RESUMO

There are numerous sources of multipotent mesenchymal stromal cells (MSC) with therapeutic potential, and bone marrow is the main one. However, pain, lack of donors and comorbidities associated with harvesting stimulate the search for new sources of MSCs. The aim of this work is to obtain cells from umbilical cord (UC) perivascular tissue of dogs and characterize them as MSCs. For this, the UC was obtained from therapeutic cesarean sections and submitted to enzymatic digestion. The obtained cells were subjected to growth and proliferation tests, as well as the analysis of surface markers, differentiation test in three mesenchymal lineages and analysis of differentiation markers expression. From all the UC used in this study an adherent with fibroblastoid shape cell was obtained, with an initial number of 4.8 × 105 of cells. The growth curves showed a lag phase from 0 to 24 h, followed by a phase of growth of 24 to 168 h, and then phase of cell decay. The doubling time was kept around 15 h until the sixth passage, from which there were signs of cellular senescence. The differentiation assays demonstrated the ability of cells to differentiate into osteoblasts, adipocytes and chondrocytes when subjected to the induction mediums. The study of surface markers was positive for adhesion markers and negative for hematopoietic markers. Thus, cells obtained from canine UC perivascular tissue by enzymatic digestion are multipotent MSC and the protocol developed ensures the perivascular origin of these cells.

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The study of wound healing and its treatment is extremely important in veterinary medicine due to the high frequency of wounds and the difficulty in treating wounds by second intention. Thus, the objective of this study was to evaluate the use of a nanofiber membrane made of biodegradable polymers as a method of wound treatment in dogs. This study comprised two dogs with bite wounds. Debridement and cleaning was performed followed by the application of the membrane. In one dog, the wound was in the left proximal calcaneal region with clinical signs of infection, necrotic tissue, and muscle and the gastrocnemius tendon were exposed. The wound displayed rapid formation of granulation tissue which became excessive, so it was necessary to debride several times. However, with the suspension of the use of the membrane, formation of this tissue was not observed, and the wound evolved to epithelialization and fast contraction. In the second dog, there was a deep wound on the medial aspect of the proximal right hind limb, with clinical signs of infection, with muscle exposure. Once the membrane was placed, granulation tissue formed, and the membrane was used until the level of this tissue reached the skin. The wound underwent rapid epithelialization and contraction, without developing exuberant granulation tissue. Efficient wound repair was observed and the dogs exhibited greater comfort during applicationand use of the membrane. More studies should be conducted in dogs focusing on the application of this membrane until the appearance of healthy granulation tissue, as continued use seems to stimulate the formation of exuberant granulation tissue.(AU)

O estudo da reparação e tratamento das feridas cutâneas possui extrema importância em medicina veterinária devido à alta frequência e dificuldade no tratamento por segunda intenção. Este estudo objetivou avaliar o uso da membrana de nanofibras de polímeros biodegradáveis, como alternativa no tratamento de feridas em cães. Foram incluídos no trabalho dois cães com feridas por mordedura. Foi realizado o debridamento e limpeza das feridas e a aplicação da membrana. Em um animal, a ferida em região proximal ao calcâneo esquerdo, apresentava sinais clínicos de infecção, com tecido necrótico, exposição da musculatura e do tendão gastrocnêmio. Foi observada formação rápida de tecido de granulação que se tornou exuberante, sendo necessário debridamento seriado. Porém, com a suspensão do uso da membrana a formação desse tecido não foi mais observada, evoluindo para epitelização e rápida contração. No outro animal, a ferida em face medial proximal do membro pélvico direito, era profunda, com sinais clínicos de infecção e musculatura exposta. A formação de tecido de granulação também apresentou-se rápida, utilizando-se a membrana apenas até que o nível deste tecido se igualasse ao da pele, evoluindo para rápida epitelização e contração sem formação de tecido de granulação exuberante. Foi observada reparação eficiente e com maior conforto para os pacientes durante aplicação e utilização da membrana. Acredita-se que mais estudos devam ser realizados focando a aplicação em cães até o aparecimento do tecido de granulação saudável, pois as observações deste estudo indicam possível estimulação do tecido de granulação exuberante com utilização da membrana.(AU)

