RESUMO
O presente trabalho estabeleceu a densidade de micronúcleos e a distribuição do colágeno intersticial no tecido tumoral benigno e maligno de mama humana. Foram utilizadas a reação histoquímica de Feulgen e tricrômico de Masson, e a análise digital de imagens. Foram selecionados fragmentos de tecido mamário, diagnosticados como Fibroadenoma (FA), Doença fibrocística (DF) e Carcinoma Ductal Infiltrante (CDI). Para controle, foram utilizadas amostras de plástica mamária com tecido normal. A reação histoquímica foi realizada através da reação de Feulgen, para evidenciação dos micronúcleos, e, para a análise de colágeno intersticial, foi utilizada a coloração tricrômico de Masson. O número médio de micronúcleos exibiu valores semelhantes em amostra de FA (90,8 ± 4,5), DF (80,3 ± 4,0) e tecido normal (83,0 ± 4,1). Entretanto, valores significativamente menores que aqueles foram encontrados no CDI (176,5 ± 88,3). Quanto à distribuição do colágeno intersticial, constatou-se um aumento estatisticamente significante (p< 0,001) nos casos de FA (8101,4 ± 405,07) e DF (7046,78 ± 352,33), quando comparados ao tecido mamário normal (1733,13 ± 86,65) e ao CDI (2165,94 ± 108,29). Pode-se concluir que tanto o método de análise de imagem como a reação de Feulgen mostraram-se eficientes para evidenciar as alterações do núcleo celular e da matriz extracelular de tumores de mama.
Assuntos
Carcinoma Ductal de Mama , Colágeno , Doença da Mama Fibrocística , Fibroadenoma , Neoplasias da Mama , Testes para MicronúcleosRESUMO
Objetivo: este estudo avaliou, através da histoquímica e da morfometria, o perfil histológico do pâncreas de ratos Wistar, gerados por matrizes submetidas aos seguintes tratamentos: dieta padrão, dieta hipoprotéica e ingestão crônica de etanol (3g/kg peso corporal). Método: quatro grupos experimentais foram gerados: grupo controle - GC; grupo etanol- GE; grupo desnutrido - GD; grupo etanol desnutrido - GED, avaliando-se a evolução do peso corporal em três períodos: 3° (P3), 25° (P5) e 40° (P40) dias de vida. Na análise morfométrica avaliaram-se as áreas de depósito de colágeno, número médio de vasos pancreáticos e ilhotas de Langerhans. Resultados: observamos que em P3, apenas o grupo etanol (GE) tinha peso significativamente menor quando comparado com os demais grupos. Houve diferença significativa de peso corporal entre os grupos de mesmo tratamento e dietas diferentes (GE x GED) em P25 e P40, tendo o GED o menor peso. O GD e GED exibiram um aumento no número médio de vasos, quando comparado aos outros grupos. Entretanto, não houve uma alteração, estatisticamente, significativa no número de ilhotas de Langerhans, bem como nos depósitos de colágeno nos grupos tratados. Conclusão: de acordo com os resultados obtidos, o modelo experimental adotado a exposição pré e pós-natal ao etanol, causa alterações significativas no número de vasos no pâncreas e peso corporal médio. Por outro lado, as ilhotas de Langerhans e tecido conjuntivo pancreático não demonstraram alterações morfológicas importantes.
Objective: the present study evaluated, by means of histochemistry and morphometrical analysis, the histological profile ofpancreas of Wistar rats born offemales which underwent any of the following treatments: standard laboratory diet, low-protein diet and ethanol chronic ingestion (3g/Kg/day). Methodology: four experimental groups (Control Group - CG, Ethanol Group - EG, Undernourished Group - UG and Ethanol Undernourished Group - EUG) had their body weights evaluated at three different time: on the 3rd (D3), 25th (D25) and 40th (D40) day oflife. Areas ofcollagen deposition, number of pancreatic vessels and islets of Langerhans were evaluated in morphometric analysis. Results: on D3, only the ethanol group (EG) had significantly lower weight when compared to the other groups. There was significant difference ofweight between groups with same treatment but different diets (EG x EUG) on D25 and D40. EUG had the lower weight. In the morphometric study, UG and EUG showed a significant increase in the mean number of vessels when compared to other groups. However, there were no statistically significant changes neither on the number of islets of Langerhans nor on the interstitial collagen deposits among experimental groups. Conclusion: the experimental protocol thus showed pre and post-natal exposition to ethanol to induce minor morphological changes in pancreatic tissue of rats, while undernutrition, associated or not to ethanol, brought significant changes on pancreatic vessel number and body weights. On the other hand, islets of Langerhans and pancreatic conjunctive tissue did no! present important morphological alterations.
