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This study aimed to investigate the presence of Mycoplasma spp. and identify the species of mycoplasma isolates obtained from seabirds found on Brazilian coastal beaches. Tracheal and cloacal swab samples were collected from 50 seabirds rescued by three conservation and marine animal rehabilitation centers located in Brazil. The tracheal and cloacal samples were subjected to mycoplasma culture and the isolates were identified through PCR. A "Mollicutes-specific" 16S rRNA PCR reaction was employed for triage. Four species-specific PCR reactions were used to detect Mycoplasma gallisepticum, Mycoplasma synoviae, Mycoplasma meleagridis, or M. gallinarum. The Mollicutes positive and species negative samples were submitted do 16S rRNA sequencing. Eighteen (36%) of 50 seabirds tested positive for mycoplasma by culture. In the PCR for the genus, 28 (56%) of 50 seabirds were positive for Mycoplasma spp., with 13 (26%) detected in the trachea, one (2%) in the cloaca, and 14 (28%) in both sites. In the species-specific PCR, M. gallisepticum was detected in 17.8%, and M. meleagridis in 17.8%. Both species were detected in 14.3%. Of the isolates not characterized at species level, we obtained ten sequences and they were divided into three clusters. The first cluster was closely related to M. meleagridis, the second to M. synoviae, and the third grouped M. tully, M. gallisepticum, and M. imitans. Four and five of nine species of seabirds studied had mycoplasma detected by culture or PCR, respectively. Mycoplasmas were found in the majority of the animals studied, with the highest prevalence proportionally found in Sula leucogaster, and the lowest in Fregata magnificens. The phylogenetic analysis identified Mycoplasma spp. adapted to aquatic birds.

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Rats and mice are the most used experimental models in research. Globally, animal houses are subjected to parasite outbreaks. In Brazil, the parasitological profile is used to reflect the sanitary condition of laboratory animals and must be monitored frequently. The present study developed an integrative review of scientific studies on the parasitological profile of rats and mice in animal facilities in Brazil. It identified the most prevalent parasite species reported in animal facilities from different geographic regions of the country, as well as factors contributing to the perpetuation of these parasites, and proposed measures to help prevent such infections. Based on the guiding question "which endoparasites and ectoparasites have already been identified in rat and mouse colonies in animal facilities in Brazil?" and considering inclusion and exclusion criteria, 28 studies published between 1974 and 2021 were selected in four scientific bases. These studies covered facilities in 12 Brazilian States, describing 16 genera of parasites in mice and 18 in rats. Most of the facilities in the selected studies were of the conventional type and with few sanitary barriers, and these conditions may favor the recurrence of parasites. Efforts are, therefore, necessary for institutions to have animal facilities in accordance with the legislation and practice optimal methodologies. The measures proposed in this article can contribute to change the panorama of parasites in the national animal facilities, aiming to safeguard the quality of scientific data and animal welfare.

Ratos e camundongos são os modelos experimentais mais utilizados em pesquisa. Globalmente, as instalações de animais estão sujeitas a surtos de parasitas. No Brasil, o perfil parasitológico é utilizado para refletir a condição sanitária dos animais de laboratório e deve ser monitorado frequentemente. O presente estudo teve como objetivo desenvolver uma revisão integrativa de estudos científicos sobre o perfil parasitológico de ratos e camundongos em biotérios no Brasil. A revisão identifica as espécies parasitárias mais prevalentes relatadas em biotérios de diferentes regiões geográficas do país, bem como os fatores que contribuem para a perpetuação desses parasitas, e propõe medidas para ajudar a prevenir tais infecções. Com base na questão norteadora "quais endoparasitas e ectoparasitas já foram identificados em colônias de ratos e camundongos em biotérios no Brasil?" e considerando os critérios de inclusão e exclusão, foram selecionados 28 estudos publicados entre 1974 e 2021 em quatro bases científicas. Esses estudos abrangeram instalações em 12 estados brasileiros, descrevendo 16 gêneros de parasitas em camundongos e 18 em ratos. A maioria das instalações dos estudos selecionados era do tipo convencional e com poucas barreiras sanitárias, e essas condições podem favorecer a recorrência de parasitas. Portanto, esforços são necessários para que as instituições tenham biotérios de acordo com a legislação e pratiquem metodologias otimizadas. As medidas propostas neste artigo podem contribuir para mudar o panorama das parasitoses nos biotérios nacionais, visando salvaguardar a qualidade dos dados científicos e o bem-estar animal.

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This work aimed to detect Mycoplasma cynos, M. canis, M. edwardii, and M. molare in different types of kennels, in addition to evaluating their distribution in different colonization sites. The dogs belonged to different kennels from armed forces (n = 3), shelters (n = 3), and commercial purposes (n = 2). Samples of the oropharynx, genital mucosa, and ear canal were collected from each dog (n = 98), totaling 294 samples. Aliquots were submitted to isolation and the samples confirmed as Mycoplasma spp. were subjected to conventional PCR for M. canis and multiplex PCR for M. edwardii, M. molare, and M. cynos detection. Of the 98 dogs studied, 63.3% (62) were positive in at least one anatomical site evaluated for Mycoplasma spp. Among the 111 anatomical sites positive for Mycoplasma spp., M. canis, M. edwardii, and M. molare were detected in 29.7% (33/111), 40.5% (45/111), and 2.70% (3/111), respectively. No animal was positive for M. cynos.

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Spontaneous polydactyly has been described in several species, but only one report about it in Swiss mice. The aim of the current study was to report the spontaneous occurrence of pre-axial polydactyly in Swiss mice. Clinical examination showed one extra toe laterally to the first digit, in the plantar region, alopecia in the back, altered face growth anatomy and changed perineal region anatomy. Pre-axial polydactyly in the tibial side, fused metatarsals and Y-shaped free phalanges were evidenced in the radiographic images. Pre-axial polydactyly observed in the plantar region differed from that in reports on albino Swiss mice with post-axial polydactyly (Po/Po+) phenotype featured by one extra toe in the ulnar side of one, or both, front limbs, which is the dominant feature. The observed findings highlight the importance of both clinical examinations and close attention by professionals involved in rodents breeding on physical changes resulting from different causes, including the genetic ones, since they reveal mutations and, sometimes, new biomodels.(AU)

A polidactilia espontânea foi descrita em várias espécies, mas há apenas um relato em camundongos Swiss. O objetivo do presente estudo foi relatar uma ocorrência de polidactilia pré-axial em camundongos Swiss. O exame clínico revelou um dedo extra lateralmente ao primeiro dedo na região plantar, alopecia dorsal, anatomias facial e da região perineal alteradas. Nas imagens radiográficas foram evidenciados polidactilia pré-axial no lado tibial, metatarsos fundidos e falanges livres em forma de Y. A polidactilia pré-axial observada diferiu do relato existente de polidactilia pós-axial (Po/Po+) caracterizado por um dedo extra no lado ulnar de um ou ambos os membros anteriores e de característica dominante. Os achados observados destacam a importância dos exames clínicos e da atenção cuidadosa dos profissionais envolvidos na criação de roedores sobre as alterações físicas decorrentes de diferentes causas, inclusive as genéticas, em revelar mutações e, às vezes, novos biomodelos.(AU)

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Spontaneous polydactyly has been described in several species, but only one report about it in Swiss mice. The aim of the current study was to report the spontaneous occurrence of pre-axial polydactyly in Swiss mice. Clinical examination showed one extra toe laterally to the first digit, in the plantar region, alopecia in the back, altered face growth anatomy and changed perineal region anatomy. Pre-axial polydactyly in the tibial side, fused metatarsals and Y-shaped free phalanges were evidenced in the radiographic images. Pre-axial polydactyly observed in the plantar region differed from that in reports on albino Swiss mice with post-axial polydactyly (Po/Po+) phenotype featured by one extra toe in the ulnar side of one, or both, front limbs, which is the dominant feature. The observed findings highlight the importance of both clinical examinations and close attention by professionals involved in rodents’ breeding on physical changes resulting from different causes, including the genetic ones, since they reveal mutations and, sometimes, new biomodels.