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The study of wound healing and its treatment is extremely important in veterinary medicine due to the high frequency of wounds and the difficulty in treating wounds by second intention. Thus, the objective of this study was to evaluate the use of a nanofiber membrane made of biodegradable polymers as a method of wound treatment in dogs. This study comprised two dogs with bite wounds. Debridement and cleaning was performed followed by the application of the membrane. In one dog, the wound was in the left proximal calcaneal region with clinical signs of infection, necrotic tissue, and muscle and the gastrocnemius tendon were exposed. The wound displayed rapid formation of granulation tissue which became excessive, so it was necessary to debride several times. However, with the suspension of the use of the membrane, formation of this tissue was not observed, and the wound evolved to epithelialization and fast contraction. In the second dog, there was a deep wound on the medial aspect of the proximal right hind limb, with clinical signs of infection, with muscle exposure. Once the membrane was placed, granulation tissue formed, and the membrane was used until the level of this tissue reached the skin. The wound underwent rapid epithelialization and contraction, without developing exuberant granulation tissue. Efficient wound repair was observed and the dogs exhibited greater comfort during applicationand use of the membrane. More studies should be conducted in dogs focusing on the application of this membrane until the appearance of healthy granulation tissue, as continued use seems to stimulate the formation of exuberant granulation tissue.

O estudo da reparação e tratamento das feridas cutâneas possui extrema importância em medicina veterinária devido à alta frequência e dificuldade no tratamento por segunda intenção. Este estudo objetivou avaliar o uso da membrana de nanofibras de polímeros biodegradáveis, como alternativa no tratamento de feridas em cães. Foram incluídos no trabalho dois cães com feridas por mordedura. Foi realizado o debridamento e limpeza das feridas e a aplicação da membrana. Em um animal, a ferida em região proximal ao calcâneo esquerdo, apresentava sinais clínicos de infecção, com tecido necrótico, exposição da musculatura e do tendão gastrocnêmio. Foi observada formação rápida de tecido de granulação que se tornou exuberante, sendo necessário debridamento seriado. Porém, com a suspensão do uso da membrana a formação desse tecido não foi mais observada, evoluindo para epitelização e rápida contração. No outro animal, a ferida em face medial proximal do membro pélvico direito, era profunda, com sinais clínicos de infecção e musculatura exposta. A formação de tecido de granulação também apresentou-se rápida, utilizando-se a membrana apenas até que o nível deste tecido se igualasse ao da pele, evoluindo para rápida epitelização e contração sem formação de tecido de granulação exuberante. Foi observada reparação eficiente e com maior conforto para os pacientes durante aplicação e utilização da membrana. Acredita-se que mais estudos devam ser realizados focando a aplicação em cães até o aparecimento do tecido de granulação saudável, pois as observações deste estudo indicam possível estimulação do tecido de granulação exuberante com utilização da membrana.

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The study aimed to evaluate biocompatibility, osteoconduction and osseointegration of a pasty composite of hydroxyapatite (20%) and lignin (80%) as a promoter of metal implant and bone tissue integration. An intramedullary Schanz pin was implanted in both tibias of fifteen bitches. In the left tibia, the pin was coated with the biomaterial at the time of surgery. Marrow cavity was also filled with the biomaterial. Right limb did not receive the biomaterial, then constituting the control group. Tibias were harvested from five animals at 8, 60 and 150 days after surgery; three of them were analyzed by histological and biomechanical assessment and the two remaining tibias by X-ray diffraction. Results showed that the biomaterial is biocompatible, with osteoconductivity and osseointegration properties. Histological analysis and diffractograms showed the presence of hydroxyapatite in samples in all periods, although the presence of organic material of low crystallinity was variable. There was no statistical difference in the forces required for removal of the biocompatibility, osteoconductivity and osseointegration, it was not able to promote a better intramedullary pin anchorage.

O trabalho objetivou avaliar a biocompatibilidade, a osteocondução e a osseointegração de um compósito pastoso de hidroxiapatita (20%) e lignina (80%) como promotor de integração entre implante metálico e tecido ósseo. Um pino intramedular de Schanz foi implantado em ambas as tíbias de quinze cadelas. Na tíbia esquerda, o pino foi coberto com o biomaterial no momento da cirurgia. A cavidade medular também foi preenchida com o biomaterial. O membro direito não recebeu o biomaterial, constituindo assim o grupo controle. As tíbias foram coletadas de cinco animais aos oito, 60 e 150 dias após a cirurgia, sendo três encaminhadas para avaliação histológica e biomecânica e as duas restantes, para difração de raios X. Os resultados revelaram biocompatibilidade do material, com propriedades de osteocondução e osseointegração. As análises histológicas e os difratogramas mostraram presença da hidroxiapatita no tecido em todos os períodos avaliados, embora a presença de material orgânico de baixa cristalinidade tenha sido variável. Não houve diferença estatística na força necessária para remoção do pino intramedular entre os tempos ou tratamentos. Embora o biomaterial tenha apresentado biocompatibilidade, osteocondutividade e osseointegração, ele não foi capaz de promover uma melhor ancoragem do pino intramedular.

