RESUMO
Este estudo teve por objetivo implantar um protocolo de amplificação genômica, precedida de transcrição reversa (RT-PCR) para o gene da nucleoproteína do vírus da raiva, para a utilização dessa metodologia em laboratórios onde são realizadas investigações para a detecção do vírus rábico. Foram utilizadas 50 amostras de tecido encefálico de animais (44 bovinos, 5 eqüinos e 1 quiróptero) oriundos do Estado do Rio de Janeiro, positivos por imunofluorescência direta e/ou prova biológica para o vírus rábico. A extração do RNA foi feita a partir da suspensão a 10 por cento em PBS pH7,2 do tecido encefálico utilizando-se a metodologia de TRIzolTM (Life Technologies) e o protocolo de RT-PCR descrito por Heaton et al. (1997), incluindo algumas modificações. Dentre as 50 amostras analisadas, 50 foram positivas pela prova biológica e pela RT-PCR e destas, 49 foram positivas pela imunofluorescência direta. Estes resultados demonstram ser este protocolo de RT-PCR uma metodologia sensível, específica, rápida e extremamente valiosa, podendo ser utilizada como rotina em laboratórios que trabalham no diagnóstico de vírus rábico.
Assuntos
Animais , Diagnóstico , Reação em Cadeia da Polimerase , Vírus da Raiva , Transcrição Gênica , Bovinos , Quirópteros , CavalosRESUMO
Este estudo teve por objetivo implantar um protocolo de amplificação genômica, precedida de transcrição reversa (RT-PCR) para o gene da nucleoproteína do vírus da raiva, para a utilização dessa metodologia em laboratórios onde são realizadas investigações para a detecção do vírus rábico. Foram utilizadas 50 amostras de tecido encefálico de animais (44 bovinos, 5 eqüinos e 1 quiróptero) oriundos do Estado do Rio de Janeiro, positivos por imunofluorescência direta e/ou prova biológica para o vírus rábico. A extração do RNA foi feita a partir da suspensão a 10 por cento em PBS pH7,2 do tecido encefálico utilizando-se a metodologia de TRIzolTM (Life Technologies) e o protocolo de RT-PCR descrito por Heaton et al. (1997), incluindo algumas modificações. Dentre as 50 amostras analisadas, 50 foram positivas pela prova biológica e pela RT-PCR e destas, 49 foram positivas pela imunofluorescência direta. Estes resultados demonstram ser este protocolo de RT-PCR uma metodologia sensível, específica, rápida e extremamente valiosa, podendo ser utilizada como rotina em laboratórios que trabalham no diagnóstico de vírus rábico.(AU)
Assuntos
Animais , Vírus da Raiva , Reação em Cadeia da Polimerase , Transcrição Gênica , Diagnóstico , Quirópteros , Cavalos , BovinosRESUMO
Fifty-three rotavirus-positive fecal specimens from children with diarrhea admitted to a Rio de Janeiro, Brazil, children's hospital between January 1997 and December 1998 were characterized for P and G types by using reverse transcription-PCR. Genotype P[4]G2 accounted for 21% of isolates, while uncommon genotypes P[8]G9, P[6]G9, and P[4]G9 accounted for 13% of the isolates.
Assuntos
Antígenos Virais , Proteínas do Capsídeo , Gastroenterite/virologia , Infecções por Rotavirus/virologia , Rotavirus/classificação , Rotavirus/genética , Brasil , Capsídeo/genética , Pré-Escolar , Fezes/virologia , Genes Virais , Genótipo , Hospitalização , Humanos , Lactente , Dados de Sequência Molecular , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , Análise de Sequência de DNARESUMO
The occurrence in chickens of small viruses with bisegmented double-stranded RNA (dsRNA) genome is confirmed and a new virus with similar properties but with three genome segments is described. Both differ from birnaviruses (Intervirology 25, 141-143, 1986) in having indistinct surface structure, smaller diameters (35 nm), and higher buoyant density (1.4 g/ml) in CsCl but are similar in these respects to viruses previously described in several mammals (Lancet 2, 103-104, 1988; J. Gen. Virol. 69, 2749-2754, 1988; Res. Vet. Sci, in press) under the tentative name of picobirnaviruses (PBV). Genome segment length estimations gave values of 2.6 and 1.9 kbp for the avian PBV and 2.9, 2.4 and 0.9 kbp for the trisegmented viruses. The source and pathogenic potential of these viruses remain to be established.
