RESUMO
In this study, P. fluorescens-infecting phages were isolated, characterized, and evaluated to their potential to control the bacterial counts and, consequently, the proteolytic spoilage of raw milk during cold storage. The UFJF_PfDIW6 and UFJF_PfSW6 phages showed titers of 9.7 and 7.6 log PFU/ml; latent period of 115 and 25 min, and burst size of 145 and 25 PFU/infected cell, respectively. They also were highly specific to the host bacterium, morphologically classified as the Podoviridae family, stable at pH 5 to 11 and were not inactivated at 63 °C or 72 °C for 30 min. These phages found to be effective against P. fluorescens, reducing bacterial count throughout the entire exponential growth phase in broth formulated with milk at both 4 °C and 10 °C. This effect on bacteria growth led to inhibition by at least 2 days in proteases production, delaying the degradation of milk proteins. When applied together in raw milk stored at 4 °C, they reduced the total bacteria, psychrotrophic, and Pseudomonas by 3 log CFU/ml. This study's findings indicate that these phages have a great potential to prevent the growth of Pseudomonas and, consequently, to retard proteolytic spoilage of raw milk during chilled storage.
Assuntos
Bacteriófagos , Contaminação de Alimentos/prevenção & controle , Armazenamento de Alimentos , Leite/microbiologia , Pseudomonas fluorescens/virologia , Animais , Temperatura Baixa , Microbiologia de Alimentos , Peptídeo Hidrolases , Pseudomonas fluorescens/crescimento & desenvolvimentoRESUMO
Neste estudo, Licochalcone A (LicoA) foi investigado em ensaios in vitro e in vivo . A sobrevivência dos vermes em cultura, o padrão de oviposição, a contagem de tubérculos íntegros e a integridade da pelagem foram adotados nos testes in vitro . Após a perfusão dos animais, o número de vermes recuperados, sua localização e o estudo do oograma foram os parâmetros analisados para sinalizar a existência de potencial atividade esquistossomicida in vivo . Observamos redução na sobrevivência, integridade do tegumento e reprodução de vermes adultos in vitro.. Os modelos murinos não mostraram diferença significativa nos parâmetros parasitológicos analisados que indicam atividade contra os vermes com uma dose oral única de 25 mg / kg de LicoA ou duas injeções intraperitoneais de 50 mg / kg de LicoA. No entanto, é muito cedo para excluir completamente a atividade esquistossomicida do LicoA, visto que a forma farmacêutica utilizada não poderia fornecer uma absorção regular do medicamento.(AU)
Assuntos
Schistosoma mansoni/patogenicidade , Técnicas In Vitro , Esquistossomose mansoni/parasitologia , OviposiçãoRESUMO
Neste estudo, Licochalcone A (LicoA) foi investigado em ensaios in vitro e in vivo . A sobrevivência dos vermes em cultura, o padrão de oviposição, a contagem de tubérculos íntegros e a integridade da pelagem foram adotados nos testes in vitro . Após a perfusão dos animais, o número de vermes recuperados, sua localização e o estudo do oograma foram os parâmetros analisados para sinalizar a existência de potencial atividade esquistossomicida in vivo . Observamos redução na sobrevivência, integridade do tegumento e reprodução de vermes adultos in vitro.. Os modelos murinos não mostraram diferença significativa nos parâmetros parasitológicos analisados que indicam atividade contra os vermes com uma dose oral única de 25 mg / kg de LicoA ou duas injeções intraperitoneais de 50 mg / kg de LicoA. No entanto, é muito cedo para excluir completamente a atividade esquistossomicida do LicoA, visto que a forma farmacêutica utilizada não poderia fornecer uma absorção regular do medicamento.
Assuntos
Esquistossomose mansoni/parasitologia , Schistosoma mansoni/patogenicidade , Técnicas In Vitro , OviposiçãoRESUMO
Haemoproteid species have a wide global distribution, and they have been described in falcon species in several parts of the world. However, few studies in South America have focused on these birds. Haemoproteus spp. infections have been reported as the causative agents of serious histopathological changes, which can lead to the death of the host. Thus, this study aimed to molecularly and phylogenetically characterize Haemoproteus spp. in Caracara plancus, to characterize aspects of parasitism through clinical analysis and biochemical parameters, and to describe the histopathology of infection. To examine these aspects, 5 southern caracaras were examined clinically, and blood samples were collected. Blood smears were subsequently utilized in parasitemia calculations, PCR amplification, and serum biochemical investigations. Histological sections of the liver, kidneys, spleen, and heart were examined to check for possible histopathological changes. The birds showed clinical signs such as pallor and prostration that are consistent with Haemoproteus spp. infection. Moreover, the examination of the blood smears revealed 0.07% parasitemia in young gametocytes only. The PCR and sequencing results confirmed that the parasites belonged to Haemoproteus spp. The activity of aspartate aminotransferase (AST) and alanine aminotransferase (ALT) enzymes, albumin, total serum proteins, and enzymatic urea were first described in C. plancus and serve as reference for future studies of bird species parasitized by Haemoproteus spp. Histopathology results showed signs of injury that were consistent with haemosporidian infection in the tissues of the analyzed organs. The present study is preliminary, and additional studies of Haemoproteus spp. infections in other bird species are needed to better understand the relationship between parasites and hosts, because despite the low parasitemia recorded, biochemical and histopathological changes in various organs were observed.
