RESUMO

Properdin (P) is a positive regulatory protein that stabilizes the C3 convertase and C5 convertase of the complement alternative pathway (AP). Several studies have suggested that properdin can bind directly to the surface of certain pathogens regardless of the presence of C3bBb. Saprophytic Leptospira are susceptible to complement-mediated killing, but the interaction of properdin with Leptospira spp. has not been evaluated so far. In this work, we demonstrate that properdin present in normal human serum, purified properdin, as well as properdin oligomers P2, P3, and P4, interact with Leptospira. Properdin can bind directly to the bacterial surface even in the absence of C3b. In line with our previous findings, AP activation was shown to be important for killing non-pathogenic L. biflexa, and properdin plays a key role in this process since this microorganism survives in P-depleted human serum and the addition of purified properdin to P-depleted human serum decreases the number of viable leptospires. A panel of pathogenic L.interrogans recombinant proteins was used to identify putative properdin targets. Lsa30, an outer membrane protein from L. interrogans, binds to unfractionated properdin and to a lesser extent to P2-P4 properdin oligomers. In conclusion, properdin plays an important role in limiting bacterial proliferation of non-pathogenic Leptospira species. Once bound to the leptospiral surface, this positive complement regulatory protein of the AP contributes to the formation of the C3 convertase on the leptospire surface even in the absence of prior addition of C3b.

Assuntos

RESUMO

The aims of the study were to determine the seroprevalence of leishmaniasis and Chagas disease, and to determine the risk factors associated with seropositivity in dogs in the tourist city of Ibiúna, São Paulo, Brazil. A total of 570 blood samples of dogs were collected from four regions in the 48 districts of the municipality, from September 2007 to March 2008, and submitted for serological examination. Laboratory diagnosis of leishmaniasis and Chagas disease was performed using indirect enzyme-linked immunosorbent assay and indirect immunofluorescence, respectively. Of the 570 animals examined, 13 (2.3%; 95% confidence interval [CI] = 1.2%-3.8%) were seropositive for leishmaniasis, and 35 (6.1%; 95% CI = 4.3%-8.3%) were seropositive for Chagas disease. A risk factor associated with seropositivity for Chagas disease in dogs was residence in a region with a predominance of small farms generally used for subsistence planting and leisure and surrounded by forest areas (odds ratio = 4.20). By contrast, there were no risk factors identified for leishmaniasis, leading us to conclude that leishmaniasis and Chagas disease are present in dogs in the tourist city of Ibiúna, São Paulo; however, additional studies are needed in order to fully define the risk factors associated with disease in this municipality.

O objetivo do trabalho foi determinar a soroprevalência de leishmaniose e doença de Chagas, e determinar os fatores de risco associados com a soropositividade em cães da Estância Turística de Ibiúna, Estado de São Paulo, Brasil. Foram colhidas amostras de sangue de 570 cães distribuídos em quatro regiões nos 48 bairros do município, no período de setembro de 2007 a março de 2008 e submetidas a exame sorológico. O diagnóstico laboratorial da leishmaniose e da doença de Chagas foi efetuado com o teste de ELISA e com a reação de imunofluorescência indireta (RIFI), respectivamente. Dos 570 animais examinados, 13 (2,3%; IC 95% = 1,2% - 3,8%) foram soropositivos para leishmaniose, e 35 (6,1%; IC 95% = 4,3% - 8,3%) para doença de Chagas. As variáveis alimentação com comida caseira (OR = 5,28) e o animal ser procedente da região 4 (OR= 4,20) foram identificadas como fatores de risco associados à soropositividade para doença de Chagas, no entanto, não foram identificados fatores de risco para leishmaniose. Conclui-se que a leishmaniose e a doença de Chagas estão presentes em cães da Estância Turística de Ibiúna, São Paulo, e com base na análise de fatores de risco, recomenda-se evitar a administração de comida caseira aos cães.

RESUMO

The aims of the study were to determine the seroprevalence of leishmaniasis and Chagas disease, and to determine the risk factors associated with seropositivity in dogs in the tourist city of Ibiúna, São Paulo, Brazil. A total of 570 blood samples of dogs were collected from four regions in the 48 districts of the municipality, from September 2007 to March 2008, and submitted for serological examination. Laboratory diagnosis of leishmaniasis and Chagas disease was performed using indirect enzyme-linked immunosorbent assay and indirect immunofluorescence, respectively. Of the 570 animals examined, 13 (2.3%; 95% confidence interval [CI] = 1.2%-3.8%) were seropositive for leishmaniasis, and 35 (6.1%; 95% CI = 4.3%-8.3%) were seropositive for Chagas disease. A risk factor associated with seropositivity for Chagas disease in dogs was residence in a region with a predominance of small farms generally used for subsistence planting and leisure and surrounded by forest areas (odds ratio = 4.20). By contrast, there were no risk factors identified for leishmaniasis, leading us to conclude that leishmaniasis and Chagas disease are present in dogs in the tourist city of Ibiúna, São Paulo; however, additional studies are needed in order to fully define the risk factors associated with disease in this municipality.

