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1.
Plants (Basel) ; 12(10)2023 May 12.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-37653888

RESUMO

The objective of this study was to determine the duration of the main phenological stages, plant growth development, yield, and cone quality of hop cultivars grown under artificial light (17 h per day) during vegetative development (early season) in a subtropical climate region. The study was conducted in Palotina, Paraná, Brazil (24° S), during the 2021 and 2022 growing seasons. The plants were cultivated in a 5.5 m high trellis system with artificial light supplementation during vegetative development. The hop cultivars Hallertau Mittelfrüher, Mapuche, Northern Brewer, Spalter, and Yakima Gold were used in the treatments. The duration of the phenological stages, vegetative growth (plant height, fresh mass of the plants, number of lateral branches per plant), components of productive yield (number of cones per side branch, number of cones per plant, fresh mass, length, and width of the cone, production of fresh cones per plant, and yield), and chemical components of the cones (alpha- and beta-acid contents, and essential oil concentrations) were recorded. The duration of the phenological stages was visually evaluated, and plant growth was analyzed using non-linear log-logistic regression. The remaining data were subjected to analysis of variance and the means were compared using Tukey's test. The data were also subjected to multivariate analysis using the principal components test, correlation analysis, and hierarchical grouping. The cultivar Mapuche was considered an early hop in both seasons, and the cultivars Spalter and Yakima Gold were considered early cultivars in the second season. In both seasons, the productive yield components were positively correlated with the precocity of the cultivars, in which Mapuche in the 2021 season and Mapuche, Spalter, and Yakima Gold in the 2022 season had the highest mean of the number of cones per side branch and per plant, production per plant, and productivity. The cultivar Yakima Gold had a positive correlation with the chemical quality of cones, alpha and beta acid contents, and essential oil concentrations, for both seasons.

2.
Semina ciênc. agrar ; 43(2): 585-598, mar.-abr. 2022. tab, ilus, graf
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: biblio-1368839

RESUMO

The objective of this study is to compare the direct fecal smear (DFS) and centrifugal sedimentation (CS) methods in the detection of Cryptosporidium spp. oocysts in fecal samples of dairy calves. One hundred and fourteen fecal samples were collected from calves aged up to six months from 10 dairy farms located in Palotina and Francisco Alves, Paraná, Brazil. The microscopic analysis revealed the presence of Cryptosporidium spp. oocysts in 51.75% (59/114) of the samples in both methods. In CS, 48.25% (55/114) of the samples were positive, while in DFS slides, only 6.14% (7/114) were positive. Only 4 samples were positive exclusively in DFS. To ensure that there were no false-negative results in the microscopic analysis, the 55 samples that were negative in both DFS and CS were selected for molecular analysis using the nested PCR (nPCR). Of these 55 samples, 24% (13/55) were positive and forwarded for sequencing part of the genome, which made it possible to identify C. parvum, C. bovis and C. ryanae. Besides the characterization of the Cryptosporidium species, it was possible to identify bacteria of the genus Acinetobacter interfering directly in the analyzed samples. The microscopic analysis also revealed higher sensitivity when CS was used to make the fecal smears. However, some samples that were negative in this technique had positive PCR results. Thus, molecular analysis is indicated to confirm cases of Cryptosporidium spp. Further studies are necessary to prove the specificities of the used primers since the results obtained in nPCR were positive for the protozoan but, when genetic sequencing was performed, Acinetobacter spp. was identified.(AU)


O objetivo deste trabalho foi comparar os métodos de esfregaço fecal direto (DFS) e centrífugo sedimentação (CS) para a pesquisa de oocistos de Cryptosporidium spp. em amostras fecais de bezerros leiteiros. Foram coletadas 114 amostras fecais de bezerros com até seis meses de idade, provenientes de dez propriedades leiteiras localizadas nos municípios de Palotina e Francisco Alves, Paraná. Por meio da análise microscópica, foi possível observar oocistos de Cryptosporidium spp. em 51,75% (59/114) das amostras. Pelo método da CS foi identificada positividade em 48,25% (55/114) das amostras, enquanto nas lâminas pelo método do esfregaço fecal direto (DFS), apenas 6,14% (7/114) foram positivas. Somente 4 amostras foram positivas exclusivamente no método do DFS. Para assegurar que na análise microscópica não houvesse resultados falso-negativos, as 55 amostras negativas para os dois métodos de confecção de lâminas (DFS e CS) foram selecionadas para análise molecular por meio da técnica de Nested PCR. Das 55 amostras submetidas a nPCR, 24% (13/55) apresentaram-se positivas e foram encaminhadas para o sequenciamento genético de uma porção do genoma, o qual possibilitou identificar as espécies de C. parvum, C. bovis e C. ryanae. Além da caracterização das espécies de Cryptosporidium, foi possível identificar a presença de bactérias do gênero Acinetobacter interferindo diretamente nas amostras analisadas. A análise microscópica revelou maior sensibilidade quando o método de CS foi usado para a confecção dos esfregaços fecais, entretanto, amostras negativas por meio dessa metodologia apresentaram resultados positivos na nPCR. Desta forma, para a confirmação dos casos de Cryptosporidium spp., é indicado a realização da análise molecular. Novos estudos são necessários para se comprovar a especificidade dos primers utilizados, uma vez que na nPCR o resultado obtido foi positivo, porém ao realizar o sequenciamento genético houve a identificação de Acinetobacter spp.(AU)