Assuntos
Animais , Feminino , Gravidez , Recém-Nascido , Desnutrição , Etanol/efeitos adversos , Ilhotas Pancreáticas , Pâncreas , Ratos WistarRESUMO
Estudos têm demonstrado os efeitos do alcoolismo e desnutrição isolados ou em associação. Baseando-se nessas informações, o presente estudo avaliou, por meio da histoquímica e análise digital de imagens, o perfil histológico do fígado de ratos Wistar gerados por matrizes submetidas a dois tratamentos nutricionais: dieta padrão do biotério (Labina, 23% de proteína) e dieta hipoprotéica (Dieta Básica Regional - DBR 8% de proteína) e ingestão crônica de etanol (3,0g/kg do peso corporal) ou água destilada, originando 4 grupos experimentais (Controle GC, Etanol-GE, Desnutrido-GO e Etanol-Desnutrido-GED). Avaliou-se a evolução ponderal dos filhotes em três períodos: 3º (P3), 25º (P25) e 40º (P40) dias de vida. Observou-se em P3 que apenas GE tinha peso significativamente menor, quando comparado com os demais grupos. Em P25 e P40, o GE e GED apresentaram significativa redução de peso, quando comparados com os grupos GC e GD, tendo o GED peso menor. Na análise morfométrica, foram medidas as áreas de depósito de colágeno perivascular, número de infiltrados inflamatórios no parênquima hepático e permitiu observar que o depósito de colágeno perivascular e intersticial teve aumento estatisticamente significativo no GE, quando comparado com os outros grupos. A exposição ao etanol e desnutrição protéica experimental causou a vacuolização dos hepatócitos, em grande parte do parênquima, e a ocorrência de infiltrados inflamatórios intersticiais e perivasculares no grupo etanol. Em resumo, nossos resultados revelam que há interferência do álcool e da desnutrição protéica, de forma isolada ou em associação...
Studies have shown the effects of malnutrition and alccolismo alone or in combination. Based on this information, this study examined, by immunohistochemistry and digital image analysis, histological profile of the liver of rats generated by arrays subjected to two nutritional treatments: standard diet of the vivarium (Labina, 23% protein) and low protein diet (Regional Basic Diet - DBR 8% protein) and chronic ingestion of ethanol (3.0 g/kg body weight) or distilled water, resulting in four experimental groups (Control GC, GE, Ethanol, and Ethanol-GO Malnourished -Malnourished-GED). We evaluated the weight gain of pups in three periods: 3 (P3), 25 (P25) and 40 (P40) days old. It was observed that only in P3 GE had significantly lower weight compared with the other groups. In P25 and P40, GE and GED showed significant weight reduction when compared with the GC and GD, taking the GED less weight. In morphometric analysis, we measured the areas of perivascular collagen deposition, number of inflammatory infiltrates in the liver parenchyma and has observed that the collagen deposition and perivascular interstitial had a statistically significant increase in SG, when compared with other groups. Ethanol exposure and experimental protein malnutrition caused vacuolization of hepatocytes, mainly the parenchyma, and the occurrence of interstitial and perivascular inflammatory infiltrates in the ethanol group. In summary, our results show that there is interference of alcohol and malnutrition, alone or in combination...
Los estudios han demostrado los efectos de la malnutrición y alccolismo solo o en combinación. Con base en esta información, este estudio examinó, mediante técnicas de inmunohistoquímica y análisis de imágenes digitales, el perfil histológico del hígado de las ratas generado por las matrices sometido a dos tratamientos nutricionales: dieta estándar del vivero (Labina, 23% de proteína) y la dieta baja en proteínas (Dieta Básica Regional - DBR proteínas 8%) y la ingestión crónica de etanol (3,0 g/kg de peso corporal) o agua destilada, lo que resulta en cuatro grupos experimentales (control de GC, GE, etanol, etanol y desnutridos-GO -desnutridos-GED). Se evaluó la ganancia de peso de las crías en tres períodos: 3 (P3), 25 (P25) y de edad 40 (P40) días. Se observó que sólo en P3 GE tenía un peso significativamente menor en comparación con los otros grupos. En P25 y P40, GE y GED mostraron una reducción significativa de peso en comparación con el GC y GD, tomando el peso de GED menos. En el análisis morfométrico, que mide las áreas de depósito de colágeno perivascular, el número de infiltrados inflamatorios en el parénquima hepático y ha observado que el depósito de colágeno intersticial y perivascular había un aumento estadísticamente significativo en la SG, en comparación con otros grupos. la exposición del etanol y la desnutrición proteica experimental causada vacuolización de hepatocitos, sobre todo el parénquima, y la presencia de infiltrado inflamatorio intersticial y perivascular en el grupo de etanol. En resumen, nuestros resultados muestran que hay una interferencia del alcohol y la malnutrición, solo o en combinación...
