RESUMO
Bovine semen experimentally contaminated with Leptospira santarosai serovar Guaricura was submitted tothe modified EMJH medium with 5-fluorouracil (300mg/L) and nalidixic acid (20mg/L), named as ôselectivemediumõ and using the serial dilution technique, in order to evaluate the percentage of recovery of the addedmicroorganism. The selective EMJH medium was found with higher percentage of recovery of leptospirasand minor losses of samples due to contamination with opportunistic microorganisms than the non-selectiveEMJH medium: 151/376 (40.0%) of positive growth; and 38/376 (10.0%) contamination and 58/376 (15%) and129/376 (34.0%), respectively. These results were statistically significant (p<0. 0001; Fisher). Differences werefound when the frequencies of positive leptospires recovery have been compared in the serial dilution technique (10-1 to 10-4) between the selective and non-selective media at different dilution factors. At 1/10th dilution the percentages found were (0%, 0/80) and (38%, 30/80), at 1/100th dilution, (3%, 2/80) and (49%, 39/ 80) and at 1/1,000th dilution, (25%, 20/80) and (50%, 40/80), respectively. The percentage of recovery of leptospires was found to be directly proportional to the dilution used. The methodology of the serial dilution technique (setting at least three dilutions) and the use of selective EMJH medium have been found to be efficient for the isolation of leptospires from the bovine semen samples.
Sêmen bovino experimentalmente contaminado com a estirpe Leptospira santarosai Sorovar Guaricura foi utilizado para verificar a porcentagem de recuperação de leptospiras, utilizandoo meio de EMJH com 5-fluorouracil (300 mg/L) e ácido nalidíxico (20 mg/L), denominado ômeio seletivoõ, associado à técnica das diluições seriadas. O meio seletivo EMJH foi encontrado comporcentagem de recuperação mais elevada e com menos perda de amostras devido à contaminação com microorganismos oportunistas quando comparado com o meio EMJH não seletivo, que foram encontrados, respectivamente, com 151/376 (40.0%) de crescimento positivo e 38/376 (10.0%) de contaminação, 58/376 (15%) e 129/376 (34.0%). Estes resultados foram estatíticamente significantes (p<0, 0001; Fisher). Diferenças foram encontradas quando as freqüências de leptospiras recuperadas foram comparadas com a técnica de diluição seriada (10-1 a 10-4) e entre os meios seletivo e não-seletivo, em diferentes níveis de diluição. À diluição de 1/10, as porcentagens encontradas foram (0%, 0/80) e (38%, 30/80); à diluição 1/100, (3%, 2/80) e (49%, 39/80); e à diluição 1/1000, (25%, 20/80) e (50%, 40/80), respectivamente. A porcentagem de recuperação de leptospiras foi diretamente proporcional às diluições empregadas. A metodologia das diluições seriadas (estabelecendo pelo menos três diluições) e o uso de meio EMJH seletivo mostraram ser eficientes no isolamento de leptospiras presentes nas amostras de sêmen bovino.
Assuntos
Bovinos , Meios de Cultura , Resistência Microbiana a Medicamentos , Leptospirose , Leptospira/isolamento & purificação , Sêmen , Métodos , Técnicas e Procedimentos DiagnósticosRESUMO
Bovine semen experimentally contaminated with Leptospira santarosai serovar Guaricura was submitted to the modified EMJH medium with 5-fluorouracil (300mg/L) and nalidixic acid (20mg/L), named as "selective medium" and using the serial dilution technique, in order to evaluate the percentage of recovery of the added microorganism. The selective EMJH medium was found with higher percentage of recovery of leptospiras and minor losses of samples due to contamination with opportunistic microorganisms than the non-selective EMJH medium: 151/376 (40.0%) of positive growth; and 38/376 (10.0%) contamination and 58/376 (15%) and 129/376 (34.0%), respectively. These results were statistically significant (p<0. 0001; Fisher). Differences were found when the frequencies of positive leptospires recovery have been compared in the serial dilution technique (10(-1) to 10(-4)) between the selective and non-selective media at different dilution factors. At 1/10(th) dilution the percentages found were (0%, 0/80) and (38%, 30/80), at 1/100(th) dilution, (3%, 2/80) and (49%, 39/ 80) and at 1/1,000(th) dilution, (25%, 20/80) and (50%, 40/80), respectively. The percentage of recovery of leptospires was found to be directly proportional to the dilution used. The methodology of the serial dilution technique (setting at least three dilutions) and the use of selective EMJH medium have been found to be efficient for the isolation of leptospires from the bovine semen samples.
RESUMO
Foram avaliados 304 cães de ambiente rural e urbano do município de Monte Negro, Rondônia, através do Antígeno Acidificado Tamponado (AAT), Soroaglutinação Lenta em Tubos (SAL) e 2-Mercaptoetanol (2-ME) para a pesquisa de anticorpos anti-Brucella abortus e da Imunodifusão em gel de ágar (IDGA) e Imunodifusão em gel de ágar com soro tratado com 2-Mercaptoetanol (IDGA-ME) para Brucella canis. Foram consideradas positivas as amostras reagentes nas provas confirmatórias do 2-ME e IDGA-ME. Verificaram-se 56 (18,4 por cento) animais reagentes ao AAT e 12 (4,0 por cento) reagentes a SAL. Apenas um cão (0,3 por cento) foi considerado positivo, confirmado pela prova do 2-ME. Foram observadas 11 (3,6 por cento) reações á IDGA, porém não houve confirmação na prova do IDGA-ME. Ressalta-se a baixa ocorrência de cães positivos ao 2-ME e a ausência de animais reagentes á IDGA-ME.