RESUMO
Due to their tissue structure similar to mammalian skin and their close evolutionary relationship with chordates, holothurians (Echinodermata: Holothuroidea) are particularly interesting for studies on wound healing. However, previous studies dealing with holothuroid wound healing have had limited approaches, being restricted to tissue repair or perivisceral immune response. In this study, we combined tissue, cellular and humoral parameters to study the wound healing process of Holothuria grisea. The immune responses of the perivisceral coelom were assessed by analyzing the number, proportion and viability of coelomocytes and the volume and protein concentration of the coelomic fluid. Additionally, the morphology of the healing tissue and number of coelomocytes in the connective tissue of different body wall layers were examined over 30 days. Our results showed that perivisceral reactions started 3 h after injury and decreased to baseline levels within 24 h. In contrast, tissue responses were delayed, beginning after 12 h and returning to baseline levels only after day 10. The number of coelomocytes in the connective tissue suggests a potential cooperation between these cells during wound healing: phagocytes and acidophilic spherulocytes act together in tissue clearance/homeostasis, whereas fibroblast-like and morula cells cooperate in tissue remodeling. Finally, our results indicate that the major phases observed in mammalian wound healing are also observed in H. grisea, despite occurring at a different timing, which might provide insights for future studies. Based on these data, we propose a model that explains the entire healing process in H. grisea.
Assuntos
Holothuria , Cicatrização , Animais , Cicatrização/fisiologia , Holothuria/fisiologia , Imunidade HumoralRESUMO
Ucides cordatus (Linnaeus, 1763) is a hypo-hyper-regulating mangrove crab possessing gills for respiratory and osmoregulatory processes, separated in anterior and posterior sections. They also have hepatopancreas, which is responsible for digestion and absorption of nutrients and detoxification of toxic metals. Each of these organs has specific cells that are important for in vitro studies in cell biology, ion and toxic metals transport. In order to study and characterize cells from gills and hepatopancreas, both were separated using a Sucrose Gradient (SG) from 10 to 40% and cells in each gradient were characterized using the vital mitochondrial dye DASPEI (2-(4-dimethylaminostyryl)-N- ethylpyridinium iodide) and Trichrome Mallorys stain. Both in 20 and 40% SG for gill cells and 30% SG for hepatopancreatic cells, a greater number of cells were colored with DASPEI, indicating a larger number of mitochondria in these cells. It is concluded that the gill cells present in 20% and 40% SG are Thin cells, responsible for respiratory processes and Ionocytes responsible for ion transport, respectively. For hepatopancreatic cells, the 30% SG is composed of Fibrillar cells that possess larger number of membrane ion and nutrient transporters. Moreover, the transport of toxic metal cadmium (Cd) by isolated hepatopancreatic cells was performed as a way of following cell physiological integrity after cell separation and to study differences in transport among the cells. All hepatopancreatic cells were able to transport Cd. These findings are the first step for further work on isolated cells of these important exchange epithelia of crabs, using a simple separation method and to further develop successful in vitro cell culture in crabs.
Ucides cordatus (Linnaeus, 1763) é um caranguejo de mangue hiper-hipo-regulador que possui brânquias responsáveis por processos respiratórios e osmorregulatórios. Apresentam também hepatopâncreas, que realizam digestão, absorção de nutrientes e detoxificação de metais tóxicos. Cada um desses órgãos possui células específicas que são importantes para estudos in vitro em biologia celular e transporte de íons e metais tóxicos. Visando estudar e caracterizar as células de cada órgão, estas foram separadas em um gradiente de sacarose (SG) de 10 a 40% e as células de cada gradiente foram caracterizadas usando o marcador de mitocôndria DASPEI (2-(4-dimethylaminostyryl)-N- ethylpyridinium iodide) e o corante Tricromo de Mallory. No SG de 20 e 40% para células branquiais e 30% para células hepatopancreáticas, foi observado um maior número de células coradas com DASPEI, indicando um maior número de mitocôndrias nessas células. Conclui-se que células branquiais presentes no SG de 20 e 40% são Thin cells, responsáveis por processos respiratórios, e Ionócitos, responsáveis pelo transporte iônico, respectivamente. Para as células hepatopancreáticas, o SG de 30% é composto de células Fibrilares que possuem um maior número de transportadores de membrana para íons e nutrientes. Adicionalmente, o transporte do metal tóxico cádmio (Cd) em células hepatopancreáticas isoladas foi realizado para testar a integridade fisiológica das células isoladas e estudar o transporte entre os diferentes tipos celulares. Todas as células hepatopancreáticas transportaram Cd. Os resultados obtidos são um primeiro passo para trabalhos adicionais em células isoladas de importantes epitélios de troca em caranguejos, utilizando um método de separação simples e visando futuros estudos com cultura de células em caranguejos.
