RESUMO

This study evaluated the effects of oocyte meiosis inhibitors roscovitine (ROS) and butyrolactone I (BL-I) on in vitro production of bovine embryos. Bovine oocytes were maintained in pre in vitro maturation (pre-IVM) with 25 µM ROS or 100 µM BL-I for 24 h to delay meiosis and for 24 h in in vitro maturation (IVM). Following this treatment, the nuclear maturation index was evaluated. All embryos degenerated following this procedure. In the second set of experiments, oocytes were maintained for 6 or 12 h in pre-IVM with the following three treatments: ROS (25 µM or 12.5 µM), BL-I (100 µM or 50 µM) or a combination of both drugs (6.25 µM ROS and 12.5 µM BL-I). Oocytes were cultivated for 18 or 12 h in IVM. When a meiosis-inducing agent was used during pre-IVM for 24 h, more degenerated oocytes were observed at the end of the IVM period. This effect decreased when the meiotic blocking period was reduced to 6 or 12 h. No significant differences were observed in the blastocyst production rate of oocytes in pre-IVM for 6 h with ROS, BL-I, or ROS + BL-I compared with that of the control group (P > 0.05). However, inhibition of oocytes for 12 h resulted in decreased embryo production compared with that in the controls (P < 0.05). There was no difference in the post-vitrification embryo re-expansion rate between the study groups, showing that the meiotic inhibition for 6 or 12 h did not alter the embryo cryopreservation process.

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Background: Studies report that cyclodextrins have the property of carrying cholesterol to the membrane, but in some casescan also remove this cholesterol from the plasma membrane. The mechanism of action of CLC is not well understood,however, it seems to involve sperm protection during the freezing and thawing process. Studies show that its use enhancingincreased osmotic tolerance and reduced premature sperm capacitation reaction. In this sense, studies report that cyclodextrins have the property of carrying cholesterol to the membrane, but in some cases can also remove this cholesterol fromthe plasma membrane. Improvements were reported in the sperm parameters of buffaloes, bulls, stallions and sheep. Ramnaturally present less lipids in their membrane, on average 27%, while bulls have 31%, rabbits 62%, and humans 50%.The aim of the present study was to evaluate the use of cholesterol-loaded cyclodextrin (CLC), a commercial diluent, inthe kinetics and viability of frozen and thawed ram spermatozoa.Materials, Methods & Results: Five ejaculates, from five rams of Dorper breed were collected and divided into three groups:control, 1 mg CLC and 2 mg CLC. Semen was diluted in different concentrations of CLC (0, 1, and 2 mg/120×106 spermatozoa), and incubated at room temperature (21°C) for 10 min. Samples were conditioned in 0.5 mL straws and incubatedat 5°C for 4 h, exposed to LN2 vapor for 10 min and storing a cryogenic container. The parameters as spermatic kinetics,plasma membrane, acrosomal membrane (MPAI, %), and intracellular levels of superoxide anion (O2-) were evaluated.Sperm progressive motility (PM), rapid spermatozoa percentage (RAP), linearity (LIN, %), average path velocity (VAP,μm/s) and MPAI (%) were more satisfactory with the use of 1 mg compared to 2 mg (P < 0.05). In addition, 1 mg CLCshowed decreased levels of superoxide anion formation (O2-), a free...(AU)

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A maioria dos protocolos utilizados para a criopreservação de sêmen canino, se baseiam em metodologias descritas para outras espécies. Assim, este estudo tem como objetivo avaliar diferentes protocolos de congelação para sêmen desta espécie doméstica. Para tanto, foram utilizados 3 machos, adultos, da raça Buldogue Campeiro, com idades entre 2 a 5 anos e fertilidade comprovada. Foram realizadas 5 colheitas de sêmen de cada animal, pelo método de manipulação digital do bulbo peniano, priorizando a segunda fração do ejaculado. As amostras colhidas foram divididas em 2 grupos, com concentração de 100 x 106 espermatozoides por mL. No grupo 1, as amostras foram diluídas diretamente em meio de congelação comercial Botudog® (Botupharma Biotecnologia Animal). No grupo 2, as amostras foram centrifugadas a 600 g por 10 minutos e em seguida, o pellet foi ressuspendido em meio de congelação comercial Botudog®. As amostras foram envasadas em palhetas de 0,5 mL com concentração de 50 x 106 espermatozoides viáveis. Em seguida, as amostras permaneceram por 1 hora em estabilização a 5ºC. Logo após, transferidas para o vapor de nitrogênio durante 10 minutos, e por fim, mergulhadas em nitrogênio e armazenadas em botijão criogênico. As palhetas foram descongeladas a 46ºC por 15 segundos. Foram avaliados os parâmetros de cinética espermática e integridade de membrana plasmática e acrossomal (IMPA, %). Verificou-se que os parâmetros de motilidade total (%), velocidade linear progressiva (VSL; µm/s), velocidade curvilínea (VCL; µm/s), linearidade (%), percentagem de espermatozoides rápidos (%) e integridade de membrana plasmática e acrossomal avaliados por citometria de fluxo foram superiores no grupo 1, em que as amostras não foram centrifugadas. Estes dados demonstram que, o protocolo para congelação de sêmen canino, utilizando o diluente Botudog®, não preconiza a centrifugação do ejaculado, previamente a congelação.(AU)

