RESUMO

This work examines the economic advantages of probiotic use in the diet of Nile tilapia broodstock during the reproductive period. For this purpose, Bacillus subtilis was applied as a feed additive. The experimental design was completely randomized with three treatment groups: the T0 control (without probiotic), the T1 continuous probiotic intake, and the T2 alternate probiotic intake at a dose of 0.50 g kg-1 of feed (1010 CFU g-1 ) with four replicates. For the reproduction assay, 118 females and 48 males of Nile tilapia (proportion 4 males:9 females. hapa-1 ) (weight 527.65 g ± 185.98 g and length 30.16 cm ± 3.57 cm) were distributed into 12 hapas (3.5 × 2.0 × 1.5 m). Reproductive variables (spawning female percentage, egg production, and fry production) were used to calculate the economic feasibility indexes (total cost of nutrition [TcN], gross revenue [GR], and total operational profit [ToP]). The results show increasing values for spawning female number, collected eggs, and surviving fry in the probiotic groups. We recommend continuous intake of probiotic (feed with addition of probiotic) at a dose of 0.5 g kg-1 of feed (1010 CFU g-1 ) during the breeding season of Nile tilapia, due to the suitable reproductive indexes and profitability.

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This work examines the economic advantages of probiotic use in the diet of Nile tilapia broodstock during the reproductive period. For this purpose, Bacillus subtilis was applied as a feed additive. The experimental design was completely randomized with three treatment groups: the T0 control (without probiotic), the T1 continuous probiotic intake, and the T2 alternate probiotic intake at a dose of 0.50 g kg-1 of feed (1010 CFU g-1 ) with four replicates. For the reproduction assay, 118 females and 48 males of Nile tilapia (proportion 4 males:9 females. hapa-1 ) (weight 527.65 g ± 185.98 g and length 30.16 cm ± 3.57 cm) were distributed into 12 hapas (3.5 × 2.0 × 1.5 m). Reproductive variables (spawning female percentage, egg production, and fry production) were used to calculate the economic feasibility indexes (total cost of nutrition [TcN], gross revenue [GR], and total operational profit [ToP]). The results show increasing values for spawning female number, collected eggs, and surviving fry in the probiotic groups. We recommend continuous intake of probiotic (feed with addition of probiotic) at a dose of 0.5 g kg-1 of feed (1010 CFU g-1 ) during the breeding season of Nile tilapia, due to the suitable reproductive indexes and profitability.(AU)

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A commercialprobioticcontaining Bacillussubtilis(109 CFU g-1) was evaluated incaged matrinxã,Bryconamazonicus,by measuring hematological parametersand macrophage activity after 42 and 84 days after feeding. The product wasadded tocommercial feed using 2%soybean oil as a protectant. A randomized three-treatmentexperiment was performed using fourreplicates per treatment. The groups included: (a) control without probiotic, (b) 5 g kg-1probiotic, and (c) 10 g kg-1probiotic. Forhematological analysis,eightfishper treatmentwere used to determinetotal cell count (RBC); thrombocytes, differential, and total leukocyte count (TLC); hematocrit (Htc); hemoglobin tax; mean corpuscular volume (MCV); and mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC). Furthermore, plasma cortisol and glucose levels were measured in blood samples. Macrophage phagocytic activity was evaluated by injecting Saccharomyces cerevisiae(11,000 cells in a 3 mLvolume) into the coelomic cavity incubating for 8hours.Addition of probiotics to the diet of caged matrinxã altered the Htc, RBC, MCV, MCHC, TLC, lymphocyte, and eosinophil values. We observed increased cortisol and glucose levels and phagocytic activity, but no increase in the phagocytic index. We thus conclude that supplementing caged Brycon amazonicuswith probiotics improves their non-specific immunity and alters blood profiles.

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Linking proprieties of adhesion, infectious capacities and antibiotic resistance of pathogen bacteria could help to treat fish diseases. Adhesions of ten fish pathogenic bacteria were tested in microtiter plates vacant, coated with skin or gut mucus, fixed with methanol, stained with 2% crystal-violet and revealed by colorimetric method. Infectious capacity was performed by exposing gilthead seabream fibroblast cell line (SAF-1) to 107 -108 CFUmL-1 of pathogen bacteria. Cell viability was measured 3h, 9h and 20 hours post-infection. The sensitivity to antibiotics was executed by disk diffusion. Data showed that all the bacteria tested adhere to polystyrene. For skin mucus, Vibrio harveyi, Vibrio alginolyticus, Halomonas venusta, and Aeromonas bivalvium were moderately adherent. Dietzia maris was strongly adherent. For gut mucus, 60% of tested bacteria were weakly adherent and 40% were non adherent. For infection, D. maris, V. harveyi and A. bivalvium decreased the cells viability to 89% after only 3h. After 20h, the viability percentage ranged between 1% and 32%. All isolates presented resistance to 1000 mg ml-1 of sulphonamide, 60% were resistant to sulfonamide and penicillin G. Present findings could be relevant in fish aquaculture and underscore the importance of the linkage between adhesion, infectious capacity, and antibiotic susceptibility of pathogen bacteria to avoid fish diseases.

Estudar o link entre propriedades de adesão, capacidades infecciosas e resistência a antibióticos de bactérias patogênicas pode ajudar a tratar doenças de peixes. A adesão de dez bactérias patogênicas foi testada em placas de microtitulação vazias, revestidas com muco da pele ou do intestino, fixadas com metanol, coradas com 2% de violeta cristal e reveladas pelo modo colorimétrico. A capacidade infecciosa foi realizada expondo a linha celular de fibroblasto de dourada (SAF-1) a 107-108 CFUmL-1 de bactérias patogénicas. A viabilidade celular foi medida 3h, 9h e 20 horas após a infecção. A sensibilidade aos antibióticos foi executada por difusão em disco. Os dados mostram que todas as bactérias testadas aderem ao poliestireno. Para o muco cutâneo, Vibrio harveyi, Vibrio alginolyticus, Halomonas venusta e Aeromonas bivalvium foram moderadamente aderentes. Dietzia maris foi fortemente aderente. Para o muco intestinal, 60% das bactérias testadas eram fracamente aderentes e 40% não aderentes. Para infecção, D. maris, V. harveyi e A. bivalvium diminuíram a viabilidade celular para 89% após apenas 3h. Após 20h, o percentual de viabilidade variou entre 1% e 32%. Todos os isolados apresentaram resistência a 1000 mg mL-1 de sulfonamida, 60% foram resistentes à sulfonamida e à penicilina G. Os achados atuais podem ser relevantes na aqüicultura e ressaltam a importância da ligação entre adesão, capacidade infecciosa e suscetibilidade a antibióticos de bactérias patogênicas para evitar doenças em peixes.