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Animais , Bebidas Alcoólicas/toxicidade , Desnutrição Proteico-Calórica/etiologia , Desnutrição Proteico-Calórica/metabolismo , Fígado/lesões , Fígado/metabolismoRESUMO
Mães alcoolistas, em humanos e animais de laboratório, vêm sendo responsáveis por distúrbios sistêmicos em seus descendentes. O presente estudo avaliou, através da histoquímica e da análise digital de imagem, o perfil histológico do coração de ratos (ratos Wistar) submetidos indiretamente ao etanol e à desnutrição crônica, durante o período perinatal, gerados por matrizes submetidas aos seguintes tratamentos: dieta padrão do biotério, dieta experimental hipoprotéica, ingestão de água e ingestão crônica de etanol (3g/kg do peso corporal). Foram originados quatro grupos experimentais (Grupo Controle GC, Etanol GE, Desnutrido GD, Etanol Desnutrido GED), avaliando-se a evolução do peso corporal em três períodos: 3o (P3), 25o (P25) e 40o (P40) dia de vida. Na análise morfométrica, avaliaram-se as áreas de depósito de colágeno, o número e o diâmetro médio dos vasos cardíacos e as inclusões PAS-positivas e lipofucsina. Os resultados demonstraram que, em P3, apenas o grupo etanol (GE) tinha peso significativamente menor, quando comparado com os demais grupos. Houve diferença significativa de peso entre os grupos com o mesmo tratamento e dietas diferentes (GE x GED) em P25 e P40, tendo o GED o menor peso. A análise de imagens dos depósitos de colágeno revelou um aumento significativo no GE. O GD exibiu uma redução no número médio de vasos, quando comparado a outros grupos. O GED apresentou um aumento significativo no diâmetro médio dos vasos do endo-miocárdio, bem como inclusões PAS-positivas, com distribuição difusa dos cardiomiócitos e do endotélio vascular. Pode-se, então, concluir que a exposição pré e pós-natal ao etanol induz alterações morfológicas importantes no tecido cardíaco dos descendentes, e muitas dessas alterações são intensificadas pelo estado de desnutrição protéica.
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Assistência Perinatal , Coração , Desnutrição , EtanolRESUMO
The S100 proteins have been extensively used as cancer biomarkers. The objectives of the present work were to immobilize the antibody anti-protein S100 to a net of semi-interpenetrated of polysiloxane and polyvinyl alcohol (POS-PVA discs), to investigate its capacity to capture S100 protein from serum and to quantify it by ELISA in sera from patients with prostatic adenocarcinoma (n = 15) and healthy individuals (n = 10). Also these values were compared to the S100 protein expression in the prostatic tissue through immunohistochemistry. The POS-PVA discs fixed about 92.8% of the offered antibody (7.75 microg of antibody per disc). The best values of the immobilized no-marked antibody anti-S100 and serum dilution were found to be 10 microg and 1:400, respectively. Optical density (OD) values for the sera of patients (0.425 +/- 0.042) with prostatic adenocarcinoma were significantly lower (P < 0.05) compared to those established for the healthy individuals (1.034 +/- 0.124). In the immunohistochemistry study no significant variations were observed in the number of positive S100 cells between prostatic adenocarcinoma (153.45 +/- 16.82) and normal prostate (147.04 +/- 18.98). These results showed a clear difference between S100 proteins expressed in tissue and presented in serum during the prostatic tissue neoplasic transformation. Sera analysis was more sensitive than immunohistochemistry S100 protein detection in the prostate tissue besides the advantage to be less invasive method.
