RESUMO
INTRODUCTION: Pneumocystis jirovecii is an atypical fungus particularly detected in HIV-positive or transplant patients. OBJECTIVE: To detect and genotype Pneumocystis jirovecii in patient samples from two hospitals in Mexico City. METHOD: Eighty-nine respiratory tract samples, corresponding to 53 patients (30 HIV-positive and 23 HIV-negative) with respiratory symptoms and to 11 healthy individuals included as negative control, were processed. DNA was extracted from the ITS region and amplified by nested polymerase chain reaction from the internal transcribed spacer, with one fragment being obtained at each round (693 and 550 bp). Genotypes and their phylogenetic relationship were determined by sequencing the 550 bp fragment. RESULTS: Forty-eight samples from 30 HIV-positive patients were received from a single hospital, out of which 11 (36.6 %) were positive for Pneumocystis jirovecii. No sample was positive in HIV-negative patients or healthy subjects. The most frequently detected haplotypes were Eg and Em. CONCLUSIONS: The frequency of Pneumocystis jirovecii infection was high in the studied Mexican population. The most common genotype was different from those reported in other countries. It is necessary to address this health problem through early detection of this infection.
INTRODUCCIÓN: Pneumocystis jirovecii es un hongo atípico detectado particularmente en pacientes VIH-positivos o con trasplante. OBJETIVO: Detectar y genotipificar Pneumocystis jirovecii en muestras de pacientes de dos hospitales de la ciudad de México. MÉTODO: Fueron procesadas 89 muestras respiratorias, correspondientes a 53 pacientes (30 VIH positivos y 23 VIH negativos) con sintomatología respiratoria y 11 personas sanas incluidas como control negativo. El DNA fue extraído y amplificado por PCR anidada de la región del espaciador transcrito interno, obteniendo un fragmento en cada ronda (de 693 y 550 pb). Los genotipos y su relación filogenética fueron determinados por secuenciación del fragmento de 550 pb. RESULTADOS: Cuarenta y ocho muestras de 30 pacientes VIH-positivos provenían de un solo hospital, de las cuales 11 (36.6 %) fueron positivas a Pneumocystis jirovecii. Ninguna fue positiva en pacientes VIH-negativos o personas sanas. Los haplotipos detectados con mayor frecuencia fueron Eg y Em. CONCLUSIONES: La frecuencia de infección por Pneumocystis jirovecii fue alta en la población mexicana estudiada. El genotipo más frecuente fue diferente a los reportados en otros países. Es necesario encauzar este problema de salud hacia la detección temprana de esta infección.
Assuntos
Infecções por HIV/complicações , Pneumocystis carinii/isolamento & purificação , Pneumonia por Pneumocystis/epidemiologia , Adulto , Idoso , Pré-Escolar , Estudos Transversais , Feminino , Genótipo , Humanos , Masculino , México , Pessoa de Meia-Idade , Filogenia , Pneumocystis carinii/genética , Pneumonia por Pneumocystis/diagnóstico , Pneumonia por Pneumocystis/microbiologia , Reação em Cadeia da Polimerase , Estudos Prospectivos , Adulto JovemRESUMO
Resumen Introducción: Pneumocystis jirovecii es un hongo atípico detectado particularmente en pacientes VIH-positivos o con trasplante. Objetivo: Detectar y genotipificar Pneumocystis jirovecii en muestras de pacientes de dos hospitales de la ciudad de México. Método: Fueron procesadas 89 muestras respiratorias, correspondientes a 53 pacientes (30 VIH positivos y 23 VIH negativos) con sintomatología respiratoria y 11 personas sanas incluidas como control negativo. El DNA fue extraído y amplificado por PCR anidada de la región del espaciador transcrito interno, obteniendo un fragmento en cada ronda (de 693 y 550 pb). Los genotipos y su relación filogenética fueron determinados por secuenciación del fragmento de 550 pb. Resultados: Cuarenta y ocho muestras de 30 pacientes VIH-positivos provenían de un solo hospital, de las cuales 11 (36.6 %) fueron positivas a Pneumocystis jirovecii. Ninguna fue positiva en pacientes VIH-negativos o personas sanas. Los haplotipos detectados con mayor frecuencia fueron Eg y Em. Conclusiones: La frecuencia de infección por Pneumocystis jirovecii fue alta en la población mexicana estudiada. El genotipo más frecuente fue diferente a los reportados en otros países. Es necesario encauzar este problema de salud hacia la detección temprana de esta infección.
Abstract Introduction: Pneumocystis jirovecii is an atypical fungus particularly detected in HIV-positive or transplant patients. Objective: To detect and genotype Pneumocystis jirovecii in patient samples from two hospitals in Mexico City. Method: Eighty-nine respiratory tract samples, corresponding to 53 patients (30 HIV-positive and 23 HIV-negative) with respiratory symptoms and to 11 healthy individuals included as negative control, were processed. DNA was extracted from the ITS region and amplified by nested polymerase chain reaction from the internal transcribed spacer, with one fragment being obtained at each round (693 and 550 bp). Genotypes and their phylogenetic relationship were determined by sequencing the 550 bp fragment. Results: Forty-eight samples from 30 HIV-positive patients were received from a single hospital, out of which 11 (36.6 %) were positive for Pneumocystis jirovecii. No sample was positive in HIV-negative patients or healthy subjects. The most frequently detected haplotypes were Eg and Em. Conclusions: The frequency of Pneumocystis jirovecii infection was high in the studied Mexican population. The most common genotype was different from those reported in other countries. It is necessary to address this health problem through early detection of this infection.
Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Pré-Escolar , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Idoso , Adulto Jovem , Pneumonia por Pneumocystis/epidemiologia , Infecções por HIV/complicações , Pneumocystis carinii/isolamento & purificação , Filogenia , Pneumonia por Pneumocystis/diagnóstico , Pneumonia por Pneumocystis/microbiologia , Reação em Cadeia da Polimerase , Estudos Transversais , Estudos Prospectivos , Pneumocystis carinii/genética , Genótipo , MéxicoRESUMO
Yeast mating signal transduction pathways require a heterotrimeric G protein composed of Gα, Gß, and Gγ subunits connected to a mitogen-activated protein kinase (MAPK) module. While in Saccharomyces cerevisiae elimination of Gα induces constitutive activation of the mating pathway, in Kluyveromyces lactis it produces partial sterility, which indicates that K. lactis Gα (KlGα) is required to positively activate mating. We use physical interaction experiments to determine that KlGα interacts with the adaptor protein KlSte50p. The Ras association (RA) domain of KlSte50p favored interaction with the GDP-bound KlGα subunit, and when the KlGα protein is constitutively activated, the interaction drops significantly. Additionally, KlSte50p strongly associates with the MAPK kinase kinase (MAPKKK) KlSte11p through its sterile alpha motif (SAM) domain. Genetic experiments placed KlSte50p downstream of the G protein α subunit, indicating that KlGα may stimulate the mating pathway via KlSte50p. Fusion of KlSte50p to the KlGß subunit partially eliminated the requirement of KlGα for mating, indicating that one contribution of KlGα to the mating pathway is to facilitate plasma membrane anchoring of KlSte50p.
Assuntos
Proteínas Fúngicas/metabolismo , Subunidades alfa de Proteínas de Ligação ao GTP/metabolismo , Kluyveromyces/fisiologia , Feromônios/metabolismo , Transdução de Sinais/fisiologia , Sequência de Aminoácidos , Sequência de Bases , Proteínas Fúngicas/genética , Subunidades alfa de Proteínas de Ligação ao GTP/genética , Kluyveromyces/genética , Dados de Sequência Molecular , Subunidades Proteicas/genética , Subunidades Proteicas/metabolismo , Proteínas Recombinantes de Fusão/genética , Proteínas Recombinantes de Fusão/metabolismo , Técnicas do Sistema de Duplo-HíbridoRESUMO
The mating pheromone response pathway in Saccharomyces cerevisiae is one of the best understood signalling pathways in eukaryotes. Comparison of this system with pathways in other fungal species has generated surprises and insights. Cloning and targetted disruption of genes encoding components of the pheromone response pathway has allowed the attribution of specific functions to these signal transduction components. In this review we describe current knowledge of the Kluyveromyces lactis mating system, and compare it with the well-understood S. cerevisiae pathway, emphasizing the similarities and differences in the heterotrimeric G protein activity. This mating pathway is controlled positively by both the Galpha and the Gbeta subunits of the heterotrimeric G protein.
Assuntos
Kluyveromyces/fisiologia , Feromônios/fisiologia , Transdução de Sinais , Proteínas Heterotriméricas de Ligação ao GTP/genética , Proteínas Heterotriméricas de Ligação ao GTP/fisiologia , Kluyveromyces/genética , Feromônios/genética , Receptores de Feromônios/fisiologia , Elementos de Resposta , Saccharomyces cerevisiae/genética , Saccharomyces cerevisiae/fisiologia , Transdução de Sinais/genéticaRESUMO
Las levaduras del género Candida frecuentemente son el agente causal de infecciones en sitios corporales expuestos a factores como la humedad y la maceración. En este estudio fueron incluidos 1,059 individuos manipuladores de alimentos de diversos centros comerciales de la ciudad de México y un grupo testigo sano de 139 personas. En todos ellos se tomaron muestras de manos para el aislamiento de hongos potencialmente patógenos. Se encontró que 30.7 por ciento de los trabajadores estudiados son portadores de diversas levaduras; la mayoría de estos aislamientos se obtuvo de los trabajadores del área de panadería. De los 325 aislamientos levaduriformes obtenidos, C. albicans representó 12.4 por ciento y el restante 85.8 por ciento correspondió a Candida no albicans; otras levaduras aisladas fueron Rhodotorula (0.9 por ciento) y Trichosporon (0.9 por ciento). En el grupo testigo solamente se aislaron levaduras de Candida en 11.5 por ciento; de éstas, seis correspondieron a C. albicans (37.5 por ciento) y 10 (62.5 por ciento) a C. no albicans. No se aislaron hongos filamentosos.
Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Adolescente , Adulto , Candida albicans , Manipulação de Alimentos , Meios de Cultura , Unhas/microbiologiaRESUMO
Con la finalidad de conocer nuevos datos sobre la frecuencia, agentes etiológicos y localización topográfica de las dermatofitosis, se realizó un estudio en 1734 pacientes que presentaban lesiones sugestivas de estas micosis. De cada paciente se anotaron los datos de localización corporal de la lesión, edad y género. Se tomaron muestras de escamas y/o pelos de las lesiones para realizar examen directo con hidróxido de potasio y cultivo en agar Sabouraud. La frecuencia de la infección por género no presentó diferencia significativa. De los pacientes estudiados, 869 fueron positivos para dermatófitos (50.1 por ciento) y en 446 el diagnóstico se confirmó tanto por examen directo como por cultivo. Las uñas fueron el sitio más afectado (579 casos) y en la mayoría de los cultivos fue aislado Trichophyton rubrum (82.5 por ciento). Del total de pacientes positivos a dermatófitos, 33 fueron niños; 11 de ellos presentaron afectación de uñas por Trichophyton rubrum. Se diagnosticaron tres pacientes con onicomicosis en pies por Microsporum canis. Se discute la importancia de algunas variantes epidemiológicas en las dermatofitosis.