RESUMO
O cupim asiático Coptotermes gestroi é considerado praga em áreas urbanas, causando danos expressivos em casas, edifícios e árvores. Esta pesquisa avaliou a eficiência de Isaria javanica URM4993 e I. javanica URM4995 sobre operários de C. gestroi. Os insetos foram pulverizados nas concentrações de 104 a 108 conídios/mL e mantidos em incubadora a 25 ± 1º C e 80 ± 10% de umidade relativa. Determinou-se a Concentração Letal (CL50) e o Tempo Letal (TL50), bem como foi quantificada a produção de conídios sobre os insetos mortos. Os aspectos biológicos referentes à germinação e esporulação, antes e após a infecção em C. gestroi, foram avaliados. O fungo foi virulento ao cupim, causando infecção em todas as concentrações utilizadas, sendo que I. javanica URM4993 foi mais eficiente, por causar mortalidade de 100%, após o 6º dia de inoculação (CL50 de 4,86 conídios/mL e TL50 de 2,26 dias). A esporulação nos insetos mortos não diferiu entre as linhagens. Foi observado que o percentual de germinação foi maior nas linhagens reisoladas do que nas linhagens padrão. Contudo, I. javanica URM4993 apresentou maior potencial de esporulação. Esses resultados mostram o fungo como um candidato ao controle biológico desse cupim.
The Asiatic termite Coptotermes gestroi is considered a pest in urban areas causing extensive damage to houses, buildings and trees. The present study evaluated the effectiveness of Isaria javanica URM4993 and URM4995 on workers of C. gestroi. Insects were sprayed with concentrations of 104 at 108 conidia/mL and kept in an incubator at 25 ± 1º C and 80 ± 10% relative humidity. Results were used to determine the lethal concentration (LC50) and lethal time (LT50). Conidia production on dead insects was assessed. Biological aspects related to germination and sporulation, before and after infection with C. gestroi were also assessed. The fungus was virulent to termites, causing infection at all tested concentrations, with I. javanica URM4993 being the most virulent, causing 100% mortality after six days of inoculation (LC50 of 4.86 x 10 conidia/mL and LT50 of 2.26 days). Sporulation on dead insects did not differ between strains. The percentage of germination was greater for reisolated strains than for standard strains. However, I. javanica URM4993 showed greater sporulation. These results show that the fungus is a candidate for the biological control of termites.
Assuntos
Controle de Pragas , Controle Biológico de Vetores , IsópterosRESUMO
Isolates of entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae var. anisopliae were characterized using internal transcribed spacer-RFLP, ISSR and intron splice site primers. Thirty-seven isolates were studied, most of which were obtained from the sugar cane pest, Mahanarva fimbriolata (Hemiptera: Cercopidae) from Tangará da Serra, Southwest Mato Grosso State, Brazil. Internal transcribed spacer-RFLP did not differentiate the isolates of M. anisopliae var. anisopliae, while ISSR and intron primers identified three distinct groups. Variability among these groups was 96% for (GTG)(5) and 100% for the other primers. We found considerable genetic variability, even among isolates from the same geographical origin and host.
Assuntos
Hypocreales/genética , Polimorfismo Genético , Primers do DNA , DNA Fúngico/genética , Variação Genética , Íntrons , Repetições de Microssatélites , Polimorfismo de Fragmento de Restrição , Sítios de Splice de RNARESUMO
ABSTRACT The Asiatic termite Coptotermes gestroi is considered a pest in urban areas causing extensive damage to houses, buildings and trees. The present study evaluated the effectiveness of Isaria javanica URM4993 and URM4995 on workers of C. gestroi. Insects were sprayed with concentrations of 104 at 108 conidia/mL and kept in an incubator at 25 ± 1º C and 80 ± 10% relative humidity. Results were used to determine the lethal concentration (LC50) and lethal time (LT50). Conidia production on dead insects was assessed. Biological aspects related to germination and sporulation, before and after infection with C. gestroi were also assessed. The fungus was virulent to termites, causing infection at all tested concentrations, with I. javanica URM4993 being the most virulent, causing 100% mortality after six days of inoculation (LC50 of 4.86 x 10 conidia/mL and LT50 of 2.26 days). Sporulation on dead insects did not differ between strains. The percentage of germination was greater for reisolated strains than for standard strains. However, I. javanica URM4993 showed greater sporulation. These results show that the fungus is a candidate for the biological control of termites.
