RESUMO
Obtaining data on transgene copy number is an integral step in the generation of transgenic plants. Techniques such as Southern blot, segregation analysis, and quantitative PCR (qPCR) have routinely been used for this task, in a range of species. More recently, use of Digital PCR (dPCR) has become prevalent, with a measurement accuracy higher than qPCR reported. Here, the relative merits of qPCR and dPCR for transgene copy number estimation in white clover were investigated. Furthermore, given that single copy reference genes are desirable for estimating gene copy number by relative quantification, and that no single-copy genes have been reported in this species, a search and evaluation of suitable reference genes in white clover was undertaken. Results demonstrated a higher accuracy of dPCR relative to qPCR for copy number estimation in white clover. Two genes, Pyruvate dehydrogenase (PDH), and an ATP-dependent protease, identified as single-copy genes, were used as references for copy number estimation by relative quantification. Identification of single-copy genes in white clover will enable the application of relative quantification for copy number estimation of other genes or transgenes in the species. The results generated here validate the use of dPCR as a reliable strategy for transgene copy number estimation in white clover, and provide resources for future copy number studies in this species.
Assuntos
Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real/métodos , Transgenes , Trifolium/genética , Variações do Número de Cópias de DNA , Dosagem de Genes , Folhas de Planta/genética , Plantas Geneticamente Modificadas/genéticaRESUMO
Se realizó un estudio prospectivo de la enfermedad de lengua azul en 2 hatos de ganado bovino en la región del Istmo de Tehuantepec. El estudio incluyó la detección menstrual de anticuerpos grupo-específicos contra el virus de lengua azul (VLA) y la captura de moscas culicoides. En enero de 1988, el total de ganado bovino en los 2 hatos (600) fue clasificado seropositivo al VLA, utilizando un método ELISA. Con base en este resultado, 40 bovinos adultos y 35 becerros nacidos entre octubre de 1987 y enero de 1988 fueron evaluados mensualmente (enero a diciembre de 1988) para detectar la producción de anticuerpos grupo-específicos VLA. Se detectó un patrón positivo de seroconversión contra el VLA en becerros, durante la temporada de lluvia en los meses del verano (junio-septiembre). Sin embargo, en algunos becerros se determinó serológicamente actividad de VLA en la temporada seca, durante marzo y abril. Debido a la ausencia de anticuerpos maternos, la mayoría de los becerros fueron susceptibles de infección con el VLA a los 6 meses de edad. La evidencia serológica de la actividad del VLA en becerros se relacionó con la abundancia de moscas Culicoides insignis capturadas durante el estudio
Assuntos
Bovinos , Doenças Transmissíveis/etiologia , Doenças Transmissíveis/veterinária , Doenças Transmissíveis/epidemiologia , Bluetongue/complicações , Bluetongue/etiologia , Bluetongue/fisiopatologia , Bluetongue/epidemiologia , Vírus Bluetongue/patogenicidade , Insetos Vetores/imunologia , Insetos Vetores/microbiologiaRESUMO
En este documento se analizan algunos procedimientos para una evaluación ex-ante de los probables efectos nutricionales de los proyectos de desarrollo. Los aspectos que se tratan, se refieren: a la selección de los grupos más necesitados como meta de los componentes de un proyecto; a la necesidad de evitar situaciones en las que el aumento en los ingresos en realidad empeora la nutrición; y a la identificación de componentes adicionales para un proyecto. Se describe la evaluación de un proyecto de desarrollo a gran escala en las Filipinas. Esa evaluación condujo a establecer prioridades para las áreas distantes para los pequeños agricultortes, y para los pescadores de subsistencia, concluyendo que los componentes orientados hacia la producción mejoran la nutrición de los participantes, y que era probable que una intervención frente a los problemas de abastecimiento de agua, resultaría efectiva. Se considera importante la futura aplicación de tales procedimientos, si es que pueden ser integrados de manera completa en la planificación de todo el proyecto. El trabajo de campo que se describe aquí recibió el apoyo de la División de Política de Alimentación y Nutrición de la Organización de la Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación (FAO) Roma, y del Consejo Nacional de Nutrición (NNC), del Gobierno de la Filipinas. Los análisis se efectuaron en el NNC en las Filipinas y en el Cornell, El Programa de Vigilancia Nutricional de Cornell es financiado mediante el Convenio Cooperativo AID, DSAN, CA, -0240, entre la Oficina de Nutrición, División de Ciencia y Tecnología, USAID, y la Universidad de Cornell. Agradecemos al Consejo Nacional de Nutrición de las Filipinas y a la División de Política de Alimentación y Nutrición de la FAO, por su autorización para usar los resultados. También agradecemos los consejos y comentarios de muchos colegas en Cornell, las Filipinas y Roma
Assuntos
Planejamento Alimentar , Inquéritos NutricionaisRESUMO
En una pequeña zona de El Salvador con una población de alrededor de 6.000 residentes permanentes y 3.000 a 4.000 trabajadores migrantes, que acusaba una elevada incidencia de malaria, se llevó a cabo un estudio de tres años para determinar la incidencia y características de la enfermedad. En este artículo se presenta una síntesis de los hallazgos de ese estudio (AU)