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Introducción. El trasplante es una de las alternativas para el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas, y está encaminado hacia el reemplazo de las células perdidas durante el desarrollo de la enfermedad. Una fuente celular prometedora para el desarrollo de los trasplantes podrían ser las células mononucleadas de la médula ósea. Objetivo. Estudiar la capacidad de las células mononucleadas de la médula ósea de sobrevivir al trasplante y buscar un método que permita el seguimiento de estas células in vivo una vez implantadas. Materiales y métodos. Las células mononucleadas fueron extraídas del fémur de ratas mediante un gradiente de Ficoll-Hypaque. Las células objeto de estudio fueron modificadas genéticamente con un adenovirus que expresa la PFV o marcadas con el reactivo de Hoechst. Las células marcadas se implantaron en el estriado de ratas lesionadas con ácido quinolínico. Resultados. La viabilidad de las células modificadas genéticamente fue baja, mientras que la de las células marcadas con el reactivo de Hoechst fue superior al 90 por ciento. Las células implantadas sobrevivieron al trasplante al menos un mes y se dispersaron desde el sitio de entrada hacia el cuerpo calloso y la corteza. Conclusiones. Consideramos más ventajoso el uso del reactivo de Hoechst para el seguimiento de estas células in vivo. Las células mononucleadas tienen características que les permiten formar parte de las fuentes celulares candidatas para el tratamiento de las enfermedades neurodegenerativas(AU)

Introduction: Transplant is one of the alternatives available for the treatment of neurodegenerative diseases aimed at replacing the cells lost during the course of the disease. One promising source of cells for the development of transplants could be the mononucleate cells from bone marrow. AIMS. The purpose of this study was to study the capacity of bone marrow mononucleate cells to survive the transplant process, and to search for a method that enables tracking of these cells in vivo once they have been implanted. MATERIALS AND METHODS: Bone marrow mononucleate cells were extracted from the femur of rats by means of a Ficoll-Hypaque gradient. The cells under study were modified genetically with an adenovirus that expresses the PFV or which are marked with Hoechst dye. The marked cells were implanted in the striatum of rats with lesions caused by quinolinic acid. RESULTS: The viability of the genetically modified cells was low, whereas that of the cells marked with Hoechst dye was above 90percent. The implanted cells survived the transplant at least a month and dispersed away from the site of entry towards the corpus callosum and cortex. CONCLUSIONS: We consider that the use of Hoechst dye offers more advantages for tracking these cells in vivo. Mononucleate cells have a number of characteristics that allow them to be included as candidate sources of cells for the treatment of neurodegenerative diseases

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El uso de tejido fetal fresco en el neurotrasplante presenta considerables dificultades logìsticas que limitan su aplicabilidad clìnica . Este aspecto podrìa solucionarse con el desarrollo de procedimientos optimos de almacenamiento del tejido que no afecten a la viabilidad y la supervivencia dopaminèrgica in vivo. Es objetivo del trabajao determinar si la hibernaciòn durante siete dìas influye sobre la supervivencia del tejido mesencefàlico in vitro y comparar el tejido hibernado con el fresco...(AU)

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Most of the culture system for in vitro maintenance and neural differentiation of marrow stromal cells (MSCs) use synthetic media supplemented with 10 or 20 percent fetal bovine serum (FBS). Serum, however, is comprised of unknown quantities of undefined substances which could interfere the effect of exogenous substances on neural differentiation of MSCs, AIM. Here we describe survival of MSCs cultured in culture conditions where serum was reduced at 0,5 and 1 percent using Bottenstein and Sato's N2 formula (1979) and poly-L-lysine (PLL)-coated substrate...(AU)

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Introducción. El problema ético moral que supone el uso de embriones humanos como fuente de células en el neurotrasplante encierra serias contradicciones en cuanto a qué tejido emplear, de qué fuente, qué método de obtención usar y la búsqueda de fuentes alternativas de tejidos. Desarrollo. En este trabajo se presenta un breve recuento de los puntos éticos y médicos involucrados en la obtención, protección del sujeto donante, preparación, seguridad y eficacia del tejido nervioso fetal humano en el contexto del trasplante neural. La ética del trasplante nervioso fetal humano es muy complejo, ya que representa una encrucijada entre varios puntos de la ética médica, los cuales, en su propio derecho, son muy debatidos, tales como el aborto, el trasplante y la integración en la función cerebral individual. Se analizan desde una perspectiva bioética aspectos como el establecimiento de la fuente óptima de optención de tejido nervioso para trasplante, la seguridad y eficacia del mismo, el consentimiento informado para la donación del tejido, la disponibilidad y el almacenamiento, entre otros. Conclusiones. Todo programa que proponga el uso de tejido fetal con propósito de trasplante debe ajustarse estricta y verdaderamente a las regulaciones éticas nacionales y locales, antes de iniciar los ensayos clínicos(AU)

