RESUMO

The aim of this study was to determine whether Southern Blot/Hybridization (SB) associated to Polymerase Chain Reaction (PCR) improves the sensitivity in the detection of hemoplasma DNA in domestic cats (Felis catus). Whole blood was collected in tubes containing the anticoagulant ethylenediamine tetra-acetic acid and DNA extracted from 149 animals. PCR was performed using species specific primers to amplify the 16S ribosomal RNA subunit of Mycoplasma haemofelis and 'Candidatus M. haemominutum' from these samples. Hybridization was performed using a 16S rDNA probes chemically labeled and the results were visualized using a chemiluminescent substrate addition followed by autoradiography. Eighteen (12.1%) of the 149 tested samples had a positive PCR result for hemoplasma species DNA. SB/hybridization technique showed that 24/149 (16.1%) samples were positive for hemoplasmas, confirming the 18 PCR-positive results and reveling six additional positive animals (p 0.001). SB/hybridization method with specific probes was more sensitive than PCR performed alone, being complimentary to this technique to diagnose infections caused by feline hemoplasmas.

O objetivo deste trabalho foi verificar se a técnica de Southern Blot/Hibridização (SB) em associação à reação de polimerização em cadeia (PCR) aumenta a sensibilidade na detecção de DNA de hemoplasmas em gatos domésticos (Felis catus). O sangue total foi coletado em tubos contendo o anticoagulante ácido etilenodiamino tetra-acético, o DNA extraído a partir de 149 animais e a PCR realizada com o uso de sequências iniciadoras espécie-específicas, para amplificar subunidade 16S do RNA ribossomal de Mycoplasma haemofelis e 'Candidatus M. haemominutum' dessas amostras. Para a hibridização, foram utilizadas sondas específicas quimicamente marcadas, e os resultados visualizados por meio da adição de substrato quimiluminescente seguida de autoradiografia. Dezoito (12,1%) das 149 amostras testadas apresentaram resultado PCR-positivo para o DNA de hemoplasmas. A técnica de SB mostrou que 24/149 (16,1%) amostras apresentaram resultado positivo para hemoplasmas, confirmando os 18 resultados PCR-positivos, além de revelar seis outros adicionais (p 0,001). O método de SB com sondas específicas mostrou-se mais sensível do que a PCR realizada isoladamente, sendo complementar para o diagnóstico das infecções causadas pelos hemoplasmas felinos.

RESUMO

The aim of this study was to determine whether Southern Blot/Hybridization (SB) associated to Polymerase Chain Reaction (PCR) improves the sensitivity in the detection of hemoplasma DNA in domestic cats (Felis catus). Whole blood was collected in tubes containing the anticoagulant ethylenediamine tetra-acetic acid and DNA extracted from 149 animals. PCR was performed using species specific primers to amplify the 16S ribosomal RNA subunit of Mycoplasma haemofelis and 'Candidatus M. haemominutum' from these samples. Hybridization was performed using a 16S rDNA probes chemically labeled and the results were visualized using a chemiluminescent substrate addition followed by autoradiography. Eighteen (12.1%) of the 149 tested samples had a positive PCR result for hemoplasma species DNA. SB/hybridization technique showed that 24/149 (16.1%) samples were positive for hemoplasmas, confirming the 18 PCR-positive results and reveling six additional positive animals (p 0.001). SB/hybridization method with specific probes was more sensitive than PCR performed alone, being complimentary to this technique to diagnose infections caused by feline hemoplasmas.

