RESUMO
It was evaluated the different methodologies for glomerular enumeration described in the literature in a quantitative, double-blind study on the number of glomeruli present in kidney biopsy specimens obtained using a Tru-cut-type biopsy needle. Eighteen samples were taken (n=18) from various regions of canine kidneys harvested immediately after euthanasia. Sample collection was carried out using Tru-cut-type, semi-automated, 16 gauge needles. Reading and evaluation of the specimens were performed independently by four researchers by means of eye loupe inspection, light microscopy, light microscopy with a reduced condenser aperture, and dissection microscopy. Samples were also subjected to histopathological evaluation for comparison purposes. There was no inter-researcher variation for any of the tested methods. The glomerular counts obtained using light microscopy with reduced condenser aperture were similar to those reported in the histopathological evaluation (P=0.44);whereas, the other glomerular enumeration methods yielded significantly lower counts when compared to the histopathological analysis (eye loupe inspection: P<0.01; conventional light microscopy: P=0.02; dissection microscopy: P<0.01).Light microscope with lowering of the condenser lens delivers better results than conventional light microscopy and eye loupe inspection. Results obtained using dissection microscopy and eye loupe inspection did not correlate well with those provided by histopathological evaluation; consequently, these two methods should be avoided.(AU)
Avaliou-se as diferentes metodologias de quantificação glomerular descritas na literatura em um estudo quantitativo, duplo-cego, sobre o número de glomérulos presentes em amostras de biópsias renais obtidas com agulha de biópsia tipo Tru-cut. Dezoito amostras foram coletadas (n=18) de várias regiões de rins caninos colhidos imediatamente após a eutanásia. A coleta das amostras foi realizada com agulhas semi-automáticas de calibre 16, tipo Tru-cut. A leitura e avaliação das amostras foram realizadas de forma independente por quatro pesquisadores por meio de inspeção visual, microscopia de luz, microscopia de luz com redução da lente condensadora e microscopia de dissecção. As amostras também foram submetidas à avaliação histopatológica para fins de comparação e variação do pesquisador para qualquer um dos métodos testados. As contagens glomerulares obtidas por microscopia de luz com redução da lente condensadora foram semelhantes àquelas encontradas na avaliação histopatológica (P=0.44), enquanto que os outros métodos de quantificação glomerular produziram contagens significativamente mais baixas a análise histopatológica (inspeção da lupa dos olhos: P<0.01; microscopia de luz convencional: P=0.02; microscopia dissecação: P<0.01). Microscópio de luz com abaixamento da lente condensadora fornece melhores resultados do que microscopia de luz convencional e inspeção da lupa. As contagens obtidas usando microscopia de dissecção e inspeção de lupa de olho não se correlacionaram bem com aqueles fornecidos pela avaliação histopatológica; consequentemente, estes dois métodos devem ser evitados.(AU)
Assuntos
Animais , Cães , Glomerulonefrite/diagnóstico , Glomerulonefrite/veterinária , Glomérulos Renais , Microscopia/veterináriaRESUMO
ABSTRACT: It was evaluated the different methodologies for glomerular enumeration described in the literature in a quantitative, double-blind study on the number of glomeruli present in kidney biopsy specimens obtained using a Tru-cut-type biopsy needle. Eighteen samples were taken (n=18) from various regions of canine kidneys harvested immediately after euthanasia. Sample collection was carried out using Tru-cut-type, semi-automated, 16 gauge needles. Reading and evaluation of the specimens were performed independently by four researchers by means of eye loupe inspection, light microscopy, light microscopy with a reduced condenser aperture, and dissection microscopy. Samples were also subjected to histopathological evaluation for comparison purposes. There was no inter-researcher variation for any of the tested methods. The glomerular counts obtained using light microscopy with reduced condenser aperture were similar to those reported in the histopathological evaluation (P=0.44);whereas, the other glomerular enumeration methods yielded significantly lower counts when compared to the histopathological analysis (eye loupe inspection: P<0.01; conventional light microscopy: P=0.02; dissection microscopy: P<0.01).Light microscope with lowering of the condenser lens delivers better results than conventional light microscopy and eye loupe inspection. Results obtained using dissection microscopy and eye loupe inspection did not correlate well with those provided by histopathological evaluation; consequently, these two methods should be avoided.
RESUMO: Avaliou-se as diferentes metodologias de quantificação glomerular descritas na literatura em um estudo quantitativo, duplo-cego, sobre o número de glomérulos presentes em amostras de biópsias renais obtidas com agulha de biópsia tipo Tru-cut. Dezoito amostras foram coletadas (n=18) de várias regiões de rins caninos colhidos imediatamente após a eutanásia. A coleta das amostras foi realizada com agulhas semi-automáticas de calibre 16, tipo Tru-cut. A leitura e avaliação das amostras foram realizadas de forma independente por quatro pesquisadores por meio de inspeção visual, microscopia de luz, microscopia de luz com redução da lente condensadora e microscopia de dissecção. As amostras também foram submetidas à avaliação histopatológica para fins de comparação e variação do pesquisador para qualquer um dos métodos testados. As contagens glomerulares obtidas por microscopia de luz com redução da lente condensadora foram semelhantes àquelas encontradas na avaliação histopatológica (P=0.44), enquanto que os outros métodos de quantificação glomerular produziram contagens significativamente mais baixas a análise histopatológica (inspeção da lupa dos olhos: P<0.01; microscopia de luz convencional: P=0.02; microscopia dissecação: P<0.01). Microscópio de luz com abaixamento da lente condensadora fornece melhores resultados do que microscopia de luz convencional e inspeção da lupa. As contagens obtidas usando microscopia de dissecção e inspeção de lupa de olho não se correlacionaram bem com aqueles fornecidos pela avaliação histopatológica; consequentemente, estes dois métodos devem ser evitados.