RESUMO

La inmunogenicidad es un parámetro importante en estudios de inmunógenos. En la leptospirosis la respuesta inmune humoral es vital para la resistencia a la infección, de ahí que este trabajo se haya propuesto evaluar la inmunogenicidad y la capacidad protectora homóloga de un candidato tetravalente que incluye al serogrupo Ballum en su formulación. Se trabajó con la cepa 245-12 clasificada como L. borgpetersenii serovar Ballum, aislada a partir de un caso confirmado de leptospirosis. Con esta cepa previamente caracterizada desde el punto de vista de su virulencia, se formularon 5 lotes de una preparación vacunal tetravalente, la cual contiene además las cepas Canicola, Icterohaemorrhagiae y Pomona contenidas en la vacuna Polivalente-Leptospira, de uso veterinario. Se evaluó la inmunogenicidad de esta preparación, mediante microaglutinación y la capacidad de protección homóloga en hámster sirio dorado, frente al reto con 100 DL50. Los animales se inmunizaron con dos dosis de la vacuna (0,1mL) con un intervalo de 15 días, el reto se llevó a cabo a los 14 días de concluido el esquema de inmunización. Los resultados obtenidos se compararon con los de la vacuna Polivalente-Leptospira. Todos los lotes de preparación tetravalente formulados cumplieron satisfactoriamente con los controles de calidad. Los lotes formulados en este estudio mostraron una significativa inmunogenicidad y capacidad de protección homologa frente al serogrupo Ballum, y lograron eliminar el estado de portador en los animales inmunizados. El presente trabajo, por primera vez, sienta las bases para formulaciones vacunales novedosas, en animales, conteniendo el serogrupo Ballum(AU)

Immunogenicity is an important parameter for studies of immunogens. The humoral immune response against leptospirosis is vital for resistance to the infection; hence this paper is proposed to evaluate the immunogenicity and protective homologous capacity of a tetravalent candidate that includes serogroup Ballum in its formulation. The strain 245-12 classified as L. borgpetersenii serovar Ballum was used in this paper, isolated from a confirmed case of leptospirosis. Five (5) batches of a tetravalent vaccine preparation were formulated with this strain previously characterized from the point of view of its virulence, which also contains the strains Canicola, Icterohaemorrhagiae and Pomona contained in the Polyvalent-Leptospira vaccine for veterinary use. The immunogenicity of this preparation was assessed by micro agglutination and homologous protection capacity in Golden Syrian Hamster before the challenge with 100 LD50. Animals were immunized with two doses of vaccine (0.1 mL) with an interval of 15 days; the challenge was carried out 14 days after the immunization schedule was ended. The results were compared with those obtained with the Polyvalent-Leptospira vaccine. All the batches of the tetravalent preparation formulated complied satisfactorily with the quality controls. The batches formulated in this study showed a significant immunogenicity and homologous protection capacity against serogroup Ballum and they were able to eliminate the carrier state in the immunized animals. This paper, for the first time sets the bases for novel vaccine formulations, in animals, containing the serogroup Ballum(AU)

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Uno de los criterios más importantes para el desarrollo de inmunógenos de Leptospira es contar con cepas bien caracterizadas por su virulencia y representativa de los serogrupos circulantes desde el punto de vista clínico y veterinario. Todo lo cual permite garantizar inmunógenos capaces de proteger contra los serovares presente en la formulación y que afectan a los animales en riesgo. Este trabajo se realizó a partir de aislamientos del agente causal de cinco casos clínicos autóctonos de Leptospira en la provincia de Holguín, Cuba, mediante métodos convencionales: crecimiento a 13ºC, medio suplementado con 8-azaguanina y en presencia de cloruro de sodio. Además, los aislamientos se clasificaron hasta nivel de serogrupo mediante la técnica de microaglutinación. A partir de estos aislamientos fue seleccionada y caracterizada una cepa del serogrupo Ballum como candidato vacunal. Los aislamientos no mostraron crecimiento a 13ºC, ni cuando se le añadió al medio 8-azaguanina (2,25 mg/mL), mientras que todas las cepas mostraron conversión a forma esférica en presencia de cloruro de sodio (1M). La clasificación de los aislamientos permitió disponer de dos cepas pertenecientes al serogrupo Ballum y dos a Pomona. La cepa seleccionada mostró alta virulencia y patogenicidad en el biomodelo Hámster Sirio, además de buena estabilidad en los medios de cultivos. Su clasificación hasta el nivel de serovar mediante el uso de anticuerpos monoclonales determinó su pertenencia al serovar Ballum. El presente trabajo, por primera vez, sienta las bases para formulaciones vacunales novedosas en animales, conteniendo el serogrupo Ballum(AU)