O objetivo deste trabalho foi verificar se a técnica de Southern Blot/Hibridização (SB) em associação à reação de polimerização em cadeia (PCR) aumenta a sensibilidade na detecção de DNA de hemoplasmas em gatos domésticos (Felis catus). O sangue total foi coletado em tubos contendo o anticoagulante ácido etilenodiamino tetra-acético, o DNA extraído a partir de 149 animais e a PCR realizada com o uso de sequências iniciadoras espécie-específicas, para amplificar subunidade 16S do RNA ribossomal de Mycoplasma haemofelis e 'Candidatus M. haemominutum' dessas amostras. Para a hibridização, foram utilizadas sondas específicas quimicamente marcadas, e os resultados visualizados por meio da adição de substrato quimiluminescente seguida de autoradiografia. Dezoito (12,1%) das 149 amostras testadas apresentaram resultado PCR-positivo para o DNA de hemoplasmas. A técnica de SB mostrou que 24/149 (16,1%) amostras apresentaram resultado positivo para hemoplasmas, confirmando os 18 resultados PCR-positivos, além de revelar seis outros adicionais (p 0,001). O método de SB com sondas específicas mostrou-se mais sensível do que a PCR realizada isoladamente, sendo complementar para o diagnóstico das infecções causadas pelos hemoplasmas felinos.

RESUMO

In order to detect the positivity to antigens of Dirofilaria immitis, antibodies anti-Borrelia burgdorferi and anti-Ehrlichia canis, 200 canine blood samples were collected as followed: 100 from the municipality of Ilhéus and 100 from Itabuna, State of Bahia. The kit Snap 3DX (IDEXX Laboratories) was used to performe serology. None of the tested animals were positive for antigens of D. immitis. Only two dogs of them were positive for antibodies anti-B. burgdorferi. From all the samples analyzed, 72 (36%) were positive for antibodies anti-E. canis, 43 from Ilhéus and 29 from Itabuna (p=0,027).

Para avaliação de positividade para antígenos de Dirofilaria immitis, anticorpos anti-Borrelia burgdorferi e anti-Ehrlichia canis foram coletadas 200 amostras de sangue de cães, 100 no município de Ilhéus e 100 no de Itabuna. Foi utilizado o "kit" Snap 3DX (IDEXX Laboratories) para realização das sorologias. Não se observou nenhum animal positivo para antígenos de D. immitis. Apenas dois dos cães estavam positivos para anticorpos anti-B. burgdorferi. Do total de amostras analisadas, 72 (36%) estavam positivas para anticorpos anti-E. canis, sendo 43 em Ilhéus e 29 em Itabuna (p=0,027).

RESUMO

O Lynxacarus radovskyi é um ácaro da pele do gato que se alimenta da superfície do pêlo. O potencial das manifestaçõesclínicas é proporcional ao número de ácaros fixados no animal e a duração da infestação. Com o objetivo de pesquisar apresença de ectoparasitos em 10 felinos que apresentavam pontos avermelhados nos pêlos foi realizado o tricograma eobservou-se a presença de ovos e exemplares adultos de L. radovskyi aderidos aos pêlos dos animais. Observou-se, ainda,que um canino, macho e adulto, que convivia com estes felinos, também estava parasitado por estes artrópodes, emboraapresentando menor grau de infestação. Em cães, não existem relatos deste parasito na literatura mundial. Concluiu-se que,devido ao pequeno tamanho do parasito e as dificuldades no diagnóstico, é necessário um estudo amplo que avalie aocorrência deste parasito e suas implicações na sanidade dos felinos.

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O Lynxacarus radovskyi é um ácaro da pele do gato que se alimenta da superfície do pêlo. O potencial das manifestaçõesclínicas é proporcional ao número de ácaros fixados no animal e a duração da infestação. Com o objetivo de pesquisar apresença de ectoparasitos em 10 felinos que apresentavam pontos avermelhados nos pêlos foi realizado o tricograma eobservou-se a presença de ovos e exemplares adultos de L. radovskyi aderidos aos pêlos dos animais. Observou-se, ainda,que um canino, macho e adulto, que convivia com estes felinos, também estava parasitado por estes artrópodes, emboraapresentando menor grau de infestação. Em cães, não existem relatos deste parasito na literatura mundial. Concluiu-se que,devido ao pequeno tamanho do parasito e as dificuldades no diagnóstico, é necessário um estudo amplo que avalie aocorrência deste parasito e suas implicações na sanidade dos felinos.