RESUMO
O objetivo deste trabalho foi estabelecer o efeito do congelamento (-80°C) e eficiência na estocagem do plasma sanguíneo com EDTA 10mg/dL na determinação dos metabólitos em ratos recém desmamados. Foram utilizadas amostras de 90 ratos da linhagem Wistar e os analitos testados foram: glicose, colesterol total e frações HDL, LDL, VLDL e triglicérides. Os diferentes tempos de armazenamento das análises apesar de demonstrarem variação na concentração em mg/dL para os metabólitos analisados não apresentaram significância estatística no teste t-Student (p<0,05). Sendo assim, concluímos que é importante que o tempo de armazenamento das amostras seja considerado no planejamento experimental e que o plasma é um material de alta flexibilidade na conservação de certos metabólitos. CEUA Nº 251/11.
The objective of this study was to determine the effect of store in freezer (-80ºC) and efficient storage of blood plasma with EDTA 10mg/dL in the determination of metabolites in newly weaned rats. Samples of 90 Wistar rats and the analytes were tested: glucose, total cholesterol and HDL, LDL, VLDL and triglycerides. The different storage times of the analysis showed variation in the concentration in mg / dL for the metabolites analyzed did not show statistical significance in Students t test (p <0.05), when use samples refrigerated and frozen at -80ºC. Therefore, we conclude that it is important that the storage time of the samples is considered in the experimental design and the plasma is a material of high flexibility in the storage of certain metabolites.
Assuntos
Animais , Congelamento , Plasma/citologia , Ratos Wistar/classificação , Temperatura Baixa , Tempo de ReaçãoRESUMO
O objetivo deste trabalho foi estabelecer o efeito do congelamento (-80°C) e eficiência na estocagem do plasma sanguíneo com EDTA 10mg/dL na determinação dos metabólitos em ratos recém desmamados. Foram utilizadas amostras de 90 ratos da linhagem Wistar e os analitos testados foram: glicose, colesterol total e frações HDL, LDL, VLDL e triglicérides. Os diferentes tempos de armazenamento das análises apesar de demonstrarem variação na concentração em mg/dL para os metabólitos analisados não apresentaram significância estatística no teste t-Student (p<0,05). Sendo assim, concluímos que é importante que o tempo de armazenamento das amostras seja considerado no planejamento experimental e que o plasma é um material de alta flexibilidade na conservação de certos metabólitos. CEUA Nº 251/11.(AU)
The objective of this study was to determine the effect of store in freezer (-80ºC) and efficient storage of blood plasma with EDTA 10mg/dL in the determination of metabolites in newly weaned rats. Samples of 90 Wistar rats and the analytes were tested: glucose, total cholesterol and HDL, LDL, VLDL and triglycerides. The different storage times of the analysis showed variation in the concentration in mg / dL for the metabolites analyzed did not show statistical significance in Students t test (p <0.05), when use samples refrigerated and frozen at -80ºC. Therefore, we conclude that it is important that the storage time of the samples is considered in the experimental design and the plasma is a material of high flexibility in the storage of certain metabolites.(AU)
Assuntos
Animais , Ratos Wistar/classificação , Plasma/citologia , Congelamento , Temperatura Baixa , Tempo de ReaçãoRESUMO
O presente estudo teve como objetivo apresentar os resultados de pesquisa de positividade do microorganismo Proteus mirabilis em camundongos das linhagens C57BL/6, BALB/c e BALB/c Nude, originários do setor de criação de camundongos livres de patógenos específicos (SPF) do Centro de Bioterismo da Faculdade de Medicina da USP e relatar a importância do isolamento deste microorganismo em colônias de animais. Para tanto, amostras de fezes de 71 camundongos da linhagem C57BL/6, 48 camundongos da linhagem BALB/c e 26 camundongos da linhagem BALB/c Nude, foram semeadas em meios específicos para bactérias gram negativas e diagnosticado no Enterokit B da Probac do Brasil. Nossos resultados mostraram que, as linhagens de camundongos C57BL/6, BALB/c e BALB/c Nude apresentaram P.mirabilis nas fezes, nas porcentagens de 80,3%, 62,5% e 73,1% respectivamente, sendo inadequadas para utilização em protocolos experimentais das áreas de radiobiologia, imunologia, oncologia e cirurgias experimentais invasivas, por interferirem potencialmente nos resultados destas áreas. CEUA nº 251/11.(AU)