A polidactilia espontânea foi descrita em várias espécies, mas há apenas um relato em camundongos Swiss. O objetivo do presente estudo foi relatar uma ocorrência de polidactilia pré-axial em camundongos Swiss. O exame clínico revelou um dedo extra lateralmente ao primeiro dedo na região plantar, alopecia dorsal, anatomias facial e da região perineal alteradas. Nas imagens radiográficas foram evidenciados polidactilia pré-axial no lado tibial, metatarsos fundidos e falanges livres em forma de Y. A polidactilia pré-axial observada diferiu do relato existente de polidactilia pós-axial (Po/Po+) caracterizado por um dedo extra no lado ulnar de um ou ambos os membros anteriores e de característica dominante. Os achados observados destacam a importância dos exames clínicos e da atenção cuidadosa dos profissionais envolvidos na criação de roedores sobre as alterações físicas decorrentes de diferentes causas, inclusive as genéticas, em revelar mutações e, às vezes, novos biomodelos.

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ABSTRACT: Spontaneous polydactyly has been described in several species, but only one report about it in Swiss mice. The aim of the current study was to report the spontaneous occurrence of pre-axial polydactyly in Swiss mice. Clinical examination showed one extra toe laterally to the first digit, in the plantar region, alopecia in the back, altered face growth anatomy and changed perineal region anatomy. Pre-axial polydactyly in the tibial side, fused metatarsals and Y-shaped free phalanges were evidenced in the radiographic images. Pre-axial polydactyly observed in the plantar region differed from that in reports on albino Swiss mice with post-axial polydactyly (Po/Po+) phenotype featured by one extra toe in the ulnar side of one, or both, front limbs, which is the dominant feature. The observed findings highlight the importance of both clinical examinations and close attention by professionals involved in rodents' breeding on physical changes resulting from different causes, including the genetic ones, since they reveal mutations and, sometimes, new biomodels.

RESUMO: A polidactilia espontânea foi descrita em várias espécies, mas há apenas um relato em camundongos Swiss. O objetivo do presente estudo foi relatar uma ocorrência de polidactilia pré-axial em camundongos Swiss. O exame clínico revelou um dedo extra lateralmente ao primeiro dedo na região plantar, alopecia dorsal, anatomias facial e da região perineal alteradas. Nas imagens radiográficas foram evidenciados polidactilia pré-axial no lado tibial, metatarsos fundidos e falanges livres em forma de Y. A polidactilia pré-axial observada diferiu do relato existente de polidactilia pós-axial (Po/Po+) caracterizado por um dedo extra no lado ulnar de um ou ambos os membros anteriores e de característica dominante. Os achados observados destacam a importância dos exames clínicos e da atenção cuidadosa dos profissionais envolvidos na criação de roedores sobre as alterações físicas decorrentes de diferentes causas, inclusive as genéticas, em revelar mutações e, às vezes, novos biomodelos.

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Mycoplasma is an important avian pathogen that can cause both respiratory disease and synovitis in birds, resulting in considerable economic losses to the poultry industry worldwide. This study aimed to determine the incidence of Mycoplasma gallisepticum and M. synoviae in broiler flocks at the Federal District and its surrounding regions using polymerase chain reaction (PCR). All slaughtered lots (57 flocks) were analyzed from July to November in one of the two slaughterhouses at the Federal District with Federal inspection services. Approximately 10 samples of broiler tracheae per slaughtered batch were collected from the evisceration line. The results obtained from the accumulated incidence over the study period were 7.02% and 35.09% for M. gallisepticum and M. synoviae, respectively. A greater concentration of flocks affected by M. synoviae was observed during October. The sample design as well as the PCR technique assisted in detecting both agents in the broiler batches in the first epidemiological study of these two agents in the region.(AU)

Os micoplasmas são importantes patógenos aviários, que podem causar doenças respiratórias e sinovites em aves, resultando em consideráveis perdas econômicas para a indústria avícola em todo o mundo. O objetivo deste estudo foi determinar a incidência de Mycoplasma gallisepticum e Mycoplasma synoviae em lotes de frangos na região do Distrito Federal e Entorno, por meio da reação em cadeia de polimerase (PCR). Todos os lotes abatidos (57 lotes) foram analisados durante os meses de julho a novembro, em um dos dois abatedouros frigoríficos do Distrito Federal com Serviço de Inspeção Federal. Na linha de evisceração foram coletadas cerca de 10 amostras de traqueia de frangos de corte por lote abatido. Os resultados obtidos da incidência acumulada no período de estudo foram de 7.02% para M. gallisepticum e 35,09% M. synoviae. Uma maior concentração do número de lotes afetados por M. synoviae foi observada durante o mês de outubro. O desenho amostral, assim como a técnica de PCR, permitiu a detecção de ambos os agentes nos lotes de frangos de corte analisados, sendo este o primeiro estudo epidemiológico desses dois agentes na região de estudo.(AU)

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Bacteria of Mollicutes Class are associated with intramammary infection and decrease in milk production. This study investigated the occurrence of Mollicutes and elucidated their risk factors in dairy herds from Southeast Brazil. For this, milk samples from 387 lactation cows from Minas Gerais, Rio de Janeiro and São Paulo States were subjected to the polymerase chain reaction (PCR) to detect Mollicutes. Species of Mycoplasma were investigated in Mollicutes positive samples by PCR, including Mycoplasma bovis, M. alkalescens, M. bovigenitalium, M. bovirhinis, M. arginini and A. laidlawii. An epidemiological questionnaire was applied to collect data on possible risk factors, which were assessed using Pearson's Chi-square test followed by odds ratio (P≤0.05). Mollicutes were reported in 21% (4/19) of the herds and 4% (16/387) of the animals, while 1% (5/387) were positive for M. bovis and 3% (11/387) for M. arginini. All samples were negative to the other agents. Herds with more than 150 animals [OR=3.51 (95% CI 1.11-11.08)], manual milking [OR=9.97 (95% CI 2.80-35.49)] and not-milking animals with mastitis last [OR=6.54 (95% CI 1.92-22.29)] were risk factors. The presence of these conditions may favor intramammary infection by Mollicutes in dairy herds from Southeast Brazil. This is the first report of M. bovis in Rio de Janeiro and M. arginini in the studied states.(AU)