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Linking proprieties of adhesion, infectious capacities and antibiotic resistance of pathogen bacteria could help to treat fish diseases. Adhesions of ten fish pathogenic bacteria were tested in microtiter plates vacant, coated with skin or gut mucus, fixed with methanol, stained with 2% crystal-violet and revealed by colorimetric method. Infectious capacity was performed by exposing gilthead seabream fibroblast cell line (SAF-1) to 107 -108 CFUmL-1 of pathogen bacteria. Cell viability was measured 3h, 9h and 20 hours post-infection. The sensitivity to antibiotics was executed by disk diffusion. Data showed that all the bacteria tested adhere to polystyrene. For skin mucus, Vibrio harveyi, Vibrio alginolyticus, Halomonas venusta, and Aeromonas bivalvium were moderately adherent. Dietzia maris was strongly adherent. For gut mucus, 60% of tested bacteria were weakly adherent and 40% were non adherent. For infection, D. maris, V. harveyi and A. bivalvium decreased the cells viability to 89% after only 3h. After 20h, the viability percentage ranged between 1% and 32%. All isolates presented resistance to 1000 mg ml-1 of sulphonamide, 60% were resistant to sulfonamide and penicillin G. Present findings could be relevant in fish aquaculture and underscore the importance of the linkage between adhesion, infectious capacity, and antibiotic susceptibility of pathogen bacteria to avoid fish diseases.(AU)

Estudar o link entre propriedades de adesão, capacidades infecciosas e resistência a antibióticos de bactérias patogênicas pode ajudar a tratar doenças de peixes. A adesão de dez bactérias patogênicas foi testada em placas de microtitulação vazias, revestidas com muco da pele ou do intestino, fixadas com metanol, coradas com 2% de violeta cristal e reveladas pelo modo colorimétrico. A capacidade infecciosa foi realizada expondo a linha celular de fibroblasto de dourada (SAF-1) a 107-108 CFUmL-1 de bactérias patogénicas. A viabilidade celular foi medida 3h, 9h e 20 horas após a infecção. A sensibilidade aos antibióticos foi executada por difusão em disco. Os dados mostram que todas as bactérias testadas aderem ao poliestireno. Para o muco cutâneo, Vibrio harveyi, Vibrio alginolyticus, Halomonas venusta e Aeromonas bivalvium foram moderadamente aderentes. Dietzia maris foi fortemente aderente. Para o muco intestinal, 60% das bactérias testadas eram fracamente aderentes e 40% não aderentes. Para infecção, D. maris, V. harveyi e A. bivalvium diminuíram a viabilidade celular para 89% após apenas 3h. Após 20h, o percentual de viabilidade variou entre 1% e 32%. Todos os isolados apresentaram resistência a 1000 mg mL-1 de sulfonamida, 60% foram resistentes à sulfonamida e à penicilina G. Os achados atuais podem ser relevantes na aqüicultura e ressaltam a importância da ligação entre adesão, capacidade infecciosa e suscetibilidade a antibióticos de bactérias patogênicas para evitar doenças em peixes.(AU)

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Stress is know as responsible for the decrease in immunity and reduced survival, growth, and reproductive capacity of animals. Besides, organisms respond to certain biological rhythms, such as circadian, to which animals naturally adjust. This study aimed to monitor the plasma (lactate and total protein), serum (cortisol and cholesterol) and whole blood (glucose) variables in tilapia in a 24 h cycle. A set of 49 aquariums with 5 individuals each were used. All of them, at the beginning of the experiment, were subjected to the same stress of capture and handling. The animals from the first aquaria were sampled after 15 min of stress. Blood samples from animals of the remaining aquarium were sequentially drawn at 30-min intervals. Radar charts were used to visualize the hourly change in the measured variables. Significant differences of each analysis between the measured variables by aquarium and the phases of the circadian cycle (light-dark) and morning-afternoon-night-dawn intervals, were evaluated using the Mann-Whitney and Kruskal-Wallis tests, respectively. A positive relationship between cortisol and glucose levels was found. Most analysis, except cholesterol and lactate did not show any significant difference between light and dark periods, and the intensity and frequency of peaks observed were not deleterious to individuals.

O estresse é conhecidamente responsável pela diminuição da imunidade e redução da sobrevivência, crescimento e capacidade reprodutiva dos animais. Além disso, os organismos respondem a certos ritmos biológicos, como o circadiano, aos quais se ajustam naturalmente. Este estudo teve como objetivo monitorar as variáveis plasmática (lactato e proteína total), soro (cortisol e colesterol) e sangue total (glicose) na tilápia em um período de 24 h. Quarenta e nove aquários com 5 indivíduos cada foram utilizados. Todos eles, no início do experimento, foram submetidos ao mesmo estresse de captura e manuseio. Os animais do primeiro aquários foram amostrados após 15 min do estresse. Os demais As amostras de sangue de indivíduos de cada aquário foram sequencialmente em intervalos de 30 min. Somente os indivíduos do primeiro aquário foram analisados após 15 minutos de estresse. Os gráficos de radar foram usadas para visualizar a variação horária nas variáveis medidas. Diferenças estatisticamente significativas entre a média dos indivíduos de cada aquário, para as fases do ciclo circadiano (luz-escuro) e os intervalos manhã-tarde-noite-madrugada foram respectivamente avaliadas utilizando os testes Mann-Whitney e Kruskal-Wallis. Observou-se relação positiva entre os níveis de cortisol e glicose. As análises, com exceção de colesterol e lactato, não mostraram diferença significativa entre períodos de luz e sombras, e a intensidade e a freqüência dos picos observados não foram prejudiciais aos indivíduos.