O objetivo do trabalho foi determinar a soroprevalência de leishmaniose e doença de Chagas, e determinar os fatores de risco associados com a soropositividade em cães da Estância Turística de Ibiúna, Estado de São Paulo, Brasil. Foram colhidas amostras de sangue de 570 cães distribuídos em quatro regiões nos 48 bairros do município, no período de setembro de 2007 a março de 2008 e submetidas a exame sorológico. O diagnóstico laboratorial da leishmaniose e da doença de Chagas foi efetuado com o teste de ELISA e com a reação de imunofluorescência indireta (RIFI), respectivamente. Dos 570 animais examinados, 13 (2,3%; IC 95% = 1,2% - 3,8%) foram soropositivos para leishmaniose, e 35 (6,1%; IC 95% = 4,3% - 8,3%) para doença de Chagas. As variáveis alimentação com comida caseira (OR = 5,28) e o animal ser procedente da região 4 (OR= 4,20) foram identificadas como fatores de risco associados à soropositividade para doença de Chagas, no entanto, não foram identificados fatores de risco para leishmaniose. Conclui-se que a leishmaniose e a doença de Chagas estão presentes em cães da Estância Turística de Ibiúna, São Paulo, e com base na análise de fatores de risco, recomenda-se evitar a administração de comida caseira aos cães.

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Procurando atender ao objetivo de manter a regularidade da periodicidade do Brazilian Journal of Veterinary Research and Animal Science (BJVRAS), estamos lançando o segundo fascículo de 2015. Neste número, houve o predomínio de artigos da área de Reprodução Animal, que conta com uma revisão sobre a eficiência placentária na espécie equina, dois trabalhos analisando aspectos do sêmen: perfil oxidativo de sêmen bovino criopreservado em diferentes estações do ano e criopreservação do sêmen de quatis; além de uma investigação sobre a influência da temperatura de transporte de ovários na viabilidade de oócitos caninos coletados em diferentes estágios do ciclo estral. Na área de Cirurgia Veterinária, é investigada a contração de feridas. Na área de Clínica Veterinária, foi analisado o eletrocardiograma de cães tratados com solução oftálmica de maleato de timolol 0,5%. Na área de Medicina Veterinária Preventiva, é apresentado um trabalho que investigou a ocorrência de toxoplasmose e neosporose em cães da cidade de Natal, Rio Grande do Norte. A área de Patologia Veterinária conta com um trabalho efetuado em modelo experimental que investiga a carcinogênese química em camundongos BALB-C. Finalmente, na área de Nutrição e Produção Animal é apresentada uma investigação da reatividade de equinos à presença de estímulos sonoros.Desejamos uma boa leitura a todos.Prof. Dr. Silvio Arruda Vasco

Procurando atender ao objetivo de manter a regularidade da periodicidade do Brazilian Journal of Veterinary Research and Animal Science (BJVRAS), estamos lançando o segundo fascículo de 2015. Neste número, houve o predomínio de artigos da área de Reprodução Animal, que conta com uma revisão sobre a eficiência placentária na espécie equina, dois trabalhos analisando aspectos do sêmen: perfil oxidativo de sêmen bovino criopreservado em diferentes estações do ano e criopreservação do sêmen de quatis; além de uma investigação sobre a influência da temperatura de transporte de ovários na viabilidade de oócitos caninos coletados em diferentes estágios do ciclo estral. Na área de Cirurgia Veterinária, é investigada a contração de feridas. Na área de Clínica Veterinária, foi analisado o eletrocardiograma de cães tratados com solução oftálmica de maleato de timolol 0,5%. Na área de Medicina Veterinária Preventiva, é apresentado um trabalho que investigou a ocorrência de toxoplasmose e neosporose em cães da cidade de Natal, Rio Grande do Norte. A área de Patologia Veterinária conta com um trabalho efetuado em modelo experimental que investiga a carcinogênese química em camundongos BALB-C. Finalmente, na área de Nutrição e Produção Animal é apresentada uma investigação da reatividade de equinos à presença de estímulos sonoros. Desejamos uma boa leitura a todos.Prof. Dr. Silvio Arruda Vasc

RESUMO

Procurando atender ao objetivo de manter a regularidade da periodicidade do Brazilian Journal of Veterinary Research and Animal Science (BJVRAS), estamos lançando o segundo fascículo de 2015. Neste número, houve o predomínio de artigos da área de Reprodução Animal, que conta com uma revisão sobre a eficiência placentária na espécie equina, dois trabalhos analisando aspectos do sêmen: perfil oxidativo de sêmen bovino criopreservado em diferentes estações do ano e criopreservação do sêmen de quatis; além de uma investigação sobre a influência da temperatura de transporte de ovários na viabilidade de oócitos caninos coletados em diferentes estágios do ciclo estral. Na área de Cirurgia Veterinária, é investigada a contração de feridas. Na área de Clínica Veterinária, foi analisado o eletrocardiograma de cães tratados com solução oftálmica de maleato de timolol 0,5%. Na área de Medicina Veterinária Preventiva, é apresentado um trabalho que investigou a ocorrência de toxoplasmose e neosporose em cães da cidade de Natal, Rio Grande do Norte. A área de Patologia Veterinária conta com um trabalho efetuado em modelo experimental que investiga a carcinogênese química em camundongos BALB-C. Finalmente, na área de Nutrição e Produção Animal é apresentada uma investigação da reatividade de equinos à presença de estímulos sonoros.Desejamos uma boa leitura a todos.Prof. Dr. Silvio Arruda Vasco