Assuntos
Animais , Bovinos , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Cryptosporidium/patogenicidade , Oocistos , Fezes/microbiologia
3.
Rev Bras Parasitol Vet ; 30(2): e026920, 2021.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-34076057

RESUMO

The objective of this research was to evaluate the control of coccidiosis in the litter of commercial poultry housing in the Western region of Paraná, Brazil, which adopts sanitary management to control Salmonellosis. Three litter treatments were selected, proposed by an integrating company in the region: fermentation associated with liming (FL); liming (L) and fermentation (F). Stool samples were collected from 18 poultry housing, in a completely randomized experimental design, testing different collection areas in the sheds, from the 5th day of the birds' housing, repeated weekly until the 40th day, during five successive flocks. The incidence of coccidiosis was determined by oocysts count in feces (OoPG), testing the interactions between treatment, age of birds and the number of flocks housed. Samples were selected to identify, through the Multiplex PCR, species of the genus Eimeria. circulating in the shed. The results showed that in litter where fermentation was adopted, the efficiency to control the sporulation of Eimeria spp. was significantly (p <0.05) higher than in the other treatments. The use of the Multiplex PCR technique requires improvements in the preparation of samples for the extraction of genetic material.


Assuntos
Coccidiose , Coccidiostáticos , Eimeria , Doenças das Aves Domésticas , Animais , Brasil , Galinhas , Coccidiose/tratamento farmacológico , Coccidiose/prevenção & controle , Coccidiose/veterinária , Coccidiostáticos/uso terapêutico , Habitação , Aves Domésticas , Doenças das Aves Domésticas/prevenção & controle
4.
Rev. bras. parasitol. vet ; 30(2): e026920, 2021. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-1251388

RESUMO

Abstract The objective of this research was to evaluate the control of coccidiosis in the litter of commercial poultry housing in the Western region of Paraná, Brazil, which adopts sanitary management to control Salmonellosis. Three litter treatments were selected, proposed by an integrating company in the region: fermentation associated with liming (FL); liming (L) and fermentation (F). Stool samples were collected from 18 poultry housing, in a completely randomized experimental design, testing different collection areas in the sheds, from the 5th day of the birds' housing, repeated weekly until the 40th day, during five successive flocks. The incidence of coccidiosis was determined by oocysts count in feces (OoPG), testing the interactions between treatment, age of birds and the number of flocks housed. Samples were selected to identify, through the Multiplex PCR, species of the genus Eimeria. circulating in the shed. The results showed that in litter where fermentation was adopted, the efficiency to control the sporulation of Eimeria spp. was significantly (p <0.05) higher than in the other treatments. The use of the Multiplex PCR technique requires improvements in the preparation of samples for the extraction of genetic material.


Resumo O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência dos manejos sanitários aplicados à cama de aviários comerciais para o controle da salmonelose nas criações de frango de corte, na região Oeste do Paraná, e verificar seu efeito no controle da coccidiose. Foram selecionados três tratamentos de cama: a fermentação associada à calagem (FL); calagem (L) e fermentação (F). As amostras de fezes foram coletadas de 18 aviários, com um delineamento experimental inteiramente casualizado, testando-se diferentes áreas de coleta. As coletas foram realizadas a partir do 5° dia do alojamento e se repetiram semanalmente até o 40° dia, durante cinco lotes sucessivos. A incidência da parasitose foi determinada pela contagem de oocistos por grama de fezes (OoPG), testando as interações entre tratamento, idade das aves e número de lotes alojados. Amostras de fezes foram selecionadas para identificar os oocistos esperulados das espécies do gênero Eimeria circulantes no galpão, por meio do Multiplex PCR. Observou-se que a fermentação foi significativamente (p<0,05) mais eficiente, comparando-se o mesmo lote ao longo de todos os observados. A utilização da técnica de PCR Multiplex, precisa ser padronizada para amostras de campo.


