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Papillomaviruses (PVs) have been identified in several animal species, including dogs (canine papillomaviruses, CPVs) and cattle (bovine papillomaviruses, BPVs). Although some BPVs may occasionally infect species other than cattle, to the best of our knowledge, BPVs have not been reported in dogs to date. Herein, we carried out a retrospective phylogenetic study of PVs circulating in dogs from southern Brazil between 2017 and 2022, also investigating possible mixed infections and spillover events. For this, we screened 32 canine papilloma samples by PCR using the degenerate primers FAP59/64 and/or MY09/11, which amplify different regions of the L1 gene; the genomic target often used for PV classification/typing. Out these, 23 PV DNA samples were successfully amplified and sequenced. All PVs amplified by FAP59/64 (n = 22) were classified as CPV-1. On the other hand, PVs amplified by MY09/11 (n = 4) were classified as putative BPV-1. Among these, three samples showed mixed infection by CPV-1 and putative BPV-1. One of the putative BPV-1 detected in co-infected samples had the L1 gene full-sequenced, confirming the gene identity. Furthermore, the phylogenetic classifications from the FAP59/64 and/or MY09/11 amplicons were supported by a careful in silico analysis, which demonstrated that the analysis based on them matches to the classification from the complete L1 gene. Overall, we described CPV-1 circulation in southern Brazil over the years and the potencial BPV infection in dogs (potential spillover event), as well as possible CPV/1/BPV-1 co-infections. Finally, we suggest the analysis of the complete genome of the putative BPVs detected in dogs in order to deepen the knowledge about the PV-host interactions.

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Bovine papillomaviruses (BPVs) exhibit a high degree of genetic variability, and several viral types have been identified based on analysis of the L1 gene. The L1 is the main capsid protein and the main target for neutralizing antibodies. We performed a retrospective study on BPVs circulating in Rio Grande do Sul state, Southern Brazil, in 2016-2020. DNA from 43 bovine papilloma samples were amplified using two degenerate primer sets - FAP59/64 and MY09/11 - targeting the L1 region, and analyzed for phylogeny, mixed BPV infections (coinfections) and amino acid (aa) sequences. We also performed an in silico analysis with 114 BPV L1 sequences from the GenBank database to assess the agreement between the phylogeny obtained based on complete L1 sequences versus that based on the region amplified using the FAP59/64 and MY09/11 primer sets. Considering single and coinfections, we identified 31 BPV-1 (31/43; 72.1%), 27 BPV-2 (27/43; 62.8%) and 4 BPV-6 (4/43; 9.3%). Coinfections with BPV-1 and BPV-2 were observed in 61.3% of the samples. Our results are supported by in silico analyses that demonstrate that the classification using FAP59/64 or MY09/11 matches the complete L1 results, except for BPV-17 and -18, which may be mistakenly classified depending on the primers used. Furthermore, we found unique or rare amino acids in at least one L1 sequence of each BPV type identified in our study, some of which have been identified previously in papillomavirus epitopes, suggesting immune-mediated selection. Finally, our study provides an overview of BPVs circulating in Southern Brazil over the last five years and point to the combined use of primers FAP59/64 and MY09/11 for analysis of BPV coinfections and putative epitopes.

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Leishmaniosis is a great public health problem affecting both humans and animals. The disease is caused by the protozoan Leishmania spp., which has a complex cycle involving a phlebotomine vector. The ELISA test (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) along with a chromatographic immunoassay was defined by the Brazil Health Ministry as the confirmatory screening protocol in 2011. Uruguaiana city is 630 km away from Porto Alegre, which makes it difficult to send samples and diagnose leishmaniasis, as well as receive quick results. In view of this, the present study evaluated an in-house indirect ELISA method compared to indirect immunofluorescence assay (IFA) and dual-path platform chromatographic immunoassay (DPP-BioManguinhos®) for the detection of an immune response to Leishmania spp. in canine species. The serological evaluation included 48 canines from the western border of Brazil (Uruguaiana and Barra do Quaraí city). Among the 48 canine samples tested, 18 were positive when using the ELISA technique, 19 were positive with IFA, and 17 were positive with rapid test DPP®. The ELISA technique showed a sensitivity/specificity of 83.3%/86.7% when compared to IFA and 100%/96.8% compared to DPP®. The present study showed a prevalence of 37.5%, demonstrating that the infection circulates in the studied population. It can be concluded that the ELISA technique was valuable for use in field conditions when performing screening tests in endemic areas.

A leishmaniose é um grande problema de saúde pública que afeta tanto humanos quanto animais. A doença é causada pelo protozoário Leishmania spp., que possui um ciclo complexo envolvendo um vetor flebotomíneo. O teste ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay), juntamente com um imunoensaio cromatográfico, foi definido pelo Ministério da Saúde do Brasil como protocolo de triagem confirmatória em 2011. A cidade de Uruguaiana fica a 630 km de Porto Alegre, o que dificulta o envio de amostras e o diagnóstico da leishmaniose, além da demora para obter os resultados. Diante disso, o presente estudo teve como objetivo avaliar um método de ELISA indireto in-house comparado ao ensaio de imunofluorescência indireta (IFA) e imunoensaio cromatográfico de plataforma de dupla via (DPP-BioManguinhos®) para a detecção de uma resposta imune contra Leishmania spp. na espécie canina. A avaliação sorológica incluiu 48 caninos da fronteira oeste do Brasil (cidade de Uruguaiana e Barra do Quaraí). Das 48 amostras caninas testadas, 18 foram positivas na técnica de ELISA, 19 foram positivas com IFA e 17 foram positivas com o teste rápido DPP®. A técnica de ELISA apresentou sensibilidade/especificidade de 83,3%/86,7% quando comparada ao IFA e 100%/96,8% em relação ao DPP®. O presente estudo apresentou prevalência de 37,5%, demonstrando que a infecção circula na população estudada. Pode-se concluir que a técnica de ELISA foi valiosa para uso em condições de campo na realização de testes de triagem em áreas endêmicas.