Most protocols used for canine semen cryopreservation are based on methodologies described for other species. Thus, this study aims at evaluating different freezing protocols for semen of this domestic species. To this end, 3 adult Bulldog Campeiro males aged 2 to 5 years and proven fertility were used. Five semen samples were collected from each animal using the digital manipulation of the penile bulb method, prioritizing the second fraction of the ejaculate. The collected samples were divided into 2 groups, with a concentration of 100 x 106 sperm per mL. In group 1, the samples were diluted directly into Botudog® commercial freezing medium (Botupharma Animal Biotechnology). In group 2, the samples were centrifuged at 600 g for 10 minutes and then the pellet was resuspended in commercial Botudog® freezing medium. The samples were packed in 0.5 mL straws with a concentration of 50 x 106 viable sperm. Then, the samples remained for 1 hour in stabilization at 5ºC. Afterwards, they were transferred to nitrogen vapor for 10 minutes, and finally, dipped in nitrogen and stored in cryogenic cylinder. The straws were thawed at 46ºC for 15 seconds. Parameters for spermatic kinetics, and plasma and acrosomal membrane integrity (IMPA, %) were evaluated. Total motility (%), progressive linear velocity (VSL; µm/s), curvilinear velocity (VCL; µm/s), linearity (%), percentage of rapid sperm (%) and membrane integrity were found. Plasma and acrosomal samples evaluated by flow cytometry were higher in group 1, where samples were not centrifuged. These data demonstrate that the protocol for canine semen freezing using Botudog® diluent does not recommend centrifugation of the ejaculate prior to freezing.(AU)

La mayoría de los protocolos utilizados para la criopreservación de semen canino se basan en metodologías descritas para otras especies. Por lo tanto, esta investigación tiene como objetivo evaluar diferentes protocolos de congelación para el semen de esta especie doméstica. Con este fin, se utilizaron 3 machos, adultos, de la raza Bulldog Campero, con edades entre 2 a 5 años y fertilidad comprobada. Se realizaron cinco recolecciones de semen de cada animal mediante el método de manipulación digital del bulbo del pene, priorizando la segunda fracción de la eyaculación. Las muestras recolectadas se dividieron en 2 grupos, con una concentración de 100 x 106 espermatozoides por mL. En el grupo 1, las muestras se diluyeron directamente en medio de congelación comercial Botudog® (Botupharma Animal Biotechnology). En el grupo 2, las muestras fueron centrifugadas a 600 g durante 10 minutos y luego el pellet fue resuspendido en medio de congelación comercial Botudog®. Las muestras se envasaron en paletas de 0,5 mL con una concentración de 50 x 106 espermatozoides viables. Luego, las muestras permanecieron durante 1 hora en estabilización a 5ºC. Posteriormente, se transfirieron al vapor de nitrógeno durante 10 minutos y, finalmente, se sumergieron en nitrógeno y se almacenaron en un cilindro criogénico. Las paletas se descongelaron a 46ºC durante 15 segundos. Se han evaluado los parámetros de la cinética espermática y la integridad de la membrana plasmática acrosomal (IMPA, %). Se verificó que los parámetros de motilidad total (%), velocidad lineal progresiva (VSL; µm/s), velocidad curvilínea (VCL; µm/s), linealidad (%), porcentaje de espermatozoides rápidos (%) e integridad de la membrana plasmática y acrosomal evaluadas por citometría de flujo, fueron mayores en el grupo 1, donde las muestras no fueron centrifugadas. Estos datos demuestran que, el protocolo para la congelación de semen canino, usando el diluyente Botudog®, no preconiza la centrifugación del eyaculado, previamente a la congelación.(AU)