Assuntos
Animais , Doenças das Aves Domésticas/prevenção & controle , Coccidiose/prevenção & controle , Coccidiose/tratamento farmacológico , Coccidiose/veterinária , Coccidiostáticos/uso terapêutico , Eimeria , Aves Domésticas , Brasil , Galinhas , Habitação
5.
Poult Sci ; 98(5): 2160-2168, 2019 May 01.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-30597084

RESUMO

This experiment was conducted to evaluate the combined effects of manganese-amino acid complex and arginine supplementation on the immune competence of broilers. On the day of hatch 640 male Cobb 500 broiler chicks assigned to two study groups (immune stimulate and non-stimulated). A 2 × 2 factorial arrangement of treatments was used with two manganese sources (MnSO4 or manganese-amino acid complex - MnAA) and two digestible Arg:Lys ratios (1.12 or 1.20). The treatments are: IM (80 ppm MnSO4); MnAA (40 ppm MnSO4 + 40 ppm MnAA); IM+Arg: 80 ppm MnSO4+ L-Arg (Arg:DigLys 1.20); MnAA+Arg: 40 ppm MnSO4 + 40 ppm MnAA + L-Arg (Arg:Lys 1.20). For treatments 1 and 2, the digestible Arg:Lys ratio was 1.12, considered normal for corn-soybean meal-based diets. Birds in the immune stimulated group received a dose of Salmonella Enteritidis vaccine. For growth performance and lymphoid organ development, no significant results were observed. Non-stimulated birds fed diets with Arg supplementation had higher percentage of mucosal T helper, T helper and T cytotoxic, compared to the normal Arg:Lys ratio (1.12). In the immune stimulated birds, broilers fed exclusive IM diet had a higher amount of T helper, T cytotoxic, activated T cytotoxic, and APC cells compared to broilers fed MnAA. The inorganic Mn diets, resulted in higher humoral antibody level (increased IgM levels) only when associated with supplementation of L-Arg. However, the use of an associated Mn source, could support high levels of IgM in commercial levels of Arg. No differences were observed to macrophage phagocytic activity analyses.


Assuntos
Arginina/metabolismo , Galinhas , Imunocompetência/imunologia , Manganês/metabolismo , Vacinas contra Salmonella/imunologia , Salmonella enteritidis/imunologia , Ração Animal/análise , Animais , Arginina/administração & dosagem , Dieta/veterinária , Suplementos Nutricionais/análise , Imunidade Celular/efeitos dos fármacos , Imunidade Humoral/efeitos dos fármacos , Imunização/veterinária , Imunocompetência/efeitos dos fármacos , Tecido Linfoide/efeitos dos fármacos , Tecido Linfoide/crescimento & desenvolvimento , Manganês/administração & dosagem , Tamanho do Órgão/efeitos dos fármacos , Fagocitose/efeitos dos fármacos , Doenças das Aves Domésticas/imunologia , Distribuição Aleatória , Salmonelose Animal/imunologia
6.
Semina ciênc. agrar ; 38(4): 1917-1924, Jul.-Ago. 2017. ilus, tab
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-25006

RESUMO

Considered a zoonosis of utmost importance, cryptosporidiosis has a worldwide distribution and can infect mammals, birds, reptiles, and amphibians. It is caused by a highly resistant protozoan present in the environment and can cause death in immunosuppressed individuals and pups, as well as in farm animals such as cattle and sheep, generating losses. The aim of this study was to investigate the presence of Cryptosporidium spp. in sheep feces from the farms of Western Paraná, which have different management styles, and compare the results with their respective management methods. One hundred and forty-four stool samples were collected (69 from Property 1 and 75 from Property 2) and analyzed using a fecal smear on slides after staining by the modified Ziehl-Neelsen method. Samples tested positive by this method were subjected to nested PCR and the products obtained were sent for sequencing to determine the species. While 82.60% of the samples from Property 1 were tested positive, only 36% of the samples from Property 2 were tested positive. On analyzing the sequencing data, it was observed that the Cryptosporidium species of samples from Property 1 showed high similarity to Cryptosporidium xiaoi and those from Property 2, to Cryptosporidium ubiquitum. The reason for divergence in results can be attributed to differences in management systems adopted by each property, thus showing the importance of detecting carrier animals, as they can contaminate the environment,especially the water sources, and spread the disease to humans and other animals.(AU)


