RESUMO
The effect of melatonin (0.1 microM) on freshly isolated islets from adult rats was investigated. Melatonin caused a marked decrease of insulin secretion by islets in response to glucose. The mechanism involved was then examined. Melatonin did not interfere with glucose metabolism as indicated by the measurement of glucose oxidation. However, the content of the protein kinase A (PKA) catalytic alpha-subunit was significantly decreased in islets exposed to melatonin for 1 hr in the presence of 8.3 mM glucose, whereas that of the protein kinase C (PKC) alpha-subunit remained unchanged. Melatonin also inhibited forskolin-induced insulin secretion, a well known activator of adenylate cyclase (AC) activity. This may explain the low content of insulin found in islets incubated in the presence of melatonin for 3 hr. In fact, 3',5' -cyclic adenosine monophosphate (cAMP), a product of AC activity, stimulates insulin synthesis. These findings led us to postulate that a down-regulation of the PKA signaling pathway may be the mechanism involved in the melatonin inhibition of the process of glucose-induced insulin secretion.
Assuntos
Proteínas Quinases Dependentes de AMP Cíclico/metabolismo , Insulina/metabolismo , Ilhotas Pancreáticas/efeitos dos fármacos , Ilhotas Pancreáticas/fisiologia , Melatonina/farmacologia , Animais , Colforsina/farmacologia , Proteínas Quinases Dependentes de AMP Cíclico/química , Glucose/metabolismo , Glucose/farmacologia , Técnicas In Vitro , Secreção de Insulina , Masculino , Proteína Quinase C/química , Proteína Quinase C/metabolismo , Subunidades Proteicas , RatosRESUMO
O bioensaio de hormônio de crescimento humano por incremento de peso corpóreo de ratos hipofisectomizados tem sido estudado com enfoque especial na economia de tempo e material, além de melhorar ou ao menos manter a qualidade dos parâmetros estatísticos do ensaio fatorial 2x2 clássico, que usa doses de 20 e 100microng/rato/dia. A determinaçäo da atividade biológica e dos parâmetros estatísticos relativos foi obtida através de um programa de computaçäo BASSY, em linguagem FORTRAN IV, descrito para a análise de ensaio fatorial 2x2. Com uma sensibilidade calculada da ordem de 2migrong/rato/dia, o ensaio pode ainda ser realizado em condiçöes de maior economia usando-se apenas um total de 0,6mg de hGH, com índice de precisäo inferior a 0,3. O presente estudo também mostra a excelente estabilidade das preparaçöes padräo (WHO) e Ipen ampolizadas e a precisäo interensaio relativamente alta deste bioensaio in vivo: CV = 8,7 e 18,9% respectivamente, usando-se o mesmo (n = 3) e diferentes (n = 6) esquemas de ensaio em um período superior a um ano