RESUMO
Introducción. El trasplante es una de las alternativas para el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas, y está encaminado hacia el reemplazo de las células perdidas durante el desarrollo de la enfermedad. Una fuente celular prometedora para el desarrollo de los trasplantes podrían ser las células mononucleadas de la médula ósea. Objetivo. Estudiar la capacidad de las células mononucleadas de la médula ósea de sobrevivir al trasplante y buscar un método que permita el seguimiento de estas células in vivo una vez implantadas. Materiales y métodos. Las células mononucleadas fueron extraídas del fémur de ratas mediante un gradiente de Ficoll-Hypaque. Las células objeto de estudio fueron modificadas genéticamente con un adenovirus que expresa la PFV o marcadas con el reactivo de Hoechst. Las células marcadas se implantaron en el estriado de ratas lesionadas con ácido quinolínico. Resultados. La viabilidad de las células modificadas genéticamente fue baja, mientras que la de las células marcadas con el reactivo de Hoechst fue superior al 90 por ciento. Las células implantadas sobrevivieron al trasplante al menos un mes y se dispersaron desde el sitio de entrada hacia el cuerpo calloso y la corteza. Conclusiones. Consideramos más ventajoso el uso del reactivo de Hoechst para el seguimiento de estas células in vivo. Las células mononucleadas tienen características que les permiten formar parte de las fuentes celulares candidatas para el tratamiento de las enfermedades neurodegenerativas(AU)
Introduction: Transplant is one of the alternatives available for the treatment of neurodegenerative diseases aimed at replacing the cells lost during the course of the disease. One promising source of cells for the development of transplants could be the mononucleate cells from bone marrow. AIMS. The purpose of this study was to study the capacity of bone marrow mononucleate cells to survive the transplant process, and to search for a method that enables tracking of these cells in vivo once they have been implanted. MATERIALS AND METHODS: Bone marrow mononucleate cells were extracted from the femur of rats by means of a Ficoll-Hypaque gradient. The cells under study were modified genetically with an adenovirus that expresses the PFV or which are marked with Hoechst dye. The marked cells were implanted in the striatum of rats with lesions caused by quinolinic acid. RESULTS: The viability of the genetically modified cells was low, whereas that of the cells marked with Hoechst dye was above 90percent. The implanted cells survived the transplant at least a month and dispersed away from the site of entry towards the corpus callosum and cortex. CONCLUSIONS: We consider that the use of Hoechst dye offers more advantages for tracking these cells in vivo. Mononucleate cells have a number of characteristics that allow them to be included as candidate sources of cells for the treatment of neurodegenerative diseases
Assuntos
Animais , Ratos , Células da Medula Óssea/citologia , Células da Medula Óssea/fisiologia , Transplante de Medula Óssea , Movimento Celular , Ácido Quinolínico/toxicidade , Córtex Visual/citologia , Córtex Visual , Córtex Visual/patologiaRESUMO
A good deal of evidence currently exists to show that transplanting foetal mesencephalic tissue can produce symptomatic benefits both in patients and in disease models. Nevertheless, the technical and ethical difficulties involved in obtaining enough suitable foetal cerebral tissue have been a serious obstacle to its application. Stromal cells derived from bone marrow, due to their potential capacity to generate different types of cells, could be an ideal source of material for cell restoration in neurodegenerative diseases. AIMS: Our aim was to evaluate the effect of transplanting stromal cells derived from bone marrow on the behaviour of 6-OHDA rats, when they are inserted into the striatum(AU)
Assuntos
Animais , Ratos , Modelos Animais de Doenças , Doença de Parkinson/cirurgia , Células Estromais/transplanteRESUMO