Bactérias da Classe Mollicutes estão associadas à infecção intramamária e diminuição da produção leiteira. O objetivo deste estudo foi investigar a ocorrência de Mollicutes e elucidar seus fatores de risco em rebanhos leiteiros do sudeste brasileiro. Para isso, amostras de leite de 387 vacas em lactação dos estados de Minas Gerais, Rio de Janeiro e São Paulo foram submetidas à reação em cadeia da polimerase (PCR) para detectar Mollicutes. Espécies de Mycoplasma foram investigadas nas amostras positivas por PCR, incluindo Mycoplasma bovis, M. alkalescens, M. bovigenitalium, M. bovirhinis, M. arginini e A. laidlawii. Foi aplicado um questionário epidemiológico para a coleta de dados sobre possíveis fatores de risco, que foram avaliados pelo teste de Qui-Quadrado de Pearson seguido de odds ratio (P≤0.05). Mollicutes foram detectados em 21% (4/19) dos rebanhos e 4% (16/387) dos animais, enquanto 1% (5/387) destes foram positivos para m. bovis, 3% (11/387) para m. arginini, sendo todas as amostras negativas para os demais agentes. Rebanhos com mais de 150 animais [OR=3,51 (95% IC 1,11-11,08)], ordenha manual [OR=9,97 (95% IC 2,80-35,49)] e ausência de linha de ordenha [OR=6,54 (95% IC 1,92-22,29)] foram considerados fatores de risco. A presença dessas condições pode favorecer a infecção intramamária por Mollicutes em rebanhos leiteiros no sudeste do Brasil. Este é o primeiro relato de M. bovis no Rio de Janeiro e M. arginini nos estados estudados.(AU)

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Although rare, mycoplasmas are included among the causes of respiratory diseases in reptiles and, in the order Squamata, three reports of these microorganisms causing diseases in pythons have already been reported. This study aimed to evaluate the occurrence of Mycoplasma species in captive snakes. A total of 26 snakes of the families Pythonidae (13), Boidae (7), Viperidae (5) and Colubridae (1) from RioZoo, Brazil, were evaluated. Animals were examined to determine clinical signs consistent with any infectious disease. Tracheal swab samples from snakes were collected in Frey medium and analyzed for the presence of Mycoplasma spp.by isolation and a genus-specific PCR. DNA sequencing analyses of six positive samples by PCR were carried out to identify the species. Using isolation 19.23% (5/26) was positive, while 65.38% (17/26) of the animals were positive by PCR. Based on the analyses of the six sequences obtained, there was similarity with a Mycoplasma spp. previously described in a phyton and, M. agassizii and M. testudineum reported in chelonians. This is the first report of Mycoplasma spp. in animals of the families Boidae and Viperidae. Mycoplasma spp. were detected in snakes with and without clinical signs. The mycoplasmas reported resented identity (range, 95% to 100%) to others already described in reptiles. There was no relationship between the presence of Mycoplasma spp. and clinical signs.(AU)

Embora raros, os micoplasmas estão incluídos entre as causas de doenças respiratórias em répteis e, na ordem Squamata, já foram realizados três relatos destes microrganismos causando doença em pítons. Este estudo teve como objetivo avaliar a ocorrência de espécies de Mycoplasma em serpentes em cativeiro. Foram avaliadas 26 serpentes das famílias Pythonidae (13), Boidae (7), Viperidae (5) e Colubridae (1) do RioZoo, Brasil. Os animais foram examinados para determinar sinais clínicos consistentes com qualquer doença infecciosa. Amostras de swab traqueal de cobras foram coletadas em meio Frey e analisadas por isolamento microbiológico e pela técnica da PCR para identificar Mycoplasma spp. As amostras positivas para o gênero Mycoplasma spp. foram submetidas ao sequenciamento genético para identificação das espécies. No isolamento, 19,23% (5/26) foram positivos, enquanto 65,38% (17/26) dos animais foram positivos por PCR. Com base nas análises das seis sequências obtidas, houve similaridade com o Mycoplasma spp. descrito anteriormente em um píton e M. agassizii e M. testudineum encontrados em quelônios. Este é o primeiro relato de Mycoplasma spp. em animais das famílias Boidae e Viperidae. Mycoplasma spp. foi detectado em serpentes com e sem sinais clínicos. Os micoplasmas encontrados apresentaram semelhança genética com outros já descritos em répteis. Não houve relação entre a presença de Mycoplasma spp. e sinais clínicos.(AU)

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Bacteria of Mollicutes Class are associated with intramammary infection and decrease in milk production. This study investigated the occurrence of Mollicutes and elucidated their risk factors in dairy herds from Southeast Brazil. For this, milk samples from 387 lactation cows from Minas Gerais, Rio de Janeiro and São Paulo States were subjected to the polymerase chain reaction (PCR) to detect Mollicutes. Species of Mycoplasma were investigated in Mollicutes positive samples by PCR, including Mycoplasma bovis, M. alkalescens, M. bovigenitalium, M. bovirhinis, M. arginini and A. laidlawii. An epidemiological questionnaire was applied to collect data on possible risk factors, which were assessed using Pearson's Chi-square test followed by odds ratio (P≤0.05). Mollicutes were reported in 21% (4/19) of the herds and 4% (16/387) of the animals, while 1% (5/387) were positive for M. bovis and 3% (11/387) for M. arginini. All samples were negative to the other agents. Herds with more than 150 animals [OR=3.51 (95% CI 1.11-11.08)], manual milking [OR=9.97 (95% CI 2.80-35.49)] and not-milking animals with mastitis last [OR=6.54 (95% CI 1.92-22.29)] were risk factors. The presence of these conditions may favor intramammary infection by Mollicutes in dairy herds from Southeast Brazil. This is the first report of M. bovis in Rio de Janeiro and M. arginini in the studied states.

Bactérias da Classe Mollicutes estão associadas à infecção intramamária e diminuição da produção leiteira. O objetivo deste estudo foi investigar a ocorrência de Mollicutes e elucidar seus fatores de risco em rebanhos leiteiros do sudeste brasileiro. Para isso, amostras de leite de 387 vacas em lactação dos estados de Minas Gerais, Rio de Janeiro e São Paulo foram submetidas à reação em cadeia da polimerase (PCR) para detectar Mollicutes. Espécies de Mycoplasma foram investigadas nas amostras positivas por PCR, incluindo Mycoplasma bovis, M. alkalescens, M. bovigenitalium, M. bovirhinis, M. arginini e A. laidlawii. Foi aplicado um questionário epidemiológico para a coleta de dados sobre possíveis fatores de risco, que foram avaliados pelo teste de Qui-Quadrado de Pearson seguido de odds ratio (P≤0.05). Mollicutes foram detectados em 21% (4/19) dos rebanhos e 4% (16/387) dos animais, enquanto 1% (5/387) destes foram positivos para m. bovis, 3% (11/387) para m. arginini, sendo todas as amostras negativas para os demais agentes. Rebanhos com mais de 150 animais [OR=3,51 (95% IC 1,11-11,08)], ordenha manual [OR=9,97 (95% IC 2,80-35,49)] e ausência de linha de ordenha [OR=6,54 (95% IC 1,92-22,29)] foram considerados fatores de risco. A presença dessas condições pode favorecer a infecção intramamária por Mollicutes em rebanhos leiteiros no sudeste do Brasil. Este é o primeiro relato de M. bovis no Rio de Janeiro e M. arginini nos estados estudados.

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ABSTRACT: Bacteria of Mollicutes Class are associated with intramammary infection and decrease in milk production. This study investigated the occurrence of Mollicutes and elucidated their risk factors in dairy herds from Southeast Brazil. For this, milk samples from 387 lactation cows from Minas Gerais, Rio de Janeiro and São Paulo States were subjected to the polymerase chain reaction (PCR) to detect Mollicutes. Species of Mycoplasma were investigated in Mollicutes positive samples by PCR, including Mycoplasma bovis, M. alkalescens, M. bovigenitalium, M. bovirhinis, M. arginini and A. laidlawii. An epidemiological questionnaire was applied to collect data on possible risk factors, which were assessed using Pearson's Chi-square test followed by odds ratio (P≤0.05). Mollicutes were reported in 21% (4/19) of the herds and 4% (16/387) of the animals, while 1% (5/387) were positive for M. bovis and 3% (11/387) for M. arginini. All samples were negative to the other agents. Herds with more than 150 animals [OR=3.51 (95% CI 1.11-11.08)], manual milking [OR=9.97 (95% CI 2.80-35.49)] and not-milking animals with mastitis last [OR=6.54 (95% CI 1.92-22.29)] were risk factors. The presence of these conditions may favor intramammary infection by Mollicutes in dairy herds from Southeast Brazil. This is the first report of M. bovis in Rio de Janeiro and M. arginini in the studied states.