Procurando atender ao objetivo de manter a regularidade da periodicidade do Brazilian Journal of Veterinary Research and Animal Science (BJVRAS), estamos lançando o segundo fascículo de 2015. Neste número, houve o predomínio de artigos da área de Reprodução Animal, que conta com uma revisão sobre a eficiência placentária na espécie equina, dois trabalhos analisando aspectos do sêmen: perfil oxidativo de sêmen bovino criopreservado em diferentes estações do ano e criopreservação do sêmen de quatis; além de uma investigação sobre a influência da temperatura de transporte de ovários na viabilidade de oócitos caninos coletados em diferentes estágios do ciclo estral. Na área de Cirurgia Veterinária, é investigada a contração de feridas. Na área de Clínica Veterinária, foi analisado o eletrocardiograma de cães tratados com solução oftálmica de maleato de timolol 0,5%. Na área de Medicina Veterinária Preventiva, é apresentado um trabalho que investigou a ocorrência de toxoplasmose e neosporose em cães da cidade de Natal, Rio Grande do Norte. A área de Patologia Veterinária conta com um trabalho efetuado em modelo experimental que investiga a carcinogênese química em camundongos BALB-C. Finalmente, na área de Nutrição e Produção Animal é apresentada uma investigação da reatividade de equinos à presença de estímulos sonoros. Desejamos uma boa leitura a todos.Prof. Dr. Silvio Arruda Vasc

RESUMO

The aim of this work was to isolate and characterize microorganisms in hypertrophied lymph nodes or gross lesions suggestive of tuberculosis collected from 12 goats and 28 sheep slaughtered at the public slaughterhouse of Patos municipality, Paraíba State, in the Northeast region of Brazil. The identification of mycobacteria was performed by the PRA method (PCR-Restriction Enzyme Analysis). Histopathological examination of lesions was also performed. Organs affected were liver, lung, mammary gland, bladder and mediastinal, mesenteric, submandibular, parotid, popliteal, precrural, prescapular and superficial inguinal lymph nodes. Histopathological examination showed the presence of granulomas in 8 (20.00%) animals. Of the 12 goats, 1 (8.33%) was positive in the culture of mycobacteria, and by PRA method the isolate was classified as belonging to the M. tuberculosis complex. Two (7.14%) sheep were positive for the presence of environmental mycobacteria. There was isolation of Corynebacterium pseudotuberculosis in 8 (66.66%) goats and 17 (60.71%) sheep, and simultaneous isolation of mycobacteria and C. pseudotuberculosis in 1 (8.33%) goat and 1 (3.57%) sheep. The isolation of mycobacteria of the M. tuberculosis complex in goats in this study raises concerns of public health, as professionals involved in handling these animals and the meat and milk consumers are exposed to the risk of infection.

O objetivo do presente trabalho foi isolar e tipificar micro-organismos presentes em linfonodos hipertrofiados ou lesões macroscópicas sugestivas de tuberculose colhidos de 12 caprinos e 28 ovinos abatidos no matadouro público do município de Patos, Paraíba. A identificação de micobactérias foi feita com o método PRA (PCR-Restriction Enzyme Analysis). Também foi realizado o exame histopatológico das lesões. Os órgãos afetados foram fígado, pulmão, glândula mamária, bexiga e linfonodos mediastínicos, mesentéricos, submandibulares, parotídeos, poplíteos, pré-crural, pré-escapular e inguinal superficial. O exame histopatológico apontou a presença de granulomas em 8 (20,00%) animais. Dos 12 caprinos, 1 (8,33%) foi positivo no cultivo de micobactérias, e pelo método PRA o isolado foi classificado como pertencente ao complexo M. tuberculosis. Dois (7,14%) ovinos foram positivos para a presença de micobactérias ambientais. Houve isolamento de Corynebacterium pseudotuberculosis em 8 (66,66%) caprinos e em 17 (60,71%) ovinos, e isolamento simultâneo de micobactérias e C. pseudotuberculosis em 1 (8,33%) caprino e 1 (3,57%) ovino. O isolamento de micobactéria do complexo M. tuberculosis em caprinos no presente trabalho levanta preocupações do ponto de vista de saúde pública, uma vez que profissionais envolvidos na manipulação destes animais, bem como a população consumidora de carne e leite, estão expostos ao risco de infecção.

RESUMO

To determine the presence of Brucella ovis in ovine from Paraíba State, in the Northeast region of Brazil, 80 animals slaughtered in the public slaughterhouse of Patos city were used. Before slaughter, blood samples were collected by jugular venopuncture from each animal, and after slaughter, testicles, epidydimus and uterus were aseptically collected. For the serological diagnosis of B. ovis and B. abortus infections, the agar gel immunodiffusion (AGID) and Rose Bengal (RBT) tests were carried out, respectively. In addition, microbiological culture and polymerase chain reaction (PCR) were performed on testicle, epidydimus and uterus samples. Six animals (7.5%) tested positive for the presence of B. ovis antibodies and all animals tested negative for the presence of B. abortus antibodies. One AGID-positive animal tested positive at uterine swab culture. PCR was able to amplify DNA of Brucella spp. from the pool of testicle, epidydimus and uterus samples from AGID-positive animals. This is the first report of isolation and detection of B. ovis DNA by PCR in ovine from the Northeast region of Brazil.

