RESUMO

Atrazine (ATZ) is the third most sold herbicide in Brazil, occupying the seventh position between most widely used pesticides. Due to its easy outflow, low reactivity and solubility, moderate adsorption to organic matter and clay, and long soil persistence, residual herbicide can be identified after long periods following application, and its usage has been prohibited in diverse countries. Amphibians are important bioindicators to assess impact of pesticide like atrazine, due to having a partial aquatic life cycle. This study had as objective to assess the response of bullfrog (Lithobates catesbeianus) tadpoles when exposed to this herbicide. Animals were exposed for a total of 168h to following concentrations: negative control, 40 µg/L, 200 µg/L, 2000 µg/L, 20000 µg/L of ATZ. Analysis of swimming activity was performed, and biochemical profile was assessed by analysis of blood and plasma glucose levels, urea, creatinine, cholesterol, HDL, triglycerides, glutamic pyruvic transaminase (GPT), alkaline phosphatase (AP), calcium, total proteins, phenol, peroxidase and polyphenol oxidase activity. Results exhibited malnutrition, anemia, likely muscle mass loss, and hepatic damage, indicating that ATZ can lead to an increase in energy to maintain homeostasis for animal survival.

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Atrazine (ATZ) is one of the most used active principles in agricultural systems. This pesticide has the ability to easily accumulate in terrestrial and aquatic environments, causing impacts with chronic adverse effects. Avoidance tests are tests that seek to assess the concentration from which a given organism escapes, that is, migrates to another habitat. They are being used as a modality of innovative and minimally invasive ecotoxicological tests. Our objective was to evaluate the sensitivity and possible toxic effects of ATZ in bullfrog tadpoles (Lithobates catesbeianus), through avoidance tests and oxidative stress analyses. We performed the behavioral avoidance test lasting 12 h, with observations every 60 min in a linear multi-compartment system with seven compartments. Each compartment corresponded to a concentration: negative control, 1, 2, 20, 200, 2000, 20,000 µg L-1. After the selection of habitat, organisms were forcedly maintained in the chosen concentrations for 48 h and then, metabolic effects were measured assessing the blood plasma amino acid profile and liver protein degradation. We also determined the effective concentrations of ATZ tested at 0 h and 48 h. The results showed that there was an effect of the treatment on the distribution of tadpoles, but not on the hours or on the combined effect (interaction). The biochemical analyses also showed a concentration-dependent relationship which caused significant toxic effects even in a short period of time. In conclusion, these frogs were able to avoid places with high concentrations of ATZ in the first hours of exposure, which suggests that in the natural environment these animals can migrate or avoid areas contaminated by this herbicide; however, depending on the selected concentration, serious biochemical consequences can occur.

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The use of biological indicators has increased in recent years with the aim of investigating environ-mental pollution in aquatic environments that are vulnerable to the constant use of pesticides. Some biomarkers can help assess the health status, indicating physical, metabolic, and behavioral changes under acute and sublethal poisoning. The mixture of the active ingredients cyproconazole and pico-xystrobin is a widely used fungicide for the control of pests in cotton, rice, coffee, sugarcane, corn, soybean, and wheat. The objective of this study was to verify the occurrence of possible histopatholo-gical lesions in the liver and kidneys of bullfrog tadpoles (Lithobates catesbeianus) caused by a fungi-cide commercial formula composed of picoxystrobin and cyproconazole. The animals were subjected to different concentrations of the fungicide to determine the median lethal concentration (LC50-96h = 0.05 mg L-1), that is, the lethal dose for 50% of the animals in 96 h. After determining the value of LC50-96h, the animals were subjected to three sublethal concentrations (LC50-96h/2, LC50-96h/10, and LC-50-96h/100). Through histological biomarkers, it was verified that this fungicide changed the morphology of the animals' kidney and liver tissues in a chronic way, impairing the functioning of organs that are essential for their survival and metamorphosis, which can result in an imbalance in the biodiversity of aquatic ecosystems.(AU)

