RESUMO
This study aimed to identify the risks of staphylococcal food poisoning due to the consumption of raw milk. Fifty-one farms in Londrina (PR) and 50 in Pelotas (RS) were analyzed, to determine the population of coagulase-positive staphylococci (UFC/ mL), as well as to verify the ability of producing Staphylococcal Enterotoxin A (SEA) by immunodifusion (OSP), the presence of the gene for the production of SEA (PCR) in the cultures, and the research of enterotoxin (SEA to SEE) in milk samples using ELISA commercial kit. Considering the 101 farms analyzed, 19 (18.8%) presented coagulase-positive staphylococci count above 105 UFC/mL. For the evaluation of the enterotoxigenic ability (SEA) by the OSP technique, six cultures coagulase-positive (5.5%) were positive to the test and identified as S. aureus. From the coagualse-negative sample, one (5.5%) was OSP positive. For the evaluation of the presence of the gene for EEA synthesis, 51 cultures of staphylococci were tested. From this total, 14 (27.45%) presented the gene, and from that, only 5 (9.81%) cultures were capable of expressing it in the technique of the OSP. The morphologic characteristic of the evaluated cultures that had enterotoxigenic capacity, from the 14 (33,3%) cultures that presented the gene for EEA production, 05 (11.9%) were characterized as typical cultures of S.aureus in Baird Parker agar. All the 12 milk samples studied for the presence of EEA to EEE in milk were negative. Thus, it can be concluded that there is extensive contamination of raw milk for staphylococci coagulase, however, most of the isolated strains were not enterotoxigenic or did not express such a characteristic. Only 9.81% of the tested colonies expressed the gene and effectively produced SEA. None of the samples had sufficient counts to produce detectable amounts of SEA. The milk samples did not present risk to cause staphylococcal food poisoning if consumed in natura until the collection moment.(AU)
Este trabalho teve como objetivo identificar os riscos de intoxicação estafilocócica pelo consumo de leite cru. Foram analisadas amostras de 51 propriedades em Londrina (PR) e 50 em Pelotas (RS), com o objetivo de determinar a população de estafilococos coagulase-positivos (UFC/mL) em leite, verificar a capacidade de produzir enterotoxina estafilocócica A (EEA) através do teste de imunodifusão (OSP), a presença do gene para produção EEA (PCR) nas culturas isoladas e a pesquisa de enterotoxina (EEA a EEE) nas amostras de leite através do kit comercial ELISA. Das 101 amostras, 19 (18,8%) apresentaram contagens de estafilococos coagulase positivos (ECP) acima de 105 UFC/mL. Quanto à capacidade enterotoxigênica das culturas isoladas (OSP), seis culturas produtoras de coagulase (5,5%) foram positivas no teste e identificadas como S. aureus. Das amostras coagulase negativas, 1 foi positiva no OSP (5,5%). Quanto à presença do gene para síntese de EEA, das 51 culturas de estafilococos testadas, 14 (27,45%) apresentaram o gene, sendo que, destas, somente 5 (9,81%) culturas foram capazes de expressá-lo na técnica do OSP. Quanto à característica morfológica das culturas avaliadas para a capacidade enterotoxigênica, 14 (33,3%) culturas que apresentaram o gene para produção de EEA foram caracterizadas como culturas típicas de S. aureus no ágar Baird Parker. Das amostras (12) utilizadas para pesquisa de EEA a EEE no leite, em nenhuma se detectou a presença de EE. Pode-se concluir que há extensa contaminação do leite cru por estafilococos coagulase-positivos, embora a maioria das colônias isoladas não fosse enterotoxigênica ou não expressasse esta característica. Somente 9,81% das colônias testadas expressaram o gene e efetivamente produziram EEA. Nenhuma das amostras apresentou enterotoxina detectável no leite. As amostras de leite testadas não apresentaram risco de causar intoxicação estafilocócica (EEA) se consumidas in natura até o momento da coleta.(AU)
Assuntos