RESUMO

The aim of this research was to determine the occurrence of anti Brucella abortus, anti B. canis and anti Leptospira spp. antibodies in foxes (Pseudalopex vetulus). Sixty road-killed wild foxes from semi-arid of Paraiba state, Northeastern region of Brazil, were used. For the detection of anti B. abortus antibodies, the buffered plate agglutination test (BPAT) was applied as a screening method and the 2-mercaptoethanol test as a confirmatory method. For serological diagnosis of infections by B. canis and Leptospira spp., the agar gel immunodiffusion test (AGID) and the microscopic agglutination test (MAT) were used, respectively. All samples were negative for anti B. canis and anti Leptospira spp. antibodies. Of the 60 foxes tested, 16 (26.6 %) were positive for anti B. abortus antibodies at BPAT, four (6.7%) samples were confirmed in the 2-mercaptoethanol test, and two samples presented titer 100 and two titer 50.

O objetivo do presente trabalho foi determinar a ocorrência de anticorpos anti Brucella abortus, anti Brucella canis e anti Leptospira spp. em raposas (Pseudalopex vetulus). Para tanto, foram utilizadas 60 raposas atropeladas em rodovias no semiárido da Paraíba, Nordeste do Brasil. Para a detecção de anticorpos anti Brucella abortus, o teste do antígeno acidificado tamponado (AAT) foi empregado como teste de triagem, e a prova do 2-mercaptoetanol foi empregada como método confirmatório. Para o diagnóstico sorológico das infecções por Brucella canis e Leptospira spp., foram utilizados os testes de imunodifusão em gel de agar (IDGA) e soroaglutinação microscópica, respectivamente. Todas as amostras foram negativas na pesquisa de anticorpos anti Brucella canis e anti Leptospira spp. Das 60 raposas testadas, 16 (26,6%) foram positivas para anticorpos anti Brucella abortus no teste de AAT, e quatro (6,7%) amostras foram confirmadas no teste de 2-mercaptoetanol, sendo duas amostras com título 100 e duas com título 50.

RESUMO

The aim of this research was to determine the occurrence of anti Brucella abortus, anti B. canis and anti Leptospira spp. antibodies in foxes (Pseudalopex vetulus). Sixty road-killed wild foxes from semi-arid of Paraiba state, Northeastern region of Brazil, were used. For the detection of anti B. abortus antibodies, the buffered plate agglutination test (BPAT) was applied as a screening method and the 2-mercaptoethanol test as a confirmatory method. For serological diagnosis of infections by B. canis and Leptospira spp., the agar gel immunodiffusion test (AGID) and the microscopic agglutination test (MAT) were used, respectively. All samples were negative for anti B. canis and anti Leptospira spp. antibodies. Of the 60 foxes tested, 16 (26.6 %) were positive for anti B. abortus antibodies at BPAT, four (6.7%) samples were confirmed in the 2-mercaptoethanol test, and two samples presented titer 100 and two titer 50.

O objetivo do presente trabalho foi determinar a ocorrência de anticorpos anti Brucella abortus, anti Brucella canis e anti Leptospira spp. em raposas (Pseudalopex vetulus). Para tanto, foram utilizadas 60 raposas atropeladas em rodovias no semiárido da Paraíba, Nordeste do Brasil. Para a detecção de anticorpos anti Brucella abortus, o teste do antígeno acidificado tamponado (AAT) foi empregado como teste de triagem, e a prova do 2-mercaptoetanol foi empregada como método confirmatório. Para o diagnóstico sorológico das infecções por Brucella canis e Leptospira spp., foram utilizados os testes de imunodifusão em gel de agar (IDGA) e soroaglutinação microscópica, respectivamente. Todas as amostras foram negativas na pesquisa de anticorpos anti Brucella canis e anti Leptospira spp. Das 60 raposas testadas, 16 (26,6%) foram positivas para anticorpos anti Brucella abortus no teste de AAT, e quatro (6,7%) amostras foram confirmadas no teste de 2-mercaptoetanol, sendo duas amostras com título 100 e duas com título 50.

RESUMO

The aim of this research was to determine the occurrence of anti Brucella abortus, anti B. canis and anti Leptospira spp. antibodies in foxes (Pseudalopex vetulus). Sixty road-killed wild foxes from semi-arid of Paraiba state, Northeastern region of Brazil, were used. For the detection of anti B. abortus antibodies, the buffered plate agglutination test (BPAT) was applied as a screening method and the 2-mercaptoethanol test as a confirmatory method. For serological diagnosis of infections by B. canis and Leptospira spp., the agar gel immunodiffusion test (AGID) and the microscopic agglutination test (MAT) were used, respectively. All samples were negative for anti B. canis and anti Leptospira spp. antibodies. Of the 60 foxes tested, 16 (26.6 %) were positive for anti B. abortus antibodies at BPAT, four (6.7%) samples were confirmed in the 2-mercaptoethanol test, and two samples presented titer 100 and two titer 50.