O uso de indicadores biológicos tem aumentado nos últimos anos, com o intuito de investigar a po-luição ambiental em ambientes aquáticos que são vulneráveis ao constante uso de pesticidas. Alguns biomarcadores podem ajudar a avaliar o estado de saúde, indicando alterações físicas, metabólicas e comportamentais de intoxicações agudas e subletais. A mistura dos ingredientes ativos picoxistrobina e ciproconazol é amplamente usada como fungicida para o controle de pragas da cultura de algodão, arroz, café, cana-de-açúcar, milho, soja e trigo. O objetivo deste trabalho foi verificar a ocorrência de possíveis lesões histopatológicas em fígado e rins de girinos de rã-touro (Lithobates catesbeianus) causadas pela mistura dos fungicidas picoxistrobina e ciproconazol. Os animais foram submetidos a diferentes concentrações do fungicida para determinação da concentração letal mediana (CL50-96h = 0,05 mg L-1), ou seja, a dose letal para 50% dos animais em 96 horas. Após a determinação do valor da CL50-96h, os animais foram submetidos a três concentrações subletais (CL50-96h/2, CL50-96h/10 e CL50-96h/100). Através dos biomarcadores histológicos, a pesquisa verificou que esse fungicida alterou a morfolo-gia dos tecidos renais e hepáticos dos animais de maneira crônica, prejudicando o funcionamento de órgãos que são fundamentais para sua sobrevivência e metamorfose, o que pode resultar em um desequilíbrio para a biodiversidade dos ecossistemas aquáticos.(AU)

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The aim of this study was to evaluate the effect of zinc sulfate (ZnSO4) on hematological parameters of bullfrog tadpoles, Lithobates catesbeianus, through acute and chronic toxicity tests. Although the toxicity of zinc for several species of fish has been studied, the toxicity of this metal is not well known to all aquatic organisms, especially for amphibians. The action of this metal ion on the respiratory system of fish occurs by precipitation of the mucus produced by the gills of fish that die by asphyxiation. The acute toxicity tests showed that LC50-96h (median lethal concentration) of zinc sulfate was 2.78 mg L-1, level considered below that set by CONAMA. Chronic toxicity tests were performed on three concentrations: CL50-96h/100 (0.0278 mg ZnSO4 L-1), LC50-96h/10 (0.278 mg ZnSO4 L-1) and LC50-96h (2.78 mg ZnSO4 L-1) during 312 hours under semi-static, and a control group (without addition of zinc sulfate). Analyses of hematological parameters indicate the occurrence of changes, showing the possibility of chronic effects in tadpoles of L. catesbeianus, which should be better studied.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do sulfato de zinco (ZnSO4) sobre os parâmetros hematológicos de girinos de rã-touro, Lithobates catesbeianus, por meio de testes de toxicidade aguda e crônica. Embora a toxicidade de zinco para várias espécies de peixes já tenha sido estudada, a toxicidade deste metal não é bem conhecida para todos os organismos aquáticos, principalmente para os anfíbios. A ação desse íon metálico sobre o sistema respiratório dos peixes ocorre pela precipitação da secreção da mucosa produzida pelas brânquias dos peixes, que morrem por asfixia. Os testes de toxicidade aguda mostraram que a CL50-96h (concentração letal média) do sulfato de zinco foi 2,78 mg L-1, nível inferior ao estabelecido pelo CONAMA. Os testes de toxicidade crônica foram realizados em três concentrações: CL50-96h/100 (0,0278 mg ZnSO4 L-1), CL50-96h/10 (0,278 mg ZnSO4 L-1) e CL50-96h (2,78 mg ZnSO4 L-1), durante 312 horas em sistema semiestático, além de um grupo controle (sem adição de sulfato de zinco). As análises dos parâmetros hematológicos evidenciaram a ocorrência de alterações, indicando a possibilidade de ocorrerem efeitos crônicos em girinos de L. catesbeianus, que devem ser melhor estudados.