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The study describes the genetic identification, clinical, and epidemiological characteristics of an outbreak of equine infectious anemia occurring in the state of Rio Grande do Sul, Brazil. Three animals kept in the periurban region of Uruguaiana city tested positive for the AGID test. The serology was performed as a requirement for transit. None of the animals showed clinical signs of infection, one animal was necropsied, and the others were stolen. In the post-mortem examination, no macroscopic changes were observed, and microscopically, discrete hemosiderosis was detected in fragments of the liver and spleen. Amplifying and sequencing a proviral DNA fragment in blood, spleen, and mesenteric lymph node samples confirmed EIAV infection. Phylogenetic analysis of the first sequenced EIAV sample from the Rio Grande do Sul State indicates a high similarity with other Brazilian samples. Results confirmed the viral presence in the state's herds and described epidemiological and virological characteristics of EIA that contribute to the maintenance and dissemination of the virus in herds.

O estudo descreve a identificação genética, as características clínicas e epidemiológicas de um foco de Anemia Infecciosa Equina que ocorreu no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil. Três equinos criados na região periurbana da cidade de Uruguaiana testaram positivos pela prova sorológica de IDGA. O exame foi realizado como requerimento para trânsito dos animais. Nenhum animal apresentava sinais clínicos da infecção, um cavalo foi necropsiado e os outros dois foram roubados. Na necropsia não obsevou-se nenhuma alteração e microscopicamente foi constatada hemosiderose discreta em fragmento do fígado e baço. A infecção foi confirmada pela amplificação e sequenciamento de um segmento do genoma pró-viral do EIAV de amostras do sangue, baço e linfonodo mesentérico. A análise filogenética do primeiro EIAV sequenciado no Estado do RS indica similaridade com outras amostras que circulam no Brasil. O resultado confirma a presença do vírus no rebanho equino da região e descreve características clínicas e epidemiológicas que contribuem para a manutenção e disseminação do vírus no rebanho.

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ABSTRACT: Leishmaniosis is a great public health problem affecting both humans and animals. The disease is caused by the protozoan Leishmania spp., which has a complex cycle involving a phlebotomine vector. The ELISA test (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) along with a chromatographic immunoassay was defined by the Brazil Health Ministry as the confirmatory screening protocol in 2011. Uruguaiana city is 630 km away from Porto Alegre, which makes it difficult to send samples and diagnose leishmaniasis, as well as receive quick results. In view of this, the present study evaluated an in-house indirect ELISA method compared to indirect immunofluorescence assay (IFA) and dual-path platform chromatographic immunoassay (DPP-BioManguinhos®) for the detection of an immune response to Leishmania spp. in canine species. The serological evaluation included 48 canines from the western border of Brazil (Uruguaiana and Barra do Quaraí city). Among the 48 canine samples tested, 18 were positive when using the ELISA technique, 19 were positive with IFA, and 17 were positive with rapid test DPP®. The ELISA technique showed a sensitivity/specificity of 83.3%/86.7% when compared to IFA and 100%/96.8% compared to DPP®. The present study showed a prevalence of 37.5%, demonstrating that the infection circulates in the studied population. It can be concluded that the ELISA technique was valuable for use in field conditions when performing screening tests in endemic areas.

RESUMO: A leishmaniose é um grande problema de saúde pública que afeta tanto humanos quanto animais. A doença é causada pelo protozoário Leishmania spp., que possui um ciclo complexo envolvendo um vetor flebotomíneo. O teste ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay), juntamente com um imunoensaio cromatográfico, foi definido pelo Ministério da Saúde do Brasil como protocolo de triagem confirmatória em 2011. A cidade de Uruguaiana fica a 630 km de Porto Alegre, o que dificulta o envio de amostras e o diagnóstico da leishmaniose, além da demora para obter os resultados. Diante disso, o presente estudo teve como objetivo avaliar um método de ELISA indireto in-house comparado ao ensaio de imunofluorescência indireta (IFA) e imunoensaio cromatográfico de plataforma de dupla via (DPP-BioManguinhos®) para a detecção de uma resposta imune contra Leishmania spp. na espécie canina. A avaliação sorológica incluiu 48 caninos da fronteira oeste do Brasil (cidade de Uruguaiana e Barra do Quaraí). Das 48 amostras caninas testadas, 18 foram positivas na técnica de ELISA, 19 foram positivas com IFA e 17 foram positivas com o teste rápido DPP®. A técnica de ELISA apresentou sensibilidade/especificidade de 83,3%/86,7% quando comparada ao IFA e 100%/96,8% em relação ao DPP®. O presente estudo apresentou prevalência de 37,5%, demonstrando que a infecção circula na população estudada. Pode-se concluir que a técnica de ELISA foi valiosa para uso em condições de campo na realização de testes de triagem em áreas endêmicas.

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The aim of this study was to investigate the presence of adenovirus (AdV), rotavirus (RV), and hepatitis E virus (HEV) in beef, pork, and chicken meat cuts in retail trade in the city of Uruguaiana, RS, Brazil. A total of 131 meat products were collected (beef, n = 55; chicken, n = 47; pork, n = 29) from 18 commercial establishments (supermarkets, n = 7; butchers, n = 7; markets/grocery stores, n = 4). All samples were evaluated for AdV, RV, and HEV. The genomes of RV and AdV were identified in 29% (n = 38) and 5.34% (n = 7) of the samples, respectively. HEV was not identified in any of the samples. Chicken cuts had a higher frequency of AdV and RV isolates compared to beef and pork (P < 0.05). Among the categories of commercial establishments evaluated, all revealed at least one positive sample for AdV and RV; however, supermarkets showed a higher frequency of RV than others (P < 0.05). The genetic material of AdV and RV was identified simultaneously in 2.29% (n = 3) of samples from supermarkets (n = 2) and grocery stores (n = 1). This is the first report on detection of enteric viruses in meat cuts in the western region of the state of Rio Grande do Sul, Brazil, and the presence of AdV and RV in these products may indicate flaws during the process of handling these foods, especially in places where commercialization provides important public health issues.