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Stress is know as responsible for the decrease in immunity and reduced survival, growth, and reproductive capacity of animals. Besides, organisms respond to certain biological rhythms, such as circadian, to which animals naturally adjust. This study aimed to monitor the plasma (lactate and total protein), serum (cortisol and cholesterol) and whole blood (glucose) variables in tilapia in a 24 h cycle. A set of 49 aquariums with 5 individuals each were used. All of them, at the beginning of the experiment, were subjected to the same stress of capture and handling. The animals from the first aquaria were sampled after 15 min of stress. Blood samples from animals of the remaining aquarium were sequentially drawn at 30-min intervals. Radar charts were used to visualize the hourly change in the measured variables. Significant differences of each analysis between the measured variables by aquarium and the phases of the circadian cycle (light-dark) and morning-afternoon-night-dawn intervals, were evaluated using the Mann-Whitney and Kruskal-Wallis tests, respectively. A positive relationship between cortisol and glucose levels was found. Most analysis, except cholesterol and lactate did not show any significant difference between light and dark periods, and the intensity and frequency of peaks observed were not deleterious to individuals.(AU)

O estresse é conhecidamente responsável pela diminuição da imunidade e redução da sobrevivência, crescimento e capacidade reprodutiva dos animais. Além disso, os organismos respondem a certos ritmos biológicos, como o circadiano, aos quais se ajustam naturalmente. Este estudo teve como objetivo monitorar as variáveis plasmática (lactato e proteína total), soro (cortisol e colesterol) e sangue total (glicose) na tilápia em um período de 24 h. Quarenta e nove aquários com 5 indivíduos cada foram utilizados. Todos eles, no início do experimento, foram submetidos ao mesmo estresse de captura e manuseio. Os animais do primeiro aquários foram amostrados após 15 min do estresse. Os demais As amostras de sangue de indivíduos de cada aquário foram sequencialmente em intervalos de 30 min. Somente os indivíduos do primeiro aquário foram analisados após 15 minutos de estresse. Os gráficos de radar foram usadas para visualizar a variação horária nas variáveis medidas. Diferenças estatisticamente significativas entre a média dos indivíduos de cada aquário, para as fases do ciclo circadiano (luz-escuro) e os intervalos manhã-tarde-noite-madrugada foram respectivamente avaliadas utilizando os testes Mann-Whitney e Kruskal-Wallis. Observou-se relação positiva entre os níveis de cortisol e glicose. As análises, com exceção de colesterol e lactato, não mostraram diferença significativa entre períodos de luz e sombras, e a intensidade e a freqüência dos picos observados não foram prejudiciais aos indivíduos.(AU)

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Wild fisheries are declining due to over-fishing, climate change, pollution and marine habitat destructions among other factors, and, concomitantly, aquaculture is increasing significantly around the world. Fish infections caused by pathogenic bacteria are quite common in aquaculture, although their seriousness depends on the season. Drug-supplemented feeds are often used to keep farmed fish free from the diseases caused by such bacteria. However, given that bacteria can survive well in aquatic environments independently of their hosts, bacterial diseases have become major impediments to aquaculture development. On the other hand, the indiscriminate uses of antimicrobial agents has led to resistant strains and the need to switch to other antibiotics, although it seems that an integrated approach that considers not only the pathogen but also the host and the environment will be the most effective method in the long-term to improve aquatic animal health. This review covers the mechanisms of bacterial pathogenicity and details the foundations underlying the interactions occurring between pathogenic bacteria and the fish host in the aquatic environment, as well as the factors that influence virulence. Understanding and linking the different phenomena that occur from adhesion to colonization of the host will offer novel and useful means to help design suitable therapeutic strategies for disease prevention and treatment.

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Successful disease treatment depends on molecular studies under indoor conditions with experimental infection protocols that facilitate understanding the disease and the drug`s efficacy. The internal transcribed spacer (ITS) region was sequenced from three isolates, which were identified as Saprolegnia aenigmatica. Subsequently, healthy fish were immunosuppressed with dexamethasone (1.2 mg kg-1) and descaled to the skin using a sharp scalpel. These individuals were isolated in individual aquariums maintained at 22°C. Individuals in one group were subcutaneously inoculated with 9,000 zoospores (DDZ treatment), a second group was exposed to oomycetes in water with three colonized baits (DDB), a third group was maintained in water without zoospores (DD), and a control group (C) consisted of healthy animals. After 48 and 96 hours, two animals from each group were euthanized for fungal reisolation. The fish from groups DD and C did not show clinical signs, and no oomycetes were isolated. The animals from the DDZ and DDB groups showed cotton-wool-like masses on the skin, and S. aenigmatica was re-isolated. Thus, for infection using zoospores or baits parasitized by S. aenigmatica, an immunosuppressor (dexamethasone) and a sharp scalpel can be used effectively to establish an experimental infection in P. mesopotamicus.