Medição de Risco/estatística & dados numéricos , Leite , Intoxicação Alimentar Estafilocócica/transmissão , Ingestão de Líquidos , Enterotoxinas/efeitos adversos , Imunodifusão/instrumentação , CoagulaseRESUMO
This study aimed to identify the risks of staphylococcal food poisoning due to the consumption of raw milk. Fifty-one farms in Londrina (PR) and 50 in Pelotas (RS) were analyzed, to determine the population of coagulase-positive staphylococci (UFC/ mL), as well as to verify the ability of producing Staphylococcal Enterotoxin A (SEA) by immunodifusion (OSP), the presence of the gene for the production of SEA (PCR) in the cultures, and the research of enterotoxin (SEA to SEE) in milk samples using ELISA commercial kit. Considering the 101 farms analyzed, 19 (18.8%) presented coagulase-positive staphylococci count above 105 UFC/mL. For the evaluation of the enterotoxigenic ability (SEA) by the OSP technique, six cultures coagulase-positive (5.5%) were positive to the test and identified as S. aureus. From the coagualse-negative sample, one (5.5%) was OSP positive. For the evaluation of the presence of the gene for EEA synthesis, 51 cultures of staphylococci were tested. From this total, 14 (27.45%) presented the gene, and from that, only 5 (9.81%) cultures were capable of expressing it in the technique of the OSP. The morphologic characteristic of the evaluated cultures that had enterotoxigenic capacity, from the 14 (33,3%) cultures that presented the gene for EEA production, 05 (11.9%) were characterized as typical cultures of S.aureus in Baird Parker agar. All the 12 milk samples studied for the presence of EEA to EEE in milk were negative. Thus, it can be concluded that there is extensive contamination of raw milk for staphylococci coagulase, however, most of the isolated strains were not enterotoxigenic or did not express such a characteristic. Only 9.81% of the tested colonies expressed the gene and effectively produced SEA. None of the samples had sufficient counts to produce detectable amounts of SEA. The milk samples did not present risk to cause staphylococcal food poisoning if consumed in natura until the collection moment.
Este trabalho teve como objetivo identificar os riscos de intoxicação estafilocócica pelo consumo de leite cru. Foram analisadas amostras de 51 propriedades em Londrina (PR) e 50 em Pelotas (RS), com o objetivo de determinar a população de estafilococos coagulase-positivos (UFC/mL) em leite, verificar a capacidade de produzir enterotoxina estafilocócica A (EEA) através do teste de imunodifusão (OSP), a presença do gene para produção EEA (PCR) nas culturas isoladas e a pesquisa de enterotoxina (EEA a EEE) nas amostras de leite através do kit comercial ELISA. Das 101 amostras, 19 (18,8%) apresentaram contagens de estafilococos coagulase positivos (ECP) acima de 105 UFC/mL. Quanto à capacidade enterotoxigênica das culturas isoladas (OSP), seis culturas produtoras de coagulase (5,5%) foram positivas no teste e identificadas como S. aureus. Das amostras coagulase negativas, 1 foi positiva no OSP (5,5%). Quanto à presença do gene para síntese de EEA, das 51 culturas de estafilococos testadas, 14 (27,45%) apresentaram o gene, sendo que, destas, somente 5 (9,81%) culturas foram capazes de expressá-lo na técnica do OSP. Quanto à característica morfológica das culturas avaliadas para a capacidade enterotoxigênica, 14 (33,3%) culturas que apresentaram o gene para produção de EEA foram caracterizadas como culturas típicas de S. aureus no ágar Baird Parker. Das amostras (12) utilizadas para pesquisa de EEA a EEE no leite, em nenhuma se detectou a presença de EE. Pode-se concluir que há extensa contaminação do leite cru por estafilococos coagulase-positivos, embora a maioria das colônias isoladas não fosse enterotoxigênica ou não expressasse esta característica. Somente 9,81% das colônias testadas expressaram o gene e efetivamente produziram EEA. Nenhuma das amostras apresentou enterotoxina detectável no leite. As amostras de leite testadas não apresentaram risco de causar intoxicação estafilocócica (EEA) se consumidas in natura até o momento da coleta.