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Embryonic lipids are crucial for the formation of cellular membranes and dynamically participate in metabolic pathways. Cells can synthesize simple fatty acids, and the elongation of fatty acids facilitates the formation of complex lipids. The aim of this work was to investigate the involvement of the elongation of very long chain fatty acid enzyme 5 (ELOVL5) in embryonic development and lipid determination. Bovine embryos were produced in vitro using a standard protocol and randomly divided to receive one of three treatments at Day 4: morpholino (Mo) gene expression knockdown assay for ELOVL5 (ELOVL5-Mo), Mo antisense oligonucleotides for the thalassemic ß-globulin human mRNA (technical control Mo), and placebo (biological control). The phenotypes of embryonic development, cell number, ELOVL5 protein abundance, lipid droplet deposits, and lipid fingerprint were investigated. No detrimental effects (p > 0.05) were observed on embryo development in terms of cleavage (59.4 ± 3.5%, 63.6 ± 4.1%, and 65.4 ± 2.2%), blastocyst production (31.3 ± 4.2%, 28.1 ± 4.9%, and 36.1 ± 2.1%), and blastocyst cell number (99.6 ± 7.7, 100.2 ± 6.2, 86.8 ± 5.6), respectively, for biological control, technical control Mo, and ELOVL5-Mo. ELOVL5 protein abundance and cytoplasmic lipid droplet deposition were increased (p < 0.05) in ELOVL5-Mo-derived blastocysts compared with the controls. However, seven lipid species, including phosphatidylcholines, phosphatidylethanolamines, and triacylglycerol, were downregulated in the ELOVL5-Mo-derived blastocysts compared with the biological control. Therefore, ELOVL5 is involved in the determination of embryonic lipid content and composition. Transient translational blockage of ELOVL5 reduced the expression of specific lipid species and promoted increased cytoplasmic lipid droplet deposition, but with no apparent deleterious effect on embryonic development and blastocyst cell number.

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This study evaluated the sanitary hygienic quality and the presence of pathogenic microorganisms in raw meats and fresh sausages marketed in the city of Uruguaiana, Rio Grande do Sul (RS), Brazil. We analyzed 238 samples of fresh sausages, beef, pork, and chicken from 18 commercial establishments (butchers, supermarkets, and groceries). Samples were subjected to enumerate hygiene indicator microorganisms (mesophilic aerobes and enterobacteria) and detection of Salmonella spp. and Listeria monocytogenes. The mean counts of mesophilic aerobes and enterobacteria were 5.09 and 3.54 log CFU/g, respectively. Beef samples presented the highest frequency of Salmonella spp. (7.93%) and fresh sausages present the highest frequency of L. monocytogenes (19.04%). Among the analyzed samples, 43.70% did not comply with the microbiological parameters established by the Brazilian Ministry of Health. The presence of Salmonella spp. and L. monocytogenes in different samples and commercial establishments demonstrate the failures of good manufacturing practices in industrial environmental and retails points and the need to train food handlers to reduce the exposure of consumers to potential risks.(AU)

Este estudo teve como objetivo avaliar a qualidade higiênica sanitária e a presença de microrganismos patogênicos em carnes in natura e linguiças frescais comercializadas na cidade de Uruguaiana, Rio Grande do Sul (RS), Brasil. Foram analisadas 238 amostras de linguiças, carne bovina, suína e de frango de 18 estabelecimentos comerciais (açougues, supermercados e mercearias). As amostras foram submetidas à enumeração de microrganismos indicadores de higiene (aeróbios mesófilos e enterobactérias) e detecção de Salmonella spp. e Listeria monocytogenes. As contagens médias de aeróbios mesófilos e enterobactérias foram 5,09 e 3,54 log UFC/g, respectivamente. Salmonella spp. esteve presente mais frequentemente em amostras de carne bovina (4,91 %), enquanto L. monocytogenes foi mais frequente em linguiças frescais (19,04 %). Das amostras analisadas, 43,70 % não atenderam aos parâmetros microbiológicos estabelecidos pelo Ministério da Saúde. A presença de Salmonella spp. e L. monocytogenes em diferentes amostras e estabelecimentos comerciais demonstra falhas de boas práticas de fabricação na indústria e pontos de venda, além da necessidade de treinar manipuladores de alimentos para reduzir a exposição dos consumidores à riscos.(AU)

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ABSTRACT: This study evaluated the sanitary hygienic quality and the presence of pathogenic microorganisms in raw meats and fresh sausages marketed in the city of Uruguaiana, Rio Grande do Sul (RS), Brazil. We analyzed 238 samples of fresh sausages, beef, pork, and chicken from 18 commercial establishments (butchers, supermarkets, and groceries). Samples were subjected to enumerate hygiene indicator microorganisms (mesophilic aerobes and enterobacteria) and detection of Salmonella spp. and Listeria monocytogenes. The mean counts of mesophilic aerobes and enterobacteria were 5.09 and 3.54 log CFU/g, respectively. Beef samples presented the highest frequency of Salmonella spp. (7.93%) and fresh sausages present the highest frequency of L. monocytogenes (19.04%). Among the analyzed samples, 43.70% did not comply with the microbiological parameters established by the Brazilian Ministry of Health. The presence of Salmonella spp. and L. monocytogenes in different samples and commercial establishments demonstrate the failures of good manufacturing practices in industrial environmental and retails points and the need to train food handlers to reduce the exposure of consumers to potential risks.

RESUMO: Este estudo teve como objetivo avaliar a qualidade higiênica sanitária e a presença de microrganismos patogênicos em carnes in natura e linguiças frescais comercializadas na cidade de Uruguaiana, Rio Grande do Sul (RS), Brasil. Foram analisadas 238 amostras de linguiças, carne bovina, suína e de frango de 18 estabelecimentos comerciais (açougues, supermercados e mercearias). As amostras foram submetidas à enumeração de microrganismos indicadores de higiene (aeróbios mesófilos e enterobactérias) e detecção de Salmonella spp. e Listeria monocytogenes. As contagens médias de aeróbios mesófilos e enterobactérias foram 5,09 e 3,54 log UFC/g, respectivamente. Salmonella spp. esteve presente mais frequentemente em amostras de carne bovina (4,91 %), enquanto L. monocytogenes foi mais frequente em linguiças frescais (19,04 %). Das amostras analisadas, 43,70 % não atenderam aos parâmetros microbiológicos estabelecidos pelo Ministério da Saúde. A presença de Salmonella spp. e L. monocytogenes em diferentes amostras e estabelecimentos comerciais demonstra falhas de boas práticas de fabricação na indústria e pontos de venda, além da necessidade de treinar manipuladores de alimentos para reduzir a exposição dos consumidores à riscos.