Assuntos
Biomarcadores Tumorais/sangue , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática/métodos , Proteínas de Neoplasias/sangue , Neoplasias da Próstata/sangue , Neoplasias da Próstata/diagnóstico , Proteínas S100/sangue , Biomarcadores Tumorais/imunologia , Humanos , Masculino , Proteínas de Neoplasias/imunologia , Neoplasias da Próstata/imunologia , Reprodutibilidade dos Testes , Proteínas S100/imunologia , Sensibilidade e EspecificidadeRESUMO
Objetivo: avaliar através da histoquímica com lectinas a expressão de glicosaminoglicanos (mucinas) nas células do trato gastrointestinal de ratos expostos ao etanol. Método: ratos foram expostos ao etanol (3 g/kg do peso) durante 15, 30 e 45 dias. Após a perfusão, o estômago e o intestino fixados em formalina tamponada a 10% e fragmentos desses órgãos emblocados em parafina. Os cortes histológicos (4µm) foram incubados com lectil1as (PNA, WGA e ConA) conjugadas à peroxidase. A marcação das lectinas se revelou com o DAB-H202. seguida pela contra-coloração com hematoxilina. Os métodos Periodic acid-shiff (PAS) e Alcian blue foram usados para avaliar a expressão de glicosaminoglicanos (mucinas). Resultados: verificou-se que na mucosa gástrica a expressão das mucinas aumentou progressivamente durante a exposição ao etanol, conforme o aumento do número de células PAS e Alcian blue positivas. Por outro lado, na mucosa intestinal nenhuma diferença considerável se observou no número dessas células. Todas as lectinas testadas apresentaram um aumento no padrão de marcação relacionado ao maior período de exposição ao etanol. A PNA foi a mais seletiva das lectinas, reconhecendo, exclusivamente, células do cólon e das glândulas gástricas. A Con A apresentou uma intensa marcação nas regiões apicais das glândulas do cólon e do estômago, enquanto que a WGA reagiu, intensamente, nas células caliciformes e células de Paneth nas glândulas do epitélio intestinal. Conclusão: esses achados demonstram que a exposição ao etanol, leva a uma alteração dos padrões de reconhecimento das lectinas nas células do tecido gastrointestinal, bem como, um aumento a expressão gástrica das mucinas.
Objectives: in this work, lectin histochemistry was used to evaluate the expression of glycosaminoglycan (mucin) in gastrointestinal cells of rats exposed to ethanol. Method: Rats were exposed to ethanol (3g/kg of weight) during 15, 30 and 45 days. After perfusion, the stomach and intestine were formalin 10% fixed and the tissues were paraffin embedded. Slices (4mm) were incubated with peroxidase-conjugated lectins (PNA, WGA and Con A). Lectin staining was revealed with DAB-H2O 2followed by haematoxylin counterstaining. Periodic acid-Shiff (PAS)and Alcian Blue staining methods were used to evaluate glycosaminoglycan expression. Results: indicated that, in gastric mucosae, acid and neutral mucin expression rose progressively during ethanol exposition while in intestinal mucosae no considerable difference was observed in the number of PAS- and Alcian Blue-positive staining cells. All lectins presented an increasing binding pattern related to the period of ethanol exposure. PNA was the most selective lectin, recognizing exclusively colon cells and gastric glands. Con A presented an intense binding to the bottom region of the colon stomach glands while WGA intensely bound to the caliceform and Paneth cells in the intestinal glands. Conclusion: These jindings demonstrate that ethanol exposure led to a different pattern of lectin recognition of the cells of the gastrointestinal tissue.
Assuntos
Animais , Ratos , Etanol/toxicidade , Glicosaminoglicanos , Histocitoquímica/métodos , Lectinas , Mucinas , Trato GastrointestinalRESUMO
The present study aims to evaluate, through lectin histochemistry, the alterations in the expression of cell surface carbohydrate between benign and malignant lesions of skin using computer image analysis. Skin fragments were obtained through biopsies and diagnosed as basal cell carcinoma (BCC), epidermoid carcinoma (EpC), trichoepithelioma (TE), keratoacanthoma (KA), seborrheic keratosis (SK) and actinic keratosis (AK). Lectins Con A, WGA, PNA, UEA-I and LTA were used in histochemistry study. Image analysis was carried out in a workstation using OPTIMAS TM software system. PNA strong binding pattern to studied tumours evidenced the high expression of D-galactose residues in the epidermal neoplasms when compared to other sugars recognized by the other lectins. Among benign neoplasms, KA presented a high expression of glucose/mannose, alpha-fucose and D-galactose residues evidenced by the intense staining of Con A (94.7 percent), LTA (84.2 percent) and PNA (89.4 percent), respectively. Malignant tumours showed distinct binding patterns. EpC presented significant binding only by PNA lectin. BCC was differentially stained in comparison to the staining pattern observed in benign lesions such as TE. Qualitative (lectin histochemistry) and quantitative (digital image analysis) data obtained in this study evidenced those lectins are potential markers to biochemical alterations in skin neoplasms.
