RESUMO
Fumonisin B1 is a mycotoxin produced by Fusarium verticillioides and Fusarium proliferatum, and it is found chiefly in corn and corn-based products. Since its discovery fumonisin B1 has been associated with diseases in animals, such as leukoencephalomalacia in horses, and pulmonary edema in swine. On humans, the ingestion of foods with fumonisin B1 is associated with esophageal cancer. Aflatoxin M1 is the principal hydroxylated metabolite occurring in milk from animals which have consumed aflatoxin B1-contaminated feeds. It is also present in milk from nursing mothers who consumed foodstuffs with aflatoxin B1. In this study the effect of gamma-irradiation (60Co) was verified, in doses ranged from 0 to 20 kGy, in order to inactivate fumonisin B1 in corn flour and aflatoxin M1 in fluid and powdered milk. Fumonisin B1 was extracted from the samples with methanol:water (3:1). The extract was purified through immunoaffinity column followed by separation and quantification by means of high-performance liquid chromatography (HPLC) with o-phthaldialdehyde (OPA). For determining aflatoxin M1 the purification was done through immunoaffinity column followed by separation and quantification by means of HPLC with fluorescence detector. Gamma irradiation (60Co) at doses from 3 to 20 kGy reduced the fumonisin B1 content in a range of 11.2 % to 55.5 %. Gamma irradiation (60Co) at 20 kGy dose r
Fumonisina B1 é a micotoxina produzida por Fusarium verticillioides e Fusarium proliferatum e é encontrada principalmente em milho e produtos a base de milho. Desde sua descoberta a fumonisina B1 tem sido associada a doenças em animais, como leucoencefalomalácia em cavalos e edema pulmonar em suínos. Em humanos, o consumo de alimentos com fumonisina B1 tem sido associado com câncer esofágico. A aflatoxina M1 é o principal metabólito hidroxilado encontrado no leite de animais que consumiram rações contaminadas com aflatoxina B1, bem como no leite de lactantes que consumiram alimentos com esta substância. Neste estudo foi verificado o efeito da irradiação gama (60Co), em doses que variaram de 0 a 20 kGy, quanto à capacidade de inativar fumonisina B1 em farinha de milho e aflatoxina M1 em leite fluido e em pó. A fumonisina B1 foi extraída das amostras com metanol:água (8:2). O extrato foi purificado em coluna de imunoafinidade, seguido de separação e quantificação por meio de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detector de fluorescência, após derivatização com ortoftaldialdeído. Para efetuar a determinação da aflatoxina M1, a amostra foi purificada em coluna de imunoafinidade e a separação e a quantificação por meio de CLAE com detector de fluorescência. Foi observada uma redução da concentração da fumonisina B1 na faixa de 11,2 % a 55,5% em doses de 3 a 20 kGy de
RESUMO
Fumonisin B1 is a mycotoxin produced by Fusarium verticillioides and Fusarium proliferatum, and it is found chiefly in corn and corn-based products. Since its discovery fumonisin B1 has been associated with diseases in animals, such as leukoencephalomalacia in horses, and pulmonary edema in swine. On humans, the ingestion of foods with fumonisin B1 is associated with esophageal cancer. Aflatoxin M1 is the principal hydroxylated metabolite occurring in milk from animals which have consumed aflatoxin B1-contaminated feeds. It is also present in milk from nursing mothers who consumed foodstuffs with aflatoxin B1. In this study the effect of gamma-irradiation (60Co) was verified, in doses ranged from 0 to 20 kGy, in order to inactivate fumonisin B1 in corn flour and aflatoxin M1 in fluid and powdered milk. Fumonisin B1 was extracted from the samples with methanol:water (3:1). The extract was purified through immunoaffinity column followed by separation and quantification by means of high-performance liquid chromatography (HPLC) with o-phthaldialdehyde (OPA). For determining aflatoxin M1 the purification was done through immunoaffinity column followed by separation and quantification by means of HPLC with fluorescence detector. Gamma irradiation (60Co) at doses from 3 to 20 kGy reduced the fumonisin B1 content in a range of 11.2 % to 55.5 %. Gamma irradiation (60Co) at 20 kGy dose r
Fumonisina B1 é a micotoxina produzida por Fusarium verticillioides e Fusarium proliferatum e é encontrada principalmente em milho e produtos a base de milho. Desde sua descoberta a fumonisina B1 tem sido associada a doenças em animais, como leucoencefalomalácia em cavalos e edema pulmonar em suínos. Em humanos, o consumo de alimentos com fumonisina B1 tem sido associado com câncer esofágico. A aflatoxina M1 é o principal metabólito hidroxilado encontrado no leite de animais que consumiram rações contaminadas com aflatoxina B1, bem como no leite de lactantes que consumiram alimentos com esta substância. Neste estudo foi verificado o efeito da irradiação gama (60Co), em doses que variaram de 0 a 20 kGy, quanto à capacidade de inativar fumonisina B1 em farinha de milho e aflatoxina M1 em leite fluido e em pó. A fumonisina B1 foi extraída das amostras com metanol:água (8:2). O extrato foi purificado em coluna de imunoafinidade, seguido de separação e quantificação por meio de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detector de fluorescência, após derivatização com ortoftaldialdeído. Para efetuar a determinação da aflatoxina M1, a amostra foi purificada em coluna de imunoafinidade e a separação e a quantificação por meio de CLAE com detector de fluorescência. Foi observada uma redução da concentração da fumonisina B1 na faixa de 11,2 % a 55,5% em doses de 3 a 20 kGy de