RESUMO: Bactérias da Classe Mollicutes estão associadas à infecção intramamária e diminuição da produção leiteira. O objetivo deste estudo foi investigar a ocorrência de Mollicutes e elucidar seus fatores de risco em rebanhos leiteiros do sudeste brasileiro. Para isso, amostras de leite de 387 vacas em lactação dos estados de Minas Gerais, Rio de Janeiro e São Paulo foram submetidas à reação em cadeia da polimerase (PCR) para detectar Mollicutes. Espécies de Mycoplasma foram investigadas nas amostras positivas por PCR, incluindo Mycoplasma bovis, M. alkalescens, M. bovigenitalium, M. bovirhinis, M. arginini e A. laidlawii. Foi aplicado um questionário epidemiológico para a coleta de dados sobre possíveis fatores de risco, que foram avaliados pelo teste de Qui-Quadrado de Pearson seguido de odds ratio (P≤0.05). Mollicutes foram detectados em 21% (4/19) dos rebanhos e 4% (16/387) dos animais, enquanto 1% (5/387) destes foram positivos para m. bovis, 3% (11/387) para m. arginini, sendo todas as amostras negativas para os demais agentes. Rebanhos com mais de 150 animais [OR=3,51 (95% IC 1,11-11,08)], ordenha manual [OR=9,97 (95% IC 2,80-35,49)] e ausência de linha de ordenha [OR=6,54 (95% IC 1,92-22,29)] foram considerados fatores de risco. A presença dessas condições pode favorecer a infecção intramamária por Mollicutes em rebanhos leiteiros no sudeste do Brasil. Este é o primeiro relato de M. bovis no Rio de Janeiro e M. arginini nos estados estudados.

RESUMO

ABSTRACT: Although rare, mycoplasmas are included among the causes of respiratory diseases in reptiles and, in the order Squamata, three reports of these microorganisms causing diseases in pythons have already been reported. This study aimed to evaluate the occurrence of Mycoplasma species in captive snakes. A total of 26 snakes of the families Pythonidae (13), Boidae (7), Viperidae (5) and Colubridae (1) from RioZoo, Brazil, were evaluated. Animals were examined to determine clinical signs consistent with any infectious disease. Tracheal swab samples from snakes were collected in Frey medium and analyzed for the presence of Mycoplasma spp.by isolation and a genus-specific PCR. DNA sequencing analyses of six positive samples by PCR were carried out to identify the species. Using isolation 19.23% (5/26) was positive, while 65.38% (17/26) of the animals were positive by PCR. Based on the analyses of the six sequences obtained, there was similarity with a Mycoplasma spp. previously described in a phyton and, M. agassizii and M. testudineum reported in chelonians. This is the first report of Mycoplasma spp. in animals of the families Boidae and Viperidae. Mycoplasma spp. were detected in snakes with and without clinical signs. The mycoplasmas reported resented identity (range, 95% to 100%) to others already described in reptiles. There was no relationship between the presence of Mycoplasma spp. and clinical signs.

RESUMO: Embora raros, os micoplasmas estão incluídos entre as causas de doenças respiratórias em répteis e, na ordem Squamata, já foram realizados três relatos destes microrganismos causando doença em pítons. Este estudo teve como objetivo avaliar a ocorrência de espécies de Mycoplasma em serpentes em cativeiro. Foram avaliadas 26 serpentes das famílias Pythonidae (13), Boidae (7), Viperidae (5) e Colubridae (1) do RioZoo, Brasil. Os animais foram examinados para determinar sinais clínicos consistentes com qualquer doença infecciosa. Amostras de swab traqueal de cobras foram coletadas em meio Frey e analisadas por isolamento microbiológico e pela técnica da PCR para identificar Mycoplasma spp. As amostras positivas para o gênero Mycoplasma spp. foram submetidas ao sequenciamento genético para identificação das espécies. No isolamento, 19,23% (5/26) foram positivos, enquanto 65,38% (17/26) dos animais foram positivos por PCR. Com base nas análises das seis sequências obtidas, houve similaridade com o Mycoplasma spp. descrito anteriormente em um píton e M. agassizii e M. testudineum encontrados em quelônios. Este é o primeiro relato de Mycoplasma spp. em animais das famílias Boidae e Viperidae. Mycoplasma spp. foi detectado em serpentes com e sem sinais clínicos. Os micoplasmas encontrados apresentaram semelhança genética com outros já descritos em répteis. Não houve relação entre a presença de Mycoplasma spp. e sinais clínicos.

RESUMO

Esse estudo foi realizado com o objetivo de verificar a associação entre micoplasmas e ácaros (Raillietia auris e R. flechtmanni) no conduto auditivo de bovinos. Foram realizadas lavagens no conduto auditivo externo de 60 bovinos abatidos no Estado do Rio de Janeiro, Brasil. Para a lavagem dos condutos auditivos foi utilizada solução salina tamponada (PBS, pH 7.2) em seringas estéreis de 60mL. Para o isolamento de micoplasmas foram utilizados pools de ácaros por animal, lavados sucessivamente em 1mL de meio Hayflick modificado. Os lavados dos ácaros foram diluídos de 10-1 até 10-5 e repicados em meio Hayflick modificado, sólido e líquido e incubados a 37°C por 48-72 horas em microaerofilia. A identificação das espécies de micoplasmas foi realizada pelo teste da imunoperoxidase indireta (IPI). Verificou-se alta prevalência de ácaros do gênero Raillietia spp. 76,7% (46/60). O parasitismo por ácaros e micoplasmas foi verificado em 40 animais (74,1%), sendo esta associação significativa (p<0,001). Dos ácaros processados para isolamento de micoplasmas, 193 foram fêmeas e 25 machos. A frequência de Mycoplasma em Raillietia spp. foi de 81,2% (177/218) (p<0.001). Das fêmeas identificadas, 52,3% (101/193) foram R. auris e 47,7% (92/193) R. flechtmanni. A frequência de Mycoplasma nas fêmeas de R. auris foi de 75,2% (76/101) e na espécie R. flechtmanni foi de 88% (81/92) (P<0.05). As espécies de micoplasmas tipificadas pela IPI nos ácaros Raillietia auris foram: M. alkalescens 6,9%, M. arginini 3,4%, M. bovirhinis 9,2%, M. conjunctivae 18,4%, M. mycoides mycoides LC 8,0%, M. capricolum 5,7%. Em R. flechtmanni as espécies de micoplasmas identificadas foram: M. alkalescens 12,2%, M. arginini 1,0%, M. bovirhinis 18,9%, M. bovis 2,2%, M. conjunctivae 21,0%, M. mycoides mycoides LC 11,0% e M. capricolum 4,4%. As espécies de micoplasmas identificadas no conduto auditivo externo dos bovinos foram as mesmas presentes nos ácaros R. auris e R. flechtmanni. Os resultados confirmam que o conduto auditivo externo de bovinos é um habitat de Mycoplasma spp., incluindo espécies potencialmente patogênicas para os rebanhos, além dos ácaros R. auris e R. flechtmanni estarem associados com esses molicutes carreando-os em seu organismo.

