RESUMO
In pathogens, the thioredoxin system forms part of the defense against oxidative stress and ensures the formation of the proper disulfide bonds to ensure protein function. In Corynebacterium pseudotuberculosis, the role and mechanism of TrxA1 has not been elucidated, but, the significant homology among different Trxs and the conservation of the residues that form their active sites underline the importance of the Trx systems. Proteins involved in redox metabolism and low molecular weight thiols, which might interact with them, become attractive targets to modulate the activity of pathogens. The activity of the protein was investigated using a turbidimetric assay system. The influence of different pH and low molecular weight thiols were tested. Additionally, this assay was used to investigate the inhibitory potential of ligands from different molecular families, such as, polyanions (suramin and heparin) and flavonoids (hesperetin and hesperidin). All four compounds showed inhibition of the protein activity by approximately 80%. The interactions between these compounds and Cp-TrxA1 were investigated using CD spectroscopy, NMR, molecular docking and dynamics. Our results demonstrate that suramin and hesperetin can serve as lead molecules for the development of specific inhibitors for the C. pseudotuberculosis TrxA1.
Assuntos
Corynebacterium pseudotuberculosis/metabolismo , Flavonoides/química , Flavonoides/farmacologia , Polímeros/química , Polímeros/farmacologia , Tiorredoxinas/antagonistas & inibidores , Tiorredoxinas/química , Domínio Catalítico , Corynebacterium pseudotuberculosis/genética , Ligantes , Espectroscopia de Ressonância Magnética , Conformação Molecular , Simulação de Acoplamento Molecular , Simulação de Dinâmica Molecular , Oxirredução , Polieletrólitos , Ligação Proteica , Proteínas Recombinantes , Relação Estrutura-Atividade , Tiorredoxinas/genética , Tiorredoxinas/isolamento & purificaçãoRESUMO
Cianobactérias são microrganismos procariontes que, durante o crescimento celular, são capazes de produzir exopolissacarídeos (EPS). Devido à diversidade bioquímica destes, podem ser excelentes para vários fins biotecnológicos, tendo aplicações em indústrias alimentícias, têxteis, de tintas, cosméticos, de papel, e farmacêuticas, como floculantes, espessantes ou estabilizadores, substituindo os polissacarídeos de macroalgas e plantas. Além disso, as cianobactérias apresentam taxas maiores de crescimento e são mais fáceis de manipular do que plantas e macroalgas. Este estudo teve por objetivo otimizar a produção de EPS no meio BG11, com relação a diferentes concentrações de nitrogênio e glicose do meio de cultivo na produção de EPS e biomassa pela cianobactéria Nostoc sp.