This study aimed to present the positive results of Proteus mirabilis research from strains inbred mice C57BL/6, BALB/c and BALB/c Nude, originating from the sector of Specific Pathogen Free (SPF) mice - Animal Facilities of Faculdade de Medicina (USP University of São Paulo) and report the importance of isolation of this microorganism in colonies of animals. For this, stool samples from: 71 C57BL/6, 48 BALB/c and 26 BALB /c Nude inbred mice, were inoculated in cultural bacteria specific media and diagnosed in the B Enterokit Probac-Brasil. Our results showed that the strains of C57BL/6, BALB/c and BALB/c Nude presented P.mirabilis in stool, percentages of 80.3%, 62.5% and 73.1% respectively, being unsuitable for use in experimental protocols in the fields of radiobiology, immunology, oncology, and experimental invasive surgeries by interfering mainly on the results of these areas. CEUA No. 251/11.(AU)
Assuntos
Animais , Camundongos , Proteus mirabilis/patogenicidade , Fezes/microbiologia , Camundongos/microbiologia , BenchmarkingRESUMO
Objetivo: Realizar uma comparação, em relação a sensibilidade, das técnicas de cultura bacteriana e PCR para detecção de Pasteurella pneumotropica, em colônias convencionais de camundongos das linhagens isogênicas C57BL/6, BALB/c e heterogênica Swiss; ratos Wistar e Hamster Golden. Materiais e Métodos: 230 amostras de traquéia foram coletadas e divididas em partes iguais: uma parte foi encaminhada para a cultura bacteriana, onde foram realizadas provas bioquímicas manuais e semi-automatizadas. A outra parte foi submetida à reação de PCR, onde os oligonucleotídeos iniciadores foram F; 5 ACCTACTCTTGACATCCAGA 3 e R; 5 CGCTCCACATCGCTGCTT 3 que amplificam em 296 pb. Os produtos obtidos foram separados por eletroforese em gel de agarose. A visualização e fotodocumentação foram realizadas sob luz ultravioleta. Resultados e conclusão: Os resultados obtidos através da cultura bacteriana foram de 1,75% de casos positivos e 98,25% de negativos. Em relação ao PCR observamos o resultado de 63% de positivos e 37% de casos negativos. Concluindo, nossos resultados demonstram que a técnica de PCR oferece significativamente maior sensibilidade para detecção de P. pneumotropica quando comparado a cultura bacteriana. CEUA nº 251/11.(AU)
OBJECTIVE: To conduct a comparative study of the sensitivity by bacterial culture and PCR detection of Pasteurella pneumotropica in conventional colonies of inbred mice strains C57BL/6, BALB/c and Swiss outbred; Golden Hamster and Wistar rats. MATERIALS AND METHODS: 230 samples of the trachea were collected and divided into equal parts: one part was sent for culture, where biochemical tests were performed manually and semi-automated, after bacterial isolation. The other part was subjected to PCR, used primers F, 5 ACCTACTCTTGACATCCAGA 3 and R, 5 CGCTCCACATCGCTGCTT 3 which amplifies at 296 bp. The products obtained were separated by electrophoresis in agarose gel. Visualization and photodocumentation were performed under ultraviolet light. RESULTS AND CONCLUSION: The results obtained by bacterial culture were 1.75% of positive cases and negative in 98.25%; 63% and 37% of cases positive and negative, respectively, by PCR. These results point to the greater sensitivity of PCR (x2 = 0.10, 0.80 < p <0.50) when compared to bacterial culture. CEUA nº 251/11(AU)
Assuntos
Animais , Benchmarking/estatística & dados numéricos , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Bactérias , Pasteurella pneumotropica/patogenicidade , Roedores/genéticaRESUMO
Objetivo: Realizar uma comparação, em relação a sensibilidade, das técnicas de cultura bacteriana e PCR para detecção de Pasteurella pneumotropica, em colônias convencionais de camundongos das linhagens isogênicas C57BL/6, BALB/c e heterogênica Swiss; ratos Wistar e Hamster Golden. Materiais e Métodos: 230 amostras de traquéia foram coletadas e divididas em partes iguais: uma parte foi encaminhada para a cultura bacteriana, onde foram realizadas provas bioquímicas manuais e semi-automatizadas. A outra parte foi submetida à reação de PCR, onde os oligonucleotídeos iniciadores foram F; 5 ACCTACTCTTGACATCCAGA 3 e R; 5 CGCTCCACATCGCTGCTT 3 que amplificam em 296 pb. Os produtos obtidos foram separados por eletroforese em gel de agarose. A visualização e fotodocumentação foram realizadas sob luz ultravioleta. Resultados e conclusão: Os resultados obtidos através da cultura bacteriana foram de 1,75% de casos positivos e 98,25% de negativos. Em relação ao PCR observamos o resultado de 63% de positivos e 37% de casos negativos. Concluindo, nossos resultados demonstram que a técnica de PCR oferece significativamente maior sensibilidade para detecção de P. pneumotropica quando comparado a cultura bacteriana. CEUA nº 251/11.