This study was carried out to assess the association between of mycoplasmas species with ear mites Raillietia auris and R. flechtmanni in the external ear canal of 60 bovines at slaughter time from the State of Rio de Janeiro, Brazil. Steril syringes (60ml) loaded with buffer solution (PBS, pH 7.2) were used for the ear canal flushing. Were processed 218 mites for mycoplasma isolation. A pool of mites from each sampled bovine was washed five times sucessively in 1mL of liquid modified Hayflick´s medium. The washed mites obtained were diluted up to 10-1 at 10-5, inoculated in liquid and solid Hayflick´s media and incubated at 37ºC for 2-3 days, being the plates put into jar for the obtention of microaerofilia condition. The Typical colonies were typified by the indirect imunoperoxidase test (IPI) with paper discs satured with hyperimmune rabbit sera. In the studied bovine high prevalence was verified Raillietia spp. 76.7% (46/60). The parasitism by mycoplasmas and mites was verified in 40 animals (74.1%), this association was significant (p<0.001). Among the mites processed for isolation mycoplasmas 193 were female and 25 males. The frequency of Mycoplasma in Raillietia spp. was of 81.2% (177/218) (p<0.001). Of the females identified 52.3% (101/193) were R. auris and 47.7% (92/193) were R. flechtmanni. The frequency of Mycoplasma in the females of R. auris was of 75.2% (76/101) and 88% (81/92) in R. flechtmanni (P<0.05). The mycoplasmas species typified by IPI in the Raillietia auris mites were M. alkalescens 6.9%, M. arginini 3.4%, M. bovirhinis 9.2%, M. conjunctivae 18.4%, M. mycoides mycoides LC 8.0%, M. capricolum 5.7%. In the R. flechtmanni mites mycoplasmas species typified were M. alkalescens 12.2%, M. arginini 1.0%, M. bovirhinis 18.9%, M. bovis 2.2%, M. conjunctivae 21.0%, M. mycoides mycoides LC 11.0% e M. capricolum 4.4%. The species of identified mycoplasmas in the external ear canal bovine and mites were exactly the same. The results confirm that the external ear canal cattle's ear canal is also a mycoplasmas source, including potentially pathogenic species for cattle, and these mollicutes are closely related with mites Raillietia spp. that is carrier and this agent in your organism.

Assuntos

RESUMO

Esse estudo foi realizado com o objetivo de verificar a associação entre micoplasmas e ácaros (Raillietia auris e R. flechtmanni) no conduto auditivo de bovinos. Foram realizadas lavagens no conduto auditivo externo de 60 bovinos abatidos no Estado do Rio de Janeiro, Brasil. Para a lavagem dos condutos auditivos foi utilizada solução salina tamponada (PBS, pH 7.2) em seringas estéreis de 60mL. Para o isolamento de micoplasmas foram utilizados pools de ácaros por animal, lavados sucessivamente em 1mL de meio Hayflick modificado. Os lavados dos ácaros foram diluídos de 10-1 até 10-5 e repicados em meio Hayflick modificado, sólido e líquido e incubados a 37°C por 48-72 horas em microaerofilia. A identificação das espécies de micoplasmas foi realizada pelo teste da imunoperoxidase indireta (IPI). Verificou-se alta prevalência de ácaros do gênero Raillietia spp. 76,7% (46/60). O parasitismo por ácaros e micoplasmas foi verificado em 40 animais (74,1%), sendo esta associação significativa (p<0,001). Dos ácaros processados para isolamento de micoplasmas, 193 foram fêmeas e 25 machos. A frequência de Mycoplasma em Raillietia spp. foi de 81,2% (177/218) (p<0.001). Das fêmeas identificadas, 52,3% (101/193) foram R. auris e 47,7% (92/193) R. flechtmanni. A frequência de Mycoplasma nas fêmeas de R. auris foi de 75,2% (76/101) e na espécie R. flechtmanni foi de 88% (81/92) (P<0.05). As espécies de micoplasmas tipificadas pela IPI nos ácaros Raillietia auris foram: M. alkalescens 6,9%, M. arginini 3,4%, M. bovirhinis 9,2%, M. conjunctivae 18,4%, M. mycoides mycoides LC 8,0%, M. capricolum 5,7%. Em R. flechtmanni as espécies de micoplasmas identificadas foram: M. alkalescens 12,2%, M. arginini 1,0%, M. bovirhinis 18,9%, M. bovis 2,2%, M. conjunctivae 21,0%, M. mycoides mycoides LC 11,0% e M. capricolum 4,4%. As espécies de micoplasmas identificadas no conduto auditivo externo dos bovinos foram as mesmas presentes nos ácaros R. auris e R. flechtmanni. Os resultados confirmam que o conduto auditivo externo de bovinos é um habitat de Mycoplasma spp., incluindo espécies potencialmente patogênicas para os rebanhos, além dos ácaros R. auris e R. flechtmanni estarem associados com esses molicutes carreando-os em seu organismo.(AU)

This study was carried out to assess the association between of mycoplasmas species with ear mites Raillietia auris and R. flechtmanni in the external ear canal of 60 bovines at slaughter time from the State of Rio de Janeiro, Brazil. Steril syringes (60ml) loaded with buffer solution (PBS, pH 7.2) were used for the ear canal flushing. Were processed 218 mites for mycoplasma isolation. A pool of mites from each sampled bovine was washed five times sucessively in 1mL of liquid modified Hayflick´s medium. The washed mites obtained were diluted up to 10-1 at 10-5, inoculated in liquid and solid Hayflick´s media and incubated at 37ºC for 2-3 days, being the plates put into jar for the obtention of microaerofilia condition. The Typical colonies were typified by the indirect imunoperoxidase test (IPI) with paper discs satured with hyperimmune rabbit sera. In the studied bovine high prevalence was verified Raillietia spp. 76.7% (46/60). The parasitism by mycoplasmas and mites was verified in 40 animals (74.1%), this association was significant (p<0.001). Among the mites processed for isolation mycoplasmas 193 were female and 25 males. The frequency of Mycoplasma in Raillietia spp. was of 81.2% (177/218) (p<0.001). Of the females identified 52.3% (101/193) were R. auris and 47.7% (92/193) were R. flechtmanni. The frequency of Mycoplasma in the females of R. auris was of 75.2% (76/101) and 88% (81/92) in R. flechtmanni (P<0.05). The mycoplasmas species typified by IPI in the Raillietia auris mites were M. alkalescens 6.9%, M. arginini 3.4%, M. bovirhinis 9.2%, M. conjunctivae 18.4%, M. mycoides mycoides LC 8.0%, M. capricolum 5.7%. In the R. flechtmanni mites mycoplasmas species typified were M. alkalescens 12.2%, M. arginini 1.0%, M. bovirhinis 18.9%, M. bovis 2.2%, M. conjunctivae 21.0%, M. mycoides mycoides LC 11.0% e M. capricolum 4.4%. The species of identified mycoplasmas in the external ear canal bovine and mites were exactly the same. The results confirm that the external ear canal cattle's ear canal is also a mycoplasmas source, including potentially pathogenic species for cattle, and these mollicutes are closely related with mites Raillietia spp. that is carrier and this agent in your organism.(AU)