Assuntos
Galinhas/microbiologia , RNA de Cadeia Dupla/análise , Retroviridae/genética , Animais , Centrifugação com Gradiente de Concentração , Densitometria , Intestinos/microbiologia , Retroviridae/ultraestruturaRESUMO
Viruses similar to the bisegmented double-stranded (ds) RNA picobirnaviruses described in human faeces and the intestinal contents of Oryzomys nigripes rats and guinea pigs were isolated from the faeces of pigs taken from several areas in the state of Sao Paulo, Brazil. Samples were collected from 912 pigs of several breeds, aged nine to 61 days, and assayed by polyacrylamide gel electrophoresis with silver staining and a combined enzyme immunoassay for rotavirus and adenovirus, using the simian rotavirus SA11 as control. Electrophoretic profiles resembling the bisegmented dsRNA viruses were detected in 106 pigs with 15.3 per cent occurring in animals with diarrhoea compared to 9.6 per cent in animals without diarrhoea.
Assuntos
Diarreia/veterinária , Fezes/microbiologia , Vírus de RNA/isolamento & purificação , RNA de Cadeia Dupla/análise , Doenças dos Suínos/microbiologia , Animais , Brasil , Diarreia/microbiologia , Eletroforese em Gel de Poliacrilamida , Técnicas Imunoenzimáticas , Vírus de RNA/genética , SuínosAssuntos
Cobaias , Animais , Fezes/microbiologia , Genes Virais , Intestinos/microbiologia , RNA Viral , Rotavirus/genética , Rotavirus/ultraestruturaRESUMO
Evidência sorológica de infecçäo por rotavírus em uma colônia de cobaios - Anticorpos reagindo com rotavírus símio SA11 foram demonstrados por ensaio imuno-enzimático (EIE) e por "Western blot assay" (WBA) em soros de cobaios mantidos para fins experimentais na Fundaçäo Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, Brasil. A proporçäo de animais soro-positivos e os níveis de anticorpos subiram rapidametne em 1985, mantiveram-se altos em 1986 e baixaram em 1987. Näo foram observados sinais de doença coincidente com a elevaçäo de anticorpos. Resultados de WBA sugerem que o rotavírus responsável pela resposta sorológica pertence ao subgrupo do grupo A
Assuntos
Cobaias , Animais , Anticorpos Antivirais/análise , Rotavirus/imunologia , Suscetibilidade a Doenças , Técnicas ImunoenzimáticasRESUMO
Antibodies reacting with simian rotavirus SA11 were detected by enzyme immunoassay (EIA) and Western blot assay (WBA) in sera from guinea pigs bred for experimental use at the Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, Brazil. The proportion of antibody-positive animals and the antibody titres rose sharply in 1985, were maintained at a high levels in 1986 and declined in 1987. There were no obvious signs of disease coinciding with serological evidence of infection. Results of WBA suggest that the virus involved belongs to subgroup 1 of group A rotaviruses.
Assuntos
Anticorpos Antivirais/análise , Infecções por Rotavirus/diagnóstico , Rotavirus/imunologia , Animais , Western Blotting , Cobaias , Técnicas ImunoenzimáticasRESUMO
Preparaçöes da amostra SA11 de rotavírus símio mantidas em diferentes laboratórios foram comparadas entre si por eletroforese do genoma viral em gel de poliacrilamida. Diferenças na migraçäo dos segmentos genômicos 4,5 e 7 permitiram a classificaçäo de oito preparaçöes virais em quatro tipos eletroforéticos
Assuntos
Genes Virais , RNA Viral/genética , Rotavirus/genética , Eletroforese em Gel de PoliacrilamidaRESUMO
Preparations of simian rotavirus SA11 maintained in different laboratories were compared with each other by polyacrylamide gel electrophoresis of genomic RNA. Differences in the migration of genome segments 4, 5 and 7 allowed the classification of eight virus preparations into four electrophoretic types.