Considerada uma zoonose de extrema importância, a cryptosporidiose possui distribuição mundial e pode infectar mamíferos, aves, répteis e anfíbios. É causada por um protozoário muito resistente no ambiente, podendo gerar mortes em indivíduos imunossuprimidos e filhotes, principalmente em animais de produção como bovinos e ovinos, gerando prejuízos. O objetivo desse trabalho foi pesquisar a presença de Cryptosporidium spp. em fezes de ovinos de propriedades rurais do Oeste do Paraná, que possuem manejos diferenciados e comparar os resultados encontrados com o respectivo manejo. Foram coletadas 144 amostras de fezes, sendo 69 da Propriedade 1 e 75 da Propriedade 2, analisadas pelo esfregaço de fezes em lâminas após a coloração pelo método de Ziehl-Neelsen modificado. As amostras positivas por esse método foram submetidas à Nested-PCR sendo os produtos obtidos enviados ao sequenciamento para a determinação da espécie. A Propriedade 1 apresentou positividade em 82,60% das amostras, enquanto a Propriedade 2 obteve 36% de amostras positivas. Foi encontrada alta similaridade para Cryptosporidium xiaoi na primeira propriedade e Cryptosporidium ubiquitum na segunda propriedade. A divergência nos resultados pode ser comprovada pela diferente forma de manejo adotada em cada propriedade, mostrando a importância de detectar os animais portadores, uma vez que estes podem contaminar o meio ambiente, especialmente os cursos dágua, e promover a disseminaçãoda doença para outros animais e para o homem.(AU)


Assuntos
Animais , Ovinos/genética , Ovinos/microbiologia , Criptosporidiose/classificação , Criptosporidiose/genética
7.
Semina Ci. agr. ; 38(4): 1917-1924, 2017.
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-744642

RESUMO

Considered a zoonosis of utmost importance, cryptosporidiosis has a worldwide distribution and can infect mammals, birds, reptiles, and amphibians. It is caused by a highly resistant protozoan present in the environment and can cause death in immunosuppressed individuals and pups, as well as in farm animals such as cattle and sheep, generating losses. The aim of this study was to investigate the presence of Cryptosporidium spp. in sheep feces from the farms of Western Paraná, which have different management styles, and compare the results with their respective management methods. One hundred and forty-four stool samples were collected (69 from Property 1 and 75 from Property 2) and analyzed using a fecal smear on slides after staining by the modified Ziehl-Neelsen method. Samples tested positive by this method were subjected to nested PCR and the products obtained were sent for sequencing to determine the species. While 82.60% of the samples from Property 1 were tested positive, only 36% of the samples from Property 2 were tested positive. On analyzing the sequencing data, it was observed that the Cryptosporidium species of samples from Property 1 showed high similarity to Cryptosporidium xiaoi and those from Property 2, to Cryptosporidium ubiquitum. The reason for divergence in results can be attributed to differences in management systems adopted by each property, thus showin


Considerada uma zoonose de extrema importância, a cryptosporidiose possui distribuição mundial e pode infectar mamíferos, aves, répteis e anfíbios. É causada por um protozoário muito resistente no ambiente, podendo gerar mortes em indivíduos imunossuprimidos e filhotes, principalmente em animais de produção como bovinos e ovinos, gerando prejuízos. O objetivo desse trabalho foi pesquisar a presença de Cryptosporidium spp. em fezes de ovinos de propriedades rurais do Oeste do Paraná, que possuem manejos diferenciados e comparar os resultados encontrados com o respectivo manejo. Foram coletadas 144 amostras de fezes, sendo 69 da Propriedade 1 e 75 da Propriedade 2, analisadas pelo esfregaço de fezes em lâminas após a coloração pelo método de Ziehl-Neelsen modificado. As amostras positivas por esse método foram submetidas à Nested-PCR sendo os produtos obtidos enviados ao sequenciamento para a determinação da espécie. A Propriedade 1 apresentou positividade em 82,60% das amostras, enquanto a Propriedade 2 obteve 36% de amostras positivas. Foi encontrada alta similaridade para Cryptosporidium xiaoi na primeira propriedade e Cryptosporidium ubiquitum na segunda propriedade. A divergência nos resultados pode ser comprovada pela diferente forma de manejo adotada em cada propriedade, mostrando a importância de detectar os animais portadores, uma vez que estes podem contaminar o meio am

