RESUMO
BACKGROUND: T-cell proliferation is a standard method to evaluate cellular immune responses against intracellular infectious agents. The present study was undertaken to look for expression of an early activation marker (CD69) and proliferation using a nonradioactive method to evaluate cellular immune response against a salt-extractable antigen from Brucella melitensis 16M (RCM-BM) in patients suffering from brucellosis. METHODS: Expression of CD69 on membrane of CD4+ and CD8+ T-cells was determined by flow cytometry. Lymphoproliferation was determined by tritiated thymidine and 5-bromo-2'-deoxyuridine (BrdU) incorporation using liquid scintillation counter or flow cytometry, respectively, to evaluate DNA synthesis. RESULTS: Thirty healthy donors and 24 patients suffering from brucellosis were included in this study. In all cases, incubation with mitogen induced expression of CD69 and proliferation of both CD4+ and CD8+ T-cells. In contrast, only brucellosis patients responded with expression of CD69 and proliferation against RCM-BM antigen from Brucella melitensis (p < 0.001). CONCLUSIONS: Methods used in this study were useful to evaluate immune response against specific antigen or polyclonal stimulation. CD4+ and CD8+ T cells from patients became equally activated and proliferated in response to RCM-BM antigen. Our data suggest that both T-cell subpopulations play an important role in immune response against Brucella.
Assuntos
Antígenos CD/metabolismo , Antígenos de Diferenciação de Linfócitos T/metabolismo , Brucelose/imunologia , Ativação Linfocitária , Subpopulações de Linfócitos T/metabolismo , Linfócitos T/metabolismo , Adulto , Antígenos de Bactérias/imunologia , Antígenos de Bactérias/metabolismo , Antimetabólitos/metabolismo , Bromodesoxiuridina/metabolismo , Brucella melitensis/imunologia , Brucella melitensis/metabolismo , Brucelose/metabolismo , Feminino , Humanos , Lectinas Tipo C , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Subpopulações de Linfócitos T/imunologia , Linfócitos T/imunologiaRESUMO
Salt-extractable antigen from Brucella melitensis 16M (RCM-BM) was used to evaluate the immune response from acute and chronic patients suffering from Brucella infections (in Mexico); their responses were compared with those of healthy controls. As a readout we used upregulation of CD69 (a well-established early activation marker for lymphocytes), lymphocyte proliferation by 3[H]thymidine or 5-bromo-2-deoxyuridine (BrdU) incorporation measured by liquid scintillation or flow cytometry, respectively, and production of gamma interferon (IFN gamma). We compared the antigen-specific response with the response induced by phytohaemagglutinin (PHA) as a positive control. There was no difference between acute patients and the healthy controls in the percentages of CD3+, CD4+ or CD8+ lymphocytes. However, we found that chronic patients had a significant (P < 0.05) increase in the CD8+ T cells, in line with previous studies. Antigen-specific responses to RCM-BM showed a significant (P < 0.05) upregulation of CD69 in both CD4+ and CD8+ T lymphocytes in acute brucellosis patients and in CD8+ T lymphocytes in chronic patients, indicating that both populations became activated by this antigen preparation. Moreover, lymphocyte proliferation from both acute and chronic patients in response to RCM-BM was highly significant (P < 0.001) when compared with healthy controls. However, there were no apparent differences between acute and chronic patients. Although the incorporation of BrdU showed similar results it provided additional information, since we demonstrated that both CD4+ and CD8+ T lymphocytes from acute and chronic patients proliferated equally well in response to RCM-BM. Similar results were observed with intracellular IFN gamma determination. As a whole, our data suggest an important role for both CD4+ and CD8+ T lymphocytes in Brucella infection in humans. As has been reported in mice, it is feasible that activated CD8+ T cells participate in protection against Brucella in humans through cytotoxicity or/and by the production of factors such as interferon and granulysin. The role of these cells should be carefully analysed to understand better their participation in human infection by Brucella.
Assuntos
Brucelose/imunologia , Linfócitos T CD4-Positivos/imunologia , Linfócitos T CD8-Positivos/imunologia , Ativação Linfocitária , Doença Aguda , Adulto , Antígenos de Bactérias/imunologia , Antígenos CD/imunologia , Antígenos de Diferenciação de Linfócitos T/imunologia , Brucella melitensis/imunologia , Antígenos CD4/imunologia , Antígenos CD8/imunologia , Doença Crônica , Humanos , Interferon gama/análise , Lectinas Tipo C , Subpopulações de Linfócitos T/imunologia , Regulação para CimaRESUMO
Objetivo: Conocer el tipo de patología ocular que se presenta en pacientes seropositivos a VIH en cada estadio comprendido dentro de la clasificación del CDC. Material y métodos: Se estudiaron pacientes con certeza diagnóstica de seropositividad a VIH, evaluados en estudio longitudinal mediante exploración oftalmológica para determinar patología. Resultados: 22 pacientes (78.5 por ciento) presentaron alteraciones oculares, de los cuales más de la mitad se ubicaron en etapa C3, con conteo CD4 inferior a 200/mm 3 . La retinopatía por VIH se presentó en 25 por ciento de los casos, con cuentas CD4 muy variables. Las infecciones intraoculares oportunistas se presentaron en 3 pacientes con conteo CD4 inferior a 200/mm 3 , de los cuales dos fallecieron. Conclusiones: El riesgo de presentación de alteraciones oculares y la gravedad de éstas está en relación inversa al número de linfocitos CD4.
Assuntos
Humanos , Masculino , Adulto , Feminino , Pessoa de Meia-Idade , Linfócitos , HIV , Imunoadesinas CD4 , Oftalmopatias , Coriorretinite , Retinite por CitomegalovirusRESUMO
Antecedentes: éste es el primer estudio realizado en el Hospital Juárez de México que determina la distribución de pacientes con SIDA, los factores socioculturales, las enfermedades relacionadas, su tratamiento y evolución, así como la mortalidad, tomando en cuenta la clasificación de CAPS, CD4 y Karnovsky. Material y métodos: se revisaron 305 expedientes de enero de 1991 a diciembre de 1996. La distribución por sexo fue de 89.27 por ciento de pacientes masculinos y 10 a 62 por ciento de pacientes femeninos, con preponderancia de la población económicamente activa. El nivel económico bajo representó 65.74 por ciento y se relacionó con escolaridad baja y mala alimentación. Los pacientes fueron originarios, principalmente, de la Ciudad de México (72.44 por ciento). En 46.06 por ciento de los casos la adquisición del virus de la inmunodeficiencia fue secundaria a una conducta heterosexual. Resultados: la mortalidad global fue de 39.4 por ciento; en el estadio I de 4.54 por ciento, en el II de 27.77 por ciento, en el III de 54.09 por ciento y en el IV de 80 por ciento. Con respecto a la clasificación por CD4, las cifras de mortalidad fueron: estadio I 18 por ciento, estadio II 30 por ciento y estadio III 50 por ciento. En la escala de Karnovsky, la mortalidad fue de 100 por ciento en la puntuación 10. El tratamiento se dividió en dos categorías de medicamentos: 1) antivirales, citoquinas, inmunorreguladores y otros; y 2) citoquinas e inmunorreguladores (1.18 por ciento ambos). La utilización de antivirales aumentó de 18.6 por ciento en 1991 a 64.7 por ciento en 1996. Conclusiones: los sistemas de clasificación CAPS y CD4 así como el de Karnovsky son evidentemente útiles en el pronóstico de mortalidad. La evolución del tratamiento en los pacientes con SIDA ha sido importante en dos categorías: antivirales y antiinfecciosos.