RESUMO
Aedes aegypti (Linnaeus, 1762) is considered the most important mosquito vector species for several arboviruses (e.g., dengue, chikungunya, Zika) in Costa Rica. The primary strategy for the control and prevention of Aedes-borne diseases relies on insecticide-based vector control. However, the emergence of insecticide resistance in the mosquito populations presents a significant threat to these prevention actions. The characterization of the mechanisms driving the insecticide resistance in Ae. aegypti is vital for decision making in vector control programs. Therefore, we analyzed the voltage-gated sodium channel (VGSC) gene for the presence of the V1016I and F1534C kdr mutations in Ae. aegypti populations from Puntarenas and Limon provinces, Costa Rica. The CDC bottle bioassays showed that both Costa Rican Ae. aegypti populations were resistant to permethrin and deltamethrin. In the case of kdr genotyping, results revealed the co-occurrence of V1016I and F1534C mutations in permethrin and deltamethrin-resistant populations, as well as the fixation of the 1534C allele. A strong association between these mutations and permethrin and deltamethrin resistance was found in Puntarenas. Limon did not show this association; however, our results indicate that the Limon population analyzed is not under the same selective pressure as Puntarenas for the VGSC gene. Therefore, our findings make an urgent call to expand the knowledge about the insecticide resistance status and mechanisms in the Costa Rican populations of Ae. aegypti, which must be a priority to develop an effective resistance management plan.
Assuntos
Aedes/genética , Proteínas de Insetos/genética , Resistência a Inseticidas/genética , Inseticidas/farmacologia , Mosquitos Vetores/genética , Mutação , Canais de Sódio Disparados por Voltagem/genética , Aedes/efeitos dos fármacos , Animais , Costa Rica , Feminino , Proteínas de Insetos/metabolismo , Mosquitos Vetores/efeitos dos fármacos , Nitrilas/farmacologia , Permetrina/farmacologia , Fenótipo , Piretrinas/farmacologia , Canais de Sódio Disparados por Voltagem/metabolismoRESUMO
BACKGROUND: Malaria remains an important public health problem in Latin America, and the development of insecticide resistance in malaria vectors poses a major threat to malaria elimination efforts. Monitoring of insecticide susceptibility and the determination of the mechanisms involved in insecticide resistance are needed to effectively guide the deployment of appropriate vector control measures. Here, molecular assays have been developed to screen for mutations associated with insecticide resistance on the voltage-gated sodium channel (VGSC) and acetylcholinesterase-1 (Ace-1) genes in four malaria vectors from Latin America. METHODS: Degenerate primers were designed to amplify a partial fragment on the VGSC and Ace-1 genes. Wild-caught individuals for Anopheles albimanus (also historical samples and individuals from a laboratory strain), Anopheles darlingi, Anopheles vestitipennis and Anopheles pseudopunctipennis were used to optimize the PCR assays. All samples were sequenced to validate the PCR results and DNA alignments were constructed for each gene using the unique haplotypes observed. RESULTS: Primers designed successfully amplified the VGSC gene in An. albimanus, An. darlingi, An. vestitipennis and An. pseudopunctipennis, and the Ace-1 gene in both An. albimanus and An. darlingi. DNA sequencing revealed that compared with Anopheles gambiae, there were a total of 29, 28, 21 and 24 single nucleotide polymorphisms (SNPs) on the VGSC gene for An. albimanus (308 bp), An. darlingi (311 bp), An. pseudopunctipennis (263 bp) and An. vestitipennis (254 bp), respectively. On the 459 bp fragment of the Ace-1 gene, a total of 70 SNPs were detected in An. darlingi and 59 SNPs were detected in An. albimanus compared with An. gambiae. The SNPs detected on the VGSC gene were all synonymous. On the Ace-1 gene, non-synonymous substitutions were identified on three different codons. All species showed the homozygous wild-type kdr allele (coding for leucine) at codon 995 (formerly reported as codon 1014) on the VGSC gene, but one sample was heterozygous at codon 280 (formerly reported as codon 119) on the Ace-1 gene, coding for both the resistant (serine) and susceptible (glycine) amino acids. CONCLUSIONS: New molecular assays to amplify and screen the regions of the VGSC and Ace-1 genes associated with insecticide resistance are reported for An. albimanus, An. darlingi, An. vestitipennis, and An. pseudopunctipennis. The development of these PCR assays presents an important advance in the analysis of target-site resistance in malaria vectors in the Americas, and will further facilitate the characterization of insecticide resistance mechanisms in these species.