O sucesso do tratamento de uma enfermidade depende do estudo de moléculas em condições de laboratório por meio de protocolos de infecção experimental que viabilizam a compreensão da doença e da eficácia dos fármacos. Pela sequência ITS foram identificadas três cepas de Saprolegnia aenigmatica. Dessa forma, pacus sadios foram submetidos à imunossupressão com dexametasona (1,2 mg kg-1), esfoliados com auxílio de bisturi e distribuídos em aquários a 22ºC. Após este procedimento, um grupo de animais foi inoculado com 9.000 zoósporos/peixe subcutâneo (DEZ), a outro foram adicionadas três iscas colonizadas com o oomiceto na água (DEI), um terceiro grupo foi mantido sem contato com o oomiceto (DE) e um quarto grupo, de animais sadios, representaram o controle (C). Após 48 e 96h deste procedimento, foram eutanaziados animais de cada grupo para reisolamento. Os animais do grupo DE e C não apresentaram sinais clínicos e não foi reisolado o oomiceto. Porém, tanto os animais do grupo DEZ quanto como os animais do grupo DEI apresentaram micélio branco na pele e foi reisolado Saprolegnia aenigmatica. Assim, a infecção com zoósporos ou com iscas colonizadas por S. aenigmatica, com o uso de dexametasona e abrasivo epitelial são formas eficazes de infecção experimental em P. mesopotamicus.

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Successful disease treatment depends on molecular studies under indoor conditions with experimental infection protocols that facilitate understanding the disease and the drug`s efficacy. The internal transcribed spacer (ITS) region was sequenced from three isolates, which were identified as Saprolegnia aenigmatica. Subsequently, healthy fish were immunosuppressed with dexamethasone (1.2 mg kg-1) and descaled to the skin using a sharp scalpel. These individuals were isolated in individual aquariums maintained at 22°C. Individuals in one group were subcutaneously inoculated with 9,000 zoospores (DDZ treatment), a second group was exposed to oomycetes in water with three colonized baits (DDB), a third group was maintained in water without zoospores (DD), and a control group (C) consisted of healthy animals. After 48 and 96 hours, two animals from each group were euthanized for fungal reisolation. The fish from groups DD and C did not show clinical signs, and no oomycetes were isolated. The animals from the DDZ and DDB groups showed cotton-wool-like masses on the skin, and S. aenigmatica was re-isolated. Thus, for infection using zoospores or baits parasitized by S. aenigmatica, an immunosuppressor (dexamethasone) and a sharp scalpel can be used effectively to establish an experimental infection in P. mesopotamicus.(AU)

O sucesso do tratamento de uma enfermidade depende do estudo de moléculas em condições de laboratório por meio de protocolos de infecção experimental que viabilizam a compreensão da doença e da eficácia dos fármacos. Pela sequência ITS foram identificadas três cepas de Saprolegnia aenigmatica. Dessa forma, pacus sadios foram submetidos à imunossupressão com dexametasona (1,2 mg kg-1), esfoliados com auxílio de bisturi e distribuídos em aquários a 22ºC. Após este procedimento, um grupo de animais foi inoculado com 9.000 zoósporos/peixe subcutâneo (DEZ), a outro foram adicionadas três iscas colonizadas com o oomiceto na água (DEI), um terceiro grupo foi mantido sem contato com o oomiceto (DE) e um quarto grupo, de animais sadios, representaram o controle (C). Após 48 e 96h deste procedimento, foram eutanaziados animais de cada grupo para reisolamento. Os animais do grupo DE e C não apresentaram sinais clínicos e não foi reisolado o oomiceto. Porém, tanto os animais do grupo DEZ quanto como os animais do grupo DEI apresentaram micélio branco na pele e foi reisolado Saprolegnia aenigmatica. Assim, a infecção com zoósporos ou com iscas colonizadas por S. aenigmatica, com o uso de dexametasona e abrasivo epitelial são formas eficazes de infecção experimental em P. mesopotamicus.(AU)

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An 84-day feeding trial was conducted to evaluate the effect of the dietary administration of Bacillus subtilis on the growth performance, body composition, intestinal probiotic recovery, hematology, and non-specific immunity of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) raised at two stocking densities. Five hundred twenty male Nile tilapias (32.63 ± 1.25 g) were distributed in 16,800-L tanks. The experimental design was completely randomized using four replications and a 2 × 2 factorial scheme with two stocking densities (18.75 fish m(-3) 62.50 fish m(-3)) and two diets (control and with probiotic). The probiotic-supplemented diet included 5 × 10(6) CFU g feed(-1). There were no significant differences (P > 0.05) in the growth performance, body composition, and levels of cortisol and glucose between the animals fed with the control diet and the animals fed with the probiotic-supplemented diet. Differences in the growth performance were observed between the fish reared at different stocking densities; in particular, the fish raised at the high stocking density exhibited reduced weight gain, feed intake, and specific growth rate compared with those raised at the low stocking density. The B. subtilis remained viable after its inclusion in the feed, storage, and passage through the stomach, which demonstrations the feasibility of using this bacteria as a probiotic. Higher values (P < 0.05) in the plasma lysozyme levels and phagocytic activity were observed in the fish that received the probiotic-supplemented diet and reared at the high stocking density, but this difference was not observed in the fish raised at the low stocking density and fed the different diets. The administration of the probiotic caused decreases in the number of erythrocytes and the hematocrit level in the fish reared at the high stocking density, but these erythrocytes showed higher values of mean corpuscular hemoglobin. The stocking density was shown to be a stressor agent that causes a lower fish growth rate. The fish fed the control diet and raised at the high stocking density had lower lysozyme levels than the fish subjected to the other treatments. The inclusion of the probiotic bacteria B. subtilis at a concentration of 5 × 10(6) CFU g feed(-1) benefited the innate immune system of Nile tilapia by decreasing the stress associated with exposure to a high stocking density, increasing the mean corpuscular hemoglobin, and improving the innate immune system (lysozyme and phagocytic activities of macrophages).