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A maioria dos protocolos utilizados para a criopreservação de sêmen canino, se baseiam em metodologias descritas para outras espécies. Assim, este estudo tem como objetivo avaliar diferentes protocolos de congelação para sêmen desta espécie doméstica. Para tanto, foram utilizados 3 machos, adultos, da raça Buldogue Campeiro, com idades entre 2 a 5 anos e fertilidade comprovada. Foram realizadas 5 colheitas de sêmen de cada animal, pelo método de manipulação digital do bulbo peniano, priorizando a segunda fração do ejaculado. As amostras colhidas foram divididas em 2 grupos, com concentração de 100 x 106 espermatozoides por mL. No grupo 1, as amostras foram diluídas diretamente em meio de congelação comercial Botudog® (Botupharma Biotecnologia Animal). No grupo 2, as amostras foram centrifugadas a 600 g por 10 minutos e em seguida, o pellet foi ressuspendido em meio de congelação comercial Botudog®. As amostras foram envasadas em palhetas de 0,5 mL com concentração de 50 x 106 espermatozoides viáveis. Em seguida, as amostras permaneceram por 1 hora em estabilização a 5ºC. Logo após, transferidas para o vapor de nitrogênio durante 10 minutos, e por fim, mergulhadas em nitrogênio e armazenadas em botijão criogênico. As palhetas foram descongeladas a 46ºC por 15 segundos. Foram avaliados os parâmetros de cinética espermática e integridade de membrana plasmática e acrossomal (IMPA, %). Verificou-se que os parâmetros de motilidade total (%), velocidade linear progressiva (VSL; µm/s), velocidade curvilínea (VCL; µm/s), linearidade (%), percentagem de espermatozoides rápidos (%) e integridade de membrana plasmática e acrossomal avaliados por citometria de fluxo foram superiores no grupo 1, em que as amostras não foram centrifugadas. Estes dados demonstram que, o protocolo para congelação de sêmen canino, utilizando o diluente Botudog®, não preconiza a centrifugação do ejaculado, previamente a congelação.(AU)

Most protocols used for canine semen cryopreservation are based on methodologies described for other species. Thus, this study aims at evaluating different freezing protocols for semen of this domestic species. To this end, 3 adult Bulldog Campeiro males aged 2 to 5 years and proven fertility were used. Five semen samples were collected from each animal using the digital manipulation of the penile bulb method, prioritizing the second fraction of the ejaculate. The collected samples were divided into 2 groups, with a concentration of 100 x 106 sperm per mL. In group 1, the samples were diluted directly into Botudog® commercial freezing medium (Botupharma Animal Biotechnology). In group 2, the samples were centrifuged at 600 g for 10 minutes and then the pellet was resuspended in commercial Botudog® freezing medium. The samples were packed in 0.5 mL straws with a concentration of 50 x 106 viable sperm. Then, the samples remained for 1 hour in stabilization at 5ºC. Afterwards, they were transferred to nitrogen vapor for 10 minutes, and finally, dipped in nitrogen and stored in cryogenic cylinder. The straws were thawed at 46ºC for 15 seconds. Parameters for spermatic kinetics, and plasma and acrosomal membrane integrity (IMPA, %) were evaluated. Total motility (%), progressive linear velocity (VSL; µm/s), curvilinear velocity (VCL; µm/s), linearity (%), percentage of rapid sperm (%) and membrane integrity were found. Plasma and acrosomal samples evaluated by flow cytometry were higher in group 1, where samples were not centrifuged. These data demonstrate that the protocol for canine semen freezing using Botudog® diluent does not recommend centrifugation of the ejaculate prior to freezing.(AU)

La mayoría de los protocolos utilizados para la criopreservación de semen canino se basan en metodologías descritas para otras especies. Por lo tanto, esta investigación tiene como objetivo evaluar diferentes protocolos de congelación para el semen de esta especie doméstica. Con este fin, se utilizaron 3 machos, adultos, de la raza Bulldog Campero, con edades entre 2 a 5 años y fertilidad comprobada. Se realizaron cinco recolecciones de semen de cada animal mediante el método de manipulación digital del bulbo del pene, priorizando la segunda fracción de la eyaculación. Las muestras recolectadas se dividieron en 2 grupos, con una concentración de 100 x 106 espermatozoides por mL. En el grupo 1, las muestras se diluyeron directamente en medio de congelación comercial Botudog® (Botupharma Animal Biotechnology). En el grupo 2, las muestras fueron centrifugadas a 600 g durante 10 minutos y luego el pellet fue resuspendido en medio de congelación comercial Botudog®. Las muestras se envasaron en paletas de 0,5 mL con una concentración de 50 x 106 espermatozoides viables. Luego, las muestras permanecieron durante 1 hora en estabilización a 5ºC. Posteriormente, se transfirieron al vapor de nitrógeno durante 10 minutos y, finalmente, se sumergieron en nitrógeno y se almacenaron en un cilindro criogénico. Las paletas se descongelaron a 46ºC durante 15 segundos. Se han evaluado los parámetros de la cinética espermática y la integridad de la membrana plasmática acrosomal (IMPA, %). Se verificó que los parámetros de motilidad total (%), velocidad lineal progresiva (VSL; µm/s), velocidad curvilínea (VCL; µm/s), linealidad (%), porcentaje de espermatozoides rápidos (%) e integridad de la membrana plasmática y acrosomal evaluadas por citometría de flujo, fueron mayores en el grupo 1, donde las muestras no fueron centrifugadas. Estos datos demuestran que, el protocolo para la congelación de semen canino, usando el diluyente Botudog®, no preconiza la centrifugación del eyaculado, previamente a la congelación.(AU)