Assuntos

RESUMO

This study was carried out to assess the association between of mycoplasmas species with ear mites Raillietia auris and R. flechtmanni in the external ear canal of 60 bovines at slaughter time from the State of Rio de Janeiro, Brazil. Steril syringes (60ml) loaded with buffer solution (PBS, pH 7.2) were used for the ear canal flushing. Were processed 218 mites for mycoplasma isolation. A pool of mites from each sampled bovine was washed five times sucessively in 1mL of liquid modified Hayflick´s medium. The washed mites obtained were diluted up to 10-1 at 10-5, inoculated in liquid and solid Hayflick´s media and incubated at 37ºC for 2-3 days, being the plates put into jar for the obtention of microaerofilia condition. The Typical colonies were typified by the indirect imunoperoxidase test (IPI) with paper discs satured with hyperimmune rabbit sera. In the studied bovine high prevalence was verified Raillietia spp. 76.7% (46/60). The parasitism by mycoplasmas and mites was verified in 40 animals (74.1%), this association was significant (p 0.001). Among the mites processed for isolation mycoplasmas 193 were female and 25 males. The frequency of Mycoplasma in Raillietia spp. was of 81.2% (177/218) (p 0.001). Of the females identified 52.3% (101/193) were R. auris and 47.7% (92/193) were R. flechtmanni. The frequency of Mycoplasma in the females of R. auris was of 75.2% (76/101) and 88% (81/92) in R. flechtmanni (P 0.05). The mycoplasmas species typified by IPI in the Raillietia auris mites were M. alkalescens 6.9%, M. arginini 3.4%, M. bovirhinis 9.2%, M. conjunctivae 18.4%, M. mycoides mycoides LC 8.0%, M. capricolum 5.7%. In the R. flechtmanni mites mycoplasmas species typified were M. alkalescens 12.2%, M. arginini 1.0%, M. bovirhinis 18.9%, M. bovis 2.2%, M. conjunctivae 21.0%, M. mycoides mycoides LC 11.0% e M. capricolum 4.4%. The species of identified mycoplasmas in the external ear canal bovine and mites were exactly the same. The results confirm that the external ear canal cattle's ear canal is also a mycoplasmas source, including potentially pathogenic species for cattle, and these mollicutes are closely related with mites Raillietia spp. that is carrier and this agent in your organism.

Esse estudo foi realizado com o objetivo de verificar a associação entre micoplasmas e ácaros (Raillietia auris e R. flechtmanni) no conduto auditivo de bovinos. Foram realizadas lavagens no conduto auditivo externo de 60 bovinos abatidos no Estado do Rio de Janeiro, Brasil. Para a lavagem dos condutos auditivos foi utilizada solução salina tamponada (PBS, pH 7.2) em seringas estéreis de 60mL. Para o isolamento de micoplasmas foram utilizados pools de ácaros por animal, lavados sucessivamente em 1mL de meio Hayflick modificado. Os lavados dos ácaros foram diluídos de 10-1 até 10-5 e repicados em meio Hayflick modificado, sólido e líquido e incubados a 37°C por 48-72 horas em microaerofilia. A identificação das espécies de micoplasmas foi realizada pelo teste da imunoperoxidase indireta (IPI). Verificou-se alta prevalência de ácaros do gênero Raillietia spp. 76,7% (46/60). O parasitismo por ácaros e micoplasmas foi verificado em 40 animais (74,1%), sendo esta associação significativa (p 0,001). Dos ácaros processados para isolamento de micoplasmas, 193 foram fêmeas e 25 machos. A frequência de Mycoplasma em Raillietia spp. foi de 81,2% (177/218) (p 0.001). Das fêmeas identificadas, 52,3% (101/193) foram R. auris e 47,7% (92/193) R. flechtmanni. A frequência de Mycoplasma nas fêmeas de R. auris foi de 75,2% (76/101) e na espécie R. flechtmanni foi de 88% (81/92) (P 0.05). As espécies de micoplasmas tipificadas pela IPI nos ácaros Raillietia auris foram: M. alkalescens 6,9%, M. arginini 3,4%, M. bovirhinis 9,2%, M. conjunctivae 18,4%, M. mycoides mycoides LC 8,0%, M. capricolum 5,7%. Em R. flechtmanni as espécies de micoplasmas identificadas foram: M. alkalescens 12,2%, M. arginini 1,0%, M. bovirhinis 18,9%, M. bovis 2,2%, M. conjunctivae 21,0%, M. mycoides mycoides LC 11,0% e M. capricolum 4,4%. As espécies de micoplasmas identificadas no conduto auditivo externo dos bovinos foram as mesmas presentes nos ácaros R. auris e R. flechtmanni. Os resultados confirmam que o conduto auditivo externo de bovinos é um habitat de Mycoplasma spp., incluindo espécies potencialmente patogênicas para os rebanhos, além dos ácaros R. auris e R. flechtmanni estarem associados com esses molicutes carreando-os em seu organismo.

RESUMO

As a step of a doctoral research project, in this study a live-type nosode was prepared from microorganism Mycoplasmagallisepticum strain R (ATCC 93-08/19610) according to Costa model and the rules by Brazilian Homeopathic Pharmacopoeia. Live nosode was tested in vitro to assess safety when used to immunize domestic fowl (Gallus gallus) against infection by this microorganism and to investigate its behavior under laboratory conditions. M. gallisepticum was not shown to grow in fluid (broth) and solid (plate) modified Frey medium with dilutions 11d, 12d, 20d and 30d. Inhibition halos about 2.0 mm were observed around paper disks impregnated with live-type nosode in microorganism-sown Petri dishes, whereas disks impregnated with conventional antibiotic oxytetracycline exhibited 8.0 mm inhibition halos. Protein assessment by Folin-Lowry method showed protein absence in dilutions 12d and 30d and neither microbial DNA traces were found in PCR assay in dilutions 12d, 20d and 30d.

Una etapa de un proyecto de doctorado, en este estudio fue preparado un nosode vivo del microorganismo Mycoplasmagallisepticumcepa R (ATCC 93-08/19610) según el modelo de Costa y las normas de la Farmacopea Homeopática Brasileña. El nosode vivo fue testeado in vitro para determinar su seguridad cuando utilizado para inmunizar aves domésticas (Gallus gallus) contra la infección por este microorganismo e investigar su conducta en condiciones de laboratorio. Fue observado que M. gallisepticum no creció en medio modificado de Frey líquido (caldo) y sólido (placa) con las diluciones 11d, 12d, 20d y 30d. Fueron observados halos de inhibición de aproximadamente 2,0 mm alrededor de discos de papel impregnados con el nosode vivo en placas de Petri sembradas con el microorganismo, mientras fueron observados halos de inhibición de 8,0 mm en los discos impregnados con el antibiótico convencional oxitetraciclina. La medición de proteínas mediante el método de Folin-Lowry evidenció ausencia de proteínas con las diluciones 12d y 30d y ausencia de vestigios de DNA microbiano por PCR con las diluciones 12d, 20d y 30d.