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The serological responses induced by four commercial inactivated Uruguayan vaccines against bovine alphaherpesviruses (BoHV)-1 and -5 and bovine pestiviruses (BVDV-1, BVDV-2, and HoBiPeV) were evaluated in sheep. Thirty-seven sheep were immunized twice (day 0 and 25) and their serum samples were tested at different intervals (days 0, 25, 40, 60, and 90) post-vaccination (PV). Among the four vaccines tested, only one (G4) could induce the production of moderate neutralizing antibody titers against BoHV-1 and -5 and BVDV-1 and -2. The G3 vaccine showed a neutralizing serological response against the bovine alphaherpesviruses only. The G1 and G2 vaccines produced extremely low levels of antibodies in a few vaccinated animals only (geometric mean titers (GMT) 2.2). Similar levels of immunological responses were induced by the G4 vaccine against BoHV-1 and -5, and titers of neutralizing antibodies induced in approximately 70% of the animals are known to confer protection (GMT > 8). For bovine pestiviruses, the vaccine stimulated response of G4 against BVDV-2 was higher compared to that against BVDV-1, and extremely low for HoBiPeV. The peak of neutralizing antibodies to BoHV-1 and BVDV-1 was observed on days 40 and 60 PV, respectively. Thereafter, a remarkably decrease in neutralizing antibody response was observed at day 90 PV. These results demonstrated that tested commercial Uruguayan vaccines did not induce a serological response of adequate magnitude and duration. Thus, it is important to periodically review formulations and compositions of commercial vaccines against bovine alphaherpesviruses and pestiviruses.(AU)

A resposta sorológica induzida por quatro vacinas comerciais uruguaias inativadas contra os alfaherpesvírus bovinos (BoHV-1 e -5) e pestivírus de bovinos (BVDV-1, BVDV-2 e HoBiPeV) foi avaliada em ovinos. Os animais foram imunizados duas vezes (dia 0 e dia 25) e o soro testado em diferentes intervalos (dias 0, 25, 40, 60 e 90) após a vacinação (PV). Dentre as quatro vacinas testadas, apenas uma (G4) apresentou títulos de anticorpos neutralizantes moderados para os BoHV-1 e -5, BVDV-1 e 2. A vacina G3 apresentou resposta somente para alfaherpesvírus bovinos. As vacinas G1 e G2 estimularam resposta somente em alguns animais vacinados. Para a vacina G4, observou-se que a resposta imunológica frente ao BoHV-1 e 5 foi semelhante e pelo menos 70% dos animais apresentaram níveis protetivos de anticorpos neutralizantes. Para os pestivírus bovinos, a vacina G4 estimulou resposta para o BVDV-2 mais elevada quando comparada com o BVDV-1, e quase que indetectável para HoBiPeV. O pico de anticorpos neutralizantes para o BoHV-1 foi observado no dia 40 PV e no dia 60 PV para o BVDV-1. Após isso, observou-se um decréscimo considerável na resposta de anticorpos neutralizantes. Os resultados demonstraram que vacinas comerciais uruguaias testadas não induziram resposta sorológica de magnitude e duração adequadas. Assim, ressalva-se a importância de rever periodicamente a formulação e composição das vacinas comerciais para alfaherpesvírus e pestivírus bovinos.(AU)

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O objetivo do estudo foi produzir anticorpos policlonais para vírus bovino e testar a reatividade em imunoensaios como imunofluorescência, imunoperoxidase e slot blot. Como imunógeno utilizou-se cepas e/ou isolados dos herpesvírus bovino tipo 1, 2 e 5 (BoHV-1, BoHV-2 e BoHV-5), vírus da diarreia viral bovina (BVDV), vírus respiratório sincicial bovino (BRSV), vírus da língua azul (BTV) e vírus vaccina (VACV) amplificados em cultivo celular. Os coelhos foram imunizados em intervalos regulares e o soro hiperimune produzido foi utilizado como anticorpo primário nos imunoensaios. A diluição de trabalho para cada antissoro foi determinada por diluição seriada limitante e variaram entre 1:800 e 1:51.200. As maiores diluições foram observadas para imunoperoxidase, quando comparadas com a imunofluorescência e slot blot. Diluições menores que 1:800 foram associadas com aumento de reações inespecíficas. Os antissoros anti-BoHV-1, -BoHV-5, -BVDV e -BRSV reagiram frente a isolados heterólogos em ensaios de imunofluorescência e imunoperoxidase. Conclui-se que os antissoros produzidos possuem elevadas concentrações de anticorpos específicos para os vírus e é uma alternativa para a utilização em imunoensaios.(AU)

The objective of the study was to produce polyclonal antibodies to bovine viruses and to test the reactivity in immunoassays such as immunofluorescence, immunoperoxidase and slot blot. Bovine viral diarrhea virus (BVDV), bovine respiratory syncytial virus (BRSV), bovine herpesvirus type 1, 2 and 5 (BoHV-1, BoHV-2 and BoHV-5) blue tongue virus (BTV) and vaccinia virus (VACV) were amplified in cell culture and used to immunize rabbits. Animals were immunized at regular intervals and the hyper immune serum produced was used as primary antibody in the immunoassays. The working dilution for each antiserum was determined by limiting serial dilution and varied from 1: 800 to 1: 51,200. The highest dilutions were observed for immunoperoxidase, when compared with immunofluorescence and slot blot. Dilutions lower than 1:800 were associated with the presence of nonspecific reactions. Anti-BoHV-1, -BoHV-5, -BVDV and -BRSV antisera reacted against heterologous isolates in immunofluorescence and immunoperoxidase assays. It is concluded that the produced polyclonal antibodies have high concentrations of virus-specific antibodies and are an alternative for use in immunoassays.(AU)