RESUMO O cupim asiático Coptotermes gestroi é considerado praga em áreas urbanas, causando danos expressivos em casas, edifícios e árvores. Esta pesquisa avaliou a eficiência de Isaria javanica URM4993 e I. javanica URM4995 sobre operários de C. gestroi. Os insetos foram pulverizados nas concentrações de 104 a 108 conídios/mL e mantidos em incubadora a 25 ± 1º C e 80 ± 10% de umidade relativa. Determinou-se a Concentração Letal (CL50) e o Tempo Letal (TL50), bem como foi quantificada a produção de conídios sobre os insetos mortos. Os aspectos biológicos referentes à germinação e esporulação, antes e após a infecção em C. gestroi, foram avaliados. O fungo foi virulento ao cupim, causando infecção em todas as concentrações utilizadas, sendo que I. javanica URM4993 foi mais eficiente, por causar mortalidade de 100%, após o 6º dia de inoculação (CL50 de 4,86 conídios/mL e TL50 de 2,26 dias). A esporulação nos insetos mortos não diferiu entre as linhagens. Foi observado que o percentual de germinação foi maior nas linhagens reisoladas do que nas linhagens padrão. Contudo, I. javanica URM4993 apresentou maior potencial de esporulação. Esses resultados mostram o fungo como um candidato ao controle biológico desse cupim.
RESUMO
The Aspergillus genus belongs to a filamentous fungal group characterized by wide dispersion in the environment. Some species are associated with diseases, especially in immunocompromised patients, while others are of economical importance due to aflatoxin production or biotechnological applications. Its species identification is nowadays performed by traditional techniques combined with molecular markers, resulting in a higher efficiency of isolate characterization. In the present study, internal transcribed spacer, inter-simple sequence repeats (ISSR), and random amplified polymorphic DNA (RAPD) molecular markers were used, with the aim of genetically characterizing strains of Aspergillus flavus and strains of other species of the A. flavus group. High genetic diversity was revealed by RAPD and by ISSR, in which the use of the (GACA)4 primer yielded a higher diversity than with the (GTG)5 primer, although the latter showed a characteristic banding profile for each species. These data were used to create a similarity matrix for the construction of dendrograms by means of the UPGMA method. The ISSR and RAPD profiles showed that among the strains previously identificated as A. flavus, one should be A. oryzae, one A. parasiticus and two A. tamarii. On the other hand, a strain previously identified as A. parasiticus should be A. flavus. All these strains were retested by traditional methods and their new species identification was confirmed. These results strongly support the need for using molecular markers as an auxiliary tool in differentiating fungal species and strains.
Assuntos
Aspergillus flavus/classificação , Aspergillus flavus/genética , Brasil , DNA Fúngico/genética , DNA Espaçador Ribossômico/genética , Marcadores Genéticos , Técnicas de Tipagem Micológica , Técnica de Amplificação ao Acaso de DNA PolimórficoRESUMO
ABSTRACT Investigations concerning pathogenicity require basic knowledge in the biology and ecology of the target species involved in the study. The present work describes a technique to maintain the termite Nasutitermes coxipoensis under laboratory conditions to conduct tests with entomopathogenic fungi. The termites were maintained in plastic boxes with a piece of the original nest (20 g) and different food substrates: rotting wood, dry wood, sugarcane pulp, and wood paper. The survival function S(t) was applied to determine the best substrate for maintaining the termites under laboratory conditions, considering an ending time for the experiment of 18 days (t). The results indicated the sugarcane pulp, followed by wood paper as the best substrates for maintaining N. coxipoensis. This information will open opportunities for studies with termites under laboratory conditions.
RESUMO Pesquisas sobre patogenicidade necessitam de conhecimentos básicos em biologia e ecologia dos organismos envolvidos no estudo. O presente trabalho descreve uma técnica de manutenção do cupim Nasutitermes coxipoensis em condições de laboratório a fim de realização de testes com fungos entomopatogênicos. Os cupins foram mantidos em caixas plásticas contendo pedaço de ninho (20 g) e substratos alimentares diferentes: madeira em decomposição, madeira seca, colmo de cana-de-açúcar e papel madeira. Utilizou-se a função de sobrevivência S(t) com o objetivo de verificar a probabilidade de vida dos insetos até um tempo t (18 dias), a fim de mantê-los em condições de laboratório. Os resultados indicaram que o substrato que possibilitou maior tempo de sobrevivência foi cana-de-açúcar, seguido de papel madeira picado. Tais informações possibilitarão a realização de testes diversos com cupins, em condições de laboratório.