OBJECTIVE: To conduct a comparative study of the sensitivity by bacterial culture and PCR detection of Pasteurella pneumotropica in conventional colonies of inbred mice strains C57BL/6, BALB/c and Swiss outbred; Golden Hamster and Wistar rats. MATERIALS AND METHODS: 230 samples of the trachea were collected and divided into equal parts: one part was sent for culture, where biochemical tests were performed manually and semi-automated, after bacterial isolation. The other part was subjected to PCR, used primers F, 5 ACCTACTCTTGACATCCAGA 3 and R, 5 CGCTCCACATCGCTGCTT 3 which amplifies at 296 bp. The products obtained were separated by electrophoresis in agarose gel. Visualization and photodocumentation were performed under ultraviolet light. RESULTS AND CONCLUSION: The results obtained by bacterial culture were 1.75% of positive cases and negative in 98.25%; 63% and 37% of cases positive and negative, respectively, by PCR. These results point to the greater sensitivity of PCR (x2 = 0.10, 0.80 < p <0.50) when compared to bacterial culture. CEUA nº 251/11
Assuntos
Animais , Bactérias , Benchmarking/estatística & dados numéricos , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Pasteurella pneumotropica/patogenicidade , Roedores/genéticaRESUMO
O presente estudo teve como objetivo apresentar os resultados de pesquisa de positividade do microorganismo Proteus mirabilis em camundongos das linhagens C57BL/6, BALB/c e BALB/c Nude, originários do setor de criação de camundongos livres de patógenos específicos (SPF) do Centro de Bioterismo da Faculdade de Medicina da USP e relatar a importância do isolamento deste microorganismo em colônias de animais. Para tanto, amostras de fezes de 71 camundongos da linhagem C57BL/6, 48 camundongos da linhagem BALB/c e 26 camundongos da linhagem BALB/c Nude, foram semeadas em meios específicos para bactérias gram negativas e diagnosticado no Enterokit B da Probac do Brasil. Nossos resultados mostraram que, as linhagens de camundongos C57BL/6, BALB/c e BALB/c Nude apresentaram P.mirabilis nas fezes, nas porcentagens de 80,3%, 62,5% e 73,1% respectivamente, sendo inadequadas para utilização em protocolos experimentais das áreas de radiobiologia, imunologia, oncologia e cirurgias experimentais invasivas, por interferirem potencialmente nos resultados destas áreas. CEUA nº 251/11.
This study aimed to present the positive results of Proteus mirabilis research from strains inbred mice C57BL/6, BALB/c and BALB/c Nude, originating from the sector of Specific Pathogen Free (SPF) mice - Animal Facilities of Faculdade de Medicina (USP University of São Paulo) and report the importance of isolation of this microorganism in colonies of animals. For this, stool samples from: 71 C57BL/6, 48 BALB/c and 26 BALB /c Nude inbred mice, were inoculated in cultural bacteria specific media and diagnosed in the B Enterokit Probac-Brasil. Our results showed that the strains of C57BL/6, BALB/c and BALB/c Nude presented P.mirabilis in stool, percentages of 80.3%, 62.5% and 73.1% respectively, being unsuitable for use in experimental protocols in the fields of radiobiology, immunology, oncology, and experimental invasive surgeries by interfering mainly on the results of these areas. CEUA No. 251/11.
