RESUMO

Increased expression of recombinant mini-proinsulin in Pichia pastoris in 2.5 l bioreactors was achieved by increasing the cultivation pH from 5.1 to 6.3, by decreasing the temperature from 28 to 22 degrees C, and by periodical addition of ammonium sulfate and EDTA to the culture broth. Using this procedure, mini-proinsulin reached nearly 0.3 g l(-1) in the culture supernatant after 160 h of growth.

Assuntos

Reatores Biológicos/microbiologia , Técnicas de Cultura de Células/métodos , Nitrogênio/metabolismo , Pichia/crescimento & desenvolvimento , Pichia/metabolismo , Proinsulina/biossíntese , Sulfato de Amônio/farmacologia , Proliferação de Células/efeitos dos fármacos , Ácido Edético/farmacologia , Concentração de Íons de Hidrogênio , Pichia/efeitos dos fármacos , Pichia/genética , Proinsulina/genética , Proteínas Recombinantes/biossíntese , Temperatura