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The aim of this study was to evaluate alterations to the physiological profile of cortisol in pro-metamorphose phase tadpoles of Lithobates catesbeianus exposed to hypoxia stressor in a capture experiment and in a crowding experiment. The capture study was performed by the treatments: stress due to individual capture with a hand net, stress due to batch capture with a hand net and stress due to capture by emptying. Three simultaneous replicates was done witch 12 animals were sampled (6 normoxia - immediately blood collection) and 6 hypoxia - blood collection after 15 min of air exposition) in two collection times with 5 days by intervals. The crowding study was performed by the treatments 1 tadpole L-1, 5 tadpoles L-1 and 10 tadpoles L-1. Three simultaneous replicates was done witch 8 animals (4 normoxia and 4 hypoxia) were sampled in the zero moment (ZM) - blood collection before the experiment, 6 animals/treatment (3 normoxia and 3 hypoxia) to 4 and 8 days and 18 animals/treatment (9 normoxia and 9 hypoxia) to 12 days. The average values to plasmatic cortisol varying from 1.7 to 5.1ng mL-1 (capture study) and 1.0 to 4.2ng mL-1 (crowding study). It concludes that the biomarker tested (cortisol) showed no alterations front of the stressor used. Alternatively, a larger response pattern to these stimuli may have been expressed in another level of an unmeasured hormone (corticosterone). And the bullfrog has great ability to adapt to different management compared to other aquatic organisms, which demonstrates the plasticity of these animals.(AU)

Avaliou-se o cortisol em girinos de rã-touro (Lithobates catesbeianus), no estágio de pró-metamorfose ao mecanismo estressor de hipóxia juntamente com captura (1º experimento) e adensamento (2º experimento). O experimento de captura foi composto pelos tratamentos: Captura individual com puçá, Captura em massa com puçá e Captura por escoamento, com 3 réplicas simultâneas onde 12 organismos foram amostrados (6 normoxia - coleta imediata de sangue e 6 hipoxia - coleta de sangue após 15 min de exposição ao ar) em 2 tempos de coleta com intervalo de 5 dias. O experimento de densidade foi composto pelos tratamentos: 1 girino L-1, 5 girinos L-1 e 10 girinos L-1, com 3 réplicas simultâneas onde 8 animais (4 normoxia e 4 hipoxia) foram amostrados no momento zero (MZ) - coleta de sangue anterior ao experimento, 6 animais/tratamento (3 normoxia e 3 hipoxia) para 4 e 8 dias e 18 animais/tratamento (9 normoxia e 9 hipoxia) para 12 dias. Os valores médios para o cortisol plasmático foram de 1,7 a 5,1ng mL-1 (Experimento de Captura); e 1,0 a 4,2ng mL-1 (Experimento de Densidade). Conclui-se que o marcador biologico de estresse utilizado (cortisol) não foi alterado pelo agente extressor. Alternativamente a resposta a este estímulo pode ser expressa em outro nível hormonal (corticosterona). E a rã-touro apresenta ótima capacidade de se adaptar aos diferentes manejos se comparados a outros organismos aquáticos, o que demonstra a plasticidade destes animais.(AU)

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The aim of this study was to evaluate alterations to the physiological profile of cortisol in pro-metamorphose phase tadpoles of Lithobates catesbeianus exposed to hypoxia stressor in a capture experiment and in a crowding experiment. The capture study was performed by the treatments: stress due to individual capture with a hand net, stress due to batch capture with a hand net and stress due to capture by emptying. Three simultaneous replicates was done witch 12 animals were sampled (6 normoxia - immediately blood collection) and 6 hypoxia - blood collection after 15 min of air exposition) in two collection times with 5 days by intervals. The crowding study was performed by the treatments 1 tadpole L-1, 5 tadpoles L-1 and 10 tadpoles L-1. Three simultaneous replicates was done witch 8 animals (4 normoxia and 4 hypoxia) were sampled in the zero moment (ZM) - blood collection before the experiment, 6 animals/treatment (3 normoxia and 3 hypoxia) to 4 and 8 days and 18 animals/treatment (9 normoxia and 9 hypoxia) to 12 days. The average values to plasmatic cortisol varying from 1.7 to 5.1ng mL-1 (capture study) and 1.0 to 4.2ng mL-1 (crowding study). It concludes that the biomarker tested (cortisol) showed no alterations front of the stressor used. Alternatively, a larger response pattern to these stimuli may have been expressed in another level of an unmeasured hormone (corticosterone). And the bullfrog has great ability to adapt to different management compared to other aquatic organisms, which demonstrates the plasticity of these animals.

Avaliou-se o cortisol em girinos de rã-touro (Lithobates catesbeianus), no estágio de pró-metamorfose ao mecanismo estressor de hipóxia juntamente com captura (1º experimento) e adensamento (2º experimento). O experimento de captura foi composto pelos tratamentos: Captura individual com puçá, Captura em massa com puçá e Captura por escoamento, com 3 réplicas simultâneas onde 12 organismos foram amostrados (6 normoxia - coleta imediata de sangue e 6 hipoxia - coleta de sangue após 15 min de exposição ao ar) em 2 tempos de coleta com intervalo de 5 dias. O experimento de densidade foi composto pelos tratamentos: 1 girino L-1, 5 girinos L-1 e 10 girinos L-1, com 3 réplicas simultâneas onde 8 animais (4 normoxia e 4 hipoxia) foram amostrados no momento zero (MZ) - coleta de sangue anterior ao experimento, 6 animais/tratamento (3 normoxia e 3 hipoxia) para 4 e 8 dias e 18 animais/tratamento (9 normoxia e 9 hipoxia) para 12 dias. Os valores médios para o cortisol plasmático foram de 1,7 a 5,1ng mL-1 (Experimento de Captura); e 1,0 a 4,2ng mL-1 (Experimento de Densidade). Conclui-se que o marcador biologico de estresse utilizado (cortisol) não foi alterado pelo agente extressor. Alternativamente a resposta a este estímulo pode ser expressa em outro nível hormonal (corticosterona). E a rã-touro apresenta ótima capacidade de se adaptar aos diferentes manejos se comparados a outros organismos aquáticos, o que demonstra a plasticidade destes animais.