8.
Semina ciênc. agrar ; 38(4): 1917-1924, 2017. ilus, tab
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: biblio-1500812

RESUMO

Considered a zoonosis of utmost importance, cryptosporidiosis has a worldwide distribution and can infect mammals, birds, reptiles, and amphibians. It is caused by a highly resistant protozoan present in the environment and can cause death in immunosuppressed individuals and pups, as well as in farm animals such as cattle and sheep, generating losses. The aim of this study was to investigate the presence of Cryptosporidium spp. in sheep feces from the farms of Western Paraná, which have different management styles, and compare the results with their respective management methods. One hundred and forty-four stool samples were collected (69 from Property 1 and 75 from Property 2) and analyzed using a fecal smear on slides after staining by the modified Ziehl-Neelsen method. Samples tested positive by this method were subjected to nested PCR and the products obtained were sent for sequencing to determine the species. While 82.60% of the samples from Property 1 were tested positive, only 36% of the samples from Property 2 were tested positive. On analyzing the sequencing data, it was observed that the Cryptosporidium species of samples from Property 1 showed high similarity to Cryptosporidium xiaoi and those from Property 2, to Cryptosporidium ubiquitum. The reason for divergence in results can be attributed to differences in management systems adopted by each property, thus showing the importance of detecting carrier animals, as they can contaminate the environment,especially the water sources, and spread the disease to humans and other animals.


Considerada uma zoonose de extrema importância, a cryptosporidiose possui distribuição mundial e pode infectar mamíferos, aves, répteis e anfíbios. É causada por um protozoário muito resistente no ambiente, podendo gerar mortes em indivíduos imunossuprimidos e filhotes, principalmente em animais de produção como bovinos e ovinos, gerando prejuízos. O objetivo desse trabalho foi pesquisar a presença de Cryptosporidium spp. em fezes de ovinos de propriedades rurais do Oeste do Paraná, que possuem manejos diferenciados e comparar os resultados encontrados com o respectivo manejo. Foram coletadas 144 amostras de fezes, sendo 69 da Propriedade 1 e 75 da Propriedade 2, analisadas pelo esfregaço de fezes em lâminas após a coloração pelo método de Ziehl-Neelsen modificado. As amostras positivas por esse método foram submetidas à Nested-PCR sendo os produtos obtidos enviados ao sequenciamento para a determinação da espécie. A Propriedade 1 apresentou positividade em 82,60% das amostras, enquanto a Propriedade 2 obteve 36% de amostras positivas. Foi encontrada alta similaridade para Cryptosporidium xiaoi na primeira propriedade e Cryptosporidium ubiquitum na segunda propriedade. A divergência nos resultados pode ser comprovada pela diferente forma de manejo adotada em cada propriedade, mostrando a importância de detectar os animais portadores, uma vez que estes podem contaminar o meio ambiente, especialmente os cursos d’água, e promover a disseminaçãoda doença para outros animais e para o homem.


Assuntos
Animais , Criptosporidiose/classificação , Criptosporidiose/genética , Ovinos/genética , Ovinos/microbiologia
9.
Ciênc. rural ; Ciênc. rural (Online);43(8): 1496-1502, ago. 2013. ilus, tab
Artigo em Português | LILACS | ID: lil-680689

RESUMO

O objetivo desta pesquisa foi avaliar o efeito da suplementação de levedura de cerveja e minerais orgânicos sobre o desempenho, morfometria intestinal e resposta imune humoral de frangos de corte, desafiados com a vacina de coccidiose. Foram utilizados 384 pintos de corte, distribuídos aleatoriamente em um delineamento inteiramente casualizado com quatro tratamentos (1. controle, 2. minerais orgânicos 3. levedo de cerveja, 4. associação de minerais orgânicos e levedo de cerveja) e 4 repetições de 24 aves cada. No alojamento, 12 aves de cada repetição foram identificadas com anilha e receberam a vacina contra coccidiose via ocular. Aos 7, 21, 35 e 42 dias, foi coletado sangue para análise de proteínas séricas totais e perfil eletroforético de IgA e IgG e um segmento do duodeno para análise morfométrica. A suplementação de levedo de cerveja ou de minerais orgânicos não afetou o desempenho de frangos de corte ou a produção de anticorpos. O desafio imunológico com a vacina de coccidiose não foi suficientemente eficaz em provocar uma resposta imune capaz de alterar a morfometria da mucosa duodenal e a produção de anticorpos.