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Background: Studies report that cyclodextrins have the property of carrying cholesterol to the membrane, but in some casescan also remove this cholesterol from the plasma membrane. The mechanism of action of CLC is not well understood,however, it seems to involve sperm protection during the freezing and thawing process. Studies show that its use enhancingincreased osmotic tolerance and reduced premature sperm capacitation reaction. In this sense, studies report that cyclodextrins have the property of carrying cholesterol to the membrane, but in some cases can also remove this cholesterol fromthe plasma membrane. Improvements were reported in the sperm parameters of buffaloes, bulls, stallions and sheep. Ramnaturally present less lipids in their membrane, on average 27%, while bulls have 31%, rabbits 62%, and humans 50%.The aim of the present study was to evaluate the use of cholesterol-loaded cyclodextrin (CLC), a commercial diluent, inthe kinetics and viability of frozen and thawed ram spermatozoa.Materials, Methods & Results: Five ejaculates, from five rams of Dorper breed were collected and divided into three groups:control, 1 mg CLC and 2 mg CLC. Semen was diluted in different concentrations of CLC (0, 1, and 2 mg/120×106 spermatozoa), and incubated at room temperature (21°C) for 10 min. Samples were conditioned in 0.5 mL straws and incubatedat 5°C for 4 h, exposed to LN2 vapor for 10 min and storing a cryogenic container. The parameters as spermatic kinetics,plasma membrane, acrosomal membrane (MPAI, %), and intracellular levels of superoxide anion (O2-) were evaluated.Sperm progressive motility (PM), rapid spermatozoa percentage (RAP), linearity (LIN, %), average path velocity (VAP,μm/s) and MPAI (%) were more satisfactory with the use of 1 mg compared to 2 mg (P < 0.05). In addition, 1 mg CLCshowed decreased levels of superoxide anion formation (O2-), a free...

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RESUMO

Os antioxidantes atuam no combate aos efeitos nocivos provocados pelos radicais livres, proporcionando melhor qualidade do sêmen fresco e criopreservado. As mudanças de temperatura provocadas durante os processos de congelação e descongelação são responsáveis pelos danos aos espermatozoides, alterando sua viabilidade e fertilidade. O estudo dos antioxidantes, os quais constituem a primeira linha de combate às espécies reativas de oxigênio (EROs), para a melhora da qualidade do sêmen criopreservado, torna-se de fundamental importância, para desenvolvimento de protocolos padrões e aplicáveis, uma vez que existem muitas controvérsias em relação ao tipo de molécula antioxidante e às doses, o momento adequado para ser acrescentado e possíveis alterações destes aos meios de criopreservação. Assim, este trabalho tem como objetivo estudar o efeito dos antioxidantes: catalase, α-tocoferol e piruvato de sódio adicionados em meio diluidor comercial para melhorar a viabilidade do sêmen bovino criopreservado. Inicialmente foram utilizados três touros, da raça Brahman, selecionados de acordo com o escore de condição corporal e exame andrológico. Oito ejaculados foram colhidos por eletroejaculação e imediatamente avaliados a motilidade e o vigor espermático.(AU)

Antioxidants act in fighting the harmful effects caused by free radicals, providing better quality of both fresh and cryopreserved semen. Changes in temperature caused during the freezing and thawing processes are responsible for damages to the sperm, changing their viability and fertility. The study of antioxidants, which constitute the first line of combat against reactive oxygen species (ROS) to improve the quality of cryopreserved semen, is of utmost importance for the development of standard and applicable protocols, since there are many controversies regarding the type and the doses of antioxidant molecules, the timing for its addition and likely changes to the cryopreservation media. This paper aims at studying the effects of catalase, α-tocopherol, and sodium pyruvate when added to commercial diluent medium to improve the viability of cryopreserved bovine semen. Initially, three Brahman bulls were selected according to the body condition score and andrological examination. Eight ejaculates were collected by electroejaculation, with motility and spermatic vigor being immediately assessed.(AU)