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The aim of this study was to evaluate the effect of zinc sulfate (ZnSO4) on hematological parameters of bullfrog tadpoles, Lithobates catesbeianus, through acute and chronic toxicity tests. Although the toxicity of zinc for several species of fish has been studied, the toxicity of this metal is not well known to all aquatic organisms, especially for amphibians. The action of this metal ion on the respiratory system of fish occurs by precipitation of the mucus produced by the gills of fish that die by asphyxiation. The acute toxicity tests showed that LC50-96h (median lethal concentration) of zinc sulfate was 2.78 mg L-1, level considered below that set by CONAMA. Chronic toxicity tests were performed on three concentrations: CL50-96h/100 (0.0278 mg ZnSO4 L-1), LC50-96h/10 (0.278 mg ZnSO4 L-1) and LC50-96h (2.78 mg ZnSO4 L-1) during 312 hours under semi-static, and a control group (without addition of zinc sulfate). Analyses of hematological parameters indicate the occurrence of changes, showing the possibility of chronic effects in tadpoles of L. catesbeianus, which should be better studied.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do sulfato de zinco (ZnSO4) sobre os parâmetros hematológicos de girinos de rã-touro, Lithobates catesbeianus, por meio de testes de toxicidade aguda e crônica. Embora a toxicidade de zinco para várias espécies de peixes já tenha sido estudada, a toxicidade deste metal não é bem conhecida para todos os organismos aquáticos, principalmente para os anfíbios. A ação desse íon metálico sobre o sistema respiratório dos peixes ocorre pela precipitação da secreção da mucosa produzida pelas brânquias dos peixes, que morrem por asfixia. Os testes de toxicidade aguda mostraram que a CL50-96h (concentração letal média) do sulfato de zinco foi 2,78 mg L-1, nível inferior ao estabelecido pelo CONAMA. Os testes de toxicidade crônica foram realizados em três concentrações: CL50-96h/100 (0,0278 mg ZnSO4 L-1), CL50-96h/10 (0,278 mg ZnSO4 L-1) e CL50-96h (2,78 mg ZnSO4 L-1), durante 312 horas em sistema semiestático, além de um grupo controle (sem adição de sulfato de zinco). As análises dos parâmetros hematológicos evidenciaram a ocorrência de alterações, indicando a possibilidade de ocorrerem efeitos crônicos em girinos de L. catesbeianus, que devem ser melhor estudados.  

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The probiotics are live micro-organisms in latency state that benefit the development of the animals. The objective of this work was to evaluate the effect of the Bacillus subtilis in different doses on the growing, survival and immunological and hematological analyses in the bullfrog (Rana catesbeiana) froglets. The test was developed in Experimental Frog farm of Agriculture Department, Pindamonhangaba, SP. Three doses of probiotics were tested (T1 2.5 g/kg, T2 5 g/kg and T3 10 g/kg of food). The test was carried out with three simultaneous replicates, plus control group. The products were added to froglet´s diet, mixed to the meal. The animals were previously feed with this diet for a period of 14 days and accompanied for about 42 days after metamorphose. Biometrics was performed every 7 days. It was evaluated the final weight, the survival, phagocytic capacity, phagocytic index and hematological analyses as hematocrit, hemoglobin level, erythrocyte number, absolute hematimetric indices (MCV and MCHC), differential counting of leucocytes and total counting of leucocytes and thrombocytes. The results had shown that the doses of the probiotics had produced none effect on the final weight and survival. The immunological analyses had shown that the probiotics have presented immunostimulant effect, but have not influenced the hematological parameters of the animals. &nbs

