RESUMO
Begonia is a very appreciated genus of ornamental plants, of economic relevancy, having species of flowers and foliage. In commercial croppings, plants exhibiting characteristic symptoms of phytoplasma infection have been observed, such as shoot proliferation, reduced plant, size small leaves and flowers, and phyllody. Leaves were sampled and total DNA was extracted to be used in nested Polymerase Chain Reaction (PCR), in order to detect and identify an expected phytoplasma. The results confirmed consistently the presence of a phytoplasma associated with symptomatic plants through the amplification of a typical genomic fragment of 1.2 kb by using the universal primers R16mF2/mR1 and R16F2n/R2. The use of specific primers R16(III)F2/R1 allowed to identify the phytoplasma detected as a representative of the group 16SrIII. This information is very expressive, because different diseases caused by fungus, bacteria, virus and nematodes have been reported for begonia, however, reports have not been found for begonia diseases associated with phytoplasmas.
Begônia é um gênero muito apreciado de plantas ornamentais, de relevância econômica, compreendendo espécies de flores e de folhagem. Em cultivo comercial foram observadas plantas apresentando sintomas característicos de infecção por fitoplasma, entre eles superbrotamento de ramos, redução no porte da planta, folhas e flores pequenas e filodia. A partir de amostras foliares foi feita extração de DNA para ser usado em duplo Polymerase Chain Reaction (PCR), visando 'a detecção de fitoplasma em tecido doente e a sua identificação ao nível de grupo de classificação. Os testes revelaram consistemente a associação de fitoplasma com os sintomas da doença, através da amplificação de um fragmento genômico típico de 1,2kb para os iniciadores universais R16mF2/mR1 e R16F2n/R2, usados na reação de PCR. O emprego de iniciadores específicos R16(III)F2/R1 permitiu identificar o fitoplasma detectado como um representante do grupo 16SrIII. Este é um resultado expressivo, pois diversas doenças causadas por fungos, bactérias, vírus e nematóides têm sido relatadas para begônia, no entanto, não têm sido encontrados relatos para doenças de begônia associadas a fitoplasmas.
RESUMO
Begonia is a very appreciated genus of ornamental plants, of economic relevancy, having species of flowers and foliage. In commercial croppings, plants exhibiting characteristic symptoms of phytoplasma infection have been observed, such as shoot proliferation, reduced plant, size small leaves and flowers, and phyllody. Leaves were sampled and total DNA was extracted to be used in nested Polymerase Chain Reaction (PCR), in order to detect and identify an expected phytoplasma. The results confirmed consistently the presence of a phytoplasma associated with symptomatic plants through the amplification of a typical genomic fragment of 1.2 kb by using the universal primers R16mF2/mR1 and R16F2n/R2. The use of specific primers R16(III)F2/R1 allowed to identify the phytoplasma detected as a representative of the group 16SrIII. This information is very expressive, because different diseases caused by fungus, bacteria, virus and nematodes have been reported for begonia, however, reports have not been found for begonia diseases associated with phytoplasmas.
Begônia é um gênero muito apreciado de plantas ornamentais, de relevância econômica, compreendendo espécies de flores e de folhagem. Em cultivo comercial foram observadas plantas apresentando sintomas característicos de infecção por fitoplasma, entre eles superbrotamento de ramos, redução no porte da planta, folhas e flores pequenas e filodia. A partir de amostras foliares foi feita extração de DNA para ser usado em duplo Polymerase Chain Reaction (PCR), visando 'a detecção de fitoplasma em tecido doente e a sua identificação ao nível de grupo de classificação. Os testes revelaram consistemente a associação de fitoplasma com os sintomas da doença, através da amplificação de um fragmento genômico típico de 1,2kb para os iniciadores universais R16mF2/mR1 e R16F2n/R2, usados na reação de PCR. O emprego de iniciadores específicos R16(III)F2/R1 permitiu identificar o fitoplasma detectado como um representante do grupo 16SrIII. Este é um resultado expressivo, pois diversas doenças causadas por fungos, bactérias, vírus e nematóides têm sido relatadas para begônia, no entanto, não têm sido encontrados relatos para doenças de begônia associadas a fitoplasmas.