Los antioxidantes actúan en el combate a los efectos nocivos provocados por los radicales libres, proporcionando mejor calidad del semen fresco y criopreservado. Los cambios de temperatura provocados durante los procesos de congelación y descongelación son responsables por los daños a los espermatozoides, alterando su viabilidad y fertilidad. El estudio de los antioxidantes, que constituyen la primera línea de combate a las especies reactivas de oxígeno (ERO), para la mejora de la calidad del semen criopreservado, se hace de fundamental importancia para el desarrollo de protocolos estándares y aplicables, ya que existen muchas controversias en relación al tipo de molécula antioxidante y a las dosis, el momento adecuado para ser añadido y posibles alteraciones de éstos a los medios de criopreservación. Así, este estudio ha tenido como objetivo estudiar el efecto de los antioxidantes: catalasa, α-tocoferol y piruvato de sodio añadidos en medio diluidor comercial para mejorar la viabilidad del semen bovino criopreservado. Inicialmente se utilizaron tres toros, de la raza Brahman, seleccionados de acuerdo con la puntuación de condición corporal y examen andrológico. Ocho eyaculados fueron recogidos por electroejaculación e inmediatamente evaluados la motilidad y el vigor espermático.(AU)

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Os antioxidantes atuam no combate aos efeitos nocivos provocados pelos radicais livres, proporcionando melhor qualidade do sêmen fresco e criopreservado. As mudanças de temperatura provocadas durante os processos de congelação e descongelação são responsáveis pelos danos aos espermatozoides, alterando sua viabilidade e fertilidade. O estudo dos antioxidantes, os quais constituem a primeira linha de combate às espécies reativas de oxigênio (EROs), para a melhora da qualidade do sêmen criopreservado, torna-se de fundamental importância, para desenvolvimento de protocolos padrões e aplicáveis, uma vez que existem muitas controvérsias em relação ao tipo de molécula antioxidante e às doses, o momento adequado para ser acrescentado e possíveis alterações destes aos meios de criopreservação. Assim, este trabalho tem como objetivo estudar o efeito dos antioxidantes: catalase, α-tocoferol e piruvato de sódio adicionados em meio diluidor comercial para melhorar a viabilidade do sêmen bovino criopreservado. Inicialmente foram utilizados três touros, da raça Brahman, selecionados de acordo com o escore de condição corporal e exame andrológico. Oito ejaculados foram colhidos por eletroejaculação e imediatamente avaliados a motilidade e o vigor espermático. Em seguida, foram diluídos conforme os grupos experimentais em meio Botubov® (Botupharma Biotecnologia Animal) com adição do antioxidante piruvato de sódio nas concentrações de 1,5 µM, 3 µM e 5 µM e em seguida, as amostras foram congeladas. Numa segunda etapa, serão utilizados outros antioxidantes e concentrações, conforme descrito: 1) Diluidor BotuBov®; 2) Diluidor BotuBov® contendo 7% de crioprotetor e catalase nas concentrações de 20, 80 e 200 UI; 3) Diluidor BotuBov® contendo 7% de crioprotetor e α-tocoferol nas concentrações de 50 µM, 100 µM e 150 µM; 4) Diluidor BotuBov® contendo 7% de crioprotetor e piruvato de sódio nas concentrações de 1,5 µM; 3,5 µM e 5 µM. Após a descongelação do sêmen com a utilização do piruvato, as amostras foram analisadas quanto à motilidade total e progressiva e vigor espermático. Verificou-se que a adição de piruvato de sódio na concentração de 1,5 µM proporcionou uma melhora nos parâmetros de motilidade total e vigor espermático, demonstrando os benefícios de seu uso.(AU)

Antioxidants act in fighting the harmful effects caused by free radicals, providing better quality of both fresh and cryopreserved semen. Changes in temperature caused during the freezing and thawing processes are responsible for damages to the sperm, changing their viability and fertility. The study of antioxidants, which constitute the first line of combat against reactive oxygen species (ROS) to improve the quality of cryopreserved semen, is of utmost importance for the development of standard and applicable protocols, since there are many controversies regarding the type and the doses of antioxidant molecules, the timing for its addition and likely changes to the cryopreservation media. This paper aims at studying the effects of catalase, α-tocopherol, and sodium pyruvate when added to commercial diluent medium to improve the viability of cryopreserved bovine semen. Initially, three Brahman bulls were selected according to the body condition score and andrological examination. Eight ejaculates were collected by electroejaculation, with motility and spermatic vigor being immediately assessed. Subsequently, the samples were diluted according to the experimental groups in Botubov® (Botupharma Animal Biotechnology) medium with the addition of sodium pyruvate at concentrations of 1.5 µM, 3 µM and 5 µM and were subsequently frozen. In a second step, other antioxidants and concentrations will be used, as follows: 1) BotuBov® Diluent; 2) BotuBov® diluent containing 7% cryoprotectant and catalase at concentrations of 20, 80 and 200 IU; 3) BotuBov® diluent containing 7% cryoprotectant and α-tocopherol at concentrations of 50 µM, 100 µM and 150 µM; 4) BotuBov® diluent containing 7% cryoprotectant and sodium pyruvate at concentrations of 1.5 µM; 3.5 µM and 5 µM. After thawing the semen with pyruvate, the samples were analyzed for total and progressive motility and spermatic vigor. It was found that the addition of 1.5 µM sodium pyruvate provided an improvement in total motility and sperm vigor parameters, demonstrating the benefits of its use.(AU)