Assuntos
Doenças das Aves/parasitologia , Falconiformes/parasitologia , Haemosporida/genética , Infecções Protozoárias em Animais/parasitologia , Alanina Transaminase/sangue , Animais , Aspartato Aminotransferases/sangue , Sequência de Bases , Doenças das Aves/metabolismo , Doenças das Aves/patologia , Proteínas Sanguíneas/análise , DNA de Protozoário/sangue , DNA de Protozoário/química , Haemosporida/classificação , Haemosporida/patogenicidade , Rim/patologia , Fígado/patologia , Miocárdio/patologia , Parasitemia/veterinária , Filogenia , Infecções Protozoárias em Animais/metabolismo , Infecções Protozoárias em Animais/patologia , Alinhamento de Sequência/veterinária , Baço/patologia , Ureia/sangueRESUMO
The aims of this work were to evaluate the in vitro and in vivo schistosomicidal properties of the methanolic extract of the aerial parts of Mitracarpus frigidus (MFM) and to determine its HPLC profile. For the in vitro experiment, four pairs of adult worms, obtained from infected mice, were exposed to different concentrations of MFM (100 to 400 µg/mL) for 24 and 48 h and analyzed under an inverted microscope. For the in vivo experiment, mice were inoculated with cercariae and, 20 days after infection, MFM (100 and 300 mg/kg) was administered orally for the following 25 days. Mice were euthanized after 60 days. MFM showed in vitro schistosomicidal activity, exhibiting the opening of the gynaecophoral canal of some male schistosomes, the presence of contorted muscles, vesicles, and the darkening of the paired worms skin. In vivo experiments showed that MFM treatments significantly reduced total worm count, as praziquantel, showing a decrease in liver and spleen weight. Also, a significant reduction in granuloma density was observed. MFM treatment did not cause alterations in the liver function of either infected or noninfected mice. The HPLC chromatogram profile showed the presence of kaempferol-O-rutinoside, rutin, kaempferol, psychorubrin, and ursolic acid.
Assuntos
Extratos Vegetais/farmacologia , Plantas Medicinais/química , Rubiaceae/química , Schistosoma mansoni/efeitos dos fármacos , Animais , Cromatografia Líquida de Alta Pressão/métodos , Feminino , Granuloma/tratamento farmacológico , Quempferóis/química , Fígado/efeitos dos fármacos , Masculino , Camundongos , Naftoquinonas/química , Extratos Vegetais/química , Rutina/química , Esquistossomicidas/farmacologia , Baço/efeitos dos fármacos , Triterpenos/química , Ácido UrsólicoRESUMO
Schistosomiasis, a parasitic disease caused by trematode flatworms of the genus Schistosoma, affects more than 200 million people worldwide, and its control is dependent on a single drug, praziquantel. Tanacetum vulgare (Asteraceae) is used in folk medicine as a vermifuge. This study aimed to investigate the in vitro schistosomicidal activity of the crude extract (TV) and the essential oil (TV-EO) from the aerial parts of T. vulgare. TV-EO was obtained by hydrodistillation and analyzed by GC/MS, which allowed the identification of ß-thujone (84.13%) as the major constituent. TV and TV-EO, at 200 µg/mL, decreased motor activity and caused 100% mortality of all adult worms. At 100 and 50 µg/mL, only TV caused death of all adult worms, while TV-EO was inactive. TV (200 µg/mL) was also able to reduce viability and decrease production of developed eggs. Confocal laser scanning microscopy showed morphological alterations in the tegument of the S. mansoni surface after incubation with TV (50 and 100 µg/mL). Quantitative analysis on the schistosomes tegument showed that TV caused changes in the numbers of tubercles of S. mansoni male worms in a dose-dependent manner. The findings suggest that T. vulgare is a potential source of schistosomicidal compounds.
Assuntos
Anti-Helmínticos/farmacologia , Extratos Vegetais/farmacologia , Schistosoma mansoni/efeitos dos fármacos , Tanacetum/química , Animais , Microscopia ConfocalRESUMO
Usando a apirase de batata como antígeno, as propriedades imunogênicas das isoformas de ATP difosfohidrolase de S. mansoni foram inicialmente exploradas em esquistossomose experimental. Elevada reatividade de anticorpos IgG2a e IgG1 contra esta proteína vegetal foi observada em soro de camundongos BALB/c na fase aguda da infecção (8-9ª semana pós-infecção). Elevada reatividade de anticorpos IgG1 com a apirase de batata, mas não de IgG2a, foi encontrada na fase crônica da infecção (17ª semana pós-infecção), diferenciando sorologicamente as fases da infecção. Adicionalmente, foi observado que o inóculo de apirase de batata em camundongos BALB/c saudáveis tem marcante atividade estimulatória, aumentando significativamente os níveis de anticorpos IgG1 e IgG2a específicos. O subtipo IgG1 de camundongo, mas não IgG2a, reage com a ATP difosfohidrolase presente na preparação de SEA. A reatividade de anticorpos contra a apirase de batata foi monitorada por um período de 11 meses em camundongos BALB/c tratados com oxaminiquina na fase crônica da doença.