RESUMO
The effect of gamma-irradiation in doses ranging from 0 to 30 kGy was verified in order to inactivate aflatoxin B1 in peanuts sample. Peanut samples of Tatu Vermelho cultivar 2001/2002 and 2002/2003 crops,cultivated in São Paulo state, naturally or experimentally contaminated with aflatoxin B1 at varied contents, were investigated. Aflatoxin B1 was extracted with methanol:4% potassium chloride moisture (270 + 30, v/ v) followed by clarification with 10% cupric sulfate and partition with chloroform. Aflatoxin quantification was done by means of thin layer chromatography, measuring the samples and the standard fluorescent areas on densitometer at 366 nm. Gamma-irradiation (60Co) at doses of 1.5 and 10 kGy reduced the aflatoxin B1 contents in around 20% in samples experimentally contaminated with 55.3, 105.8, and 159.3 µg.kg-1. In naturally contaminated peanut samples containing 84.0 µg.kg-1 and 258.3 µg.kg-1 of aflatoxin B1 ,and treated with gamma-irradiation (60Co) at 5 and 10 kGy doses, no reduction of aflatoxin B1 levels was evidenced. On the other hand, samples naturally contaminated with aflatoxin B1 (86.0 and 248.0 µg.kg-1) and irradiated with 15, 20, 25 and 30 kGy doses, showed lower values of aflatoxin B1, ranging from 49 to 72%. In conclusion, no total inactivation of aflatoxin B1 occurs by means gamma-irradiation (60Co) in natural conditions, even at 30 kGy dose.
Foi verificado o efeito da irradiação gama (60Co) em doses que variaram de 0 a 30 kGy, na destruição de diferentes níveis aflatoxina B1 em amostras de amendoim, cultivar Tatu Vermelho, artificialmente e naturalmente contaminadas, procedentes de São Paulo, safras 2001/2002 e 2002/2003. A aflatoxina B1 foi extraída em mistura de metanol e KCl 4% (270 + 30, v/v), seguido de clarificação com CuSO4 10% e partição com clorofórmio. A quantificação foi feita por cromatografia em camada delgada, medindo-se a área das fluorescências de amostras e padrões em densitômetro a 366 nm. Doses de irradiação gama (60Co) de 1, 5 e 10 kGy reduziram em cerca de 20 % os níveis de aflatoxina B1 em amostras artificialmente contaminadas com 55,3, 105,8 e 159,3 µg.kg-1. As amostras naturalmente contaminadas com aflatoxina B1 (84,0 e 258,3 µg. kg-1) e tratadas com irradiação gama (60Co) em doses de 5 e 10 kGy, não apresentaram redução do teor de aflatoxina B1. Entretanto, as amostras naturalmente contaminadas com aflatoxina B1 (86,0 e 248,0 µg.kg-1) e irradiadas nas doses de 15, 20, 25 e 30 kGy apresentaram valores menores de aflatoxina B1,com faixa de redução que variou de 49 a 72%. Desta forma, pode-se concluir que a irradiação gama (60Co) não é capaz de destruir totalmente a aflatoxina B1 em condições naturais, mesmo em doses de até 30 kGy.
RESUMO
Different doses of gamma-irradiation effect was verified for inactivating aflatoxigenic strain, and on aflatoxin B1 production by Aspergillus flavus IMI 190443 in peanut, Tatu Vermelho variety, 2001/2002 and 2002/2003 crops. Two tests were performed in all samples: in one of them they were firstly irradiated before being inoculated, and in another assay peanuts were inoculated with aflatoxigenic strain before being irradiated. After irradiation, Aspergillus flavus IMI 190443 destruction was observed by the percentage of fungi infection by means of direct plating technique. Aflatoxin B1 was extracted with a mixture of methanol and 4% potassium chloride (270 + 30, v/v), followed by clarification with 10% cupric sulfate and partition with chloroform. Quantification was done by thin layer chromatography, measuring the samples fluorescent areas and of standard samples in densitometer (366 nm). Previously irradiated peanuts inoculated with aflatoxigenic strain, induced the production of high levels of aflatoxin B1. The data of the present study showed that 25 and 30 kGy gamma irradiation doses were necessary to get a complete inactivation of Aspergillus flavus IMI 190443.
Foi verificado o efeito da irradiação gama (60Co), em diferentes doses, na destruição de cepa aflatoxigênica e na produção de aflatoxina B1 por Aspergillus flavus IMI 190443, em amendoim, cultivar Tatu Vermelho, safras 2001/2002 e 2002/2003. Foram feitos dois testes nas amostras, um deles envolvendo irradiação e posterior inoculação e outro, com inoculação antes da irradiação. A destruição do Aspergillus flavus IMI 190443, após irradiação, foi medida pela porcentagem de infecção fúngica, por meio da técnica do plaqueamento direto. A aflatoxina B1 foi extraída em mistura de metanol e KCl 4% (270 + 30, v/v), seguido de clarificação com CuSO4 10% e partição em clorofórmio. A quantificação foi executada por cromatografia em camada delgada, medindo-se a área das fluorescências de amostras e padrões em densitômetro a 366 nm. A inoculação de amendoim previamente irradiado, com cepa aflatoxigênica, provocou a formação de teores elevados de aflatoxina B1. Doses de irradiação gama de 25 e 30 kGy foram necessárias para a completa inativação de esporos.