Los antioxidantes actúan en el combate a los efectos nocivos provocados por los radicales libres, proporcionando mejor calidad del semen fresco y criopreservado. Los cambios de temperatura provocados durante los procesos de congelación y descongelación son responsables por los daños a los espermatozoides, alterando su viabilidad y fertilidad. El estudio de los antioxidantes, que constituyen la primera línea de combate a las especies reactivas de oxígeno (ERO), para la mejora de la calidad del semen criopreservado, se hace de fundamental importancia para el desarrollo de protocolos estándares y aplicables, ya que existen muchas controversias en relación al tipo de molécula antioxidante y a las dosis, el momento adecuado para ser añadido y posibles alteraciones de éstos a los medios de criopreservación. Así, este estudio ha tenido como objetivo estudiar el efecto de los antioxidantes: catalasa, α-tocoferol y piruvato de sodio añadidos en medio diluidor comercial para mejorar la viabilidad del semen bovino criopreservado. Inicialmente se utilizaron tres toros, de la raza Brahman, seleccionados de acuerdo con la puntuación de condición corporal y examen andrológico. Ocho eyaculados fueron recogidos por electroejaculación e inmediatamente evaluados la motilidad y el vigor espermático. A continuación, se diluyeron de acuerdo con los grupos experimentales en medio Botubov (Botupharma Biotecnología Animal) con adición de antioxidante piruvato de sodio a concentraciones de 1,5 µM, 3 µM y 5 µM, y luego las muestras se congelaron. En una segunda etapa, se utilizarán otros antioxidantes y concentraciones, según se describe: 1) Diluidor BotuBov®; 2) Diluidor BotuBov® conteniendo 7% de crioprotector y catalasa en las concentraciones de 20, 80 y 200 UI; 3) Diluidor BotuBov® que contiene 7% de crioprotector y α-tocoferol en las concentraciones de 50 µM, 100 µM y 150 µM; 4) Diluidor BotuBov® conteniendo 7% de crioprotector y piruvato de sodio en las concentraciones de 1,5 µM; 3,5 µM y 5 µM. Después de la descongelación del semen con la utilización del piruvato, las muestras fueron analizadas en cuanto a la motilidad total y progresiva y vigor espermático. Se comprobó que la adición de piruvato de sodio en la concentración de 1,5 µM proporcionó una mejora en los parámetros de motilidad total y vigor espermático, demostrando los beneficios de su uso.(AU)

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La ruptura del tendón pre-púbico es una afección frecuente en yeguas, rara en ovejas y vacas debido a una conexión adicional del tendón prepúbico encontrado en estas especies. La etiología de esta afección no ha sido completamente elucidada, aunque está asociada con muchas afecciones de la gestación. El tratamiento es usualmente insatisfactorio. Este reporte tiene como objetivo describir los hallazgos clínicos y anatomopatológicos en una oveja en el quinto mes de gestación con ruptura del tendón pre púbico. El mal estado clínico conllevó a la eutanasia. Los hallazgos clínicos y anatomopatológicos son consistentes con la ruptura del tendón prepúbico. El reporte de este caso funciona como alerta ante la posibilidad de la ocurrencia de esta afección en ovejas y demuestra la necesidad de la asistencia al parto de estos animales.(AU)

Pre-pubic tendon rupture is an often affection in mares, rarer in ewes and cows because of an additional connection of the pre-pubic tendon found in these species. Etiology of this affection is not completed elucidated, but it is associated with many gestation affections. Treatment is usually unsatisfactory. This report aims to describe principle clinical and anatomopathologyc findings in an ewe at the fifth month of gestation with pre-pubic tendon rupture. Bad general clinical status led to euthanasia. Clinical and anatomopathological findings are consistent with pre-pubic tendon rupture. The report of this case works as an alert to the possibility of the occurrence of this affection in ewes and demonstrate a necessity to the parturition assistance of these animals.(AU)

A ruptura do tendão pré-púbico é uma afecção frequente em éguas, rara em ovelhas e vacas devido a ligação adicional do tendão pré-púbico encontrado nestas espécies. A etiologia desta afecção não está elucidada, mas está associada a muitas aspectos da gestação. O tratamento é geralmente insatisfatório. O objetivo desta nota é descrever os principais achados clínicos e anatomopatológicos de uma ovelha no quinto mês de gestação com ruptura do tendão pré-púbico. O mau estado clínico geral levou à eutanásia. Os achados clínicos e anatomopatológicos são consistentes com a ruptura do tendão pré-púbico. Esta nota funciona como alerta para a possibilidade da ocorrência desta patologia em ovelhas e demonstrar uma necessidade de assistência para o parto desses animais.(AU)