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O objetivo do estudo foi produzir anticorpos policlonais para vírus bovino e testar a reatividade em imunoensaios como imunofluorescência, imunoperoxidase e slot blot. Como imunógeno utilizou-se cepas e/ou isolados dos herpesvírus bovino tipo 1, 2 e 5 (BoHV-1, BoHV-2 e BoHV-5), vírus da diarreia viral bovina (BVDV), vírus respiratório sincicial bovino (BRSV), vírus da língua azul (BTV) e vírus vaccina (VACV) amplificados em cultivo celular. Os coelhos foram imunizados em intervalos regulares e o soro hiperimune produzido foi utilizado como anticorpo primário nos imunoensaios. A diluição de trabalho para cada antissoro foi determinada por diluição seriada limitante e variaram entre 1:800 e 1:51.200. As maiores diluições foram observadas para imunoperoxidase, quando comparadas com a imunofluorescência e slot blot. Diluições menores que 1:800 foram associadas com aumento de reações inespecíficas. Os antissoros anti-BoHV-1, -BoHV-5, -BVDV e -BRSV reagiram frente a isolados heterólogos em ensaios de imunofluorescência e imunoperoxidase. Conclui-se que os antissoros produzidos possuem elevadas concentrações de anticorpos específicos para os vírus e é uma alternativa para a utilização em imunoensaios.

The objective of the study was to produce polyclonal antibodies to bovine viruses and to test the reactivity in immunoassays such as immunofluorescence, immunoperoxidase and slot blot. Bovine viral diarrhea virus (BVDV), bovine respiratory syncytial virus (BRSV), bovine herpesvirus type 1, 2 and 5 (BoHV-1, BoHV-2 and BoHV-5) blue tongue virus (BTV) and vaccinia virus (VACV) were amplified in cell culture and used to immunize rabbits. Animals were immunized at regular intervals and the hyper immune serum produced was used as primary antibody in the immunoassays. The working dilution for each antiserum was determined by limiting serial dilution and varied from 1: 800 to 1: 51,200. The highest dilutions were observed for immunoperoxidase, when compared with immunofluorescence and slot blot. Dilutions lower than 1:800 were associated with the presence of nonspecific reactions. Anti-BoHV-1, -BoHV-5, -BVDV and -BRSV antisera reacted against heterologous isolates in immunofluorescence and immunoperoxidase assays. It is concluded that the produced polyclonal antibodies have high concentrations of virus-specific antibodies and are an alternative for use in immunoassays.

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The aim of this study was to investigate hepatitis A virus (HAV), hepatitis E (HEV), and rotavirus (RV) in fresh and processed meat traded on the border of Brazil with Argentina and Uruguay. In total, 159 samples of raw and processed foods of animal origin were collected in Paso de los Libres, Argentina (n = 53 raw meat, n = 24 processed meat) and Rivera, Uruguay (n = 55 raw meat, n = 18 processed meat), or were seized by the Brazilian International Agricultural Surveillance System-VIGIAGRO (Brazil-Argentina border) (n = 8 raw meat, n = 1 bush meat). All samples were tested for the presence of HAV, HEV, and RV genomes. HAV genes were detected in 18.23% of samples and RV genes in 23.89%. No HEV-positive samples were detected. HAV was also detected in two of the VIGIAGRO samples. Processed meats from Argentina and Uruguay had a higher rate of HAV and RV than raw meat (P > 0.05). The median HAV in the Argentinian and Uruguayan samples was 6.9 × 104 and 3.5 × 103 copies/g, respectively. The presence of RV viral genes in raw meats from Argentina was significant, and this was not observed in processed meats. The presence of HAV and RV genes in a significant portion of products from Argentina and Uruguay is a potential source of human infection. This also indicates precarious conditions of acquisition, processing, and manipulation, which could be improved by improved regulation of food across borders.

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This study aimed to characterize the outbreaks of equine infectious anemia (EIA) identified, between the years 2009 and 2015, in the western region of the state of Rio Grande do Sul, Brazil. We identified 26 positive horses on 24 properties. Each positive property was considered an outbreak of the disease. The diagnoses were made using the agar gel immunodiffusion (AGID) test as a part of the sanitary checks conducted during animal transportation or certification of the horse´s sanitary status. The positive properties included farms or horse barns, and the infected animals were used for ranch work, sports, or reproduction. One outbreak was identified in animals that were being illegally transported from Argentina to Brazil. Fifteen outbreaks occurred on properties that were not registered with the Official Veterinary Service (OVS). Eleven outbreaks were identified in urban areas and 13 in rural areas. Twelve of the 24 outbreaks were diagnosed in 2015 alone, nine of which occurred in São Borja county. On two properties, a diagnosis could not be confirmed with a retest; therefore, these outbreaks were discharged. During sanitation checks on three properties, 12 additional positive animals were identified among a population of 1,108 susceptible animals. Based on these findings, we concluded that a subclinical form of the infection is present in that area, which is linked to properties that are not registered with the OVS, and that animals which are transported illegally across international borders represent a potential risk.(AU)

O objetivo do estudo foi caracterizar os focos de EIA identificados, entre 2009 e 2015, na região oeste do estado do Rio Grande do Sul, Brasil. Inicialmente foram identificados 26 equinos positivos em 24 propriedades, sendo que cada propriedade foi considerada um foco. Os diagnósticos foram realizados por imunodifusão em gel de ágar (AGID) na ocasião do transporte ou como medidas sanitárias, em casos de vínculo com animais infectados ou para fim de certificação do status sanitário. Um foco foi identificado em animais transportados ilegalmente da Argentina para o Brasil. Os estabelecimentos positivos eram fazendas ou estábulos e os animais infectados utilizados para trabalho, esporte ou reprodução. Quinze focos ocorreram em propriedades não cadastradas no SVO. Onze focos localizaram-se na zona urbana e 13 em propriedades rurais. Somente no ano de 2015 foram diagnosticados 12 dos 24 focos, sendo que no munícipio de São Borja ocorreram nove surtos neste período. Em duas propriedades o resultado inicial não foi confirmado no reteste, fazendo com que estes focos fossem encerrados imediatamente. Em três propriedades, durante o saneamento, identificou-se outros 12 animais positivos em três propriedades, de uma população de 1.108 susceptíveis. Assim sendo, pode-se concluir que a infecção que está presente na região, ocorre de maneira subclínica, associada a propriedades não cadastradas no SVO e animais transportados de forma ilegal, inclusive transporte internacional ilegal.(AU)