RESUMO
Maize rayado fino virus (MRFV), present in various countries in Latin America, has shown similarities to corn streak virus that occurs in Brazil, regarding pathogenic, serological and histological characteristics. In the current report both virus were molecularly compared to confirm the similarities between them. MRFV was identified by nucleic acid hybridization in samples of maize tissues exhibiting symptoms of "corn stunt" disease, collected from two Brazilian States - São Paulo and Minas Gerais. The coat protein gene and 3'non-translated region of MRFV were amplified from infected tissues by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) using MRFV-specific primers, and were characterized by nucleotide sequence and phylogenetic analysis of the cloned PCR products. Phylogenetic analysis of the relationships between the Brazilian isolates and isolates obtained from Latin America and the United States reveals a close relationship to isolates from Brazil, Peru and Bolivia. Results support the proposal that the Brazilian corn streak virus be regarded as an isolate of MRFV and provide evidence for the presence of MRFV in "corn stunt' disease in Brazil.
O vírus do rayado fino do milho (MRFV), presente em vários países da América Latina, tem mostrado semelhança ao vírus da risca do milho que ocorre no Brasil, em relação a características patogênicas, sorológicas e histológicas. No presente trabalho, ambos os vírus foram comparados molecularmente, visando confirmar a similaridade entre os mesmos. O MRFV foi identificado por hibridização de ácido nucléico em amostras de tecido que apresentavam sintomas de enfezamento, coletadas nos estados de São Paulo e Minas Gerais. O gene da capa protéica e a região 3' não traduzida do MRFV foram amplificados, a partir de tecidos infectados, através da transcrição reversa por reação em cadeia da polimerase (RT-PCR), usando-se os iniciadores específicos para o vírus, obtendo-se a seqüência nucleotídica e a análise filogenética dos produtos de PCR clonados. A análise filogenética relacionando isolados brasileiros, da América Latina e dos Estados Unidos revela a estreita relação entre isolados do Brasil, do Peru e da Bolívia. Os resultados demonstraram que o vírus da risca do milho, presente no Brasil, pode ser considerado como um isolado do MRFV e também evidenciaram a presença do MRFV associado à doença conhecida como enfezamento do milho que ocorre no Brasil.
RESUMO
Maize rayado fino virus (MRFV), present in various countries in Latin America, has shown similarities to corn streak virus that occurs in Brazil, regarding pathogenic, serological and histological characteristics. In the current report both virus were molecularly compared to confirm the similarities between them. MRFV was identified by nucleic acid hybridization in samples of maize tissues exhibiting symptoms of "corn stunt" disease, collected from two Brazilian States - São Paulo and Minas Gerais. The coat protein gene and 3'non-translated region of MRFV were amplified from infected tissues by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) using MRFV-specific primers, and were characterized by nucleotide sequence and phylogenetic analysis of the cloned PCR products. Phylogenetic analysis of the relationships between the Brazilian isolates and isolates obtained from Latin America and the United States reveals a close relationship to isolates from Brazil, Peru and Bolivia. Results support the proposal that the Brazilian corn streak virus be regarded as an isolate of MRFV and provide evidence for the presence of MRFV in "corn stunt' disease in Brazil.
O vírus do rayado fino do milho (MRFV), presente em vários países da América Latina, tem mostrado semelhança ao vírus da risca do milho que ocorre no Brasil, em relação a características patogênicas, sorológicas e histológicas. No presente trabalho, ambos os vírus foram comparados molecularmente, visando confirmar a similaridade entre os mesmos. O MRFV foi identificado por hibridização de ácido nucléico em amostras de tecido que apresentavam sintomas de enfezamento, coletadas nos estados de São Paulo e Minas Gerais. O gene da capa protéica e a região 3' não traduzida do MRFV foram amplificados, a partir de tecidos infectados, através da transcrição reversa por reação em cadeia da polimerase (RT-PCR), usando-se os iniciadores específicos para o vírus, obtendo-se a seqüência nucleotídica e a análise filogenética dos produtos de PCR clonados. A análise filogenética relacionando isolados brasileiros, da América Latina e dos Estados Unidos revela a estreita relação entre isolados do Brasil, do Peru e da Bolívia. Os resultados demonstraram que o vírus da risca do milho, presente no Brasil, pode ser considerado como um isolado do MRFV e também evidenciaram a presença do MRFV associado à doença conhecida como enfezamento do milho que ocorre no Brasil.
