RESUMO
The objective of this study was to determine whether seeds of Brassica oleracea var. italica (i.e. broccoli, an edible plant) produce defensins that inhibit phytopathogenic fungi and pathogenic bacteria of clinical significance. Crude extracts obtained from broccoli seeds were fractioned by molecular exclusion techniques and analyzed by liquid chromatography-high-resolution mass spectrometry. Two peptides were identified, BraDef1 (10.68 kDa) and BraDef2 (9.9 kDa), which were categorized as Class I defensins based on (a) their primary structure, (b) the presence of four putative cysteine disulfide bridges, and (c) molecular modeling predictions. BraDef1 and BraDef2 show identities of, respectively, 98 and 71%, and 67 and 85%, with defensins from Brassica napus and Arabidopsis thaliana. BraDef (BraDef1 + BraDef2) disrupted membranes of Colletotrichum gloeosporioides and Alternaria alternata and also reduced hyphal growth of C. gloeosporioides by ~ 56% after 120 h of incubation. Pathogenic bacteria (Bacillus cereus 183, Listeria monocytogenes, Salmonella typhimurium, Pseudomonas aeruginosa, and Vibrio parahaemolitycus) were susceptible to BraDef, but probiotic bacteria such as Bifidobacterium animalis, Lactobacillus acidophilus, and Lactobacillus casei were not inhibited. To our knowledge, this is the first report of defensins present in seeds of B. oleracea var. italica (i.e. edible broccoli). Our findings suggest an applied value for BraDef1/BraDef2 in controlling phytopathogenic fungi and pathogenic bacteria of clinical significance.
Assuntos
Anti-Infecciosos/farmacologia , Brassica/química , Defensinas/farmacologia , Sequência de Aminoácidos , Anti-Infecciosos/química , Anti-Infecciosos/isolamento & purificação , Bactérias/efeitos dos fármacos , Cromatografia Líquida , Defensinas/química , Defensinas/isolamento & purificação , Fungos/efeitos dos fármacos , Espectrometria de Massas , Testes de Sensibilidade Microbiana , Modelos Moleculares , Extratos Vegetais/química , Sementes/químicaRESUMO
RESUMEN El ecocardiograma es una herramienta ampliamente utilizada y de elevado valor para el diagnóstico de endocarditis infecciosa (EI). En nuestro centro hospitalario se indica en forma rutinaria el ecocardiograma transesofágico (ETE) para valorar este diagnóstico y sólo en caso de contraindicación se limita la valoración al ecocardiograma transtorácico (ETT). Objetivo: individualizar criterios clínicos y microbiológicos que permitan identificar una población en la que el ETE aporte información diagnóstica útil, racionalizando su uso. Material y método: registro prospectivo de 116 pacientes referidos para diagnóstico de EI por medio de ETE por el médico tratante. Se comparó el resultado ecocardiográfico con el diagnóstico de cierre de la historia clínica y con el que resultó de la aplicación en los criterios de Duke. Se realizó análisis univariado y multivariado para detectar condiciones clínicas asociadas con el diagnóstico de EI. Resultados: se comprobaron 23 casos de EI como diagnóstico de cierre de la historia clínica, de los cuales 14 fueron EI definida (EID), ocho posibles (EIP) en ausencia de hemocultivos (HC) positivos y uno rechazada, que fue excluida del resto del análisis. El ETE fue positivo en 20 casos (17,2%), que coincidieron con 20 de los casos positivos por cierre de la historia (90,9%). Los dos casos no diagnosticados por ETE fueron diagnosticados por ETT, por lo que el ecocardiograma en conjunto fue positivo en 100% de las EID y de las EI por cierre de la historia. El análisis multivariado mostró que la presencia de cardiopatía predisponente pre ETE, dos o más HC positivos y la ausencia de un foco no endovascular, implica una probabilidad de 88% de EID, en tanto que la ausencia de estos tres elementos implica una probabilidad de 0% de EID o 7,8% de EIP. Conclusiones: existe una sobreindicación de ETE para el diagnóstico de EI. La ausencia dos o más HC positivos, la existencia de cardiopatía predisponente y la ausencia de un foco infeccioso no endovascular podrían implicar la no realización de ETE. Si se hubiera limitado la realización de ETE a los pacientes que cumplieran con estos criterios se hubieran realizado 68 (58,6%) estudios menos inicialmente.
SUMMARY Transesophage echocardiogram (ETE) is an efficient tool for infective endocarditis (EI). Objective: to individualize clinical criteria to identify populations in which ETE is efficient to diagnosis. Methods: a prospective study of 116 patients suspected of EI who underwent ETE. Echocardiographic results were compared to those obtained by clinical history analysis and Duke criteria. Uni and multivaried analysis were used to determine clinical conditions associated with EI. Results: 23 cases of EI were found as conclusion of clinical history analysis, among them 14 were definitive (EID). ETE was positive in 22 cases (18.96%) included in the 23 cases above-mentioned; ETE was positive for suspected infective endocarditis (EIP) in 8 cases, without positive blood cultures (HC). Multivariate analysis showed that presence of cardiopathy prior to ETE, 2 or more positive HC and lack of non-endovascular focus implies an 88% probability of EID. Lack of these criteria indicates 0% probability of EID and 7.8% probability of EIP. Conclusions: there is an overindicated use of ETE for EI. Lack of 2 or more positive HC, predispositional cardiopathy and lack of infectious non-endovascular focus might imply no use of ETE. If ETE would have been limitated to these criteria, 67.9 (58.5%) could have been saved.