O presente estudo objetivou avaliar, através da histoquímica com lectinas, as alterações na expressão dos carboidratos da superfície celular entre lesões benignas e malignas da pele usando análise de imagens computadorizadas. Fragmentos de pele foram obtidos através de biópsias e diagnosticados como carcinoma basocelular (CBC), carcinoma epidermóide (EpC), tricoepitelioma (TE), cerato acantoma (KA), ceratose seborreica (CS) e ceratose actínica (CA). As lectinas Con A, WGA, PNA, UEA-I e LTA foram usadas no estudo histoquímico. A análise de imagens foi realizada numa estação de análise usando o sistema OPTIMAS TM de análises. A PNA tem sido largamente utilizada no estudo de tumores, evidenciando a expressão de D-galactose nas neoplasias epidérmicas; esse açúcar apresenta alta expressão quando comparado com os outros reconhecidos pelas demais lectinas. Entre as neoplasias benignas, KA apresentou alta expressão glucose/manose; resíduos de alfa-fucose e D-galactose apresentaram intensa marcação com ConA (94,7%) LTA (84,2%) e PNA (89,4 %), respectivamente. Os tumores malignos mostraram marcações distintas: EpC apresentou marcaçã significativa somente com a lectina PNA; CBC apresentou diferente padrão de marcação quando comparado ao observado nas lesõs benignas assim como no TE. Os resultados qualitativos (análise de imagens) e quantitativos (histoquímica com lectinas) desse estudo evidenciaram que as lectinas têm grande potencial como marcadores de alterações bioquímicas nas neoplasias da pele.
Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Carcinoma Basocelular/diagnóstico , Diagnóstico Diferencial , Interpretação de Imagem Assistida por Computador , Lectinas , Neoplasias Cutâneas/diagnósticoRESUMO
Immunohistochemistry, based on antibody anti-S100 protein, was used to evaluate the Langerhans cells (LC) in benign and malign skin neoplasias. These cells were quantitatively estimated using a computer image analysis (OPTIMAS software system, Version 6.1) in skin biopsies diagnosed as basal cell carcinoma (BCC), epidermoid carcinoma (EpC), trichoepithelioma (TE), keratoacanthoma (KA), seborreic keratosis (SK) and actinic keratosis (AK). The antibody anti-S100 protein recognized them. No significant variations were observed in the number of LC among malignant tumour (BCC = 23.25 +/- 5.81 and EpC = 20.88 +/- 4.24). Benign lesions (AK = 33.04 +/- 7.11; TE = 55.74 +/- 9.35; SK = 42.38 +/- 9.92, and KA = 47.62 +/- 10.4) presented a higher number of LC when they were compared among them and to malignant and normal tissues. No significant differences were observed in LC area and volume between benign and malign neoplasias. These results indicate possibly differences in the immunogenicity between benign and malign epidermic tumours. In conclusion, the experimental computer assessment method was reliable and consistent to morphometric analysis of tumoural tissues.
Assuntos
Carcinoma Basocelular/patologia , Processamento de Imagem Assistida por Computador/métodos , Imuno-Histoquímica/métodos , Células de Langerhans/patologia , Neoplasias Cutâneas/patologia , Idoso , Feminino , Humanos , Masculino , Pessoa de Meia-IdadeRESUMO
Resumo: No presente estudo foram utilizadas 48 ratas da linhagem Wistar a partir de 50 dias de vida,que foram divididas em dois grupos: controle (recebendo água por gavagem) e aguardente, durante três períodos : 40 (n = 8); 50 (n = 8); e, 60(n=8) dias, respectivamente e pesadas diariamente. Após a perfusão extraiu-se o coração, que foi pesado e fixado em formalina tamponada a 10por cento por 48h. Posteriormente, dissecou-se a parede ventricular esquerda, obtendo-se desta três fragmentos: superior, médio e inferior. Cortes histológicos dos fragmentos foram corados pela Hematoxilina-Eosina e Tricrômico de Masson. O estudo estatistico não demonstrou diferenças quanto ao peso corporal e cardíaco, assim como ao diâmetro médio dos vasos cardóacos. por outro lado, houve um aumento significante do número médio de vasos no grupo "aguardente" quando comparado ao grupo controle. No aspecto histológico não se observaram depósitos de colágeno intersticial o perivascular nos grupos estudados. Conclui-se que o aumento da rede vascular no grupo "aguardente" pode acarretar uma maior oxigenação no músculo cardíaco, minimizando assim, as lesões provocadas pelo álcool