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Animais , Camundongos , Camundongos/microbiologia , Fezes/microbiologia , Proteus mirabilis/patogenicidade , BenchmarkingRESUMO
Este trabalho tem como objetivo otimizar a triagem da bactéria Helicobacter spp em programa de controle sanitário de animais de laboratório, aplicando a técnica de PCR (Polymerase Chain Reaction). Cinquenta amostras de fezes de cada linhagem ou espécie: camundongo C57BL/6, BALB/c, Swiss; ratos Wistar e Hamster foram submetidas à reação de PCR, utilizando os oligonucleotídeos iniciadores F: 5 CTATGACGGGTATCCGGC 3' E R: 5' ATTCCACCTACCTCTCCCA 3' que amplificam um produto de 374 Este trabalho tem como objetivo otimizar a triagem da bactéria Helicobacter spp em programa de controle sanitário de animais de laboratório, aplicando a técnica de PCR (Polymerase Chain Reaction). Cinquenta amostras de fezes de cada linhagem ou espécie: camundongo C57BL/6, BALB/c, Swiss; ratos Wistar e Hamster foram submetidas à reação de PCR, utilizando os oligonucleotídeos iniciadores F: 5 CTATGACGGGTApb. Separados por eletroforese em gel de agarose, os produtos foram visualizados e fotodocumentados sob luz ultravioleta.A técnica de PCR possibilitou a detecção de camundongos positivos, sendo 18% da linhagem C57BL/6, 52% da linhagem BALB/c, 62% da linhagem Swiss. Em ratos da linhagem Wistar, foram detectados 28% de positividade e em hamster, 44%. Esses resultados sugerem que a técnica de PCR empregada foi eficaz para a triagem de Helicobacter spp em colônias de animais de laboratório. Certificado CEAU nº 251/11 HCFMUSP. (AU)
This work aimed to optimize the screening of the bacterium Helicobacter spp in sanitary control program of laboratory animals, using the PCR (Polymerase Chain Reaction). Fifty stool samples from each strain or species: C57BL/6, BALB/c, Swiss, Hamster and Wistar rats were subjected to PCR using the primers F: 5 CTATGACGGGTATCCGGC 3' and R: 5' ATTCCACCTACCTCTCCCA 3' that amplofy 374 bp product. Separated by agarose gel electrophoresis, products were visualized and photographed under ultraviolet light. The PCR technique allowed the detection of positive mice, 18% of C57BL/6, 52% of the strain BALB/c, 62% of Swiss strain. In Wistar rats were detected 28% ´possivity and hamster 44%. These results suggest that the PCR technique used was effective in screening for Helicobacter spp in colonies of laboratory animals. Certified CRAU Nº 251/11 HCFMUSP.(AU)
Assuntos
Animais , Roedores/classificação , Reação em Cadeia da Polimerase/instrumentação , Helicobacter/patogenicidadeRESUMO
Objetivo: Os parãmetros bioquímicos são utilizados em pesquisas cientificas, em conjunto com outros fatores, para análise dos resultados experimentais. Animais de laboratório criados em diferentes biotérios apresentam variações em seus valores devido a dieta, manejo, estado sanitário, idade, vias de coleta do sangue e outros interferentes. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi determinar o perfil bioquímico de camundongos, ratos, hamsters e coelhos convencionais criados pelo Centro de bioterismo da FMUSP. Materiais e Métodos: Foram utilizados 20 camundongos das linhagens isogênicas BALB/c e C57Bl/6 e da heterogênica Swiss; 40 ratos Wistar, 40 hamsters Golden e 40 coelhos New Zealand. Os exames realizados foram: uréia/BUN (Blood Urea Nitrogen), creatinina, proteínas totais, albumina e globulinas, ferro, fósforo, glicose, colesterol total e suas frações LDI (Low Density Lipoprotein), HDL (High Density Lipoprotein), VLDL (Very Low Density Lipoprotein), Bilirrubina total e frações (direta, indireta), cloretos, magnésio, triglicerides, Alt/AST (alanina aminotransferase, aspartato aminotransaminase), amônia, cálcio, ALP (fosfatase alcalina) e LDH (desidrogenase lática), determinados por fotocolorimetria semi-automática (Cobas Mira) e kits bioclin, Labtest e Byosystems. Resultados: Apresentados pelas médias e os erros padrões das concentrações de analitos, no plasma, agrupados por sexo. Conclusão: Foram determinados os perfis bioquímicos de camundongos, ratos, hamsters e coelhos convencionais do centro de Bioterismo da FMUSP, oferecendo uma ferramenta valiosa aos pesquisadores ao analisar seus resultados experimentais. Certificado CEAU nº 251/11 HCFMUSP. (AU)
