RESUMO

The purpose of this study was to investigate and compare the efficacy of various disinfectants on planktonic cells and biofilm cells of Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus and Escherichia coli. Numbers of viable biofilm cells decreased after treatment with all tested disinfectants (iodine, biguanide, quaternary ammonium compounds, peracetic acid and sodium hypochlorite). Sodium hypochlorite was the most effective disinfectant against biofilm cells, while biguanide was the least effective. Scanning electron microscopy observations revealed that cells adhered on stainless steel surface after treatment with the disinfectants. No viable planktonic cells were observed after treatment with the same disinfectants. Based on our findings, we concluded that biofilm cells might be more resistant to disinfectants than plancktonic cells.

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Biofilm bacterial infections are common in patients undergoing treatment with haemodialysis. This study involved 16 patients (7 males, 9 females; ages from 22 to 81 with an average age of 50) who had had a total of 25 temporary haemodialysis polyurethane catheter insertions into the subclavian vein (22 dual-lumen and 3 triple-lumen). The catheters remained in place from 3 to 91 days, on an average of 47 days. The reasons for catheter removal were: bad functioning (44%), suspicion of catheter-related infection (20%), availability of permanent access (16%), accidental removal (12%), signs and symptoms of infection at the site of catheter insertion (4%), and exogenous contamination (4%). Positive tip cultures were observed on seven of the catheters (28%), showing three positive blood cultures. The Staphylococcus aureus were identified in 12% of the blood cultures and isolated from one of the hubs, and biofilms were observed on all catheter tips. The S. aureus retrieved from both blood and catheters (tips and hubs) were resistant to penicillin and susceptible to azithromycin, ciprofloxacin, clindamycin, chloramphenicol, gentamicin, oxacillin, rifampin, sulfamethoxazole, tetracycline, and vancomycin. The S. aureus strains isolated from both blood and catheters (tips and hubs) were considered to be identical based on antibiotic susceptibility patterns and genetic similarity assessed using an automated ribotyping system.

As infecções devido a biofilmes bacterianos são comuns em pacientes sob tratamento em hemodiálise. Neste estudo, 16 pacientes (7 homens, 9 mulheres, de 22 a 81 anos, média 50 anos de idade), com um total de 25 cateteres de hemodiálise (3 de triplo-lúmen e 22 de duplo-lúmen) de poliuretano inseridos em veia subclávia foram estudados. Os cateteres permaneceram no local de 3 a 91 dias (média de 47 dias). Os cateteres foram removidos devido ao: mau funcionamento (44%), suspeita de infecção relacionada ao cateter (20%), viabilidade de um acesso permanente (16%), remoção acidental (12%), sinais e sintomas de infecção no local da inserção do cateter (4%) e contaminação exógena (4%). Culturas positivas de ponta foram observadas em sete cateteres (28%), concomitantemente com três culturas positivas de sangue. Das culturas de sangue foram identificados Staphylococcus aureus (12%) e de uma das conexões foi isolado S. aureus. Biofilmes foram observados sobre todas as pontas de cateteres. Os S. aureus isolados do sangue e cateter (ponta e conexão) eram resistentes a pencilina e sensíveis a azitromicina, ciprofloxacina, clindamicina, cloranfenicol, gentamicina, oxacilina, rifampicina, sulfametoxazole, tetraciclina e vancomicina. As cepas de S. aureus isoladas de sangue, ponta de cateter e conexão foram consideradas idênticas devido à coincidência do perfil de sensibilidade. E similaridade genética, avaliada por meio de ribotipagem.

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Central venous catheters from intensive care unit patients were subjected to microbiological methods (semiquantitative culture) and scanning electron microscopy in order to assess microbial attachment and correlate it with blood cultures. During the period of the survey, 59 patients with inserted central venous catheters were studied. The type of catheter used was nontunneled, noncuffed, single lumen, made of polyurethane. Blood samples for cultures were collected at the moment of catheter removal. Data on the patient's age, gender, catheter insertion site, and duration of catheterization were also obtained. From 63 catheters tips analysed, 30 (47.6%) showed microbial colonization. Infection proved to be more prevalent in 26 (41.3%) patients with catheters inserted via subclavia vein than in 2 (3.2%) inserted via the jugular vein. Infection was observed more frequently in catheters which were kept in place more than seven days. A. baumannii, Citrobacter freundii, E. aerogenes, P. aeruginosa and S. saprohyticus were isolated as causal agents of catheter-related bloodstream infections. The antimicrobial agent with greater in vitro activity against Gram-negative bacteria was imipenen and against Gram-positive were vancomycin, cefepime, penicillin, rifampin and tetracycline. The SEM analyses revealed biofilms on surfaces of all the catheters examined.