O objetivo do presente trabalho foi determinar a ocorrência de anticorpos anti Brucella abortus, anti Brucella canis e anti Leptospira spp. em raposas (Pseudalopex vetulus). Para tanto, foram utilizadas 60 raposas atropeladas em rodovias no semiárido da Paraíba, Nordeste do Brasil. Para a detecção de anticorpos anti Brucella abortus, o teste do antígeno acidificado tamponado (AAT) foi empregado como teste de triagem, e a prova do 2-mercaptoetanol foi empregada como método confirmatório. Para o diagnóstico sorológico das infecções por Brucella canis e Leptospira spp., foram utilizados os testes de imunodifusão em gel de agar (IDGA) e soroaglutinação microscópica, respectivamente. Todas as amostras foram negativas na pesquisa de anticorpos anti Brucella canis e anti Leptospira spp. Das 60 raposas testadas, 16 (26,6%) foram positivas para anticorpos anti Brucella abortus no teste de AAT, e quatro (6,7%) amostras foram confirmadas no teste de 2-mercaptoetanol, sendo duas amostras com título 100 e duas com título 50.

RESUMO

Bovine semen experimentally contaminated with Leptospira santarosai serovar Guaricura was submitted to the modified EMJH medium with 5-fluorouracil (300mg/L) and nalidixic acid (20mg/L), named as "selective medium" and using the serial dilution technique, in order to evaluate the percentage of recovery of the added microorganism. The selective EMJH medium was found with higher percentage of recovery of leptospiras and minor losses of samples due to contamination with opportunistic microorganisms than the non-selective EMJH medium: 151/376 (40.0%) of positive growth; and 38/376 (10.0%) contamination and 58/376 (15%) and 129/376 (34.0%), respectively. These results were statistically significant (p 0. 0001; Fisher). Differences were found when the frequencies of positive leptospires recovery have been compared in the serial dilution technique (10-1 to 10-4) between the selective and non-selective media at different dilution factors. At 1/10th dilution the percentages found were (0%, 0/80) and (38%, 30/80), at 1/100th dilution, (3%, 2/80) and (49%, 39/80) and at 1/1,000th dilution, (25%, 20/80) and (50%, 40/80), respectively. The percentage of recovery of leptospires was found to be directly proportional to the dilution used. The methodology of the serial dilution technique (setting at least three dilutions) and the use of selective EMJH medium have been found to be efficient for the isolation of leptospires from the bovine semen samples.

Sêmen bovino experimentalmente contaminado com a estirpe Leptospira santarosai Sorovar Guaricura foi utilizado para verificar a porcentagem de recuperação de leptospiras, utilizando o meio de EMJH com 5-fluorouracil (300 mg/L) e ácido nalidíxico (20 mg/L), denominado "meio seletivo", associado à técnica das diluições seriadas. O meio seletivo EMJH foi encontrado com porcentagem de recuperação mais elevada e com menos perda de amostras devido à contaminação com microorganismos oportunistas quando comparado com o meio EMJH não seletivo, que foram encontrados, respectivamente, com 151/376 (40.0%) de crescimento positivo e 38/376 (10.0%) de contaminação, 58/376 (15%) e 129/376 (34.0%). Estes resultados foram estatíticamente significantes (p 0, 0001; Fisher). Diferenças foram encontradas quando as freqüências de leptospiras recuperadas foram comparadas com a técnica de diluição seriada (10-1 a 10-4) e entre os meios seletivo e não-seletivo, em diferentes níveis de diluição. À diluição de 1/10, as porcentagens encontradas foram (0%, 0/80) e (38%, 30/80); à diluição 1/100, (3%, 2/80) e (49%, 39/80); e à diluição 1/1000, (25%, 20/80) e (50%, 40/80), respectivamente. A porcentagem de recuperação de leptospiras foi diretamente proporcional às diluições empregadas. A metodologia das diluições seriadas (estabelecendo pelo menos três diluições) e o uso de meio EMJH seletivo mostraram ser eficientes no isolamento de leptospiras presentes nas amostras de sêmen bovino.

RESUMO

The intensity and duration of passive immunity against swine leptospirosis were investigated by the microscopic agglutination test and in vitro leptospira growth inhibition. Twenty-one females at first parturition were divided into three groups: Group A (n=08): received two doses with 30 days interval of the commercial anti-leptospira bacterin A. Group B (n=06) received two doses with 30 days interval of the commercial anti-leptospira bacterin B and Group C (n=07) was the control. In all groups the colostrums were collected. Blood collection of piglets was performed in four different ages. Agglutinin antibodies were equally detected in sera and colostrums for serovars Canicola, Grippotyphosa, Copenhageni, Icterohaemorrhagiae and Pomona (Group A) and Canicola, Copenhageni, Icterohaemorrhagiae, Pomona and Hardjo (Group B). Mean neutralizing antibodies titers were low. Passive immunity was low duration.

Assuntos

RESUMO

In 2001, 698 urine samples were randomly collected from cattle at a slaughterhouse in the State of Paraná, Brazil. Direct examination using dark field microscopy was carried out immediately after collection. Five putative positive samples were cultured in modified EMJH medium, yielding two positive cultures (LO-14 and LO-10). Typing with monoclonal antibodies revealed that the two isolates were similar to Canicola (LO-14) and Copenhageni (LO-10). Microscopic agglutination test results show that Hardjo is the most common serovar in cattle in Brazil. Rats and dogs are the common maintenance hosts of serovars Copenhageni and Canicola. The excretion of highly pathogenic serovars such as Copenhageni and Canicola by cattle can represent an increasing risk for severe leptospirosis is large populations, mainly living in rural areas.