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La ruptura del tendón pre-púbico es una afección frecuente en yeguas, rara en ovejas y vacas debido a una conexión adicional del tendón prepúbico encontrado en estas especies. La etiología de esta afección no ha sido completamente elucidada, aunque está asociada con muchas afecciones de la gestación. El tratamiento es usualmente insatisfactorio. Este reporte tiene como objetivo describir los hallazgos clínicos y anatomopatológicos en una oveja en el quinto mes de gestación con ruptura del tendón pre púbico. El mal estado clínico conllevó a la eutanasia. Los hallazgos clínicos y anatomopatológicos son consistentes con la ruptura del tendón prepúbico. El reporte de este caso funciona como alerta ante la posibilidad de la ocurrencia de esta afección en ovejas y demuestra la necesidad de la asistencia al parto de estos animales.

Pre-pubic tendon rupture is an often affection in mares, rarer in ewes and cows because of an additional connection of the pre-pubic tendon found in these species. Etiology of this affection is not completed elucidated, but it is associated with many gestation affections. Treatment is usually unsatisfactory. This report aims to describe principle clinical and anatomopathologyc findings in an ewe at the fifth month of gestation with pre-pubic tendon rupture. Bad general clinical status led to euthanasia. Clinical and anatomopathological findings are consistent with pre-pubic tendon rupture. The report of this case works as an alert to the possibility of the occurrence of this affection in ewes and demonstrate a necessity to the parturition assistance of these animals.

A ruptura do tendão pré-púbico é uma afecção frequente em éguas, rara em ovelhas e vacas devido a ligação adicional do tendão pré-púbico encontrado nestas espécies. A etiologia desta afecção não está elucidada, mas está associada a muitas aspectos da gestação. O tratamento é geralmente insatisfatório. O objetivo desta nota é descrever os principais achados clínicos e anatomopatológicos de uma ovelha no quinto mês de gestação com ruptura do tendão pré-púbico. O mau estado clínico geral levou à eutanásia. Os achados clínicos e anatomopatológicos são consistentes com a ruptura do tendão pré-púbico. Esta nota funciona como alerta para a possibilidade da ocorrência desta patologia em ovelhas e demonstrar uma necessidade de assistência para o parto desses animais.

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The inhibition of nuclear maturation allows time for the oocyte to accumulate molecules that are important for embryonic development. Thus, the objective of this work was to evaluate the effect of blocking oocyte meiosis with the addition of forskolin, an efficient inhibitor of nuclear maturation, in in vitro maturation (IVM) medium. Forskolin was added to the IVM medium for 6 h at concentrations of 0.1 mM, 0.05 mM or 0.025 mM, then the oocytes were allowed to mature in drug-free medium for 18 h. The oocytes were assessed for the stage of nuclear maturation, the activity and distribution of mitochondria, oocyte ultrastructure, the number of viable cells and the apoptosis rate. After forskolin treatment, the oocytes were fertilized in vitro and cultured for 7 days. On day 7, the blastocyst rate, the ultrastructure, the number of intact cells and the apoptosis rate of the blastocysts were measured. No differences were observed for the stage of nuclear maturation of the oocyte, the mitochondrial activity and distribution, the blastocyst rate or total number of intact cells. However, a higher rate of apoptosis was observed in the blastocysts produced from oocytes blocked for 6 h with the higher concentration of forskolin (P < 0.05). We conclude that all the experimental groups reached the MII stage after the addition of forskolin and that the highest concentration of forskolin caused cellular degeneration without harming embryo production on the 7th day.

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RESUMO

A síndrome do ovário remanescente (SOR) é definida como a persistência da atividade ovariana em fêmeas castradas cirurgicamente (OSH), nas quais permanece parte ou todo o ovário que se vasculariza, tornando-se funcional, podendo ocorrer em gatas e cadelas. Esta condição proporciona a continuação de sinais indesejáveis ligados ao estro, como atração de machos, secreção saguinolenta, inquietação, pseudociese, dentre outros. O tratamento definitivo desta síndrome é a remoção cirúrgica do tecido ovariano presente. Não há referências na literatura sobre as consequências de uma possível cobertura e o objetivo deste relato é descrever um caso de peritonite em cadela portadora de SOR após monta natural.(AU)