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ABSTRACT This study sought to evaluate the occurrence of lesions suggestive of hydatidosis, cysticercosis, and tuberculosis in animals slaughtered under sanitary inspection of the Divisão de Inspeção de Produtos de Origem Animal (DIPOA), in the state of Rio Grande do Sul. Condemnation data between the years 2009 and 2017 were obtained from Secretaria da Agricultura Pecuária e Irrigação (SEAPI) and presented according to the administrative regions established by SEAPI. In that period, 7,509,544 cattle were slaughtered and condemnations occurred in all regions of the state at varying levels. The mean condemnation values showed the presence of hydatidosis in 523,399 (6.97%), cysticercosis in 92,277 (1.23%), and tuberculosis in 10,595 (0.14%) cattle carcasses. The mean values of hydatidosis diagnoses were higher in the regions of Alegrete (14.19%), Bagé (19.62%), and Pelotas (17.71%). The regions of Osório (1.86%), Santa Maria (2.10%), and São Luiz Gonzaga (1.83%) had highest rates of cysticercosis condemnations. All regions maintained an average bovine tuberculosis diagnosis rate of less than 1% and Estrela region had the highest index (0.70%). Results showed that the three diseases occurred in all regions of the state, the average prevalence rates in each region are variable, and distribution seems to be regionalized. This knowledge contributes to the plans for controlling these diseases, which are zoonoses that cause economic losses to the productive sector.

RESUMO O objetivo do estudo foi avaliar a ocorrência de lesões sugestivas de hidatidose, cisticercose e tuberculose em carcaças bovinas oriundas de abatedouros frigoríficos sob inspeção sanitária da Divisão de Inspeção de Produtos de Origem Animal (DIPOA), no Estado do Rio Grande do Sul. Os dados de condenações entre os anos de 2009 e 2016 foram obtidos junto a Secretaria da Agricultura Pecuária e Irrigação (SEAPI) e apresentados conforme as regiões administrativas estabelecidas pela SEAPI. Nesse período foram abatidos 7.509.544 bovinos e as condenações estiveram presentes em todas as regiões do estado, em níveis variáveis. Os valores médios das condenações demonstraram a presença de hidatidose em 523.399 (6,97%), cisticercose em 92.277 (1,23%) e tuberculose em 10.595 (0,14%) das carcaças bovinas. Os valores médios de condenações por hidatidose foram maiores nas regionais de Alegrete (14,19%), Bagé (19,62%) e Pelotas (17,71%). As regionais de Osório (1,86%), Santa Maria (2,10%) e São Luiz Gonzaga (1,83%) apresentaram as maiores médias para a presença de cisticercose. Todas as regiões mantiveram uma média abaixo de 1% para condenações por tuberculose bovina e a região de Estrela obteve o maior índice (0,70%). Os resultados demonstram que as três enfermidades são causas de condenações em todas as regiões do estado, os índices médios de prevalência em cada região são variáveis e a distribuição parece ser regionalizada. Esse conhecimento poderá subsidiar a elaboração de planos de controle dessas enfermidades, as quais, além do aspecto zoonótico, são responsáveis por perdas econômicas ao setor produtivo pelas condenações de carcaças e órgãos dos bovinos.

RESUMO

This study sought to evaluate the occurrence of lesions suggestive of hydatidosis, cysticercosis, and tuberculosis in animals slaughtered under sanitary inspection of the Divisão de Inspeção de Produtos de Origem Animal (DIPOA), in the state of Rio Grande do Sul. Condemnation data between the years 2009 and 2017 were obtained from Secretaria da Agricultura Pecuária e Irrigação (SEAPI) and presented according to the administrative regions established by SEAPI. In that period, 7,509,544 cattle were slaughtered and condemnations occurred in all regions of the state at varying levels. The mean condemnation values showed the presence of hydatidosis in 523,399 (6.97%), cysticercosis in 92,277 (1.23%), and tuberculosis in 10,595 (0.14%) cattle carcasses. The mean values of hydatidosis diagnoses were higher in the regions of Alegrete (14.19%), Bagé (19.62%), and Pelotas (17.71%). The regions of Osório (1.86%), Santa Maria (2.10%), and São Luiz Gonzaga (1.83%) had highest rates of cysticercosis condemnations. All regions maintained an average bovine tuberculosis diagnosis rate of less than 1% and Estrela region had the highest index (0.70%). Results showed that the three diseases occurred in all regions of the state, the average prevalence rates in each region are variable, and distribution seems to be regionalized. This knowledge contributes to the plans for controlling these diseases, which are zoonoses that cause economic losses to the productive sector.(AU)

O objetivo do estudo foi avaliar a ocorrência de lesões sugestivas de hidatidose, cisticercose e tuberculose em carcaças bovinas oriundas de abatedouros frigoríficos sob inspeção sanitária da Divisão de Inspeção de Produtos de Origem Animal (DIPOA), no Estado do Rio Grande do Sul. Os dados de condenações entre os anos de 2009 e 2016 foram obtidos junto a Secretaria da Agricultura Pecuária e Irrigação (SEAPI) e apresentados conforme as regiões administrativas estabelecidas pela SEAPI. Nesse período foram abatidos 7.509.544 bovinos e as condenações estiveram presentes em todas as regiões do estado, em níveis variáveis. Os valores médios das condenações demonstraram a presença de hidatidose em 523.399 (6,97%), cisticercose em 92.277 (1,23%) e tuberculose em 10.595 (0,14%) das carcaças bovinas. Os valores médios de condenações por hidatidose foram maiores nas regionais de Alegrete (14,19%), Bagé (19,62%) e Pelotas (17,71%). As regionais de Osório (1,86%), Santa Maria (2,10%) e São Luiz Gonzaga (1,83%) apresentaram as maiores médias para a presença de cisticercose. Todas as regiões mantiveram uma média abaixo de 1% para condenações por tuberculose bovina e a região de Estrela obteve o maior índice (0,70%). Os resultados demonstram que as três enfermidades são causas de condenações em todas as regiões do estado, os índices médios de prevalência em cada região são variáveis e a distribuição parece ser regionalizada. Esse conhecimento poderá subsidiar a elaboração de planos de controle dessas enfermidades, as quais, além do aspecto zoonótico, são responsáveis por perdas econômicas ao setor produtivo pelas condenações de carcaças e órgãos dos bovinos.(AU)

