RESUMO

A fagoterapia é um método de controle de infecções conhecido há mais de cem anos, porém deixou-se de ser utilizada devido à praticidade do uso de antibióticos. No entanto, com o aumento mundial da resistência bacteriana, a fagoterapia ressurge como opção terapêutica, porém os padrões de seleção de amostras utilizados são empíricos. O presente artigo descreve o comportamento in vitro de 62 amostras de bacteriófagos líticos isolados de esgoto hospitalar humano usando uma amostra de Salmonella Enteritidis de origem avícola. No estudo, foram testados quatro perfis distintos comumente utilizados nas pesquisas com bacteriófagos e observou-se que há uma variância comportamental considerável em que atividade lítica, tamanho de halo em gel difusão e índice de proliferação são fatores independentes de virulência, porém amostras prolíferas apresentam maior espectro de atividade lítica.

This article analyzed, in vitro, the behavior of 62 bacteriophages samples lytic for Salmonella Enteritidis. The lytic potential was assessed by analyzing following parameters: proliferation, halo size in gel diffusion, superficial halo size and virulence degree. Proliferation degree of samples was determined by quantifying the amount of plaque forming unit (PFU) using gel diffusion technique. To determine UFP, minor dilution with measurable halos was considered. Lytic spectrum in the gel column was measured with an acrylic precision ruler. For to superficial halo size and virulence degree, the "spot-on-lawn" technique was employed. We observed that lytic activity spectrum, halo size in gel diffusion and proliferation are factors independent of virulence, but prolific samples shown higher spectrum of lytic activity. Prolific samples that present a high degree of virulence demonstrate in vitro a good potential for medical application.

La fagoterapia es un método de control de la infección conocido por más de cien años, sin embargo, su uso se dejó de aplicar debido a la practicidad de los antibióticos. Con el aumento mundial de la resistencia bacteriana, la fagoterapia resurge como una opción terapéutica, pero los patrones de selección de muestras utilizadas son empíricas. En este trabajo, se describe el comportamiento in vitro de 62 muestras de los bacteriófagos líticos aislados de aguas residuales del hospital humano utilizando una muestra de Salmonella Enteritidis original de productos avícolas. En el estúdio, se probaron cuatro diferentes perfiles comúnmente utilizados en la investigación en bacteriófagos y se observó que existe una variación considerable en donde el espectro de comportamiento de actividad lítica, tamaño de halo en gel difusión y el índice de proliferación fueron factores independientes de la virulencia, pero las muestras prolíficos tienen un mayor espectro de acción.

Assuntos

RESUMO

El presente estudio evaluó la presencia de bacteriófagos líticos que infectan Salmonella Enteritidis (SE) en granjas y rastros localizados en la región noroeste del Estado de São Paulo. Se analizaron 102 muestras obtenidas en granjas de matrices vacunadas, de pollo de carne con historia de positividad a salmonella y rastros. No fue posible identificar la presencia de bacteriófagos líticos de SE en ninguna de las muestras. Se infiere que la ausencia de bacteriófagos sea consecuencia de la vacunación contra SE y las buenas prácticas de bioseguridad en el campo.

This study evaluated the presence of lytic bacteriophagues of Salmonella Enteritidis (SE) in farms and slaughterhouses in São Paulo State northwest region. One hundred two samples from vaccinated breeder hens, salmonella-positive poultry, and slaughterhouses were assessed. No lytic bacteriophagues of SE were detected in the samples. We infer that the absence of bacteriophagues may be caused by vaccination against SE and good biosecurity practices in field.

Avaliou-se a presença de bacteriófagos líticos para Salmonella Enteritis (SE) em granjas e abatedouros no noroeste do Estado de São Paulo. Analisou-se um total de 102 amostras obtidas de granjas de matrizes vacinadas contra SE, frango de corte com histórico de isolamento de Salmonella spp., e também de abatedouros. Detectou-se a ausência de bacteriófagos líticos para SE em 100% da amostras analisadas. Os achados podem estar relacionados a práticas de biosseguridade no controle de SE, inclusive o uso de vacinação contra SE em matrizes, reduzindo o agente a níveis não detectáveis por este sistema.

RESUMO

A pesquisa de Salmonella em carcaças de aves tem mostrado resultados discrepantes, dependendo se as amostras foram colhidas ainda na indústria, imediatamente após o chiller ou no comércio varejista, quando se encontram submetidas à refrigeração por vários dias. Técnicas mais sensíveis, tais como a Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR), podem fornecer dados importantes sobre o efeito do resfriamento sobre as células do patógeno, comparando seus resultados com os da metodologia microbiológica convencional (MC). Foram colhidas 130 carcaças de frango, sendo que 65 foram obtidas ainda na indústria (pós-chiller) e imediatamente analisadas e 65 carcaças embaladas e estocadas a 5°C por 72 horas (simulando o varejo), sendo então realizada a pesquisa do patógeno por ambas as técnicas. Do total analisado (130 amostras), a PCR foi capaz de detectar 58 positivas (44,6 por cento) e a MC 50 (38,5 por cento). Ambas as técnicas detectaram um número superior de amostras positivas para Salmonella em carcaças colhidas ainda na indústria, quando comparadas às do varejo. A PCR detectou 50,77 por cento de positividade em amostras da indústria e 38,46 por cento em amostras do varejo. Para a MC, esses valores foram de 46,15 por cento (indústria) e 30,77 por cento (varejo). Concluímos que o resfriamento das carcaças a 5°C por 72 horas pode ser um fator limitante na detecção de Salmonella quando a pesquisa do patógeno se faz pela metodologia microbiológica convencional.

The survey of Salmonella in poultry carcasses has shown conflicting results, depending on whether the samples were taken yet in the factory, immediately after the chiller or retail market, when they are subjected to refrigeration for several days. More sensitive techniques such as Polymerase Chain Reaction (PCR) can provide important data on the effect of cooling on the cells of the pathogen by comparing their results with those of conventional microbiological methods (CM). It was collected 130 chicken carcasses, wich 65 were obtained yet in the industry (post-chiller) and immediately analyzed and 65 carcasses packaged and stored at 5°C for 72 hours (simulating retail), and then research of the pathogen was performed by both techniques. Of the analyzed total (130 samples), PCR was able to detect 58 positive (44.6 percent) and CM, 50 (38.5 percent). Both techniques detected a higher number of samples positive for Salmonella on carcasses collected yet in the factory when compared to those of retail. The PCR detected 50.77 percent of positive industry samples and 38.46 percent of retail samples. CM for these values was 46.15 percent (factory) and 30.77 percent (retail). We conclude that the cooling of the carcasses for at 5°C for 72 hours can be a limiting factor in the detection of Salmonella when the pathogen research is done by conventional microbiological methods.