No ano de 2001, 698 amostras de urina foram colhidas aleatoriamente, durante o abate em um frigorífico do Estado do Paraná, Brasil. O exame direto em microscópio de campo escuro foi realizado imediatamente após a colheita. As cinco amostras de urina positivas neste exame foram semeadas em meio EMJH modificado, sendo possível o crescimento de leptospiras em duas (LO-14 e LO-10). As estirpes isoladas foram tipificadas, por painel de anticorpos monoclonais, como mais similares ao perfil das amostras de referência dos sorovares Canicola (LO-14) e Copenhageni (LO-10). No Brasil, inquéritos sorológicos utilizando a prova de soroaglutinação microscópica mostram o predomínio de reações para o sorovar Hardjo em bovinos. Roedores e cães são os reservatórios mais comuns dos sorovares Copenhageni e Canicola, respectivamente. A eliminação dos sorovares Canicola e Copenhageni pela espécie bovina pode resultar em um aumento na ocorrência de casos graves de leptospirose humana, principalmente na população rural.

RESUMO

With the aim of isolating Leptospira spp., blood serum, kidney, liver and genital tract of 137 female swine (40 sows and 97 gilts) and also urine samples from 22 sows were collected in a slaughterhouse in the State of São Paulo, from April 2003 to August 2004. Four isolates were obtained from animals that presented microagglutination test (MAT) titers > 100 for the serovar Pomona and one was obtained from an animal negative by MAT in which Leptospira was isolated from the liver and reproductive tract. The presence of leptospiral DNA was investigated by PCR, and positive results were found in kidneys of 11 females, liver of two, genital tract of two and urine of one of them. Nephrosis, interstitial multifocal nephritis, moderate to severe changing, hyalines cylinders and hemorrhagic focuses, hepatic and uterine horns congestion were histological lesions observed in higher frequency in animals positive for leptospira. The silver impregnation (Warthin Starry) confirmed the presence of spirochetes in renal tubules of four females with positive leptospira cultures from kidneys. The serogroup of the five isolates was identified as Pomona by cross agglutination with reference polyclonal antibodies. Molecular characterization of the isolates was carried out by variable-number tandem-repeats analysis. All the isolates revealed a pattern distinct from the L. interrogans Pomona type strain, but identical to a previously identified pattern from strains isolated in Argentina belonging to serovar Pomona.

Amostras de soro sanguíneo, rim, fígado e trato genital de 137 fêmeas suínas (40 matrizes e 97 marrãs) e de urina de 22 matrizes foram colhidas em abatedouro no Estado de São Paulo, no período de abril de 2003 a agosto de 2004 tendo como objetivo o isolamento de Leptospira spp. Quatro estirpes foram isoladas de animais que apresentaram títulos, no teste de soroaglutinação microscópica (SAM) > 100, para o sorovar Pomona e de um animal, não reagente na SAM, em que houve isolamento de leptospiras do fígado e aparelho reprodutor. A presença do DNA de leptospira foi investigada pela técnica da PCR e foram observados resultados positivos nos rins de 11 fêmeas, no fígado de duas, no aparelho reprodutor de duas e na urina de uma delas. Nefrose, nefrite intersticial multifocal variando de moderada a severa, cilindros hialinos e focos hemorrágicos, congestão hepática e de cornos uterinos foram lesões histológicas evidenciadas com freqüência mais alta em animais positivos para leptospira. A impregnação argêntica (Warthin Starry) confirmou a presença de espiroquetas nos túbulos renais das quatro fêmeas onde houve cultura positiva para leptospiras dos rins. O sorogrupo dos cinco isolados foi identificado como Pomona pela técnica de aglutinação cruzada com anticorpos policlonais de referência. A caracterização molecular dos isolados foi realizada pela análise do número variável de repetições em tandem (VNTR). Os mesmos revelaram um padrão distinto da estirpe padrão de L. interrogans sorovar Pomona, porém idêntico a um padrão previamente identificado em estirpes isoladas na Argentina, pertencentes ao sorovar Pomona.

RESUMO

It was performed the comparison of the intensity and duration of agglutinating and neutralizing antibodies to serovar Hardjo in swines vaccinated with two commercial anti-leptospira bacterins. Sows no reactive to 24 Leptospira sp serovars in the microscopic agglutination test (MAT) were divided in three groups: Group A (n=08): received two vaccine A doses with 30 days interval, Group B (n=08) two vaccine B doses with 30 days interval and Group C (n=08): control no vaccinated against leptospirosis.Blood samples were collected each 30 days during six months following the first vaccination. The sera were tested by MAT and growth inhibition test (GIT) to serovar Hardjo in order to evaluate respectively agglutinating and neutralizing antibodies. It was found that neutralizing antibodies persisted for a longer time than the agglutinating ones and that the absence of agglutinating antibodies does not means in the absence of the neutralizing. The peaks of agglutinating antibodies was obtained at least 30 days earlier than that produced by neutralizing. The duration of both kinds of antibodies measured differed between the two bacterines tested. The period for inducing neutralizing antibodies against serovar Hardjo indicated that gilts must be immunized with two doses of whole culture anti-leptospira bacterines applied 30 days each other at least 90 days before the first mating. For the maintenance of hight levels of neutralizing antibodies the revaccinations must be performed every six months after the first vaccination.