The objective of this study was to evaluate the effects of beer yeast and organic minerals supplementations on the performance, intestinal morphometry and humoral immune response of broilers that were challenged with coccidiosis vaccine. Three-hundred-eighty-four chicks were used, randomly distributed in an entirely random design total with four treatments (1. control, 2. organic minerals on top, 3. beer yeast, 4. association between organic minerals and beer yeast) and four treatments with 24-bird repetition each. At housing, 12 birds of each repetition were identified and received the eye-drop vaccine against coccidiosis. At 7, 21, 35 and 42 days it was collected blood to analyze the total serum proteins and the eletrophoretic profile of IgA and IgG and a duodenal segment for morphometric analysis. Neither the beer yeast nor the organic minerals supplementation affected the broiler performance or the antibodies production. The immunological challenge like the coccidiosis vaccine was not efficacious enough to provide an immune response able to modify the duodenal mucosa morphometry and the antibodies production.

10.
Rev Soc Bras Med Trop ; 44(5): 587-90, 2011 Oct.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-22031074

RESUMO

INTRODUCTION: The production of anti-Cryptosporidium polyclonal antibodies and its use in direct immunofluorescence assays to determine the presence of Cryptosporidium in water are described in the present work. METHODS: Two rabbits were immunized with soluble and particulate antigens from purified Cryptosporidium oocysts. The sera produced were prepared for immunoglobulin G extraction, which were then purified and conjugated with fluorescein isothiocyanate (FITC). Slides containing known amounts of oocysts were prepared to determine the sensitivity of the technique. To test the specificity, slides containing Giardia duodenalis cysts were prepared. RESULTS: The conjugate was successfully used in water samples experimentally contaminated with Cryptosporidium oocysts, and it was possible to detect up to five oocysts/spot, corresponding to contamination of 250 oocysts/mL. CONCLUSIONS: The three immunizations performed in the rabbits were enough to produce antibodies against Cryptosporidium, the standard direct immunofluorescence assay permitted the detection of five oocysts in 20% of the samples, and no cross-reaction with Giardia duodenalis cysts occurred.


Assuntos
Anticorpos Antiprotozoários/biossíntese , Cryptosporidium/imunologia , Água Doce/parasitologia , Animais , Cryptosporidium/isolamento & purificação , Técnica Direta de Fluorescência para Anticorpo/normas , Oocistos/imunologia , Coelhos , Sensibilidade e Especificidade
11.
Rev. Soc. Bras. Med. Trop ; Rev. Soc. Bras. Med. Trop;44(5): 587-590, Sept.-Oct. 2011. graf, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-602901

RESUMO

INTRODUCTION: The production of anti-Cryptosporidium polyclonal antibodies and its use in direct immunofluorescence assays to determine the presence of Cryptosporidium in water are described in the present work. METHODS: Two rabbits were immunized with soluble and particulate antigens from purified Cryptosporidium oocysts. The sera produced were prepared for immunoglobulin G extraction, which were then purified and conjugated with fluorescein isothiocyanate (FITC). Slides containing known amounts of oocysts were prepared to determine the sensitivity of the technique. To test the specificity, slides containing Giardia duodenalis cysts were prepared. RESULTS: The conjugate was successfully used in water samples experimentally contaminated with Cryptosporidium oocysts, and it was possible to detect up to five oocysts/spot, corresponding to contamination of 250 oocysts/mL. CONCLUSIONS: The three immunizations performed in the rabbits were enough to produce antibodies against Cryptosporidium, the standard direct immunofluorescence assay permitted the detection of five oocysts in 20 percent of the samples, and no cross-reaction with Giardia duodenalis cysts occurred.


INTRODUÇÃO: A produção de anticorpos policlonais anti-Cryptosporidium e sua utilização na imunofluorescência para determinar a presença de Cryptosporidium em água são descritas no presente trabalho. MÉTODOS: Dois coelhos foram imunizados com antígeno solúvel e particulado provenientes de oocistos purificados de Cryptosporidium. O soro produzido foi preparado para a extração de imunoglobulinas G, que foram purificadas e conjugadas com isotiocianato de fluoresceína (FITC). Lâminas contendo quantidades conhecidas de oocistos foram preparadas para determinar a sensibilidade da técnica. Para testar a especificidade foram preparadas lâminas contendo cistos de Giardia duodenalis. RESULTADOS: O conjugado foi usado com sucesso em amostras de água contaminadas experimentalmente com oocistos de Cryptosporidium, sendo capaz de detectar até cinco oocistos/spots que corresponde a uma contaminação de 250 oocistos/mL. CONCLUSÕES: As três imunizações realizadas nos coelhos foram suficientes para produção de anticorpos contra Cryptosporidium; a reação de imunofluorescência direta padronizada permitiu a detecção de cinco oocistos em 20 por cento das amostras; não houve reação cruzada com cistos de Giardia duodenalis.