Introducción. El factor de crecimiento epidérmico (FCE) ejerce un efecto neurotrófico o mitogénico sobre diferentes poblaciones celulares en el sistema nervioso, lo que está modulado por el estadío de desarrollo celular y el microambiente donde se desarrollan las células. Objetivo y métodos. En este trabajo se describe la acción del FCE sobre las células del estriado embrionario en un sistema de cultivo disociado de neuronas y glias. El cultivo de células se preparó a partir de embriones de ratas de 16-17 días. En el sistema empleado la población celular fue cultivada durante 20-24 horas en un medio que contenía suero y posteriormente se sutituyó este por una mezcla de nutrientes definidos y se trató con 20 ng/ml de FCE durante 6 días. Resultados y conclusiones. La sustitución del suero en este período inicial de desarrollo provocó una disminución apreciable de las células vivas en los cultivos tratados y en los controles. Las células sobrevivientes estaban representadas mayoritariamente por precursores celulares teniendo en cuenta sus características morfológicas y su capacidad proliferativa. El efecto del FCE se manifestó en un aumento del número de células y se demostró un estímulo de la proliferación de los precursores neuronales y de los astrocitos. La actividad específica de la colina acetiltransferasa determinada en los cultivos a los 16 días evidenció la diferenciación de una subpoblación neuronal colinérgica, la cual respondió al tratamiento con el factor de crecimiento nervioso con un aumento de la actividad de esta enzima (AU)
Assuntos
Técnicas In Vitro , Fator de Crescimento Epidérmico , Técnicas de Cultura de Células , Fatores de Crescimento Neural , Técnicas de CulturaRESUMO
Introducción. El factor de crecimiento epidérmico (FCE) ejerce un efecto neurotrófico o mitogénico sobre diferentes poblaciones celulares en el sistema nervioso, lo que está modulado por el estadío de desarrollo celular y el microambiente donde se desarrollan las células. Objetivo y métodos. En este trabajo se describe la acción del FCE sobre las células del estriado embrionario en un sistema de cultivo disociado de neuronas y glias. El cultivo de células se preparó a partir de embriones de ratas de 16-17 días. En el sistema empleado la población celular fue cultivada durante 20-24 horas en un medio que contenía suero y posteriormente se sutituyó este por una mezcla de nutrientes definidos y se trató con 20 ng/ml de FCE durante 6 días. Resultados y conclusiones. La sustitución del suero en este período inicial de desarrollo provocó una disminución apreciable de las células vivas en los cultivos tratados y en los controles. Las células sobrevivientes estaban representadas mayoritariamente por precursores celulares teniendo en cuenta sus características morfológicas y su capacidad proliferativa. El efecto del FCE se manifestó en un aumento del número de células y se demostró un estímulo de la proliferación de los precursores neuronales y de los astrocitos. La actividad específica de la colina acetiltransferasa determinada en los cultivos a los 16 días evidenció la diferenciación de una subpoblación neuronal colinérgica, la cual respondió al tratamiento con el factor de crecimiento nervioso con un aumento de la actividad de esta enzima (AU)
Assuntos
Técnicas In Vitro , Fator de Crescimento Epidérmico , Técnicas de Cultura de Células , Fatores de Crescimento Neural , Técnicas de CulturaRESUMO
Introducción. El factor de crecimiento epidérmico (FCE) ejerce un efecto neurotrófico o mitogénico sobre diferentes poblaciones celulares en el sistema nervioso, lo que está modulado por el estadío de desarrollo celular y el microambiente donde se desarrollan las células. Objetivo y métodos. En este trabajo se describe la acción del FCE sobre las células del estriado embrionario en un sistema de cultivo disociado de neuronas y glias. El cultivo de células se preparó a partir de embriones de ratas de 16-17 días. En el sistema empleado la población celular fue cultivada durante 20-24 horas en un medio que contenía suero y posteriormente se sutituyó este por una mezcla de nutrientes definidos y se trató con 20 ng/ml de FCE durante 6 días. Resultados y conclusiones. La sustitución del suero en este período inicial de desarrollo provocó una disminución apreciable de las células vivas en los cultivos tratados y en los controles. Las células sobrevivientes estaban representadas mayoritariamente por precursores celulares teniendo en cuenta sus características morfológicas y su capacidad proliferativa. El efecto del FCE se manifestó en un aumento del número de células y se demostró un estímulo de la proliferación de los precursores neuronales y de los astrocitos. La actividad específica de la colina acetiltransferasa determinada en los cultivos a los 16 días evidenció la diferenciación de una subpoblación neuronal colinérgica, la cual respondió al tratamiento con el factor de crecimiento nervioso con un aumento de la actividad de esta enzima (AU)