Como parte do experimento de uma tese de doutorado, um bioterápico do tipo nosódio vivo utilizando o microrganismo Mycoplasmagallisepticum estirpe R (ATCC 93-08/19610) foi preparado de acordo com o paradigma desenvolvido por Costa, observando as normas da Farmacopeia Homeopática Brasileira. O nosódio vivo foi testado in vitro com a finalidade de avaliar a segurança de sua utilização para imunizar galinhas domésticas (Gallus gallus) contra a infecção pelo microrganismo M.gallisepticum, e também conhecer seu comportamento sob condições de laboratório. Não houve crescimento de M. gallisepticum no cultivo em meio de Frey modificado líquido (caldo) e sólido (placa) das diluições 11d, 12d, 20d e 30d, enquanto que as diluições 1d e 10d mostraram crescimento do microrganismo. Foram observados halos de inibição de cerca de 2,0 mm em torno de discos de papel impregnados com o nosódio vivo em placas de Petri cultivadas com o microrganismo, enquanto os discos impregnados com o antimicrobiano convencional oxitetraciclina apresentaram halos de inibição de 8,0 mm. A dosagem de proteína pelo método de Folin-Lowry identificou a ausência de proteínas nas diluições 12d e 30d, assim como também não foram encontrados traços de DNA microbiano na prova de PCR para as diluições 12d, 20d e 30d.

Assuntos

RESUMO

As a step of a doctoral research project, in this study a live-type nosode was prepared from microorganism Mycoplasmagallisepticum strain R (ATCC 93-08/19610) according to Costa model and the rules by Brazilian Homeopathic Pharmacopoeia. Live nosode was tested in vitro to assess safety when used to immunize domestic fowl (Gallus gallus) against infection by this microorganism and to investigate its behavior under laboratory conditions. M. gallisepticum was not shown to grow in fluid (broth) and solid (plate) modified Frey medium with dilutions 11d, 12d, 20d and 30d. Inhibition halos about 2.0 mm were observed around paper disks impregnated with live-type nosode in microorganism-sown Petri dishes, whereas disks impregnated with conventional antibiotic oxytetracycline exhibited 8.0 mm inhibition halos. Protein assessment by Folin-Lowry method showed protein absence in dilutions 12d and 30d and neither microbial DNA traces were found in PCR assay in dilutions 12d, 20d and 30d.(AU)

Una etapa de un proyecto de doctorado, en este estudio fue preparado un nosode vivo del microorganismo Mycoplasmagallisepticumcepa R (ATCC 93-08/19610) según el modelo de Costa y las normas de la Farmacopea Homeopática Brasileña. El nosode vivo fue testeado in vitro para determinar su seguridad cuando utilizado para inmunizar aves domésticas (Gallus gallus) contra la infección por este microorganismo e investigar su conducta en condiciones de laboratorio. Fue observado que M. gallisepticum no creció en medio modificado de Frey líquido (caldo) y sólido (placa) con las diluciones 11d, 12d, 20d y 30d. Fueron observados halos de inhibición de aproximadamente 2,0 mm alrededor de discos de papel impregnados con el nosode vivo en placas de Petri sembradas con el microorganismo, mientras fueron observados halos de inhibición de 8,0 mm en los discos impregnados con el antibiótico convencional oxitetraciclina. La medición de proteínas mediante el método de Folin-Lowry evidenció ausencia de proteínas con las diluciones 12d y 30d y ausencia de vestigios de DNA microbiano por PCR con las diluciones 12d, 20d y 30d.(AU)

Como parte do experimento de uma tese de doutorado, um bioterápico do tipo nosódio vivo utilizando o microrganismo Mycoplasmagallisepticum estirpe R (ATCC 93-08/19610) foi preparado de acordo com o paradigma desenvolvido por Costa, observando as normas da Farmacopeia Homeopática Brasileira. O nosódio vivo foi testado in vitro com a finalidade de avaliar a segurança de sua utilização para imunizar galinhas domésticas (Gallus gallus) contra a infecção pelo microrganismo M.gallisepticum, e também conhecer seu comportamento sob condições de laboratório. Não houve crescimento de M. gallisepticum no cultivo em meio de Frey modificado líquido (caldo) e sólido (placa) das diluições 11d, 12d, 20d e 30d, enquanto que as diluições 1d e 10d mostraram crescimento do microrganismo. Foram observados halos de inibição de cerca de 2,0 mm em torno de discos de papel impregnados com o nosódio vivo em placas de Petri cultivadas com o microrganismo, enquanto os discos impregnados com o antimicrobiano convencional oxitetraciclina apresentaram halos de inibição de 8,0 mm. A dosagem de proteína pelo método de Folin-Lowry identificou a ausência de proteínas nas diluições 12d e 30d, assim como também não foram encontrados traços de DNA microbiano na prova de PCR para as diluições 12d, 20d e 30d.(AU)

Assuntos

RESUMO

As a step of a doctoral research project, in this study a live-type nosode was prepared from microorganism Mycoplasmagallisepticum strain R (ATCC 93-08/19610) according to Costa model and the rules by Brazilian Homeopathic Pharmacopoeia. Live nosode was tested in vitro to assess safety when used to immunize domestic fowl (Gallus gallus) against infection by this microorganism and to investigate its behavior under laboratory conditions. M. gallisepticum was not shown to grow in fluid (broth) and solid (plate) modified Frey medium with dilutions 11d, 12d, 20d and 30d. Inhibition halos about 2.0 mm were observed around paper disks impregnated with live-type nosode in microorganism-sown Petri dishes, whereas disks impregnated with conventional antibiotic oxytetracycline exhibited 8.0 mm inhibition halos. Protein assessment by Folin-Lowry method showed protein absence in dilutions 12d and 30d and neither microbial DNA traces were found in PCR assay in dilutions 12d, 20d and 30d.(AU)

Una etapa de un proyecto de doctorado, en este estudio fue preparado un nosode vivo del microorganismo Mycoplasmagallisepticumcepa R (ATCC 93-08/19610) según el modelo de Costa y las normas de la Farmacopea Homeopática Brasileña. El nosode vivo fue testeado in vitro para determinar su seguridad cuando utilizado para inmunizar aves domésticas (Gallus gallus) contra la infección por este microorganismo e investigar su conducta en condiciones de laboratorio. Fue observado que M. gallisepticum no creció en medio modificado de Frey líquido (caldo) y sólido (placa) con las diluciones 11d, 12d, 20d y 30d. Fueron observados halos de inhibición de aproximadamente 2,0 mm alrededor de discos de papel impregnados con el nosode vivo en placas de Petri sembradas con el microorganismo, mientras fueron observados halos de inhibición de 8,0 mm en los discos impregnados con el antibiótico convencional oxitetraciclina. La medición de proteínas mediante el método de Folin-Lowry evidenció ausencia de proteínas con las diluciones 12d y 30d y ausencia de vestigios de DNA microbiano por PCR con las diluciones 12d, 20d y 30d.(AU)

Como parte do experimento de uma tese de doutorado, um bioterápico do tipo nosódio vivo utilizando o microrganismo Mycoplasmagallisepticum estirpe R (ATCC 93-08/19610) foi preparado de acordo com o paradigma desenvolvido por Costa, observando as normas da Farmacopeia Homeopática Brasileira. O nosódio vivo foi testado in vitro com a finalidade de avaliar a segurança de sua utilização para imunizar galinhas domésticas (Gallus gallus) contra a infecção pelo microrganismo M.gallisepticum, e também conhecer seu comportamento sob condições de laboratório. Não houve crescimento de M. gallisepticum no cultivo em meio de Frey modificado líquido (caldo) e sólido (placa) das diluições 11d, 12d, 20d e 30d, enquanto que as diluições 1d e 10d mostraram crescimento do microrganismo. Foram observados halos de inibição de cerca de 2,0 mm em torno de discos de papel impregnados com o nosódio vivo em placas de Petri cultivadas com o microrganismo, enquanto os discos impregnados com o antimicrobiano convencional oxitetraciclina apresentaram halos de inibição de 8,0 mm. A dosagem de proteína pelo método de Folin-Lowry identificou a ausência de proteínas nas diluições 12d e 30d, assim como também não foram encontrados traços de DNA microbiano na prova de PCR para as diluições 12d, 20d e 30d.(AU)