The ovarian remnant syndrome (ORS) is defined as the persistence of ovarian activity in females surgically spayed, which part or the entire ovary remain after the surgical procedure and happens a neo vascular formation and it back to an activity, syndrome that can occurs in cats and dogs. This condition leads to a return to all undesirable signs of estrus, like male attraction, vaginal secretion (proestral bleeding), anxiety, pseudocyesis, among other symptoms. The recommended treatment is the surgical removal of the remaining ovary tissue. However, this procedure should be performed at the estrogenic stage of the cycle, when the remaining ovary tissue has follicles which make it bigger, facilitating its location. There is no references found broaching the consequences of a undesirable breeding and the objective of this article was to report a case of peritonitis in a bitch with ORS after natural breeding.(AU)

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RESUMO

A síndrome do ovário remanescente (SOR) é definida como a persistência da atividade ovariana em fêmeas castradas cirurgicamente (OSH), nas quais permanece parte ou todo o ovário que se vasculariza, tornando-se funcional, podendo ocorrer em gatas e cadelas. Esta condição proporciona a continuação de sinais indesejáveis ligados ao estro, como atração de machos, secreção saguinolenta, inquietação, pseudociese, dentre outros. O tratamento definitivo desta síndrome é a remoção cirúrgica do tecido ovariano presente. Não há referências na literatura sobre as consequências de uma possível cobertura e o objetivo deste relato é descrever um caso de peritonite em cadela portadora de SOR após monta natural.

The ovarian remnant syndrome (ORS) is defined as the persistence of ovarian activity in females surgically spayed, which part or the entire ovary remain after the surgical procedure and happens a neo vascular formation and it back to an activity, syndrome that can occurs in cats and dogs. This condition leads to a return to all undesirable signs of estrus, like male attraction, vaginal secretion (proestral bleeding), anxiety, pseudocyesis, among other symptoms. The recommended treatment is the surgical removal of the remaining ovary tissue. However, this procedure should be performed at the estrogenic stage of the cycle, when the remaining ovary tissue has follicles which make it bigger, facilitating its location. There is no references found broaching the consequences of a undesirable breeding and the objective of this article was to report a case of peritonitis in a bitch with ORS after natural breeding.

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RESUMO

Parâmetros convencionais utilizados para a avaliação espermática têm se mostrado limitados quanto a capacidade de predizer o potencial de fertilidade do sêmen. Um único teste é pouco eficaz devido ao fato que cada espermatozóide apresenta múltiplos compartimentos com diferentes funções a serem avaliadas. Dentre os principais testes de análise espermática utilizados pode-se destacar: análise subjetiva da motilidade, análise computadorizada do movimento espermático e morfologia, testes de separação, análise morfofuncional por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo. Embora nenhuma técnica de avaliação tomada isoladamente apresente sensibilidade suficiente para a determinação da fertilidade, a combinação dos diversos métodos tem agregado maior precisão para a estimativa do potencial de fertilização das amostras de sêmen bovino.

Conventional parameters utilized for semen evaluation have proved to be limited in order to predict the sperm potential fertility. A single test is not effective due the fact of each sperm cell presents multiple parts performing different functions. Among the most important sperm analysis tests we can highlight: subjective motility, computerized motility and morphology analysis, separation tests, morpho-functional analysis through fluorescence microscopy or flow cytometry. Although none of the techniques alone present a high efficiency to predict fertility, their combination may present a more accurate scenery for the estimated fertilization potential from bovine semen samples. The objective of this review is to describe methods of laboratory analysis of bovine semen.

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RESUMO

Parâmetros convencionais utilizados para a avaliação espermática têm se mostrado limitados quanto a capacidade de predizer o potencial de fertilidade do sêmen. Um único teste é pouco eficaz devido ao fato que cada espermatozóide apresenta múltiplos compartimentos com diferentes funções a serem avaliadas. Dentre os principais testes de análise espermática utilizados pode-se destacar: análise subjetiva da motilidade, análise computadorizada do movimento espermático e morfologia, testes de separação, análise morfofuncional por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo. Embora nenhuma técnica de avaliação tomada isoladamente apresente sensibilidade suficiente para a determinação da fertilidade, a combinação dos diversos métodos tem agregado maior precisão para a estimativa do potencial de fertilização das amostras de sêmen bovino. (AU)

Conventional parameters utilized for semen evaluation have proved to be limited in order to predict the sperm potential fertility. A single test is not effective due the fact of each sperm cell presents multiple parts performing different functions. Among the most important sperm analysis tests we can highlight: subjective motility, computerized motility and morphology analysis, separation tests, morpho-functional analysis through fluorescence microscopy or flow cytometry. Although none of the techniques alone present a high efficiency to predict fertility, their combination may present a more accurate scenery for the estimated fertilization potential from bovine semen samples. The objective of this review is to describe methods of laboratory analysis of bovine semen. (AU)

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