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The aim of this study was to analyze the effects of chronic toxicity of sodium selenite (Na2SeO3 SE4+) on juvenile Nile tilapia Oreochromis niloticus. Therefore, a toxicity test was carried out with three sub-lethal concentrations of that salt (0.4 mgSe L-1, 0.04 mgSe L-1 and 0.01 mgSe L-1), plus a control group. The experiment was carried out for 14 days, sampling six individuals per treatment in intervals of 0, 3, 7, 10 and 14 days. Effects of chronic sublethal concentrations of selenite were evaluated by routine haematological and histopathological analysis. There were significant differences (P 0.05) in the rate of hemoglobin, mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin (MCH) and mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC) and an increase of the total number of leukocytes, mainly due to the increased number of lymphocytes, monocytes, and neutrophils. Severe gill hyperplasia was found on the fourteenth day. Nephrosis were found in the cephalic kidney, characterized by glomerulonephritis and tubular vacuolar degeneration, which was a result of the necrosis or secondary infection, glomerular atrophy and glomerulosclerosis, proliferative glomerulonephritis, nephrosis, nephrosclerosis, tubular calcification, edema and hemorrhage. It was found that selenite, at the tested concentrations despite being sublethal, caused histological and hematological changes in Nile tilapia.

Este trabalho teve como objetivo analisar os efeitos da toxicidade crônica do selenito de sódio (Na2SeO3 Se4+) em jovens de tilápia-do-nilo Oreochromis niloticus. Para tanto, um teste de toxicidade foi realizado com três concentrações sub-letais deste sal (0,4 mgSe L-1, 0,04 mgSe L-1 e 0,01 mgSe L-1) e 0 mgSe L-1 (controle). O experimento foi conduzido por 14 dias, com amostragem de seis indivíduos por tratamento nos intervalos 0, 3, 7, 10 e 14 dias para a avaliação dos efeitos crônicos sub-letais por meio de análises hematológicas de rotina e análises histopatológicas. Diferença significativa (P 0,05) ocorreu na concentração de hemoglobina, volume corpuscular médio (VCM), hemoglobina corpuscular média (HCM) e concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM) e aumento do número total de leucócitos, causados principalmente pelo aumento do número de linfócitos, monócitos e neutrófilos. Nas brânquias dos peixes expostos ao selenito de sódio foi encontrada hiperplasia grave no décimo quarto dia. No rim cefálico ocorreu nefrose caracterizada pela degeneração vacuolar tubular e glomerulonefrite, atrofia glomerular e glomeruloesclerose, glomerulonefrite proliferativa, nefroesclerose, calcificação tubular, edema e hemorragia. Conclui-seo selenito de sódio nas concentrações utilizadas provocaram alterações hematológicas e histológicasem tilápia-do-nilo, embora tenham sido usadas concentrações sub-letais neste ensaio.

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The aim of this study was to analyze the effects of chronic toxicity of sodium selenite (Na2SeO3 SE4+) on juvenile Nile tilapia Oreochromis niloticus. Therefore, a toxicity test was carried out with three sub-lethal concentrations of that salt (0.4 mgSe L-1, 0.04 mgSe L-1 and 0.01 mgSe L-1), plus a control group. The experiment was carried out for 14 days, sampling six individuals per treatment in intervals of 0, 3, 7, 10 and 14 days. Effects of chronic sublethal concentrations of selenite were evaluated by routine haematological and histopathological analysis. There were significant differences (P 0.05) in the rate of hemoglobin, mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin (MCH) and mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC) and an increase of the total number of leukocytes, mainly due to the increased number of lymphocytes, monocytes, and neutrophils. Severe gill hyperplasia was found on the fourteenth day. Nephrosis were found in the cephalic kidney, characterized by glomerulonephritis and tubular vacuolar degeneration, which was a result of the necrosis or secondary infection, glomerular atrophy and glomerulosclerosis, proliferative glomerulonephritis, nephrosis, nephrosclerosis, tubular calcification, edema and hemorrhage. It was found that selenite, at the tested concentrations despite being sublethal, caused histological and hematological changes in Nile tilapia.(AU)

Este trabalho teve como objetivo analisar os efeitos da toxicidade crônica do selenito de sódio (Na2SeO3 Se4+) em jovens de tilápia-do-nilo Oreochromis niloticus. Para tanto, um teste de toxicidade foi realizado com três concentrações sub-letais deste sal (0,4 mgSe L-1, 0,04 mgSe L-1 e 0,01 mgSe L-1) e 0 mgSe L-1 (controle). O experimento foi conduzido por 14 dias, com amostragem de seis indivíduos por tratamento nos intervalos 0, 3, 7, 10 e 14 dias para a avaliação dos efeitos crônicos sub-letais por meio de análises hematológicas de rotina e análises histopatológicas. Diferença significativa (P 0,05) ocorreu na concentração de hemoglobina, volume corpuscular médio (VCM), hemoglobina corpuscular média (HCM) e concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM) e aumento do número total de leucócitos, causados principalmente pelo aumento do número de linfócitos, monócitos e neutrófilos. Nas brânquias dos peixes expostos ao selenito de sódio foi encontrada hiperplasia grave no décimo quarto dia. No rim cefálico ocorreu nefrose caracterizada pela degeneração vacuolar tubular e glomerulonefrite, atrofia glomerular e glomeruloesclerose, glomerulonefrite proliferativa, nefroesclerose, calcificação tubular, edema e hemorragia. Conclui-seo selenito de sódio nas concentrações utilizadas provocaram alterações hematológicas e histológicasem tilápia-do-nilo, embora tenham sido usadas concentrações sub-letais neste ensaio.(AU)

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The objective of this study was to assess the growth performance and the histomorphometric characterization of the middle intestine of GIFT strain Nile tilapia, Oreochromis niloticus juveniles fed probiotics, added either before or after the feed processing. The experimental design was completely randomized, with five treatments and five replications: pelleted feed without any probiotic; pelleted feed with inclusion of probiotic before the processing; pelleted feed with inclusion of probiotic after the processing; extruded feed without any probiotic and extruded feed with inclusion of probiotic after the processing. Two hundred and fifty juveniles were distributed in 25 aquaria (20L) and fed for 63 days. Differences in the mean values of total weight were found at the end of the experiment. After 42 days of feed intake, significant differences in feed conversion were verified for treatments with extruded diets when compared to the pelleted ones. The fishes fed diets supplemented with probiotic presented increase in the thickness of the epithelium of the intestine. The best zootechnical performance was observed in the extruded diet supplemented with probiotic added after the feed processing. The inclusion of 4.0 x 10⁸ CFU g-¹of Bacillus subtilis and 4.0 x 10⁸ CFU g-¹ of Bacillus toyoi in both the pelleted and the extruded diets promoted an cincrease in the thickness of the epithelial layer of the middle intestine.