Os probióticos são micro-organismos vivos em estado de latência, que, adicionados ao alimento, beneficiam o desenvolvimento dos animais. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do probiótico Bacillus subtilis em diferentes doses sobre o crescimento, sobrevivência, análises imunológicas e hematológicas de rãs-touro (Rana catesbeiana) recém-metamorfoseadas. O teste foi desenvolvido no Ranário Experimental da Secretaria de Agricultura e Abastecimento, em Pindamonhangaba, SP. Foram utilizadas três doses do probiótico (T1 2,5 g/kg de ração, T2 5 g/kg de ração e T3 10 g/kg de ração), misturadas diretamente à ração. O teste foi conduzido com três réplicas simultâneas e um grupo controle. Os animais foram alimentados previamente com esta dieta por 14 dias e acompanhados por 42 dias após a metamorfose. As biometrias foram realizadas a cada 7 dias. Foram avaliados o peso final, a taxa de sobrevivência, a capacidade fagocítica e o índice fagocítico. Para as análises hematológicas foram determinados hematócrito, taxa de hemoglobina, número de eritrócitos e índices hematimétricos absolutos (VCM e CHCM), além da contagem diferencial e total de leucócitos e contagem total de trombócitos. Os resultados obtidos indicaram que o peso final e a sobrevivência não sofreram influência das doses do probiótico testado. As análises imunológicas mostraram que o probiótico apresentou efeito i

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The probiotics are live micro-organisms in latency state that benefit the development of the animals. The objective of this work was to evaluate the effect of the Bacillus subtilis in different doses on the growing, survival and immunological and hematological analyses in the bullfrog (Rana catesbeiana) froglets. The test was developed in Experimental Frog farm of Agriculture Department, Pindamonhangaba, SP. Three doses of probiotics were tested (T1 2.5 g/kg, T2 5 g/kg and T3 10 g/kg of food). The test was carried out with three simultaneous replicates, plus control group. The products were added to froglet´s diet, mixed to the meal. The animals were previously feed with this diet for a period of 14 days and accompanied for about 42 days after metamorphose. Biometrics was performed every 7 days. It was evaluated the final weight, the survival, phagocytic capacity, phagocytic index and hematological analyses as hematocrit, hemoglobin level, erythrocyte number, absolute hematimetric indices (MCV and MCHC), differential counting of leucocytes and total counting of leucocytes and thrombocytes. The results had shown that the doses of the probiotics had produced none effect on the final weight and survival. The immunological analyses had shown that the probiotics have presented immunostimulant effect, but have not influenced the hematological parameters of the animals. &nbs

Os probióticos são micro-organismos vivos em estado de latência, que, adicionados ao alimento, beneficiam o desenvolvimento dos animais. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do probiótico Bacillus subtilis em diferentes doses sobre o crescimento, sobrevivência, análises imunológicas e hematológicas de rãs-touro (Rana catesbeiana) recém-metamorfoseadas. O teste foi desenvolvido no Ranário Experimental da Secretaria de Agricultura e Abastecimento, em Pindamonhangaba, SP. Foram utilizadas três doses do probiótico (T1 2,5 g/kg de ração, T2 5 g/kg de ração e T3 10 g/kg de ração), misturadas diretamente à ração. O teste foi conduzido com três réplicas simultâneas e um grupo controle. Os animais foram alimentados previamente com esta dieta por 14 dias e acompanhados por 42 dias após a metamorfose. As biometrias foram realizadas a cada 7 dias. Foram avaliados o peso final, a taxa de sobrevivência, a capacidade fagocítica e o índice fagocítico. Para as análises hematológicas foram determinados hematócrito, taxa de hemoglobina, número de eritrócitos e índices hematimétricos absolutos (VCM e CHCM), além da contagem diferencial e total de leucócitos e contagem total de trombócitos. Os resultados obtidos indicaram que o peso final e a sobrevivência não sofreram influência das doses do probiótico testado. As análises imunológicas mostraram que o probiótico apresentou efeito i