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The study aimed to evaluate biocompatibility, osteoconduction and osseointegration of a pasty composite of hydroxyapatite (20%) and lignin (80%) as a promoter of metal implant and bone tissue integration. An intramedullary Schanz pin was implanted in both tibias of fifteen bitches. In the left tibia, the pin was coated with the biomaterial at the time of surgery. Marrow cavity was also filled with the biomaterial. Right limb did not receive the biomaterial, then constituting the control group. Tibias were harvested from five animals at 8, 60 and 150 days after surgery; three of them were analyzed by histological and biomechanical assessment and the two remaining tibias by X-ray diffraction. Results showed that the biomaterial is biocompatible, with osteoconductivity and osseointegration properties. Histological analysis and diffractograms showed the presence of hydroxyapatite in samples in all periods, although the presence of organic material of low crystallinity was variable. There was no statistical difference in the forces required for removal of the biocompatibility, osteoconductivity and osseointegration, it was not able to promote a better intramedullary pin anchorage.(AU)

O trabalho objetivou avaliar a biocompatibilidade, a osteocondução e a osseointegração de um compósito pastoso de hidroxiapatita (20%) e lignina (80%) como promotor de integração entre implante metálico e tecido ósseo. Um pino intramedular de Schanz foi implantado em ambas as tíbias de quinze cadelas. Na tíbia esquerda, o pino foi coberto com o biomaterial no momento da cirurgia. A cavidade medular também foi preenchida com o biomaterial. O membro direito não recebeu o biomaterial, constituindo assim o grupo controle. As tíbias foram coletadas de cinco animais aos oito, 60 e 150 dias após a cirurgia, sendo três encaminhadas para avaliação histológica e biomecânica e as duas restantes, para difração de raios X. Os resultados revelaram biocompatibilidade do material, com propriedades de osteocondução e osseointegração. As análises histológicas e os difratogramas mostraram presença da hidroxiapatita no tecido em todos os períodos avaliados, embora a presença de material orgânico de baixa cristalinidade tenha sido variável. Não houve diferença estatística na força necessária para remoção do pino intramedular entre os tempos ou tratamentos. Embora o biomaterial tenha apresentado biocompatibilidade, osteocondutividade e osseointegração, ele não foi capaz de promover uma melhor ancoragem do pino intramedular.(AU)

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The study of wound healing and its treatment is extremely important in veterinary medicine due to the high frequency of wounds and the difficulty in treating wounds by second intention. Thus, the objective of this study was to evaluate the use of a nanofiber membrane made of biodegradable polymers as a method of wound treatment in dogs. This study comprised two dogs with bite wounds. Debridement and cleaning was performed followed by the application of the membrane. In one dog, the wound was in the left proximal calcaneal region with clinical signs of infection, necrotic tissue, and muscle and the gastrocnemius tendon were exposed. The wound displayed rapid formation of granulation tissue which became excessive, so it was necessary to debride several times. However, with the suspension of the use of the membrane, formation of this tissue was not observed, and the wound evolved to epithelialization and fast contraction. In the second dog, there was a deep wound on the medial aspect of the proximal right hind limb, with clinical signs of infection, with muscle exposure. Once the membrane was placed, granulation tissue formed, and the membrane was used until the level of this tissue reached the skin. The wound underwent rapid epithelialization and contraction, without developing exuberant granulation tissue. Efficient wound repair was observed and the dogs exhibited greater comfor

O estudo da reparação e tratamento das feridas cutâneas possui extrema importância em medicina veterinária devido à alta frequência e dificuldade no tratamento por segunda intenção. Este estudo objetivou avaliar o uso da membrana de nanofibras de polímeros biodegradáveis, como alternativa no tratamento de feridas em cães. Foram incluídos no trabalho dois cães com feridas por mordedura. Foi realizado o debridamento e limpeza das feridas, e aplicação da membrana. Em um animal, a ferida em região proximal ao calcâneo esquerdo, apresentava sinais clínicos de infecção, com tecido necrótico, exposição da musculatura e do tendão gastrocnêmio. Foi observada formação rápida de tecido de granulação que se tornou exuberante, sendo necessário debridamento seriado. Porém, com a suspensão do uso da membrana a formação desse tecido não foi mais observada, evoluindo para epitelização e rápida contração. No outro animal, a ferida em face medial proximal do membro pélvico direito, era profunda, com sinais clínicos de infecção e musculatura exposta. A formação de tecido de granulação também apresentou-se rápida, utilizando-se a membrana apenas até que o nível deste tecido se igualasse ao da pele, evoluindo para rápida epitelização e contração sem formação de tecido de granulação exuberante. Foi observada reparação eficiente e com ma