Objetivou-se avaliar o desempenho zootécnico e a caracterização histomorfométrica do intestino médio de juvenis de tilápias do Nilo, Oreochromis niloticus, variedade GIFT, alimentadas com probiótico, incluído antes e após o processamento de ração. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com cinco tratamentos e cinco repetições composto pelos seguintes tratamentos: ração peletizada sem probiótico; ração peletizada com inclusão do probiótico antes e após o processamento; ração extrusada sem probiótico e ração extrusada com inclusão do probiótico após o processamento. Duzentos e cinquenta juvenis foram distribuídos em 25 aquários (20L) e alimentados durante 63 dias. Foram constatadas diferenças para os valores médios do peso total no final do experimento. Após 42 dias de alimentação foram verificadas diferenças significativas na conversão alimentar para tratamentos com as dietas extrusadas comparadas com as peletizadas. Os peixes alimentados com as dietas suplementados com o probiótico apresentaram aumento na espessura da camada epitelial do intestino. O melhor desempenho zootécnico foi observado, na dieta extrusada suplementada de probiótico incorporado após o processamento de ração, e a inclusão de 4.0 x 10⁸ CFU g-¹ of Bacillus subtilis e 4.0 x 10⁸ CFU g-¹ of Bacillus toyoi, em dietas peletizadas e extrusadas, promoveu o aumento na espessura da camada epitelial do intestino médio.

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The objective of this study was to assess the growth performance and the histomorphometric characterization of the middle intestine of GIFT strain Nile tilapia, Oreochromis niloticus juveniles fed probiotics, added either before or after the feed processing. The experimental design was completely randomized, with five treatments and five replications: pelleted feed without any probiotic; pelleted feed with inclusion of probiotic before the processing; pelleted feed with inclusion of probiotic after the processing; extruded feed without any probiotic and extruded feed with inclusion of probiotic after the processing. Two hundred and fifty juveniles were distributed in 25 aquaria (20L) and fed for 63 days. Differences in the mean values of total weight were found at the end of the experiment. After 42 days of feed intake, significant differences in feed conversion were verified for treatments with extruded diets when compared to the pelleted ones. The fishes fed diets supplemented with probiotic presented increase in the thickness of the epithelium of the intestine. The best zootechnical performance was observed in the extruded diet supplemented with probiotic added after the feed processing. The inclusion of 4.0 x 10⁸ CFU g-¹of Bacillus subtilis and 4.0 x 10⁸ CFU g-¹ of Bacillus toyoi in both the pelleted and the extruded diets promoted an cincrease in the thickness of the epithelial layer of the middle intestine.(AU)

Objetivou-se avaliar o desempenho zootécnico e a caracterização histomorfométrica do intestino médio de juvenis de tilápias do Nilo, Oreochromis niloticus, variedade GIFT, alimentadas com probiótico, incluído antes e após o processamento de ração. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com cinco tratamentos e cinco repetições composto pelos seguintes tratamentos: ração peletizada sem probiótico; ração peletizada com inclusão do probiótico antes e após o processamento; ração extrusada sem probiótico e ração extrusada com inclusão do probiótico após o processamento. Duzentos e cinquenta juvenis foram distribuídos em 25 aquários (20L) e alimentados durante 63 dias. Foram constatadas diferenças para os valores médios do peso total no final do experimento. Após 42 dias de alimentação foram verificadas diferenças significativas na conversão alimentar para tratamentos com as dietas extrusadas comparadas com as peletizadas. Os peixes alimentados com as dietas suplementados com o probiótico apresentaram aumento na espessura da camada epitelial do intestino. O melhor desempenho zootécnico foi observado, na dieta extrusada suplementada de probiótico incorporado após o processamento de ração, e a inclusão de 4.0 x 10⁸ CFU g-¹ of Bacillus subtilis e 4.0 x 10⁸ CFU g-¹ of Bacillus toyoi, em dietas peletizadas e extrusadas, promoveu o aumento na espessura da camada epitelial do intestino médio.(AU)

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Probióticos são, em geral, considerados microrganismos vivos que, quando administrados em quantidades adequadas, conferem um benefício à saúde do hospedeiro. O método de processamento da dieta e a forma de inclusão do probiótico podem interferir nos parâmetros hematológicos, imunológicos e microbiológicos dos peixes. Objetivou-se estimar os parâmetros hematológicos, imunológicos e microbiológicos em juvenis de tilápia-do-nilo, alimentados com probiótico incluído antes e após o processamento de peletização e extrusão da ração. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado,com cinco tratamentos: ração peletizada sem a inclusão do probiótico, ração peletizada com inclusão do probiótico antes e após o processamento, ração extrusada sem probiótico e ração extrusada com inclusão do probiótico após o processamento, e cinco réplicas. Duzentos e cinquenta peixes foram distribuídos em 25 aquários (20L) e alimentados durante 63 dias. Acomposição sanguínea (série vermelha e branca) não mostrou diferenças significativas, exceto a concentração de hemoglobina corpuscular média do controle quando comparados aos demais tratamentos. A capacidade fagocítica dos animais que receberam a dieta extrusada suplementada com probiótico foi significativamente superior, entretanto, para o índice fagocítico, não ocorreram diferenças entre os tratamentos. Os peixes alimentados com a dieta extrusada mostraram melhora na imunidade inespecífica. As bactérias probióticas colonizaram o intestino, pois foi possível recuperá-las. Pode-se afirmar que esses peixes mantiveram-se sadios, pois os parâmetros hematológicos não sofreram alterações durante o período experimental. O estudo revela que qualquer forma de inclusão de probióticos nas rações testadas(antes ou depois da peletização e após a extrusão)pode ser utilizada facilmente pelo piscicultor.(AU)

