RESUMO
We screened 349 isolates of P. aeruginosa from cystic fibrosis (CF+) and non-cystic fibrosis (CF-) patients for the auxotrophy. Fourteen (4.0%) were auxotrophic and among them only one was recovered from CF-patient showing that this characteristic is strongly associated with cystic fibrosis. In total, a requirement for 5 different compounds (or combination) was verified and, of these, methionine was the most common single amino acid required. Only one auxotrophic isolate was no able to produce biofilm in vitro.
RESUMO
Cross-infection with Pseudomonas aeruginosa among cystic fibrosis (CF) patients is a rare occurrence. However, the emergence of transmissible strains has been reported between unrelated individuals. We analyzed the genetic relationship among P. aeruginosa isolates from Brazilian CF patients and transmissible clones which are worldwide spread. The data does not indicate the presence of closely related variant clones.
RESUMO
In the past two decades the members of the genus Enterococcus have emerged as important nosocomial pathogens worldwide. In the present study, we evaluated the antimicrobial resistance and genotypic characteristics of 203 Enterococcus spp. recovered from different clinical sources from two hospitals in Porto Alegre, Rio Grande do Sul, Brazil. The species were identified by conventional biochemical tests and by an automated system. The genetic diversity of E. faecalis presenting high-level aminoglycoside resistance (HLAR) was assessed by pulsed-field gel electrophoresis of chromosomal DNA after SmaI digestion. The E. faecalis was the most frequent specie (93.6%), followed by E. faecium (4.4%). The antimicrobial resistance profile was: 2.5% to ampicillin, 0.5% to vancomycin, 0.5% teicoplanin, 33% to chloramphenicol, 2% to nitrofurantoin, 66.1% to erythromycin, 66.5% to tetracycline, 24.6% to rifampicin, 30% to ciprofloxacin and 87.2% to quinupristin-dalfopristin. A total of 10.3% of the isolates proved to be HLAR to both gentamicin and streptomycin (HLRST/GE), with 23.6% resistant only to gentamicin (HLR-GE) and 37.4% only to streptomycin (HLRST). One predominant clonal group was found among E. faecalis HLR-GE/ST. The prevalence of resistance among beta-lactam antibiotics and glycopeptides was very low. However, in this study there was an increased number of HLR Enterococcus which may be spreading intra and inter-hospital.
Nas últimas duas décadas os membros do gênero Enterococcus emergiram como importantes patógenos nosocomiais ao redor do mundo. No presente estudo, nós avaliamos a resistência antimicrobiana e as características genotípicas de 203 Enterococcus spp. obtidos de diferentes fontes clínicas em dois hospitais de Porto Alegre, Rio Grande do Sul, Brasil. As espécies foram identificadas por testes bioquímicos convencionais e por um sistema automatizado. A diversidade genética de E. faecalis demonstrando resistência à altos níveis de aminoglicosídeos (HLAR) foi avaliada através da análise do DNA cromossômico após digestão com a enzima SmaI, seguido por eletroforese em campo pulsado. O E. faecalis foi a espécie mais freqüente (93,6%), seguido por E. faecium (4,4%). O perfil de resistência antimicrobiana foi: 2,5% para ampicilina, 0,5% para vancomicina, 0,5% para teicoplanina, 33% para cloranfenicol, 2% para nitrofurantoína 66,1% para eritromicina, 66,5% para tetraciclina, 24,6% para rifampicina, 30% para ciprofloxacino e 87,2% para quinupristina-dalfopristina. Um total de 10,3% dos isolados apresentaram HLAR para ambos gentamicina e estreptomicina (HLR-ST/GE), sendo 23,6% resistentes somente a gentamicina (HLR-GE) e 37,4% somente a estreptomicina (HLR-ST). Um grupo clonal predominante foi encontrado em E. faecalis HLR-GE/ST. A prevalência de resistência a antibióticos ²-lactâmicos, e em particular aos glicopeptídeos, foi muito baixa. Entretanto, neste estudo, houve um número crescente de Enterococcus HLAR que podem estar se disseminando intra e interhospitais.
RESUMO
We described the ocurrence of metallo-beta-lactamases (MBL) genes blaSPM-1 and blaIMP-1 in clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa resistant to imipenem and/or ceftazidime obtained from three universitary hospitals in the city of Porto Alegre, Brazil. The MBL production was screened by phenotypic test and the genes were detected by PCR.