Foi efetuada a comparação entre a intensidade e duração dos níveis de anticorpos neutralizantes e aglutinantes para o sorovar Hardjo em fêmeas suínas vacinadas com duas bacterinas comerciais anti-leptospirose. Animais caracterizados como não reatores para 24 sorovares de Leptospira sp pelo teste de soroaglutinação microscópica (SAM) e que nunca haviam sido vacinados contra a leptospirose foram divididos em três grupos: grupo A (n=08): recebeu duas doses, em intervalo de 30 dias, de bacterina comercial anti-leptospirose A; grupo B (n=08): recebeu duas doses, em intervalo de 30 dias de bacterina comercial anti-leptospirose B e grupo C (n=08): controle, não vacinado contra a leptospirose. As colheitas de sangue foram efetuadas a cada 30 dias durante seis meses a partir da primeira vacinação. Os soros foram submetidos aos testes da SAM e de inibição do crescimento de leptospiras in vitro (ICL) para avaliar, respectivamente, os níveis de anticorpos aglutinantes e neutralizantes. Foi constatado que os anticorpos neutralizantes persistem por mais tempo que os aglutinantes e que a ausência de anticorpos neutralizantes não corresponde a ausência dos aglutinantes. Os picos de anticorpos aglutinantes foram obtidos pelo menos 30 dias antes dos produzidos pelos neutralizantes. Houve diferença nos níveis de anticorpos neutralizantes induzidos pelas duas bacterinas testadas. O período de indução de anticorpos neutralizantes contra o sorovar Hardjo indica que marrãs devem ser imunizadas com duas doses de bacterina anti-leptospirose aplicadas com 30 dias de intervalo e pelo menos 90 dias antes da primeira cobertura. A manutenção de níveis elevados de anticorpos neutralizantes exige revacinações semestrais.

RESUMO

Leptospirosis is an important zoonosis that causes reproductive disorders in swine. The isolation of leptospires from aborted fetuses, stillbirths and weak piglets was obtained in several occasions, however, the bacteria was never isolated from apparently healthy piglets born from apparently healthy infected dams. Six sows of the Landrace breed with a known date of service and pregnancy confirmed by ultrasonography were infected intravenously with 5ml of Leptospira interrogans serovar Canicola inoculum between 76 and 90 days of gestation, and one week after farrowing, at least one piglet per sow was euthanized and samples of liver, kidneys, lungs, heart, spleen and gastric content were taken and examined by PCR. Reproductive disorders or any clinical sign of infection were not observed in the inoculated sows. The piglets born from these animals presented no clinical signs or macroscopic lesions that could be attributed to leptospirosis. All inoculated sows presented anti-leptospires antibodies by microscopic serum-agglutination test (MAT) in the postinoculation serum samples and leptospires were not found in the urine as well as were not detected by PCR applied in this material, however, PCR accomplished in kidneys and liver from a euthanized sow presented positive results. Of the total of 12 euthanized piglets, 10 (83.3%) presented positive results by PCR in at least one of the kidney, liver, heart, spleen, lung and gastric content samples. The present study reports the vertical transmission of the infection and the detection of leptospires in clinically healthy piglets born from experimentally infected sows, which is important of the epidemiological point of view as the maintenance of clinically healthy infected animals may allow the persistence of the bacteria in the herd, exposing other animals to the risk of infection.

A Leptospirose é uma importante zoonose que causa transtornos reprodutivos em suínos. O isolamento de leptospiras de fetos abortados, natimortos e leitões fracos foi obtido em várias ocasiões, porém, a bactéria nunca foi isolada de leitões aparentemente saudáveis nascidos de matrizes com infecção subclínica. Seis matrizes da raça Landrace com data de serviço conhecida e gravidez confirmada por ultrasonografia foram infectadas entre 76 e 90 dias de gestação por via intravenosa com 5 ml de inóculo de Leptospira interrogans sorovar Canicola, e uma semana após o parto, pelo menos um leitão por matriz foi eutanaziado e foram colhidas amostras de fígado, rins, pulmões, coração, baço e conteúdo gástrico para exame por PCR. Transtornos reprodutivos ou qualquer sinal clínico de infecção não foram observados nas matrizes inoculadas. Os leitões nascidos destes animais não apresentaram sinais clínicos ou lesões macroscópicas que poderiam ser atribuídos à leptospirose. Todas as matrizes inoculadas apresentaram anticorpos anti-leptospiras no teste de soroaglutinação microscópica (MAT) nas amostras de soros colhidas após a inoculação, e não foram encontradas leptospiras na urina como também não foram detectadas pela PCR aplicada neste material, porém, a PCR realizada em rins e fígado de uma matriz eutanaziada apresentou resultado positivo. Dos 12 leitões eutanaziados, 10 (83,3%) apresentaram resultados positivos na PCR em pelo menos uma das amostras de rim, fígado, coração, baço, pulmão e conteúdo gástrico. O presente estudo relata a transmissão vertical da infecção e a detecção de leptospiras em leitões clinicamente saudáveis nascidos de matrizes infectadas experimentalmente, o que é importante do ponto de vista epidemiológico, pois a manutenção de animais com infecção subclínica pode permitir a persistência da bactéria no rebanho, expondo outros animais ao risco de infecção.