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The study of wound healing and its treatment is extremely important in veterinary medicine due to the high frequency of wounds and the difficulty in treating wounds by second intention. Thus, the objective of this study was to evaluate the use of a nanofiber membrane made of biodegradable polymers as a method of wound treatment in dogs. This study comprised two dogs with bite wounds. Debridement and cleaning was performed followed by the application of the membrane. In one dog, the wound was in the left proximal calcaneal region with clinical signs of infection, necrotic tissue, and muscle and the gastrocnemius tendon were exposed. The wound displayed rapid formation of granulation tissue which became excessive, so it was necessary to debride several times. However, with the suspension of the use of the membrane, formation of this tissue was not observed, and the wound evolved to epithelialization and fast contraction. In the second dog, there was a deep wound on the medial aspect of the proximal right hind limb, with clinical signs of infection, with muscle exposure. Once the membrane was placed, granulation tissue formed, and the membrane was used until the level of this tissue reached the skin. The wound underwent rapid epithelialization and contraction, without developing exuberant granulation tissue. Efficient wound repair was observed and the dogs exhibited greater comfor

O estudo da reparação e tratamento das feridas cutâneas possui extrema importância em medicina veterinária devido à alta frequência e dificuldade no tratamento por segunda intenção. Este estudo objetivou avaliar o uso da membrana de nanofibras de polímeros biodegradáveis, como alternativa no tratamento de feridas em cães. Foram incluídos no trabalho dois cães com feridas por mordedura. Foi realizado o debridamento e limpeza das feridas, e aplicação da membrana. Em um animal, a ferida em região proximal ao calcâneo esquerdo, apresentava sinais clínicos de infecção, com tecido necrótico, exposição da musculatura e do tendão gastrocnêmio. Foi observada formação rápida de tecido de granulação que se tornou exuberante, sendo necessário debridamento seriado. Porém, com a suspensão do uso da membrana a formação desse tecido não foi mais observada, evoluindo para epitelização e rápida contração. No outro animal, a ferida em face medial proximal do membro pélvico direito, era profunda, com sinais clínicos de infecção e musculatura exposta. A formação de tecido de granulação também apresentou-se rápida, utilizando-se a membrana apenas até que o nível deste tecido se igualasse ao da pele, evoluindo para rápida epitelização e contração sem formação de tecido de granulação exuberante. Foi observada reparação eficiente e com ma

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OBJECTIVE: Absorbable membranes are used to promote the regeneration of periodontal defects by Guided Tissue Regeneration (GTR). However, their collapse into the defect is commonly reported, impairing regeneration. Therefore, absorbable but rigid membranes aiming at preventing such collapse were developed and analyzed in periodontal regeneration. MATERIALS AND METHODS: Membranes were analyzed in class II furcation defects in dogs; procedures included periodontal disease induction, prophylaxis and GTR (treated groups) or open flap debridement alone (control group). For GTR, the membranes were made of either 25% hydroxyapatite (HA) in polyhydroxybutyrate matrix (PHB) or 35% HA in PHB. Animals were clinically evaluated for gingival recession, clinical attachment level (CAL) and biopsies were collected at 60 and 120 days. Bone volume, trabeculae number, trabecular thickness and trabecular separation were quantified by micro-computed tomography, followed by histology. RESULTS: Membrane exposure was observed in both treated groups (25 and 35% HAP) from the 8(th) day after surgery, continuously progressing until 120 days. Mean CAL for all groups remained above normal values for dogs. Bone volumetric values were not significantly different. Partial formation of bone, cementum and periodontal ligament was observed in treated groups. An inflammatory infiltrate was observed in the dense connective tissue that partially filled the center of the treated defects with active osteoclasts on bone surface. CONCLUSION: Although partial regeneration of the defect was observed, it was limited by wound contamination. Consequently, rigid absorbable membranes made of HA and PHB failed to improve the regeneration of class II furcation defects in dogs.

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