One of the most important approaches for the development of Leptospira immunogens is to have very well characterized strains by their virulence and which are representative of the circulating serogroups from the clinical and veterinarian point of view. All of this allows to guarantee immunogens capable to protect against the serovars present in the formulation and that affect animals at risk. This paper was carried out from isolations of the causal agent of five autochthonous clinical cases of Leptospira at HolguÝn, by means of phenotypic conventional methods: growth at 13ºC, in supplemented media with 8-azaguanina and in the presence of sodium chloride. The isolations were also classified until serogroup level by the microaglutination technique. A strain of Ballum serogroup was selected and characterized from these isolations as a vaccinal candidate. The isolations did not show growth at 13ºC, not even when 8-azaguanina (2.25 mg/mL) was added to the culture, while all the strains showed conversion to spherical form in the presence of sodium chloride (1M). The classification of the isolations allowed having two strains belonging to the serogroup Ballum and two to Pomona. The selected strain showed high virulence and pathogenicity in the Syrian Hamster bio model, as well as a good stability in the culture media. Its classification until the serovar level by means of the use of monoclonal antibodies determined that it belonged to the Ballum serovar. The present paper sets for the first-time the bases for novel vaccinal formulations in animals, containing the serogroup Ballum(AU)

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La reproducción de las leptospiras siempre ha sido un dilema, ya que son bacterias algo delicadas en sus requerimientos nutricionales, más aún si se necesita obtener una concentración bacteriana alta, como es el caso que se presenta en la procucción de vacuna.En el presente trabajo se exponen los resultados de un medio de cultivo logrado principalmente con materias primas cubanas. Esencialmente y lo más importante fue la obtención de un medio de cultivo que satisface los requerimientos de estas células bacterianas lográndose la concntración necesaria y no afectando ni la virulencia, ni la inmunogenicidad u otras características del microorganismo. Para ello se usó una sustancia estimulante de ciertas especies de pescado, sustituyendo totalmente en el cuarto pase o pase industrial, al suero de conejo, que encarecía extraordinariamente el producto. La conclusión, después de realizar innumerables experimentos con este medio y de pasar a la fase industrial con la producción de varios lotes de vacuna, es que el nuevo medio sustituye al medio Korthof incluso, se acorta el período de reproducción bacteriana favoreciendo que el ciclo de producción se abrevie y se gane en productividad.(AU)

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Fue clasificada una cepa aislada de un perro determinándose su pertenencia al serogrupo Icterohaemorrhagiae (marcada con el número 169).Esta clasificación la realizaron en el Laboratorio Central de Diagnóstico Veterinario. Esta cepa que está incluidaen la vacuna contra la Leptospirosis animal y humana se clasificó en el Instituto Gamalieya de moscú hasta serovarmediante anticuerpos monoclonales en noviembre de 1993. La cepa resultó perteneceral serovar copenhageni,coincidiendo con el patrón de clasificación mediant los anticuerpos F12C3, F70C7, F70C14, F70C24 y F89C12. La cepa modelo fue la M20. Resulta importanteesta clasificación tanto por ser el primer reporte de este serovar en el país, como por la claridad que puede brindar en cuanto al conocimiento de la estructura etiológica de la Leoptospirosis en Cuba.(AU)

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