Cateteres venosos centrais inseridos em pacientes internados em unidade de terapia intensiva foram avaliados por métodos microbiológicos (cultura semi-quantitativa) e microscopia eletrônica de varredura a fim de detectar adesão microbiana e correlacionar com a cultura de sangue. Durante o período de estudo, foram avaliados 59 pacientes com cateter venoso central. A idade dos pacientes, sexo, sítio de inserção e tempo de permanência do cateter foram anotados. O cateter era de poliuretano não tunelizado e de único lúmen. O sangue para cultura foi coletado no momento da remoção do cateter. De 63 pontas de cateteres, 30 (47,6%) foram colonizadas e a infecção encontrada em 5 (23,8%) cateteres. A infecção foi mais prevalente em 26 pacientes (41,3%) com cateteres inseridos em veia subclávia do que nos 3 (3,2%) inseridos em veia jugular. A infecção foi observada com mais freqüência em cateteres com tempo de permanência maior do que sete dias. Os microrganismos isolados incluíram 32 estafilococos coagulase-negativa (29,7%), 61 bactérias Gram-negativas (52,9%), 9 estafilcocos coagulase-positiva (8,3%) e 3 leveduras (2,7%). Como agentes causais de infecções em unidade de terapia intensiva foram isolados E. aerogenes, P. aeruginosa, A. baumannii. Os antimicrobianos com maior atividade in vitro contra as bactérias Gram-negativas foram o imipenem e contra as Gram-positivas vancomicina, cefepime, penicilina, rifampicina e tetraciclina. As análises por microscopia eletrônica de varredura revelaram biofilmes sobre a superfície de todos os cateteres examinados.

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The internal surfaces of aluminum tubes, both unlined and lined with epoxy resin, which are used for packaged medicines such as creams, ointments, gels, etc., were evaluated chemically, and microbiologically with regard to microorganism adherence. Proof of porosity of the unlined aluminum surface and lined with epoxy resin, and the resistance to removal of the resin were observed using a scanning electron microscope and a stereoscope, with a digitalized image system. To evaluate the microorganisms adherence to the aluminum surface, unlined and lined with epoxy resin, sterilized disks (10mm in diameter) were immersed in Mueller Hinton Broth and placed in tubes of polypropylene with screw caps. The liquid culture medium was then inoculated with suspensions (10(9)CFU/ml) of the following microorganisms: Streptococcus agalactiae, Staphylococcus aureus, Acinetobacter lwoffii and Candida albicans and incubated at 37°C under constant agitation (100rpm) for 12 days. The culture broth was changed every 3 days, after which the disks were removed, and observed under the scanning electron microscope. Microscopic observations revealed adherence of the microorganisms and biofilm on the aluminum surfaces both unlined and lined with epoxy resin.

A superfície interna das bisnagas fabricadas com alumínio não revestido e revestido com resina epóxi, utilizadas para acondicionar cremes, pomadas, géis, etc., foram avaliadas quimicamente e por métodos microbiológicos correlacionados com a aderência de microrganismos. A prova da porosidade e da resistência à remoção da resina foi observada por meio do microscópio eletrônico de varredura (Topcon FM300) e estereoscópio Leica (MZ12) acoplado a Sistema de Digitalização de Imagens. Para avaliar a ação dos microrganismos foram utilizados corpos-de-prova esterilizados (discos de 10mm de diâmetro), imersos em caldo Mueller Hinton (Difco) e colocados em tubos de polipropileno com tampa de rosca (Corning). Foram inoculados tubos com meio de cultura para cada uma das suspensões bacterianas (10(9)UFC/mL) de Streptococcus agalactiae, Staphylococcus aureus, Acinetobacter lwoffii e Candida albicans, incubados a 37°C, sob agitação constante durante 12 dias. O meio de cultura era trocado a cada 3 dias. Após esse período, os corpos-de prova foram removidos, processados e observados em microscópio eletrônico de varredura JEOL-JSM (T330A). A observação por meio do microscopio eletrônico de varredura mostrou a aderência e a formação de biofilme sobre a superfície de alumínio não revestido e revestido com resina epóxi.