Assuntos
Intoxicação Alimentar Estafilocócica/transmissão , Leite , Medição de Risco/estatística & dados numéricos , Coagulase , Enterotoxinas/efeitos adversos , Imunodifusão/instrumentação , Ingestão de LíquidosRESUMO
Estafilococos têm grande importância na indústria de alimentos por serem associados a surtos de intoxicação alimentar, pela ação de suas exterotoxinas. A produção dessas substâncias tem alta correlação com a produção da enzima coagulase, que é detectada na identificação de cepas potencialmente patogênicas. Esse teste é tradicionalmente realizado com plasma de coelho liofilizado ou pela sua separação de sangue coletado de coelhos. O plasma liofilizado tem alto custo e a punção cardíaca, além de ser bastante cruenta, permite aobtenção apenas de pequenos volumes de material. Este trabalho tem como objetivo verificar a viabilidade da utilização de um material alternativo ao plasma de coelho, neste caso o plasma de cavalo, no teste de coagulase para estafilococos isolados de leite cru. Assim, 410 colônias típicas e atípicas de estafilococos isolados de leite cru foram submetidas ao teste de coagulase utilizando-se dois plasmas. Os resultados identificaram 284 (69,26 por cento) colônias coagulase positivas e 126 (30,73 por cento) coagulase negativas, com concordância de 100 por cento entre os dois plasmas. Os resultados obtidos indicam que a utilização do plasma de cavalo pode ser uma alternativa viável na pesquisa de estafilococos coagulase positivos em leite cru.
Assuntos
Staphylococcus , Coagulase , LeiteRESUMO
Petrifilmo EC e HS foram comparados ao método do Número Mais Provável (NMP) para determinar sua eficiência na enumeracão de coliformes totais e E. coli em 145 amostras de água (76 de água in natura e 69 de água de abastecimento). Em água in natura, Petrifilmo HS e EC mostraram boa correlacão com o método de NMP. Em água clorada (< 20 col/100 mL e negativas) a concordância foi baixa. Para enumeracão de E. coli, Petrifilmo EC mostrou boa correlacão com o método de NMP. Os resultados indicaram que Petrifilmo EC e HS podem ser usados com seguranca para enumeracão de coliformes totais e E. coli em água, desde que as contagens esperadas sejam maiores que 20/100 mL.
Assuntos
Enterobacteriaceae , Escherichia coli , Técnicas In Vitro , Microbiologia da Água , Métodos , Amostras de ÁguaRESUMO
A Ilha do Mel (longitude de 48º20' e latitude 25º 34', sul) pertence ao município de Paranaguá, litoral do Paraná. A ilha é hoje o principal ponto turístico do litoral paranaense, recebendo milhares de turistas todos os anos. O sistema de saneamento básico da ilha é precário, existindo fossas próximas a poços d'água e despejo de esgotos domésticos diretamente na rede de drenagem. Avaliou-se a qualidade microbiológica da água de abastecimento e efluentes da Ilha do mel. Com a indisponibilidade laboratorial na Ilha, optou-se por utilizar o sistema Petrifilm EC e HS, para enumeração de coliformes totais e E. coli, que apresenta grande praticidade na execução das análises e resultados em curto tempo. Foram analisados poços, rios, minas, fontes, canais de drenagem, lagoa, bicas, rede de drengem e captações de morros, totalizando 72 amostras colhidas nos diversos povoados da ilha: Encantadas, Brasília, Farol, Praia Grande e Fortaleza. Os resultados demonstraram duas realidades distintas. Na região de Encantadas observou-se alta contaminação de águas superficiais com despejo direto de esgoto, mas o lençol freático estava preservado. Nas demais regiões praticamente não há rios perenes, por isso não há onde despejar esgotos, recorrendo-se a fossas, que são as prováveis causas da contaminação observada no lençol freático.