Assuntos
Animais , Coelhos , Anticorpos Antiprotozoários/biossíntese , Cryptosporidium/imunologia , Água Doce/parasitologia , Cryptosporidium/isolamento & purificação , Técnica Direta de Fluorescência para Anticorpo/normas , Oocistos/imunologia , Sensibilidade e Especificidade
12.
Acta sci., Anim. sci ; 33(2): 151-155, 2011.
Artigo em Português | VETINDEX | ID: vti-764553

RESUMO

The study was conducted to evaluate the effect of supplemental Arginine (Arg) on the humoral immune response and development of lymphoid organs of broiler chickens vaccinated against Gumboro disease. Six hundred and forty broilers were reared in a complete randomized design with four treatments (1. Control, 2. Immunization, 3. Immunization and supplementation of L-Arg, and 4. Supplemental L-Arg.) and eight replications of 20 birds each. Birds in treatments 3 and 4 were vaccinated at 16 days against Gumboro disease (intermediate plus strain). Serum samples from birds at 14, 21, 28 and 35 days old were analyzed by ELISA for detection of antibody titers against Gumboro disease, and at these same ages, lymphoid organ weight was determined and the height of the primary folds of lymphoid tissue in the cloacal bursa was measured. There was no significant difference (p > 0.05) among treatments. Arg supplementation did not improve the immune response of broilers immunized against Gumboro Disease. The lack of response to immunization may be attributed to the low virulence of the vaccine strain used and the presence of environmental virus.


O estudo foi realizado com o objetivo de avaliar o efeito da suplementação de Arginina (Arg) sobre a resposta imune humoral e o desenvolvimento dos órgãos linfoides de frangos de corte imunizados contra a Doença de Gumboro. Foram utilizados 640 pintos de corte, distribuídos aleatoriamente em um delineamento inteiramente casualizado com quatro tratamentos (1. Controle, 2. Imunização, 3. Imunização + suplementação de L-Arg e 4. Suplementação de L-Arg.) e oito repetições de 20 aves cada. As aves dos tratamentos 3 e 4 foram imunizadas no 16° dia, contra a Doença de Gumboro (cepa intermediária plus). Amostras de soro das aves com 14, 21, 28 e 35 dias de idade foram analisadas por ELISA para detecção de título de anticorpos contra a Doença de Gumboro e nestas mesmas idades foi determinado o peso dos órgãos linfoides e a altura de pregas primárias do tecido linfoide da bolsa cloacal. Não houve diferença significativa (p > 0,05) entre os tratamentos. A suplementação de Arg não contribuiu com a resposta imune dos frangos de corte imunizados contra a Doença de Gumboro. A falta de resposta à imunização pode ser atribuída à baixa virulência da cepa vacinal utilizada e à presença de vírus de campo.

13.
Acta sci., Anim. sci ; 33(2): 151-155, 2011. tab
Artigo em Português | VETINDEX | ID: biblio-1399629

RESUMO

O estudo foi realizado com o objetivo de avaliar o efeito da suplementação de Arginina (Arg) sobre a resposta imune humoral e o desenvolvimento dos órgãos linfoides de frangos de corte imunizados contra a Doença de Gumboro. Foram utilizados 640 pintos de corte, distribuídos aleatoriamente em um delineamento inteiramente casualizado com quatro tratamentos (1. Controle, 2. Imunização, 3. Imunização + suplementação de L-Arg e 4. Suplementação de L-Arg.) e oito repetições de 20 aves cada. As aves dos tratamentos 3 e 4 foram imunizadas no 16º dia, contra a Doença de Gumboro (cepa intermediária plus). Amostras de soro das aves com 14, 21, 28 e 35 dias de idade foram analisadas por ELISA para detecção de título de anticorpos contra a Doença de Gumboro e nestas mesmas idades foi determinado o peso dos órgãos linfoides e a altura de pregas primárias do tecido linfoide da bolsa cloacal. Não houve diferença significativa (p > 0,05) entre os tratamentos. A suplementação de Arg não contribuiu com a resposta imune dos frangos de corte imunizados contra a Doença de Gumboro. A falta de resposta à imunização pode ser atribuída à baixa virulência da cepa vacinal utilizada e à presença de vírus de campo.