Assuntos
Animais , Hepatopâncreas/anatomia & histologia , Histocitoquímica , Xiphosura americana/classificaçãoRESUMO
Ucides cordatus (Linnaeus, 1763) is a hypo-hyper-regulating mangrove crab possessing gills for respiratory and osmoregulatory processes, separated in anterior and posterior sections. They also have hepatopancreas, which is responsible for digestion and absorption of nutrients and detoxification of toxic metals. Each of these organs has specific cells that are important for in vitro studies in cell biology, ion and toxic metals transport. In order to study and characterize cells from gills and hepatopancreas, both were separated using a Sucrose Gradient (SG) from 10 to 40% and cells in each gradient were characterized using the vital mitochondrial dye DASPEI (2-(4-dimethylaminostyryl)-N- ethylpyridinium iodide) and Trichrome Mallorys stain. Both in 20 and 40% SG for gill cells and 30% SG for hepatopancreatic cells, a greater number of cells were colored with DASPEI, indicating a larger number of mitochondria in these cells. It is concluded that the gill cells present in 20% and 40% SG are Thin cells, responsible for respiratory processes and Ionocytes responsible for ion transport, respectively. For hepatopancreatic cells, the 30% SG is composed of Fibrillar cells that possess larger number of membrane ion and nutrient transporters. Moreover, the transport of toxic metal cadmium (Cd) by isolated hepatopancreatic cells was performed as a way of following cell physiological integrity after cell separation and to study differences in transport among the cells. All hepatopancreatic cells were able to transport Cd. These findings are the first step for further work on isolated cells of these important exchange epithelia of crabs, using a simple separation method and to further develop successful in vitro cell culture in crabs.(AU)
Ucides cordatus (Linnaeus, 1763) é um caranguejo de mangue hiper-hipo-regulador que possui brânquias responsáveis por processos respiratórios e osmorregulatórios. Apresentam também hepatopâncreas, que realizam digestão, absorção de nutrientes e detoxificação de metais tóxicos. Cada um desses órgãos possui células específicas que são importantes para estudos in vitro em biologia celular e transporte de íons e metais tóxicos. Visando estudar e caracterizar as células de cada órgão, estas foram separadas em um gradiente de sacarose (SG) de 10 a 40% e as células de cada gradiente foram caracterizadas usando o marcador de mitocôndria DASPEI (2-(4-dimethylaminostyryl)-N- ethylpyridinium iodide) e o corante Tricromo de Mallory. No SG de 20 e 40% para células branquiais e 30% para células hepatopancreáticas, foi observado um maior número de células coradas com DASPEI, indicando um maior número de mitocôndrias nessas células. Conclui-se que células branquiais presentes no SG de 20 e 40% são Thin cells, responsáveis por processos respiratórios, e Ionócitos, responsáveis pelo transporte iônico, respectivamente. Para as células hepatopancreáticas, o SG de 30% é composto de células Fibrilares que possuem um maior número de transportadores de membrana para íons e nutrientes. Adicionalmente, o transporte do metal tóxico cádmio (Cd) em células hepatopancreáticas isoladas foi realizado para testar a integridade fisiológica das células isoladas e estudar o transporte entre os diferentes tipos celulares. Todas as células hepatopancreáticas transportaram Cd. Os resultados obtidos são um primeiro passo para trabalhos adicionais em células isoladas de importantes epitélios de troca em caranguejos, utilizando um método de separação simples e visando futuros estudos com cultura de células em caranguejos. (AU)
Assuntos
Animais , Histocitoquímica , Xiphosura americana/classificação , Hepatopâncreas/anatomia & histologiaRESUMO
Este estudo retrata a fauna de equinodermos encontrada na Praia do Cabo Branco, João Pessoa, Paraíba, Brasil. Esta praia é formada por um terraço de abrasão marinha do tipo arenito-ferruginoso e está localizada no ponto mais oriental das Américas. Foram identificadas 32 espécies de equinodermos pertencentes a quatro classes (Asteroidea, Ophiuroidea, Echinoidea e Holothuroidea), distribuídas em 18 famílias e 24 gêneros. O número de táxons identificados corresponde a 9,7 por cento das espécies registradas para o litoral Brasileiro e mostra a significativa diversidade das espécies de Echinodermata encontrada nesta área. A classe Ophiuroidea foi a mais diversa com 13 espécies, seguida por Holothuroidea (10 spp.), Asteroidea (5 spp.) e Echinoidea (4 spp). Do total de espécies registradas, as seguintes são novas ocorrências para o litoral do Estado da Paraíba: Ophiocnida scabriuscula, Ophiomyxa flaccida, Ophiactis lymani, Ophionereis reticulata, Ophioderma januarii, Ophiophragmus brachyatis, Thyone cognita, T. suspecta, Ocnus suspectus, Phyllophorus occidentalis, P. communis, Lissothuria sp. Holothuria grisea, H. arenicola, Chiridota rotifera, Synaptula hydriformis, Echinaster nudus, Linckia guildingii, Lytechinus variegatus, Mellita quinquiesperforata e Leodia sexiesperforata.
The present study examined the fauna of echinoderms at Cabo Branco Beach, João Pessoa, state of Paraíba, Brazil. The beach was formed by the erosion of a sandstone terrace. Thirty two species from four echinoderm classes (Asteroidea, Ophiuroidea, Echinoidea and Holothuroidea) distributed among 18 families and 24 genera were identified. The number of identified taxons corresponds to 9.7 percent of the total number of species registered for the entire Brazilian coast, and demonstrates the significant diversity of echinoderm species in this area. Class Ophiuroidea was the most diverse, with 13 species, followed by Holothuroidea (10 spp.), Asteroidea (5 spp.) and Echinoidea (4 spp.). Among the recorded species, the following were new occurrences for the state of Paraíba: Ophiocnida scabriuscula, Ophiomyxa flaccida, Ophiactis lymani, Ophionereis reticulata, Ophioderma januarii, Ophiophragmus brachyatis, Thyone cognita, T. suspecta, Ocnus suspectus, Phyllophorus occidentalis, P. communis, Lissothuria sp., Holothuria grisea, Holothuria arenicola, Chiridota rotifera, Synaptula hydriformis, Echinaster nudus, Linckia guildingii, Lytechinus variegatus, Mellita quinquiesperforata and Leodia sexiesperforata.