Assuntos
Água Potável , Enterobacteriaceae , Qualidade da ÁguaRESUMO
The SimPlate (tm) TPC CI system is a rapid method to count mesophilic aerobic microorganisms (MAM) in foods, based on the use of resazurine to indicate bacterial growth. Its efficiency in pasteurized milk was evaluated using 142 pasteurized milk samples (38 type A, 43 type B and 61 type C) collected in Londrina, PR. The standard plating method, using Plate Count Agar (PCA) was used for comparison. The plates of both systems were incubated at 35§C and read after 24h and 48h. The occurrence of false-positive and false-negative wells and the predominant microorganisms in them were also evaluated. The results were compared by simple correlation and mean variance analyses. The correlation (r) and mean variance values were 0.6811 and 0.7583 for the results obtained after 24h, respectively, and 0.9126 and 0.0842 for the results obtained after 48h, respectively. These results indicate that the performance of the system increases when the plates are incubated for 48h. When the three types of milk were evaluated separately, these values were 0.9285 and 0.0817 for type A milk, 0.9231 and 0.0466 for type B milk and 0.7209 and 0.1082 for type C milk. These results indicate that the better the quality of the milk the better the performance of SimPlate (tm) TPC CI. False-negative wells, found more frequently in samples with high MAM counts, were caused by Gram positive microorganisms, poorly detected by the SimPlate (tm) TPC CI system because they grew slowly and had low reduction capacity. The results indicated a higher efficiency of the SimPlate (tm) TPC CI system in the reading at 48h.
Assuntos
Animais , Análise de Alimentos/métodos , Técnicas de Tipagem Bacteriana , Bactérias Aeróbias/isolamento & purificação , Bactérias/crescimento & desenvolvimento , Bactérias/isolamento & purificação , Técnicas In Vitro , Leite , Métodos , Técnicas Microbiológicas , Técnicas Microbiológicas/normasRESUMO
To improve the microbiology quality of the milk produced in Brazil, steps like the refrigeration have been implanted in the dairy sector but, temperatures of 4oC are selective for psycrotrophics microorganisms. These microorganisms, irrespective of their optimum growth temperature, are able to multiply in refrigeration temperature and produce heat-resistant extra celular enzymes that can cause changes, especially in dairy products and UHT milk. This work has the objective to determine the main points of milk contamination in dairy process and the effect of refrigeration on the control and multiplication of microorganisms. Five properties located in Londrina city- PR were aviated. Different points have been assessed in the dairy process and mesophilics (35oC/48hs) and psychrotrophics (21oC/25hs) microorganisms were researched. The main contamination points found were the milk cans, bulk milk tanks, residual water in the dairy equipments and teats bad cleaned. The residual water on the bulk milk tanks, on the cans, teats bad cleaned and the dairy centrifuge equipment were the main source of psychrotrophics. The quantity of psycrotrophics in all points assessed were greater than the ideal limit (10% of the mesophilic count). In the refrigerated milk, the psychrotrophics count over came the mesophilics count, showing that the mesophilics count can under estimate the real microflora
A refrigeração do leite na propriedade e o transporte a granel são medidas cuja implantação visa a melhoria da qualidade microbiológica do leite produzido no país, mas temperaturas em torno de 4ºC selecionam uma microbiota denominada psicrotrófica, que independentemente de sua temperatura ótima de crescimento, multiplica-se bem sob refrigeração e produz enzimas termorresistentes, que comprometem a qualidade principalmente de derivados lácteos e leite UAT. Este trabalho tem como objetivo determinar os principais pontos de contaminação do leite por mesófilos e psicrotróficos no processo de produção leiteira, bem como a eficiência da refrigeração no controle do crescimento destes microrganismos. Avaliou-se cinco (5) propriedades leiteiras da região de Londrina- PR, analisando-se diversos pontos do processo de produção e pesquisando-se microrganismos aeróbios mesófilos (35ºC/48hs) e psicrotróficos (21ºC/25 hs). Os principais pontos de contaminação foram os latões, tanques de expansão, água residual de equipamentos e utensílios de ordenha e tetos higienizados inadequadamente. Água residual dos tanques de expansão, de latões, tetos higienizados inadequadamente e a clarificadora foram os pontos com maior contagem de psicrotróficos. A quantidade de psicrotróficos encontrada em todos os segmentos do processo de produção pesquisados, foi superior ao que considera-se tolerável (10% da qua