The study was conducted to evaluate the effect of supplemental Arginine (Arg) on the humoral immune response and development of lymphoid organs of broiler chickens vaccinated against Gumboro disease. Six hundred and forty broilers were reared in a complete randomized design with four treatments (1. Control, 2. Immunization, 3. Immunization and supplementation of L-Arg, and 4. Supplemental L-Arg.) and eight replications of 20 birds each. Birds in treatments 3 and 4 were vaccinated at 16 days against Gumboro disease (intermediate plus strain). Serum samples from birds at 14, 21, 28 and 35 days old were analyzed by ELISA for detection of antibody titers against Gumboro disease, and at these same ages, lymphoid organ weight was determined and the height of the primary folds of lymphoid tissue in the cloacal bursa was measured. There was no significant difference (p > 0.05) among treatments. Arg supplementation did not improve the immune response of broilers immunized against Gumboro Disease. The lack of response to immunization may be attributed to the low virulence of the vaccine strain used and the presence of environmental virus.


Assuntos
Animais , Arginina , Galinhas , Imunização , Corte , Anticorpos
14.
Ciênc. rural ; Ciênc. rural (Online);37(3): 789-795, jun. 2007. graf
Artigo em Português | LILACS | ID: lil-450271

RESUMO

As larvas da Dermatobia hominis provocam lesões ulcerativas, danificando o tecido subcutâneo e conseqüentemente a pele do hospedeiro. O couro é o subproduto que sofre maior depreciação, o que, muitas vezes, impossibilita seu aproveitamento na industrialização. Atualmente o controle químico é utilizado como forma de combate à dermatobiose, entretanto, leva ao acúmulo de substâncias tóxicas nos animais e no ambiente. No presente trabalho, foram avaliadas as respostas imune-humoral e celular de bovinos imunizados com extrato antigênico preparado com larvas de D. hominis. Três grupos de oito bezerras da raça Nelore com 10 meses de idade foram usados, tendo o primeiro grupo (A) recebido aplicação de extrato imunogênico de larvas de D. hominis, com intervalos de quinze dias; o grupo (B), utilizado como controle, não recebendo nenhum tipo de tratamento; e o grupo (C) recebendo o tratamento ectoparasiticida à base de Dichlorvos associado a Cypermetrina. Neste mesmo período, foram avaliados o leucograma e os níveis de IgG contra D. hominis pela técnica de enzimoimunoensaio-ELISA. Quanto à avaliação da imunidade humoral, verificou-se que os animais do grupo A apresentaram maior produção de IgG contra D. hominis, com níveis máximos de anticorpos circulantes aos 45 dias após a primeira imunização. Estes animais também apresentaram maior produção de neutrófilos, eosinófilos e monócitos que os dos grupos B e C. O número de nódulos de larvas encontrado nos animais do grupo C foi 148,3 por cento maior que nos animais dos grupos A e B. A comprovação da resposta imune celular e humoral, parcialmente caracterizadas, bem como a redução do número de nódulos, são indicadores que a imunização contra D. hominis foi parcialmente protetora para os bovinos imunizados.


Dermatobia hominis larvae cause ulcerative lesions and damage to subcutaneous tissue and skin of the host. Leather is the subproduct which undergoes major depreciation, making it difficult to industrial use. Nowadays, the chemical control is utilized against dermatobiosis, therefore it leads to rising toxic chemicals in the animals and environment. The immunological challenge with D. hominis larval extract may represent an important altervative for this parasitosis control. Humoral and cellular immune responses were tested in bovine using an antigenic extract prepared with D. hominis larvae. Three groups of 10 months old Nelore females were used. The first group (A) received immunogenic larval extract of D. hominis with fifteen-days interval between injections; the group (B) was the control and has not received any sort of treatment; and the group (C) received an ectoparasitecide treatment based on Dichlorvos associated to Cypermetrina. Aditionally, leucogram and levels of IgG against D. hominis by immunoassay technique were evaluated. As for the humoral immunity, animals from group A presented higher IgG production against D. hominis with maximum levels of circulating antibodies at the 45th day after the first injection. These animals also showed higher production of neutrophils, eosinophils and monocytes than those from groups B and C. The number of D. hominis larvae nodules observed in animals from the group C was 148.3 percent larger than those from group A and B. The evidence concerning both cellular and humoral immune responses as well as the reduction on nodules number are an indication that the immunization against D. hominis was partially protective for the immunized bovines.

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