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ABSTRACT: This study aimed to characterize the outbreaks of equine infectious anemia (EIA) identified, between the years 2009 and 2015, in the western region of the state of Rio Grande do Sul, Brazil. We identified 26 positive horses on 24 properties. Each positive property was considered an outbreak of the disease. The diagnoses were made using the agar gel immunodiffusion (AGID) test as a part of the sanitary checks conducted during animal transportation or certification of the horse´s sanitary status. The positive properties included farms or horse barns, and the infected animals were used for ranch work, sports, or reproduction. One outbreak was identified in animals that were being illegally transported from Argentina to Brazil. Fifteen outbreaks occurred on properties that were not registered with the Official Veterinary Service (OVS). Eleven outbreaks were identified in urban areas and 13 in rural areas. Twelve of the 24 outbreaks were diagnosed in 2015 alone, nine of which occurred in São Borja county. On two properties, a diagnosis could not be confirmed with a retest; therefore, these outbreaks were discharged. During sanitation checks on three properties, 12 additional positive animals were identified among a population of 1,108 susceptible animals. Based on these findings, we concluded that a subclinical form of the infection is present in that area, which is linked to properties that are not registered with the OVS, and that animals which are transported illegally across international borders represent a potential risk.

RESUMO: O objetivo do estudo foi caracterizar os focos de EIA identificados, entre 2009 e 2015, na região oeste do estado do Rio Grande do Sul, Brasil. Inicialmente foram identificados 26 equinos positivos em 24 propriedades, sendo que cada propriedade foi considerada um foco. Os diagnósticos foram realizados por imunodifusão em gel de ágar (AGID) na ocasião do transporte ou como medidas sanitárias, em casos de vínculo com animais infectados ou para fim de certificação do status sanitário. Um foco foi identificado em animais transportados ilegalmente da Argentina para o Brasil. Os estabelecimentos positivos eram fazendas ou estábulos e os animais infectados utilizados para trabalho, esporte ou reprodução. Quinze focos ocorreram em propriedades não cadastradas no SVO. Onze focos localizaram-se na zona urbana e 13 em propriedades rurais. Somente no ano de 2015 foram diagnosticados 12 dos 24 focos, sendo que no munícipio de São Borja ocorreram nove surtos neste período. Em duas propriedades o resultado inicial não foi confirmado no reteste, fazendo com que estes focos fossem encerrados imediatamente. Em três propriedades, durante o saneamento, identificou-se outros 12 animais positivos em três propriedades, de uma população de 1.108 susceptíveis. Assim sendo, pode-se concluir que a infecção que está presente na região, ocorre de maneira subclínica, associada a propriedades não cadastradas no SVO e animais transportados de forma ilegal, inclusive transporte internacional ilegal.

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ABSTRACT This study sought to evaluate the occurrence of lesions suggestive of hydatidosis, cysticercosis, and tuberculosis in animals slaughtered under sanitary inspection of the Divisão de Inspeção de Produtos de Origem Animal (DIPOA), in the state of Rio Grande do Sul. Condemnation data between the years 2009 and 2017 were obtained from Secretaria da Agricultura Pecuária e Irrigação (SEAPI) and presented according to the administrative regions established by SEAPI. In that period, 7,509,544 cattle were slaughtered and condemnations occurred in all regions of the state at varying levels. The mean condemnation values showed the presence of hydatidosis in 523,399 (6.97%), cysticercosis in 92,277 (1.23%), and tuberculosis in 10,595 (0.14%) cattle carcasses. The mean values of hydatidosis diagnoses were higher in the regions of Alegrete (14.19%), Bagé (19.62%), and Pelotas (17.71%). The regions of Osório (1.86%), Santa Maria (2.10%), and São Luiz Gonzaga (1.83%) had highest rates of cysticercosis condemnations. All regions maintained an average bovine tuberculosis diagnosis rate of less than 1% and Estrela region had the highest index (0.70%). Results showed that the three diseases occurred in all regions of the state, the average prevalence rates in each region are variable, and distribution seems to be regionalized. This knowledge contributes to the plans for controlling these diseases, which are zoonoses that cause economic losses to the productive sector.

RESUMO O objetivo do estudo foi avaliar a ocorrência de lesões sugestivas de hidatidose, cisticercose e tuberculose em carcaças bovinas oriundas de abatedouros frigoríficos sob inspeção sanitária da Divisão de Inspeção de Produtos de Origem Animal (DIPOA), no Estado do Rio Grande do Sul. Os dados de condenações entre os anos de 2009 e 2016 foram obtidos junto a Secretaria da Agricultura Pecuária e Irrigação (SEAPI) e apresentados conforme as regiões administrativas estabelecidas pela SEAPI. Nesse período foram abatidos 7.509.544 bovinos e as condenações estiveram presentes em todas as regiões do estado, em níveis variáveis. Os valores médios das condenações demonstraram a presença de hidatidose em 523.399 (6,97%), cisticercose em 92.277 (1,23%) e tuberculose em 10.595 (0,14%) das carcaças bovinas. Os valores médios de condenações por hidatidose foram maiores nas regionais de Alegrete (14,19%), Bagé (19,62%) e Pelotas (17,71%). As regionais de Osório (1,86%), Santa Maria (2,10%) e São Luiz Gonzaga (1,83%) apresentaram as maiores médias para a presença de cisticercose. Todas as regiões mantiveram uma média abaixo de 1% para condenações por tuberculose bovina e a região de Estrela obteve o maior índice (0,70%). Os resultados demonstram que as três enfermidades são causas de condenações em todas as regiões do estado, os índices médios de prevalência em cada região são variáveis e a distribuição parece ser regionalizada. Esse conhecimento poderá subsidiar a elaboração de planos de controle dessas enfermidades, as quais, além do aspecto zoonótico, são responsáveis por perdas econômicas ao setor produtivo pelas condenações de carcaças e órgãos dos bovinos.

