia miniaturizada respectivamente, e de 84,7// 15 dias após a preparaçäo. O método é realizado em tempo curto, é prático e reprodutível
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Cromatografia em Papel , Iodobenzenos , Radioisótopos do Iodo , Controle de Qualidade , EletroforeseRESUMO
Foi realizado um estudo "in vivo" e "invitro" do DISIDA- 99m Tc a nível hepatoniliar. Avaliou-se a ligaçäo às proteínas plasmáticas e a que fraçäo ocorre esta ligaçäo. O coeficiente de partiçäo em n-octanol/sol. salina foi de 0,41 demonstando a lipofilicidade do composto. As imagens obtidas em ratos indicam o comportamento de distribuiçäo biológica assim como a eliminaçäo do radiofármaco na forma inalterada a nível hepatobiliar
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Ratos , Animais , Fígado , Iminas/metabolismo , Técnicas In Vitro , Proteínas Sanguíneas , Tecnécio/metabolismo , Eletroforese em Gel de PoliacrilamidaRESUMO
A biodistribuiçäo e eliminaçäo do DISIDA-99mTc foram estudadas em ratos por meio de cicntilografia linear em diversos tempos da sua evoluçäo metabólica. Os animais utilizados na detecçäo deste rediofármaco foram ratos normais e com alteraçäo hepática experimental. Verificou-se uma demora na passagem do DISIDA-99mTc do fígado ao intestino delgado nos ratos pré-tratados em relaçäo aos ratos normais. Seguindo-se a via metabólica hepato-biliar da substância marcada, notou-se que embora esteja praticamente intacta através da bile, ele sofre um processo de degradaçäo ainda desconhecido, sendo eliminada via renal com 70% da sua integridade 120 minutos após a administraçäo da dose traçadora