RESUMO
Control of anthracnose in green pepper involves the use of resistant varieties and/or fungicides. The selection of varieties and efficient products demands great amounts of conidia as inoculum. It is thus necessary to optimize the production of Colletotrichum gloeosporioides conidia in the laboratory, establishing the best conditions for fungus development. The present study aimed at determining the most favorable culture media, temperature, and light conditions for the production of fungus inoculum. The fungus was isolated from green pepper fruits (Capsicum annuum L.) and transferred to four culture media (PDA, oat, filtered pepper extract, and autoclaved pepper extract), under different temperatures (15, 20, 25, 30, and 35ºC) and light conditions (24h dark, and 24h light). Colony growth was evaluated after 7 and 12 days of incubation. No differences were found between the culture media. However, the greatest number of conidia was obtained from colonies grown in oat medium at 25ºC. Temperatures of 20 and 25ºC were the most favorable for colony growth and sporulation. Higher sporulation was obtained under incubation in constant light. Cultivation of C. gloeosporioides in oat medium, at 25ºC, and constant light is recommended.
O controle da antracnose causada por Colletotrichum gloeosporioides em pimentão, envolve o emprego de variedades resistentes e/ou fungicidas. A seleção de variedades e de produtos eficientes demanda grande quantidade de inóculo. Assim, é necessário otimizar a produção de conídios em laboratório, estabelecendo as melhores condições para tal. O presente trabalho teve por objetivo determinar o meio de cultura, a temperatura e o regime de luz mais favoráveis à produção de inóculo do fungo. O isolado fúngico foi obtido de frutos de pimentão e cultivado em quatro meios de cultura (BDA, aveia, extrato de pimentão filtrado e extrato de pimentão autoclavado), sob diferentes temperaturas (15, 20, 25, 30 e 35 ºC) e regimes de luz (24 h de escuro, 24 h de luz). O crescimento da colônia foi avaliado aos 7 e 12 dias, não sendo observadas diferenças entre os meios, aos 12 dias após a incubação. Entretanto, maior produção de conídios foi obtida de colônias crescidas em aveia a 25ºC. As temperaturas de 20 e 25ºC foram as mais favoráveis para o crescimento da colônia e para esporulação do fungo. A produção de conídios foi maior quando em incubação sob luz contínua diferindo da incubação sob escuro total, aos 12 dias. Para obtenção de inóculo, indica-se o cultivo de C. gloeosporioides em meio de aveia, a 25ºC, sob luz contínua, por 12 dias.
RESUMO
Control of anthracnose in green pepper involves the use of resistant varieties and/or fungicides. The selection of varieties and efficient products demands great amounts of conidia as inoculum. It is thus necessary to optimize the production of Colletotrichum gloeosporioides conidia in the laboratory, establishing the best conditions for fungus development. The present study aimed at determining the most favorable culture media, temperature, and light conditions for the production of fungus inoculum. The fungus was isolated from green pepper fruits (Capsicum annuum L.) and transferred to four culture media (PDA, oat, filtered pepper extract, and autoclaved pepper extract), under different temperatures (15, 20, 25, 30, and 35ºC) and light conditions (24h dark, and 24h light). Colony growth was evaluated after 7 and 12 days of incubation. No differences were found between the culture media. However, the greatest number of conidia was obtained from colonies grown in oat medium at 25ºC. Temperatures of 20 and 25ºC were the most favorable for colony growth and sporulation. Higher sporulation was obtained under incubation in constant light. Cultivation of C. gloeosporioides in oat medium, at 25ºC, and constant light is recommended.
O controle da antracnose causada por Colletotrichum gloeosporioides em pimentão, envolve o emprego de variedades resistentes e/ou fungicidas. A seleção de variedades e de produtos eficientes demanda grande quantidade de inóculo. Assim, é necessário otimizar a produção de conídios em laboratório, estabelecendo as melhores condições para tal. O presente trabalho teve por objetivo determinar o meio de cultura, a temperatura e o regime de luz mais favoráveis à produção de inóculo do fungo. O isolado fúngico foi obtido de frutos de pimentão e cultivado em quatro meios de cultura (BDA, aveia, extrato de pimentão filtrado e extrato de pimentão autoclavado), sob diferentes temperaturas (15, 20, 25, 30 e 35 ºC) e regimes de luz (24 h de escuro, 24 h de luz). O crescimento da colônia foi avaliado aos 7 e 12 dias, não sendo observadas diferenças entre os meios, aos 12 dias após a incubação. Entretanto, maior produção de conídios foi obtida de colônias crescidas em aveia a 25ºC. As temperaturas de 20 e 25ºC foram as mais favoráveis para o crescimento da colônia e para esporulação do fungo. A produção de conídios foi maior quando em incubação sob luz contínua diferindo da incubação sob escuro total, aos 12 dias. Para obtenção de inóculo, indica-se o cultivo de C. gloeosporioides em meio de aveia, a 25ºC, sob luz contínua, por 12 dias.