Descrevemos a ocorrência dos genes de metalo-beta-lactamases (MBL) blaSPM-1 e blaIMP-1 em isolados clínicos de Pseudomonas aeruginosa resistentes ao imipenem e/ou ceftazidima obtidos em três hospitais universitários de Porto Alegre, Brasil. A produção de MBL foi observada através de técnica fenotípica e os genes foram detectados pelo método de PCR.
RESUMO
The in vitro susceptibilty of Staphylococcus aureus to vancomycin was evaluated from impatients at a Brazilian University Hospital by the Etest and a screening method. No vancomycin intermediate (VISA) or vancomycin resistant (VRSA) S. aureus isolate was identified. Three patients presented as heteroresistant VISA (h-VISA) isolates but none of them received vancomycin previously.
A suscetibilidade in vitro de Staphylococcus aureus à vancomicina foi avaliada em pacientes internados em um Hospital Universitário Brasileiro pelo Etest e por um método de triagem. Nenhuma amostra de S. aureus resistente (VRSA) ou com resistência intermediária (VISA) à vancomicina foi isolada. Três pacientes tiveram amostras heteroresistentes VISA (h-VISA), mas nenhum destes recebeu vancomicina previamente.
RESUMO
His study was performed to compare the methods of detection and to estimate the prevalence of extended-spectrum beta-lactamases (ESBL) among Klebsiella spp and E.coli in a university hospital in southern Brazil. We also used a molecular typing method to evaluate the genetic correlation between isolates of ESBL K.pneumoniae. Production of ESBL was investigated in 95 clinical isolates of Klebsiella spp and Escherichia coli from Hospital de Clínicas de Porto Alegre, using Kirby-Bauer zone diameter (KB), double-disk diffusion (DD), breakpoint for ceftazidime (MIC CAZ), increased zone diameter with clavulanate (CAZ/CAC) and ratio of ceftazidime MIC/ceftazidime-clavulanate MIC (MIC CAZ/CAC). Molecular typing was performed by DNA macrorestriction analysis followed by pulsed-field gel electrophoresis. The KB method displayed the highest rates of ESBL (up to 70% of Klebsiella and 59% of E.coli), contrasting with all the other methods (p 0.05). The confirmatory methods (DD, MIC CAZ, CAZ/CAC and MIC CAZ/CAC) showed a range of ESBL production from 8 to 13% for E.coli and from 33 to 40% for Klebsiella species. Therefore, the KB method was useful only as a screening method as it provided several false positive results. Molecular typing of 17 ESBL K.pneumoniae indicated that the isolates had no clonal relation. We found a good correlation among the confirmatory methods for ESBL detection although the methods which evaluate inhibition of the beta-lactamase by clavulanate appeared to be more specific. The high prevalence of ESBL Klebsiella in our hospital is probably due to individual selection of resistant strains rather than the transmission of a common strain.
Este estudo foi desenvolvido para comparar métodos de detecção e para estimar a prevalência de Klebsiella spp e E.coli produtoras de beta-lactamases de espetro ampliado (ESBL) em um Hospital Universitário no sul do Brasil. A correlação genética, determinada através de método molecular de tipagem, entre as amostras de K. pneumoniae também foi determinada. A produção de ESBL foi investigada em 95 amostras de Klebsiella spp e E.coli obtidas de pacientes no Hospital de Clínicas de Porto Alegre usando-se: medida do diâmetro a zona de inibição (KB), dupla-difusão de disco (DD), valores de concentração inibitória mínima da ceftazidima (MIC CAZ), aumento do diâmetro da zona de inibição com adição de clavulanato (CAZ/CAC) e a relação entre o MIC da ceftazidima/MIC ceftazidima com clavulanato (MIC CAZ/CAC). A tipagem molecular foi realizada utilizando-se o método de macrorestrição de DNA e eletroforese em campo pulsado (PFGE). O método KB apresentou as maiores taxas de produção de ESBL (> 70% para Klebsiella e 59% para E.coli) contrastando com os outros métodos (p 0,05). Os métodos confirmatórios (DD, MIC CAZ e MIC CAZ/CAC) indicaram a produção de ESBL em 8 a 13% de E.coli e em 33 a 40% para as espécies de Klebsiella. Portanto, o método KB é útil apenas como método de triagem devido aos diversos resultados considerados falso-positivos. A tipagem molecular realizada em 17 amostras de K.pneumoniae ESBL indicou não existência de relação clonal. Este estudo encontrou uma boa correlação entre os métodos confirmatórios de detecção de ESBL embora os métodos que avaliam a inibição da enzima pelo clavulanato pareçam ser mais específicos. A alta prevalência de Klebsiella ESBL em nosso hospital provavelmente se deve a seleção individual de cepas resistentes do que a transmissão de uma cepa comum.