RESUMO
A simple iron-milk medium was used for the isolation and enumeration (MPN) if Clostridium perfringens from fresh sausages. Samples were diluted (log 10) in 0.1% peptone water, aliquots seeded and incubated at 45°C for 16-18 h, and cultures with clots and stormy fermentation were considered positive. Confirmation of C. perfringens was made by subculturing in tryptose-sulfite-neomycin agar under anaerobic conditions. Suspect colonies were identified by standard procedures, including nitrate reduction, gelatin liquefaction, lipase and lecithinase production, starch hydrolysis, hemolysis and reverse CAMP test. From 136 samples studied, 110 were positive. Twenty-six, 48, 25, 7, 3, and 1 samples contained, respectively 10, 102, 103, 104, 105, and 109 C. perfringens per g of food. Three per cent of samples contained enough bacteria to produce food poisoning. The frequency of distribution approximately follows the Poisson equation with a µ=1.793.
RESUMO
El método de Coaglutinación estafilocócica (COA) para la identificación de clostridium chavoei fue estudiado con cuatro inmunosueros obtenidoa a partir de las siguientes preparaciones antigénicas (cultivos de 12h de la cepa 5078 de C. chavoei: a) células tratadas con formol al 0.5% (CF); b) células calentadas a ebullición 2h (CO) (ambas preparaciones con una concentración de 1.05 x 10**9 células/ml); c) extrato de veronal (EV); células lavadas y lisofilizadas se extrajeron con regulador veronal pH 8.50; y d) suspensión flagelar (F): al cultivo lavado dos veces con solución fisiológica se desflageló por agitación manual, se centrifugó a 3.500 x g y 16.000 x g durante 20 min. Los flagelos fueron separados por filtración en membrana filtrante (poro 0.2µm) observándoselos por impregnación argéntica. Lotes de 3 conejos se inocularon con 5 dosis de cada antígeno (0.2; 0.4; 0.8; 1.6 y 3.2ml) por vía IV. Para la preparación de la proteína A se siguió la técnica modificada de Kronvall. La cepa Cowan I de Staphylococcus aureus se estabilizó adiconando 0.1 ml de cada antisuero a 1 ml de suspensión. Como testigo se sensibilizaton estafilococos con suero normal de conejo. La COA se realizó con las cepas de C. chauvoei 5078, Chl y Ch2, con líquidos biológicos de ratones inoculados con la cepa 5078, con las cepas de C. septicum 3606 y S9 y una cepa de C. perfringens. Las lecturas se realizaron entre 2 y 8 min y se informaron de 0 a 4 +. La prueba fue específica para C. chauvoei y no dio reacciones cruzadas con C. spticum ni C. perfringens. La COA fue más efectiva cuando se utilizaron los antisueros obtenidos con EV (los antígenos estarían más purificados) y con F. En este caso se deberían usar los antígenos flagelares f y g, aunque escparían las mutantes inmóviles. El antisuero CF mostró una COS inferior a las anteriores, pero podría emplearse porque la preparación del antígeno es más sencilla. La COA con anti-CO fue menorm dudosa o negativa, el calor destruye componentes antigénicos. La COA puede ser un valioso elemento para el diagnóstico de C. Chauvoei