A reatividade de IgM, IgG total ou IgG1 contra a apirase de batata reduziu significativamente (~60%) após 11 meses, enquanto IgG2a, que esteve elevada na fase aguda, perde a significância na fase crônica e permanece inalterada na etapa do pós tratamento. Após a quimioterapia, os camundongos foram re-infectados com 100 cercárias, e nenhuma diferença significativa foi observada na soropositividade de IgG1, mas uma elevação significativa de IgG2a foi detectada nos camundongos re-infectados sugerindo uma nova fase aguda e sua participação nos mecanismos de proteção contra o Schistosoma. Estudos in silico demonstraram uma íntima relação estrutural e evolucionária entre a apirase de batata e as isoformas de ATP difosfohidrolases de S. mansoni. A predição de modelos tridimensionais sugeriu que os domínios conservados podem estar expostos e disponíveis para a ligação com anticorpos. O perfil de reatividade de anticorpos contra a apirase de batata foi, então, estudado em amostras de soros obtidas de pacientes com esquistossomose, moradores de três áreas endêmicas diferentes. Amostras de soros de grupos de adultos e crianças mostraram alta reatividade contra a apirase de batata, com elevação dos níveis de anticorpos IgA, IgE, IgG1 ou IgG4, com diferenças significativas entre eles. Após a quimioterapia, redução significativa ou ausência de reatividade de anticorpos contra a apirase de batata foi observada nestes pacientes. Esses achados podem estar associados à resistência ou susceptibilidade
Assuntos
Masculino , Feminino , Humanos , Animais , Bovinos , Camundongos , Ratos , Trifosfato de Adenosina/análise , Apirase/genética , Esquistossomose mansoni/genéticaRESUMO
Usando a apirase de batata como antígeno, as propriedades imunogênicas das isoformas de ATP difosfohidrolase de S. mansoni foram inicialmente exploradas em esquistossomose experimental. Elevada reatividade de anticorpos IgG2a e IgG1 contra esta proteína vegetal foi observada em soro de camundongos BALB/c na fase aguda da infecção (8-9ª semana pós-infecção). Elevada reatividade de anticorpos IgG1 com a apirase de batata, mas não de IgG2a, foi encontrada na fase crônica da infecção (17ª semana pós-infecção), diferenciando sorologicamente as fases da infecção. Adicionalmente, foi observado que o inóculo de apirase de batata em camundongos BALB/c saudáveis tem marcante atividade estimulatória, aumentando significativamente os níveis de anticorpos IgG1 e IgG2a específicos. O subtipo IgG1 de camundongo, mas não IgG2a, reage com a ATP difosfohidrolase presente na preparação de SEA. A reatividade de anticorpos contra a apirase de batata foi monitorada por um período de 11 meses em camundongos BALB/c tratados com oxaminiquina na fase crônica da doença.
A reatividade de IgM, IgG total ou IgG1 contra a apirase de batata reduziu significativamente (~60%) após 11 meses, enquanto IgG2a, que esteve elevada na fase aguda, perde a significância na fase crônica e permanece inalterada na etapa do pós tratamento. Após a quimioterapia, os camundongos foram re-infectados com 100 cercárias, e nenhuma diferença significativa foi observada na soropositividade de IgG1, mas uma elevação significativa de IgG2a foi detectada nos camundongos re-infectados sugerindo uma nova fase aguda e sua participação nos mecanismos de proteção contra o Schistosoma. Estudos in silico demonstraram uma íntima relação estrutural e evolucionária entre a apirase de batata e as isoformas de ATP difosfohidrolases de S. mansoni. A predição de modelos tridimensionais sugeriu que os domínios conservados podem estar expostos e disponíveis para a ligação com anticorpos. O perfil de reatividade de anticorpos contra a apirase de batata foi, então, estudado em amostras de soros obtidas de pacientes com esquistossomose, moradores de três áreas endêmicas diferentes. Amostras de soros de grupos de adultos e crianças mostraram alta reatividade contra a apirase de batata, com elevação dos níveis de anticorpos IgA, IgE, IgG1 ou IgG4, com diferenças significativas entre eles. Após a quimioterapia, redução significativa ou ausência de reatividade de anticorpos contra a apirase de batata foi observada nestes pacientes. Esses achados podem estar associados à resistência ou susceptibilidade