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ABSTRACT: To study the pathogenicity of the Brazilian bovine viral diarrhea virus (BVDV) type 1a 241.10 isolate, four calves were intranasally inoculated with a viral suspension containing 107.2 TCID50 mL-1. One calf was left uninoculated and kept in contact with the other calves to investigate viral transmissibility. After inoculation, the animals were monitored daily for clinical signs of infection. The presence of the virus in the blood and nasal secretions was confirmed by virus isolation in cell culture. White blood cells were quantified prior to and every 3 days after infection, and the presence of antibodies was checked every 7 days, starting at day 0 until day 42 post-inoculation (pi). After infection, nasal and ocular serous secretions were observed between days 1 and 5 pi, along with a mild cough from days 2 to 4 pi; however, no severe clinical signs were present. Body temperature was slightly elevated between days 4 and 6 pi. The control calf did not develop any of the signs observed in the infected animals. Cell culture-mediated virus isolation confirmed viremia between days 4 and 8 pi and the presence of the virus in the nasal secretions between days 1 and 10 pi. All infected animals showed a decrease in white blood cell count. Antibodies could be detected from day 14 pi, and these levels remained high until day 35 pi. The control calf had no viremia, viral presence in nasal secretions, or positive serology, indicating the absence of viral transmission. Thus, isolate BVDV 1a 241.10 has low pathogenicity and transmissibility but retains immunosuppressive capacity.

RESUMO: Com o objetivo de estudar a patogenicidade de uma amostra brasileira do BVDV-1a (241.10), quatro bovinos foram inoculados pela via intranasal com uma suspensão viral contendo 107,2 TCID50 mL-1. Um bezerro foi mantido em contato com o grupo infectado para avaliar a transmissibilidade. Após a inoculação, os animais foram monitorados diariamente para observação dos sinais clínicos. A presença de vírus no sangue e na secreção nasal foi confirmada pelo isolamento viral em cultivo celular. A contagem total de leucócitos no sangue foi realizada com intervalos de três dias pré- e pós-infecção e a detecção de anticorpos a cada sete dias, iniciando-se no dia 0 até o dia 42 pós-inoculação (pi). Após a inoculação, não foram observados sinais clínicos evidentes, apenas secreção nasal e ocular serosa entre os dias 1 e 5 pi e tosse discreta entre os dias 2 e 4 pi. A temperatura corporal teve leve aumento entre os dias 4 e 6 pi. O animal controle não desenvolveu os sinais observados no grupo infectado. O isolamento viral indicou presença de viremia entre os dias 4 a 8 pi e excreção viral na secreção nasal entre os dias 1 e 10 pi. Os animais inoculados apresentaram redução na contagem total de leucócitos no sangue. A detecção de anticorpos iniciou-se no dia 14 pi e os níveis mantiveram-se elevados até o dia 35 pi. No animal controle, não foi observada viremia, presença de vírus na secreção nasal e sorologia positiva, demonstrando ausência da transmissão. Assim sendo, conclui-se que a amostra de BVDV 1a 241.10 possui baixa patogenicidade, mantém a capacidade imunossupressora e tem baixa transmissibilidade.

RESUMO

To study the pathogenicity of the Brazilian bovine viral diarrhea virus (BVDV) type 1a 241.10 isolate, four calves were intranasally inoculated with a viral suspension containing 107.2 TCID50 mL-¹. One calf was left uninoculated and kept in contact with the other calves to investigate viral transmissibility. After inoculation, the animals were monitored daily for clinical signs of infection. The presence of the virus in the blood and nasal secretions was confirmed by virus isolation in cell culture. White blood cells were quantified prior to and every 3 days after infection, and the presence of antibodies was checked every 7 days, starting at day 0 until day 42 post-inoculation (pi). After infection, nasal and ocular serous secretions were observed between days 1 and 5 pi, along with a mild cough from days 2 to 4 pi; however, no severe clinical signs were present. Body temperature was slightly elevated between days 4 and 6 pi. The control calf did not develop any of the signs observed in the infected animals. Cell culture-mediated virus isolation confirmed viremia between days 4 and 8 pi and the presence of the virus in the nasal secretions between days 1 and 10 pi. All infected animals showed a decrease in white blood cell count. Antibodies could be detected from day 14 pi, and these levels remained high until day 35 pi. The control calf had no viremia, viral presence in nasal secretions, or positive serology, indicating the absence of viral transmission. Thus, isolate BVDV 1a 241.10 has low pathogenicity and transmissibility but retains immunosuppressive capacity.(AU)

Com o objetivo de estudar a patogenicidade de uma amostra brasileira do BVDV-1a (241.10), quatro bovinos foram inoculados pela via intranasal com uma suspensão viral contendo 107,2 TCID50 mL-¹. Um bezerro foi mantido em contato com o grupo infectado para avaliar a transmissibilidade. Após a inoculação, os animais foram monitorados diariamente para observação dos sinais clínicos. A presença de vírus no sangue e na secreção nasal foi confirmada pelo isolamento viral em cultivo celular. A contagem total de leucócitos no sangue foi realizada com intervalos de três dias pré- e pós-infecção e a detecção de anticorpos a cada sete dias, iniciando-se no dia 0 até o dia 42 pós-inoculação (pi). Após a inoculação, não foram observados sinais clínicos evidentes, apenas secreção nasal e ocular serosa entre os dias 1 e 5 pi e tosse discreta entre os dias 2 e 4 pi. A temperatura corporal teve leve aumento entre os dias 4 e 6 pi. O animal controle não desenvolveu os sinais observados no grupo infectado. O isolamento viral indicou presença de viremia entre os dias 4 a 8 pi e excreção viral na secreção nasal entre os dias 1 e 10 pi. Os animais inoculados apresentaram redução na contagem total de leucócitos no sangue. A detecção de anticorpos iniciou-se no dia 14 pi e os níveis mantiveram-se elevados até o dia 35 pi. No animal controle, não foi observada viremia, presença de vírus na secreção nasal e sorologia positiva, demonstrando ausência da transmissão. Assim sendo, conclui-se que a amostra de BVDV 1a 241.10 possui baixa patogenicidade, mantém a capacidade imunossupressora e tem baixa transmissibilidade.(AU)

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