Assuntos

RESUMO

O Grupo Mycoplasma mycoides (GMM) foi diagnosticado por PCR-REA e imunoperoxidase indireta (IPI) em amostras de lavados de conduto auditivo de bovinos no Estado do Rio de Janeiro, Brasil. 60 bovinos foram selecionados aleatoriamente. As lavagens foram feitas com uso de seringas estéreis contendo um volume de 60 mL de solução salina tamponada (PBS pH 7.2). As amostras obtidas foram estocadas em glicerol (1:2) e congeladas a 20ºC até uso. Estas amostras foram diluídas até 10-5 e repicadas em meio Hayflick modificado, sólido e líquido, sendo incubados a 37ºC por 48-72 horas. As placas foram mantidas em microaerofilia e observadas diariamente, para visualização das colônias típicas em ôovo-fritoõ. Das 60 amostras cultivadas, 48 (80,00 por cento) foram positivas para Mycoplasma spp. A prevalência obtida para o GMM na IPI foi de 20,0 por cento (12/60) enquanto na PCR-REA foi de 41,7 por cento (25/60). Das cepas tipificadas pela IPI 58,3 por cento (7/12) foram M. mycoides subsp. mycoides LC e 41,7 por cento (5/12) foram M. capricolum. Na PCR-REA o grupo M. mycoides foi confirmado pela visualização de um amplicon de 785bp, compatível com este grupo. O valor encontrado no teste Kappa para associação entre estes testes foi de 0,14 (P>0,05. Na clivagem do produto da PCR com a enzima de restrição AluI, de cepas de referências e dos isolados de ouvido os fragmentos obtidos foram de 81, 98, 186 e 236pb, mas não de 370pb, que é específica para o agente da Pleuropneumonia Contagiosa Bovina. A presença de espécies de micoplasmas no conduto auditivo de bovinos assintomáticos representa um risco para propagação de Mycoplasma spp. entre rebanhos bovinos no Brasil.

Mycoplasma mycoides cluster (MMC) was diagnosed by polimerase chain reaction-restriction endonuclease analysis (PCR-REA) and indirect immunoperoxidase (IPI), both, carried out in flushing from external ear canal, collected from bovine at slaughter time in the State of Rio de Janeiro, southeastern, Brazil. A total of 60 bovines were randomly selected. Sterile syringes (60mL) loaded with buffer solution (PBS, pH 7.2) were used for the ear canal flushing. The obtained samples were stored in glycerol (1:2) and frozen at -20ºC until use. These specimens were diluted up to 10-5, inoculated in liquid and solid modified Hayflickïs media and incubated at 37ºC for 2-3 days. The plates were kept in a microaerophilia condition and examined every two days under a stereomicroscope for the presence of typical colonies ôfried-eggõ. In this study, 35 strains selected in agreement with their biochemistry and physiologic proprieties, were used. From the 60 cultivated samples, 48 (80.00 percent) were positive for Mycoplasma spp. Under IPI the prevalence obtained for MMC was 20.0 percent (12/60) while by PCR-REA it was 41.7 percent (25/60). The IPI typing of these isolates resulted in 58.3 percent (7/12) for M.mycoides mycoides LC and 41.7 percent (5/12) for M. capricolum. PCR-REA for MMC was confirmed by the amplicon size of 785bp, compatible with this group. The Kappa value for the association between these two tests was 0.14 (p>0.05). After restriction analysis with AluI in all MMC strains the fragments size obtained were of 81, 98, 186 and 236bp, but not of 370bp that is compatible with Mycoides mycoides mycoides SC of bovine type. The presence of mycoplasmas species in the ear canal of asymptomatic bovines represent a risk of subsequent propagation of Mycoplasma spp. among bovine herds in Brazil.

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RESUMO

O Grupo Mycoplasma mycoides (GMM) foi diagnosticado por PCR-REA e imunoperoxidase indireta (IPI) em amostras de lavados de conduto auditivo de bovinos no Estado do Rio de Janeiro, Brasil. 60 bovinos foram selecionados aleatoriamente. As lavagens foram feitas com uso de seringas estéreis contendo um volume de 60 mL de solução salina tamponada (PBS pH 7.2). As amostras obtidas foram estocadas em glicerol (1:2) e congeladas a 20ºC até uso. Estas amostras foram diluídas até 10-5 e repicadas em meio Hayflick modificado, sólido e líquido, sendo incubados a 37ºC por 48-72 horas. As placas foram mantidas em microaerofilia e observadas diariamente, para visualização das colônias típicas em ôovo-fritoõ. Das 60 amostras cultivadas, 48 (80,00 por cento) foram positivas para Mycoplasma spp. A prevalência obtida para o GMM na IPI foi de 20,0 por cento (12/60) enquanto na PCR-REA foi de 41,7 por cento (25/60). Das cepas tipificadas pela IPI 58,3 por cento (7/12) foram M. mycoides subsp. mycoides LC e 41,7 por cento (5/12) foram M. capricolum. Na PCR-REA o grupo M. mycoides foi confirmado pela visualização de um amplicon de 785bp, compatível com este grupo. O valor encontrado no teste Kappa para associação entre estes testes foi de 0,14 (P>0,05. Na clivagem do produto da PCR com a enzima de restrição AluI, de cepas de referências e dos isolados de ouvido os fragmentos obtidos foram de 81, 98, 186 e 236pb, mas não de 370pb, que é específica para o agente da Pleuropneumonia Contagiosa Bovina. A presença de espécies de micoplasmas no conduto auditivo de bovinos assintomáticos representa um risco para propagação de Mycoplasma spp. entre rebanhos bovinos no Brasil.(AU)

Mycoplasma mycoides cluster (MMC) was diagnosed by polimerase chain reaction-restriction endonuclease analysis (PCR-REA) and indirect immunoperoxidase (IPI), both, carried out in flushing from external ear canal, collected from bovine at slaughter time in the State of Rio de Janeiro, southeastern, Brazil. A total of 60 bovines were randomly selected. Sterile syringes (60mL) loaded with buffer solution (PBS, pH 7.2) were used for the ear canal flushing. The obtained samples were stored in glycerol (1:2) and frozen at -20ºC until use. These specimens were diluted up to 10-5, inoculated in liquid and solid modified Hayflickïs media and incubated at 37ºC for 2-3 days. The plates were kept in a microaerophilia condition and examined every two days under a stereomicroscope for the presence of typical colonies ôfried-eggõ. In this study, 35 strains selected in agreement with their biochemistry and physiologic proprieties, were used. From the 60 cultivated samples, 48 (80.00 percent) were positive for Mycoplasma spp. Under IPI the prevalence obtained for MMC was 20.0 percent (12/60) while by PCR-REA it was 41.7 percent (25/60). The IPI typing of these isolates resulted in 58.3 percent (7/12) for M.mycoides mycoides LC and 41.7 percent (5/12) for M. capricolum. PCR-REA for MMC was confirmed by the amplicon size of 785bp, compatible with this group. The Kappa value for the association between these two tests was 0.14 (p>0.05). After restriction analysis with AluI in all MMC strains the fragments size obtained were of 81, 98, 186 and 236bp, but not of 370bp that is compatible with Mycoides mycoides mycoides SC of bovine type. The presence of mycoplasmas species in the ear canal of asymptomatic bovines represent a risk of subsequent propagation of Mycoplasma spp. among bovine herds in Brazil.(AU)

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