RESUMO
Mansonella ozzardi is a tissue-dwelling parasitic nematode, the causative agent of mansonelliasis in almost all Latin American countries. It has been described along the Argentine Yungas region. The microscopic diagnosis can yield false-negative test results at low microfilaremia levels. The aim of this study was to optimize the molecular diagnostic technique and compare it with the Knott's method and standard blood smear procedures (thin blood films and thick smears) in 92 blood samples of individuals from an endemic area. The PCR technique followed by the sequencing of the amplified product yielded 100 % sensitivity compared to the Knott's test, which is considered a reference method. Seven more cases of this parasitosis could only be identified with the molecular technique.
Assuntos
Doenças Endêmicas , Mansonella/isolamento & purificação , Mansonelose/diagnóstico , Parasitemia/diagnóstico , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Animais , Argentina/epidemiologia , Corantes Azur , Sangue/parasitologia , DNA de Helmintos/genética , DNA de Helmintos/isolamento & purificação , Eletroforese em Gel de Ágar , Formaldeído/farmacologia , Hemólise , Humanos , Mansonella/genética , Mansonella/crescimento & desenvolvimento , Mansonelose/epidemiologia , Mansonelose/parasitologia , Microfilárias/efeitos dos fármacos , Parasitemia/epidemiologia , Parasitemia/parasitologia , Estudos de Amostragem , Alinhamento de Sequência , Análise de Sequência de DNA , Coloração e Rotulagem/métodosRESUMO
Mansonella ozzardi es un nematode parásito tisular, agente etiológico de mansonellosis en casi la totalidad de los países latinoamericanos. En Argentina la mansonellosis ha sido descrita a lo largo de la región de las yungas. Su diagnóstico microscópico puede dar resultados falsos negativos en microfilaremias bajas. El objetivo del presente estudio fue optimizar su diagnóstico molecular y comparar los resultados con los obtenidos mediante las pruebas microscópicas de Knott, de gota gruesa y de extendido hemático fino, en 92 muestras de sangre de pacientes de zona endémica. La técnica de PCR seguida de la secuenciación del producto amplificado presentó una sensibilidad del 100 % frente al método de Knott, considerado como referencia, e incluso permitió identificar 7 casos más de la parasitosis.(AU)
Mansonella ozzardi is a tissue-dwelling parasitic nematode, the causative agent of mansonelliasis in almost all Latin American countries. It has been described along the Argentine Yungas region. The microscopic diagnosis can yield false-negative test results at low microfilaremia levels. The aim of this study was to optimize the molecular diagnostic technique and compare it with the Knotts method and standard blood smear procedures (thin blood films and thick smears) in 92 blood samples of individuals from an endemic area. The PCR technique followed by the sequencing of the amplified product yielded 100 % sensitivity compared to the Knotts test, which is considered a reference method. Seven more cases of this parasitosis could only be identified with the molecular technique.(AU)
Assuntos
Animais , Humanos , Doenças Endêmicas , Mansonella/isolamento & purificação , Mansonelose/diagnóstico , Parasitemia/diagnóstico , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Argentina/epidemiologia , Corantes Azur , Sangue/parasitologia , DNA de Helmintos/genética , DNA de Helmintos/isolamento & purificação , Eletroforese em Gel de Ágar , Formaldeído/farmacologia , Hemólise , Mansonella/genética , Mansonella/crescimento & desenvolvimento , Mansonelose/epidemiologia , Mansonelose/parasitologia , Microfilárias/efeitos dos fármacos , Parasitemia/epidemiologia , Parasitemia/parasitologia , Estudos de Amostragem , Alinhamento de Sequência , Análise de Sequência de DNA , Coloração e Rotulagem/métodosRESUMO
Mansonella ozzardi es un nematode parásito tisular, agente etiológico de mansonellosis en casi la totalidad de los países latinoamericanos. En Argentina la mansonellosis ha sido descrita a lo largo de la región de las yungas. Su diagnóstico microscópico puede dar resultados falsos negativos en microfilaremias bajas. El objetivo del presente estudio fue optimizar su diagnóstico molecular y comparar los resultados con los obtenidos mediante las pruebas microscópicas de Knott, de gota gruesa y de extendido hemático fino, en 92 muestras de sangre de pacientes de zona endémica. La técnica de PCR seguida de la secuenciación del producto amplificado presentó una sensibilidad del 100 % frente al método de Knott, considerado como referencia, e incluso permitió identificar 7 casos más de la parasitosis.
Mansonella ozzardi is a tissue-dwelling parasitic nematode, the causative agent of mansonelliasis in almost all Latin American countries. It has been described along the Argentine Yungas region. The microscopic diagnosis can yield false-negative test results at low microfilaremia levels. The aim of this study was to optimize the molecular diagnostic technique and compare it with the Knott's method and standard blood smear procedures (thin blood films and thick smears) in 92 blood samples of individuals from an endemic area. The PCR technique followed by the sequencing of the amplified product yielded 100 % sensitivity compared to the Knott's test, which is considered a reference method. Seven more cases of this parasitosis could only be identified with the molecular technique.
Assuntos
Animais , Humanos , Doenças Endêmicas , Mansonella/isolamento & purificação , Mansonelose/diagnóstico , Parasitemia/diagnóstico , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Corantes Azur , Argentina/epidemiologia , Sangue/parasitologia , DNA de Helmintos/genética , DNA de Helmintos/isolamento & purificação , Eletroforese em Gel de Ágar , Formaldeído/farmacologia , Hemólise , Mansonella/genética , Mansonella/crescimento & desenvolvimento , Mansonelose/epidemiologia , Mansonelose/parasitologia , Microfilárias/efeitos dos fármacos , Parasitemia/epidemiologia , Parasitemia/parasitologia , Estudos de Amostragem , Alinhamento de Sequência , Análise de Sequência de DNA , Coloração e Rotulagem/métodosRESUMO
We cloned and characterized a Plasmodium vivax repeat element of 7872bp named PvRE7.8. Several internal tandem repeats were found along the sequence. The repetitive nature of the PvRE7.8 element was confirmed by hybridization of a P. vivax YAC library. Based on the data bank analysis and the presence of two contiguous putative genes that may encode proteins related to DNA metabolism, PvRE7.8 could be considered an inactivated transposon-LINE element. By using Pv79 as probe or primers derived from Pv79-flanking sequences, P. vivax DNA Could be detected from whole blood and mosquito samples. We consider that the repeat element described here has potential for P. vivax malaria diagnosis and for epidemiological analysis of P. vivax transmission areas.