Probiotics are generally considered as live microorganisms which, when administered in adequate amounts, confer a health benefit to the host. The processing method of diet and the form of inclusion of probiotic can interfere in hematological, immunological and microbiological parameters in fish. The aimwas to estimate the hematological, immunological and microbiological parameters in juveniles of Nile tilapia, fed probiotic, included before and after the process of pelletizationand extrusion. The experimental design was completely randomized, with five treatments: pelleted diet without probiotic, pelleted diet with inclusion of probiotic before and after processing, extruded feed without probiotic and extruded feed with inclusion of probiotic after processingand five replications.Two hundred and fiftyfishwere distributed in 25 aquaria (20L) and fed for 63 days. The blood composition (red and white) showed no significant difference.(AU)

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The aim of this study was to evaluate alterations to the physiological profile (cortisol, glycaemia, and blood parameters) of Lithobates catesbeianus caused by the stressors density and hypoxia. The organisms were in the prometamorphosis stage and exposed to different tadpole densities: 1 tadpole/L (T1), 5 tadpoles/L (T2), and 10 tadpoles/L (T3) for 12 days. The blood was collected through the rupture of the caudal blood vessel and collected under normoxia (immediate collection) and hypoxia (after 15 minutes of air exposure) conditions. Cortisol levels rose on the fourth and eighth days of treatment and returned to basal levels by the end of the experiment. The stressor mechanisms tested did not affect glycaemia. White blood cells (total number of lymphocytes, neutrophils, and eosinophils) showed a significant difference at the twelfth day of the experiment when compared with the start of the experiment. We concluded that, under controlled conditions, a density of up to 10 tadpoles/L and air exposure for 15 minutes did not cause harmful physiological alterations during the experimental period. The answer to these stressors maybe was in another hormonal level (corticosterone).(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta fisiológica (cortisol, glicemia e parâmetros sanguineos) de girinos de rã-touro (Lithobates catesbeianus) em diferentes densidades e após exposição aérea. Os animais utilizados no experimento estavam entre os estágios 31 a 39, na fase de pró-metamorfose sendo testados 1 girino/L (Tratamento 1), 5 girinos/L (Tratamento 2) e 10 girinos/L (Tratamento 3), conduzidos em 3 réplicas simultâneas durante 12 dias. O sangue foi retirado por rompimento do vaso caudal na condição de Normóxia - N (tempo zero) e Hipóxia - H (tempo de 15 minutos de exposição ao ar). Foi observado um aumento nos valores de cortisol, aos 4 e 8 dias de exposição aérea retornando aos valores basais ao final do experimento, apesar de não haver diferenças significativas. A glicemia não apresentou diferenças significativas quanto aos estressores aplicados. Os parâmetros hematológicos da série branca, principalmente, o número de linfócitos, neutrófilos e eosinófilos mostraram diferença significativa aos 12 dias de experimentação quando comparados com o momento zero; concluindo-se que, em condições controladas, o adensamento de até 10 girinos/litro e a exposição aérea por 15 minutos não apresentou danos aos girinos de rã-touro durante o período experimental. O padrão de resposta a estes estímulos talvez seja expresso em outro nível hormonal (corticosterona).(AU)

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The aim of this study was to evaluate alterations to the physiological profile (cortisol, glycaemia, and blood parameters) of Lithobates catesbeianus caused by the stressors density and hypoxia. The organisms were in the prometamorphosis stage and exposed to different tadpole densities: 1 tadpole/L (T1), 5 tadpoles/L (T2), and 10 tadpoles/L (T3) for 12 days. The blood was collected through the rupture of the caudal blood vessel and collected under normoxia (immediate collection) and hypoxia (after 15 minutes of air exposure) conditions. Cortisol levels rose on the fourth and eighth days of treatment and returned to basal levels by the end of the experiment. The stressor mechanisms tested did not affect glycaemia. White blood cells (total number of lymphocytes, neutrophils, and eosinophils) showed a significant difference at the twelfth day of the experiment when compared with the start of the experiment. We concluded that, under controlled conditions, a density of up to 10 tadpoles/L and air exposure for 15 minutes did not cause harmful physiological alterations during the experimental period. The answer to these stressors maybe was in another hormonal level (corticosterone).(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta fisiológica (cortisol, glicemia e parâmetros sanguineos) de girinos de rã-touro (Lithobates catesbeianus) em diferentes densidades e após exposição aérea. Os animais utilizados no experimento estavam entre os estágios 31 a 39, na fase de pró-metamorfose sendo testados 1 girino/L (Tratamento 1), 5 girinos/L (Tratamento 2) e 10 girinos/L (Tratamento 3), conduzidos em 3 réplicas simultâneas durante 12 dias. O sangue foi retirado por rompimento do vaso caudal na condição de Normóxia - N (tempo zero) e Hipóxia - H (tempo de 15 minutos de exposição ao ar). Foi observado um aumento nos valores de cortisol, aos 4 e 8 dias de exposição aérea retornando aos valores basais ao final do experimento, apesar de não haver diferenças significativas. A glicemia não apresentou diferenças significativas quanto aos estressores aplicados. Os parâmetros hematológicos da série branca, principalmente, o número de linfócitos, neutrófilos e eosinófilos mostraram diferença significativa aos 12 dias de experimentação quando comparados com o momento zero; concluindo-se que, em condições controladas, o adensamento de até 10 girinos/litro e a exposição aérea por 15 minutos não apresentou danos aos girinos de rã-touro durante o período experimental. O padrão de resposta a estes estímulos talvez seja expresso em outro nível hormonal (corticosterona).(AU)

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