Objective: The biochemical parameters are used in scientific research in conjunction with other factors, to analyze the experimental results. Laboratory animals raised in different animal houses have variations in their values due to diet, management health status, age, the process of colecting blood and other interferences. Thus, the objective of this study was to created by conventional Bioterty Center FMUSP . Materials and Methods: We used 20 isogenic strains of mice BALB/6 and C57BL/6 and Swiss heterogeneous, 40 Wistat rats, 40 rabbits and 40 hamsters Golden New Zealand. The tests performed were: urea / BUN (Blood Urea Nitrogen), creatine, total protein, albumin and globulins, iron, phosphorus, glucose, total cholesterol and LDL (Low Density Lipoprotein), HDL (High Density Lipoprotein), VLDL (very Low Density Lipoprotein), total bilirubin and fractions (direct, indirect), chlondes, magnesium, triglucerides, ALT/AST (alanine aminotransferase, aspartate aminotransaminase), ammonium, calcium, ALP (alkaline phosphatase) and LDH (lactate denydrogenase), certain by semi-automatic spectrophotometer (Cobas Mira) and Bioclin kitas, and Labtest Biosystems. Results: Presented by the means and standard errors of the concentrations of analytes in plasma, grouped by sex. Conclusion: We determined the biochemical profiles of mice, rats, hamsters and rabbits conventional Biotery FMUSP Center, offering a valuable tool for researchers to analyze their experimental results. Certified No 251/11 CEAU HCFMUSP.(AU)
Assuntos
Animais , Bioquímica , Animais de Laboratório/classificação , Camundongos , Ratos/classificação , Cricetinae , CoelhosRESUMO
Objetivo: Os parãmetros bioquímicos são utilizados em pesquisas cientificas, em conjunto com outros fatores, para análise dos resultados experimentais. Animais de laboratório criados em diferentes biotérios apresentam variações em seus valores devido a dieta, manejo, estado sanitário, idade, vias de coleta do sangue e outros interferentes. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi determinar o perfil bioquímico de camundongos, ratos, hamsters e coelhos convencionais criados pelo Centro de bioterismo da FMUSP. Materiais e Métodos: Foram utilizados 20 camundongos das linhagens isogênicas BALB/c e C57Bl/6 e da heterogênica Swiss; 40 ratos Wistar, 40 hamsters Golden e 40 coelhos New Zealand. Os exames realizados foram: uréia/BUN (Blood Urea Nitrogen), creatinina, proteínas totais, albumina e globulinas, ferro, fósforo, glicose, colesterol total e suas frações LDI (Low Density Lipoprotein), HDL (High Density Lipoprotein), VLDL (Very Low Density Lipoprotein), Bilirrubina total e frações (direta, indireta), cloretos, magnésio, triglicerides, Alt/AST (alanina aminotransferase, aspartato aminotransaminase), amônia, cálcio, ALP (fosfatase alcalina) e LDH (desidrogenase lática), determinados por fotocolorimetria semi-automática (Cobas Mira) e kits bioclin, Labtest e Byosystems. Resultados: Apresentados pelas médias e os erros padrões das concentrações de analitos, no plasma, agrupados por sexo. Conclusão: Foram determinados os perfis bioquímicos de camundongos, ratos, hamsters e coelhos convencionais do centro de Bioterismo da FMUSP, oferecendo uma ferramenta valiosa aos pesquisadores ao analisar seus resultados experimentais. Certificado CEAU nº 251/11 HCFMUSP.