Assuntos
Acetilcolinesterase/análise , Anopheles/efeitos dos fármacos , Proteínas de Insetos/análise , Resistência a Inseticidas/genética , Mosquitos Vetores/efeitos dos fármacos , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Canais de Sódio Disparados por Voltagem/análise , Animais , Anopheles/genética , América Latina , Malária/transmissão , Mosquitos Vetores/genética , Mutação , Especificidade da EspécieRESUMO
La enfermedad de Mondor es una condición caracterizada por la presencia de tromboflebitis en varios segmentos corporales, fue descrita inicialmente por Henri Mondor en 1939 con descripciones de casos que afectaban la circulación venosa de la reja costal y las glándulas mamarias. Se alude a Braun-Falco en 1955 la primera mención de la trombosis superficial del pene, sin embargo, fue hasta 1958 cuando Helm y Hodge describieron el primer caso con compromiso urogenital masculine. Actualmente se cuenta con información limitada sobre la tromboflebitis superficial del pene (enfermedad peniana de Mondor), por lo tanto, el presente artículo describe el primer caso de tromboflebitis de la vena superficial del pene registrado en el Hospital Universitario Nacional de Colombia y expone una propuesta de abordaje terapéutico actual, basada en una revisión reciente de la literatura.
Superficial vein thrombosis was described by Henri Mondor in 1939. At the start of the experience, the disease affected the venous circulation of the thoracic wall and breasts; Helm and Hodge publicated the first report of penile Mondor's disease in 1958. Currently, there is very little clinical information about penile Mondor's disease. This article shown the first case report of penile Mondor's disease in Colombia and proposes a novel, as well as, current algortihm for management of this disease
Assuntos
Humanos , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Doenças do Pênis , Tromboflebite , Pênis , Parede TorácicaRESUMO
Con el objetivo de evaluar la participación del receptor nicotínico en el proceso de adsorción del virus de rabia a células de ganglio de la raíz dorsal de ratón adulto, éstas fueron prestadas con varios agonistas nicotínicos (Nicotina, Acetilcolina, Cistisina, Dimetil-fenil piperazinio, Carbacol y Lobelina) y posteriormente se infectaron con dos tipos de virus CVS, uno de ellos obtenido en células BHK (CVS-CHK) y el otro obtenido en cerebro de ratón (CVS-CR). Se realizó un proceso de inmunocitoquímica para la detección y el conteo de las células infectadas. La lobelina (10uM), el carbacol (1 uM) y la nicotina (1 uM,0.1 uM) disminuyeron los porcentajes de neuronas infectadas con el virus CVS-MB, pero ninguno de los agonistas probados disminuyó la infección en los cultivos tratados con CVS-BHK. El tratamiento con los agonistas no modificó las proporciones de infección en las células no neuronales del cultivo. Estos datos sugieren que el virus podría estar usando dos tipos de receptores para infectar neuronas y células no neuronales
Assuntos
Técnicas de Cultura de Células , Agonistas Nicotínicos , Vírus da RaivaRESUMO
Con el propósito de evaluar una técnica de avidina-peroxidasa biotinilada, se utilizó el conjugado antirrábico producido en el INS para la detección del virus de rabia en cortes gruesos de cerebros de ratón tratados con varios tipos de fijadores y con varias diluciones del conjugado. Los animales infectados experimentalmente fueron perfundidos vía intracardiaca con varios fijadores; los cerebros se recuperaron, se les hicieron cortes gruesos de 60 µm y se sometieron a la inmunodetección. Se encontró que en las diluciones normalmente usadas en fluorescencia se presentó un fuerte marcaje inespecífico sin mejorar la detección. En este trabajo, se presenta un protocolo fácil y rápido que pudiera ser útil para la observación de muestras sospechosas
Assuntos
Camundongos , Animais , Cérebro/enzimologia , Técnicas Imunoenzimáticas , Vírus da Raiva/isolamento & purificaçãoRESUMO
Con el objetivo de establecer una técnica de inmunocitoquímica por avidina-peroxidasa biotinilada para la detección de células infectas in vitro por el virus rábico, se usaron cultivos de ganglio de la raíz dorsal de ratón. En este trabajo se presentan los resultados del proceso de estandarización de la inmunoperoxidasa, en la que también se usa el conjugado antirrábico producido en el Instituto Nacional de Salud. Las diluciones de anticuerpo, que normalmente se usan en la inmunofluorescencia, muestran un excesivo ruido de fondo en la inmunoperoxidasa. Se discuten las posibles razones de este artefacto y se presenta un protocolo para la detección por inmunoperoxidasa de células de ganglio sensorial infectadas in vitro por virus de rabia