RESUMO
To evaluate the effect of plant extracts on the growth and the sporulation of Colletotrichum gloeosporioides, aqueous extracts from garlic, pippermint, castor bean and pepper were obtained and incorporated into potato-dextrose-agar (PDA) at concentrations of 100, 200, 500, 1000, 5000 and 10000 mg/g. Micelial growth and the conidium production were evaluated in these media. All extracts exhibited inhibitory effect at the concentration of 200 mg/g and above. Garlic extracts inhibited micelial growth in the range of 5.3 to 67.6%, it had, however no effect on sporulation. Peppermint, castor bean and pepper extracts promoted micelium inhibition and reduced the conidium production in the range of 41 to 84%, according to the extract concentrations. It was demonstrated that the different extracts have antifungal activities and that they have a potential use as an alternative control in relation to physical or chemical methods.
Extratos aquosos foram obtidos a partir de bulbilhos de alho, folhas de hortelã e mamona e frutos de pimenta. Após a incorporação destes extratos em BDA, obtendo-se concentrações de 100, 200, 500, 1000, 5000 e 10000 ppm, foi avaliado o crescimento e a produção de conídios de um isolado de Colletotrichum gloeosporioides, agente de podridão em frutos de mamoeiro. Os resultados demonstraram o efeito inibitório dos diferentes extratos a partir da concentração de 200 ppm. O extrato de alho inibiu o crescimento micelial, em porcentagens variáveis de 5,3 a 67,6%, porém não atuou de modo expressivo sobre a produção de conídios. Em contraposição, os extratos de hortelã, mamona e pimenta promoveram inibição menos acentuada do crescimento de micélio, porém reduziram drasticamente a produção de conídios em níveis variáveis de 41 a 84%, de acordo com as concentrações crescentes dos mesmos. As propriedades fungitóxicas detectadas nos extratos utilizados no ensaio evidenciaram o uso potencial dos mesmos como alternativa aos métodos físicos e químicos convencionalmente usados para o controle da doença.
RESUMO
To evaluate the effect of plant extracts on the growth and the sporulation of Colletotrichum gloeosporioides, aqueous extracts from garlic, pippermint, castor bean and pepper were obtained and incorporated into potato-dextrose-agar (PDA) at concentrations of 100, 200, 500, 1000, 5000 and 10000 mg/g. Micelial growth and the conidium production were evaluated in these media. All extracts exhibited inhibitory effect at the concentration of 200 mg/g and above. Garlic extracts inhibited micelial growth in the range of 5.3 to 67.6%, it had, however no effect on sporulation. Peppermint, castor bean and pepper extracts promoted micelium inhibition and reduced the conidium production in the range of 41 to 84%, according to the extract concentrations. It was demonstrated that the different extracts have antifungal activities and that they have a potential use as an alternative control in relation to physical or chemical methods.
Extratos aquosos foram obtidos a partir de bulbilhos de alho, folhas de hortelã e mamona e frutos de pimenta. Após a incorporação destes extratos em BDA, obtendo-se concentrações de 100, 200, 500, 1000, 5000 e 10000 ppm, foi avaliado o crescimento e a produção de conídios de um isolado de Colletotrichum gloeosporioides, agente de podridão em frutos de mamoeiro. Os resultados demonstraram o efeito inibitório dos diferentes extratos a partir da concentração de 200 ppm. O extrato de alho inibiu o crescimento micelial, em porcentagens variáveis de 5,3 a 67,6%, porém não atuou de modo expressivo sobre a produção de conídios. Em contraposição, os extratos de hortelã, mamona e pimenta promoveram inibição menos acentuada do crescimento de micélio, porém reduziram drasticamente a produção de conídios em níveis variáveis de 41 a 84%, de acordo com as concentrações crescentes dos mesmos. As propriedades fungitóxicas detectadas nos extratos utilizados no ensaio evidenciaram o uso potencial dos mesmos como alternativa aos métodos físicos e químicos convencionalmente usados para o controle da doença.