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O presente trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos da suplementaçäo de vitamina C e E sobre o desenvolvimento e sobrevivência de girinos de rä-touro. Os animais receberam 50, 250 e 500mg de vitamina C ou E/kg de raçäo, distribuídos segundo delineamento inteiramente casualizado com 3 repetiçöes cada. Na dieta controle, näo foram adicionadas vitaminas. Os girinos suplementados com vitamina C ou E näo apresentaram diferença significativa no crescimento, comparadas ao controle. Näo obstante, os suplementados com 500mg de vitamina C apresentaram melhor sobrevivência (62,83 ppor cento) do que os animais controle (40,48 por cento; p<0,05), nos demais níveis desta vitamina e a adiçäo de vitamina E näo alteraram a sobrevivência. O presente trabalho sugere que 500mg de vitamina C/kg de raçäo constitui uma opçäo para melhorar a sobrevivência de girinos de rä-touro.

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The present work was carried out at the Aquaculture Center Nutrition Laboratory, Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias UNESP - Jaboticabal, during the period January 23 to March 27, 1995. The aim of the present experiment was to study the effect of different ration processings (pelleted, bran, aggregated ration) with different binders (wheat flour and gelatin) on growth of the bullfrog tadpoles. Six dietary treatments were used in a 3 x 2 factorial arrangement employing a completely randomized design. The ration processing significantIy affected the weight gain, feed conversion and survival of the tadpoles, independently of the binder employed. The results suggest that at the initial development stage (fourth week) the best performance was observed in the tadpoles fed the aggregated dough diet and, after this period, with the pelleted ration.

O trabalho foi realizado no Laboratório de Nutrição do CAUNESP, localizado na Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias UNESP - Jaboticabal, no período de 23 de janeiro a 27 de março de 1995, e teve como objetivo avaliar diferentes formas de apresentação da ração (peletizada, farelada e massa agregada) com o uso de aglutinantes (farinha de trigo e gelatina), observando o desempenho de girinos de rã-touro (Rana catesbeiana). Foram testadas seis rações experimentais (três tipos de processamento e dois aglutinantes), com quatro repetições, em um delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 3 x 2. O processamento da ração influenciou significativamente o ganho de peso, conversão alimentar e sobrevivência dos girinos, independente do aglutinante utilizado. Concluiu-se que na fase inicial (até a quarta semana do período experimental) o melhor desempenho dos girinos ocorreu com a ração em massa agregada e, após esse período, com a ração peletizada.

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The present work was carried out at the Aquaculture Center Nutrition Laboratory, Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias UNESP - Jaboticabal, during the period January 23 to March 27, 1995. The aim of the present experiment was to study the effect of different ration processings (pelleted, bran, aggregated ration) with different binders (wheat flour and gelatin) on growth of the bullfrog tadpoles. Six dietary treatments were used in a 3 x 2 factorial arrangement employing a completely randomized design. The ration processing significantIy affected the weight gain, feed conversion and survival of the tadpoles, independently of the binder employed. The results suggest that at the initial development stage (fourth week) the best performance was observed in the tadpoles fed the aggregated dough diet and, after this period, with the pelleted ration.

O trabalho foi realizado no Laboratório de Nutrição do CAUNESP, localizado na Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias UNESP - Jaboticabal, no período de 23 de janeiro a 27 de março de 1995, e teve como objetivo avaliar diferentes formas de apresentação da ração (peletizada, farelada e massa agregada) com o uso de aglutinantes (farinha de trigo e gelatina), observando o desempenho de girinos de rã-touro (Rana catesbeiana). Foram testadas seis rações experimentais (três tipos de processamento e dois aglutinantes), com quatro repetições, em um delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 3 x 2. O processamento da ração influenciou significativamente o ganho de peso, conversão alimentar e sobrevivência dos girinos, independente do aglutinante utilizado. Concluiu-se que na fase inicial (até a quarta semana do período experimental) o melhor desempenho dos girinos ocorreu com a ração em massa agregada e, após esse período, com a ração peletizada.