Objective: The biochemical parameters are used in scientific research in conjunction with other factors, to analyze the experimental results. Laboratory animals raised in different animal houses have variations in their values due to diet, management health status, age, the process of colecting blood and other interferences. Thus, the objective of this study was to created by conventional Bioterty Center FMUSP . Materials and Methods: We used 20 isogenic strains of mice BALB/6 and C57BL/6 and Swiss heterogeneous, 40 Wistat rats, 40 rabbits and 40 hamsters Golden New Zealand. The tests performed were: urea / BUN (Blood Urea Nitrogen), creatine, total protein, albumin and globulins, iron, phosphorus, glucose, total cholesterol and LDL (Low Density Lipoprotein), HDL (High Density Lipoprotein), VLDL (very Low Density Lipoprotein), total bilirubin and fractions (direct, indirect), chlondes, magnesium, triglucerides, ALT/AST (alanine aminotransferase, aspartate aminotransaminase), ammonium, calcium, ALP (alkaline phosphatase) and LDH (lactate denydrogenase), certain by semi-automatic spectrophotometer (Cobas Mira) and Bioclin kitas, and Labtest Biosystems. Results: Presented by the means and standard errors of the concentrations of analytes in plasma, grouped by sex. Conclusion: We determined the biochemical profiles of mice, rats, hamsters and rabbits conventional Biotery FMUSP Center, offering a valuable tool for researchers to analyze their experimental results. Certified No 251/11 CEAU HCFMUSP.
Assuntos
Animais , Animais de Laboratório/classificação , Bioquímica , Camundongos , Coelhos , Cricetinae , Ratos/classificaçãoRESUMO
Este trabalho tem como objetivo otimizar a triagem da bactéria Helicobacter spp em programa de controle sanitário de animais de laboratório, aplicando a técnica de PCR (Polymerase Chain Reaction). Cinquenta amostras de fezes de cada linhagem ou espécie: camundongo C57BL/6, BALB/c, Swiss; ratos Wistar e Hamster foram submetidas à reação de PCR, utilizando os oligonucleotídeos iniciadores F: 5 CTATGACGGGTATCCGGC 3' E R: 5' ATTCCACCTACCTCTCCCA 3' que amplificam um produto de 374 Este trabalho tem como objetivo otimizar a triagem da bactéria Helicobacter spp em programa de controle sanitário de animais de laboratório, aplicando a técnica de PCR (Polymerase Chain Reaction). Cinquenta amostras de fezes de cada linhagem ou espécie: camundongo C57BL/6, BALB/c, Swiss; ratos Wistar e Hamster foram submetidas à reação de PCR, utilizando os oligonucleotídeos iniciadores F: 5 CTATGACGGGTApb. Separados por eletroforese em gel de agarose, os produtos foram visualizados e fotodocumentados sob luz ultravioleta.A técnica de PCR possibilitou a detecção de camundongos positivos, sendo 18% da linhagem C57BL/6, 52% da linhagem BALB/c, 62% da linhagem Swiss. Em ratos da linhagem Wistar, foram detectados 28% de positividade e em hamster, 44%. Esses resultados sugerem que a técnica de PCR empregada foi eficaz para a triagem de Helicobacter spp em colônias de animais de laboratório. Certificado CEAU nº 251/11 HCFMUSP.
This work aimed to optimize the screening of the bacterium Helicobacter spp in sanitary control program of laboratory animals, using the PCR (Polymerase Chain Reaction). Fifty stool samples from each strain or species: C57BL/6, BALB/c, Swiss, Hamster and Wistar rats were subjected to PCR using the primers F: 5 CTATGACGGGTATCCGGC 3' and R: 5' ATTCCACCTACCTCTCCCA 3' that amplofy 374 bp product. Separated by agarose gel electrophoresis, products were visualized and photographed under ultraviolet light. The PCR technique allowed the detection of positive mice, 18% of C57BL/6, 52% of the strain BALB/c, 62% of Swiss strain. In Wistar rats were detected 28% ´possivity and hamster 44%. These results suggest that the PCR technique used was effective in screening for Helicobacter spp in colonies of laboratory animals. Certified CRAU Nº 251/11 HCFMUSP.