RESUMO
Radiopharmaceuticals are employed in patient diagnostics and disease treatments. Concerning the diagnosis aspect, technetium-99m (99mTc) is utilized to label radiopharmaceuticals for single photon computed emission tomography (SPECT) due to its physical and chemical characteristics. 99mTc fixation on pharmaceuticals depends on a reducing agent, stannous chloride (SnCl(2)) being the most widely-utilized. The genotoxic, clastogenic and anegenic properties of the 99mTc-MDP(methylene diphosphonate used for bone SPECT) and SnCl(2) were evaluated in Wistar rat blood cells using the Comet assay and micronucleus test. The experimental approach was to endovenously administer NaCl 0.9% (negative control), cyclophosphamide 50 mg/kg b.w. (positive control), SnCl(2) 500 μg/mL or 99mTc-MDP to animals and blood samples taken immediately before the injection, 3, and 24 h after (in the Comet assay) and 36 h after, for micronucleus test. The data showed that both SnCl(2) and 99mTc-MDP-induced deoxyribonucleic acid (DNA) strand breaks in rat total blood cells, suggesting genotoxic potential. The 99mTc-MDP was not able to induce a significant DNA strand breaks increase in in vivo assays. Taken together, the data presented here points to the formation of a complex between SnCl(2) in the radiopharmaceutical 99mTc-MDP, responsible for the decrease in cell damage, compared to both isolated chemical agents. These findings are important for the practice of nuclear medicine.
Assuntos
Dano ao DNA , Compostos Radiofarmacêuticos/toxicidade , Medronato de Tecnécio Tc 99m/toxicidade , Compostos de Estanho/toxicidade , Animais , Células da Medula Óssea/efeitos dos fármacos , Eritrócitos/efeitos dos fármacos , Leucócitos Mononucleares/efeitos dos fármacos , Masculino , Micronúcleos com Defeito Cromossômico/induzido quimicamente , Testes para Micronúcleos , Ratos , Ratos WistarRESUMO
Reactive oxygen species (ROS) can induce lesions in different cellular targets, including DNA. Stannous chloride (SnCl2) is a ROS generator, leading to lethality in Escherichia coli (E. coli), with the base excision repair (BER) mechanism playing a role in this process. Many techniques have been developed to detect genotoxicity, as comet assay, in eukaryotic cells, and plasmid DNA agarose gel electrophoresis. In this study, an adaptation of the alkaline gel electrophoresis method was carried out to ascertain the induction of strand breaks by SnCl2 in bacterial DNA, from E. coli BER mutants, and its repair pathway. Results obtained show that SnCl2 was able to induce DNA strand breaks in all strains tested. Moreover, endonuclease IV and exonuclease III play a role in DNA repair. On the whole, data has shown that the alkaline gel electrophoresis assay could be used both for studying DNA strand breaks induction and for associated repair mechanisms.
Espécies reativas de oxigênio (ERO) podem induzir lesões em diferentes alvos celulares, incluindo o DNA. O cloreto estanoso (SnCl2) é um gerador de ERO que induz letalidade em E. coli, sendo o reparo por excisão de bases (BER) um mecanismo importante neste processo. Técnicas como o ensaio cometa (em eucariotos) e a eletroforese de DNA plasmidial em gel de agarose têm sido utilizadas para detectar genotoxicidade. No presente estudo, uma adaptação do método de eletroforese em gel alcalino de agarose foi usada para verificar a indução de quebras, pelo SnCl2, no DNA de E. coli, bem como a participação de enzimas do BER na restauração das lesões. Os resultados mostraram que o SnCl2 induziu quebras no DNA de todas as cepas testadas. Além disso, endonuclease IV e exonuclease III estão envolvidas na reparação dos danos. Em resumo, os dados obtidos indicam que a metodologia de eletroforese em gel alcalino de agarose pode ser empregada tanto para o estudo de quebras no DNA, quanto para avaliação dos mecanismos de reparação associados.
RESUMO
Ratos Wistar jovens e adultos foram submetidos a esplenectomia total e comparados a animais não submetidos a qualquer procedimento cirúrgico para avaliar essa função fagocitária do baço. Dezesseis semanas após, os animais foram inoculados, por via intravenosa, com uma suspensão de Escherichia coli marcada com tecnécio-99m e, vinte minutos após, foram mortos. Fígado, pulmão, baço e uma amostra de coágulo sangüíneo foram retirados para determinação da captação bacteriana. Não foram encontradas diferenças significativas no percentual de captação bacteriana nos órgãos do SMF entre ratos esplenectomizados jovens ou adultos. Entretanto, o índice fagocitário dos macrófagos dos órgãos do Sistema Mononuclear Fagocitário (SMF) foi menor nos animais esplenectomizados que no grupo controle. Ratos esplenectomizados apresentaram um percentual de captação de bactérias na corrente sangüínea maior que os animais do grupo controle (p<0,0001), devido a um maior remanescente de bactérias na corrente sangüínea. Esse achado sugere que, na asplenia, ocorre alguma falha no SMF, demonstrando a necessidade do desenvolvimento de técnicas operatórias alternativas à esplenectomia total para pacientes que necessitam da remoção do baço.
RESUMO
OBJETIVO: O baço, como maior órgão linfóide do corpo humano, apresenta funções imunológicas relevantes, tais como depuração de bactérias da corrente sangüínea e produção precoce de anticorpos contra várias partículas antigênicas. Fígado, pulmão e baço apresentam mais de 95 por cento da atividade fagocitária em humanos. MÉTODOS: Ratos jovens e adultos de ambos os sexos foram submetidos a esplenectomia total e comparados com animais não submetidos a tratamento cirúrgico, visando a avaliação dessa função. Após 16 semanas, os ratos de ambos os grupos foram inoculados, por via intravenosa, com suspensão de Escherichia coli marcada com tecnécio-99m, e depois de 20 minutos, foram mortos. Fígado, pulmão, baço e uma amostra de coágulo sangüíneo foram removidos para determinação da contagem radioativa. O estudo estatístico foi realizado pelo teste t de Student. RESULTADOS: Não ocorreram diferenças no percentual de captação obtido em ratos esplenectomizados jovens ou adultos. Entretanto, esses animais apresentaram contagens sangüíneas mais elevadas que os ratos do grupo controle (p<0,0001), devido a maior remanescente bacteriano na corrente sangüínea. CONCLUSÃO: Esse achado sugere ocorrer alguma falha no sistema mononuclear fagocitário em sua adaptação à ausência do baço e ratifica a necessidade de desenvolvimento de técnicas cirúrgicas alternativas à esplenectomia total para emprego em pacientes em que seja necessária a remoção esplênica.