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Introducción. Las técnicas de injerto intracerebral se han convertido en poderosas herramientas usadas para el estudio de los mecanismos de regeneración y plasticidad que tienen lugar en el sistema nervioso central (SNC). Las suspensiones de células neurales fetales se han empleado exitosamente como injertos intracerebrales en sitios profundos del cerebro. Objetivo. El presente trabajo tiene como objetivo la descripción de la metodología utilizada en nuestro grupo para la obtención y preparación de las suspensiones celulares de varias zonas del cerebro de embrión de rata (mesencéfalo, estriado y septum) empleadas para los trasplantes experimentales en modelos animales. Material y métodos. Se describen con detalle los pasos involucrados en la preparación del tejido en forma de suspensión celular. Estos pasos incluyen la obtención del tejido en el estadío óptimo de desarrollo, disección del tejido donante, tratamiento enzimático y la disociación mecánica hasta la obtención de la suspensión de células. Los recuentos de viabilidad mostraron un alto porcentaje (por encima de 95 por ciento) de células viables en las suspensiones obtenidas por esta vía. La viabilidad celular está afectada por diferentes factores y constituye un prerrequisito para la buena sobrevivencia del injerto. Conclusión. La metodología descrita permite la obtención de suspensiones de células neurales fetales óptimas para estudios tanto in vitro como de traplantes experimentales (AU)

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Introducción. Las técnicas de injerto intracerebral se han convertido en poderosas herramientas usadas para el estudio de los mecanismos de regeneración y plasticidad que tienen lugar en el sistema nervioso central (SNC). Las suspensiones de células neurales fetales se han empleado exitosamente como injertos intracerebrales en sitios profundos del cerebro. Objetivo. El presente trabajo tiene como objetivo la descripción de la metodología utilizada en nuestro grupo para la obtención y preparación de las suspensiones celulares de varias zonas del cerebro de embrión de rata (mesencéfalo, estriado y septum) empleadas para los trasplantes experimentales en modelos animales. Material y métodos. Se describen con detalle los pasos involucrados en la preparación del tejido en forma de suspensión celular. Estos pasos incluyen la obtención del tejido en el estadío óptimo de desarrollo, disección del tejido donante, tratamiento enzimático y la disociación mecánica hasta la obtención de la suspensión de células. Los recuentos de viabilidad mostraron un alto porcentaje (por encima de 95 por ciento) de células viables en las suspensiones obtenidas por esta vía. La viabilidad celular está afectada por diferentes factores y constituye un prerrequisito para la buena sobrevivencia del injerto. Conclusión. La metodología descrita permite la obtención de suspensiones de células neurales fetales óptimas para estudios tanto in vitro como de traplantes experimentales (AU)

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Introducción. Las técnicas de injerto intracerebral se han convertido en poderosas herramientas usadas para el estudio de los mecanismos de regeneración y plasticidad que tienen lugar en el sistema nervioso central (SNC). Las suspensiones de células neurales fetales se han empleado exitosamente como injertos intracerebrales en sitios profundos del cerebro. Objetivo. El presente trabajo tiene como objetivo la descripción de la metodología utilizada en nuestro grupo para la obstenció y preparación de las suspensiones celulares de varias zonas del cerebro de embrión de rata (mesencéfalo, estriado y septum) empleadas para los trasplantes experimentales en modelos animales. Material y métodos. Se describen con detalle los pasos involucrados en la preparación del tejido en forma de suspensión celular. Estos pasos incluyen la obtención del tejido en el estadío óptimo de desarrollo, disección del tejido donante, tratamiento enzimático y la disociación mecánica hasta la obtención de la suspensión de células. Los recuentos de viabilidad mostraron un alto porcentaje (por encima de 95 por ciento) de células viables en las suspensiones obtenidas por esta vía. La viabilidad celular está afectada por diferentes factores y constituye un prerrequisito para la buena sobrevivencia del injerto. Conclusión. La metodología descrita permite la obtención de suspensiones de células neurales fetales óptimas para estudios tanto in vitro como de traplantes experimentales (AU)

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Introducción. Las técnicas de injerto intracerebral se han convertido en poderosas herramientas usadas para el estudio de los mecanismos de regeneración y plasticidad que tienen lugar en el sistema nervioso central (SNC). Las suspensiones de células neurales fetales se han empleado exitosamente como injertos intracerebrales en sitios profundos del cerebro. Objetivo. El presente trabajo tiene como objetivo la descripción de la metodología utilizada en nuestro grupo para la obstenció y preparación de las suspensiones celulares de varias zonas del cerebro de embrión de rata (mesencéfalo, estriado y septum) empleadas para los trasplantes experimentales en modelos animales. Material y métodos. Se describen con detalle los pasos involucrados en la preparación del tejido en forma de suspensión celular. Estos pasos incluyen la obtención del tejido en el estadío óptimo de desarrollo, disección del tejido donante, tratamiento enzimático y la disociación mecánica hasta la obtención de la suspensión de células. Los recuentos de viabilidad mostraron un alto porcentaje (por encima de 95 por ciento) de células viables en las suspensiones obtenidas por esta vía. La viabilidad celular está afectada por diferentes factores y constituye un prerrequisito para la buena sobrevivencia del injerto. Conclusión. La metodología descrita permite la obtención de suspensiones de células neurales fetales óptimas para estudios tanto in vitro como de traplantes experimentales

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