RESUMO

The tuberculin skin test was established with the aim to be applied in the diagnosis of tuberculosis in experimentally sensitized goats. Thirty goats were alocated into three groups with ten animals each. The animals in group A were sensitized with Mycobacterium avium sample D4; group B with Mycobacterium bovis sample AN5; and group C (control) was inoculated with saline solution. The results of the simple cervical test after 72h of bovine tuberculin inoculation was interpreted as follow: positive reaction, when there was an increase in the skin fold thickness greater than 3.9mm; suspicious, when from 1.8 to 3.8mm; and negative when less than 1.7mm. The analysis of the results of the comparative cervical test between M. avium and M. bovis and analysed, 72h after tuberculin, indicated positive reactions, when the increase in skin fold thickness induced by M. bovis was greater than that one induced by the avian tuberculin at least 2.5mm; it was considered suspicious when the difference between the bovine and avian tuberculin reactions was from 1.9 to 2.4mm; and negative when this difference was smaller than 1.8mm. The histological evaluation of the local specific tuberculin response, were performed in skin samples collected from five goats in group A, five in group B, and four in group C, the results were the presence of mononuclear inflammatory infiltrate at 96h after tuberculin inoculation.

Foram estabelecidos critérios de interpretação do teste de tuberculinização aplicado ao diagnóstico da tuberculose em grupos de caprinos experimentalmente sensibilizados. Dos 30 animais utilizados, dez foram sensibilizados com Mycobacterium avium - amostra D4 (grupo A) e dez com Mycobacterium bovis - amostra AN5 (grupo B). Dez caprinos não foram sensibilizados e constituíram o grupo controle (grupo C). No teste cervical simples, realizado com tuberculina bovina (M. bovis) e lido às 72 horas pós-tuberculinização (p.t.), as reações positivas foram aquelas em que houve aumento da espessura da dobra de pele igual ou superior a 3,9mm; reações inconclusivas, quando situadas entre 1,8 e 3,8mm, e negativas quando iguais ou menores que 1,7mm. A análise dos resultados do teste cervical comparativo, realizado com o M. avium e M. bovis e lido às 72 horas p.t., indicou reação positiva quando o aumento da espessura da dobra da pele induzida pela tuberculina bovina superou a reação à aviária em pelo menos 2,5mm; reação inconclusiva quando a diferença entre a reação à tuberculina bovina e à tuberculina aviária ficou situada entre 1,9 e 2,4mm; e negativa quando a reação bovina ultrapassou a aviária em até 1,8mm. Às 96 horas após a injeção da tuberculina, foi efetuada a avaliação histológica do local das reações tuberculínicas colhendo-se amostras de pele de cinco caprinos dos grupos A e B e de quatro animais do grupo controle; os resultados confirmaram a presença, nos grupos sensibilizados, de infiltrado inflamatório, constituído, preferencialmente, por células mononucleares.

RESUMO

The tuberculin skin test was established with the aim to be applied in the diagnosis of tuberculosis in experimentally sensitized goats. Thirty goats were alocated into three groups with ten animals each. The animals in group A were sensitized with Mycobacterium avium sample D4; group B with Mycobacterium bovis sample AN5; and group C (control) was inoculated with saline solution. The results of the simple cervical test after 72h of bovine tuberculin inoculation was interpreted as follow: positive reaction, when there was an increase in the skin fold thickness greater than 3.9mm; suspicious, when from 1.8 to 3.8mm; and negative when less than 1.7mm. The analysis of the results of the comparative cervical test between M. avium and M. bovis and analysed, 72h after tuberculin, indicated positive reactions, when the increase in skin fold thickness induced by M. bovis was greater than that one induced by the avian tuberculin at least 2.5mm; it was considered suspicious when the difference between the bovine and avian tuberculin reactions was from 1.9 to 2.4mm; and negative when this difference was smaller than 1.8mm. The histological evaluation of the local specific tuberculin response, were performed in skin samples collected from five goats in group A, five in group B, and four in group C, the results were the presence of mononuclear inflammatory infiltrate at 96h after tuberculin inoculation.

Foram estabelecidos critérios de interpretação do teste de tuberculinização aplicado ao diagnóstico da tuberculose em grupos de caprinos experimentalmente sensibilizados. Dos 30 animais utilizados, dez foram sensibilizados com Mycobacterium avium - amostra D4 (grupo A) e dez com Mycobacterium bovis - amostra AN5 (grupo B). Dez caprinos não foram sensibilizados e constituíram o grupo controle (grupo C). No teste cervical simples, realizado com tuberculina bovina (M. bovis) e lido às 72 horas pós-tuberculinização (p.t.), as reações positivas foram aquelas em que houve aumento da espessura da dobra de pele igual ou superior a 3,9mm; reações inconclusivas, quando situadas entre 1,8 e 3,8mm, e negativas quando iguais ou menores que 1,7mm. A análise dos resultados do teste cervical comparativo, realizado com o M. avium e M. bovis e lido às 72 horas p.t., indicou reação positiva quando o aumento da espessura da dobra da pele induzida pela tuberculina bovina superou a reação à aviária em pelo menos 2,5mm; reação inconclusiva quando a diferença entre a reação à tuberculina bovina e à tuberculina aviária ficou situada entre 1,9 e 2,4mm; e negativa quando a reação bovina ultrapassou a aviária em até 1,8mm. Às 96 horas após a injeção da tuberculina, foi efetuada a avaliação histológica do local das reações tuberculínicas colhendo-se amostras de pele de cinco caprinos dos grupos A e B e de quatro animais do grupo controle; os resultados confirmaram a presença, nos grupos sensibilizados, de infiltrado inflamatório, constituído, preferencialmente, por células mononucleares.

RESUMO

The objective of this trial was to detect leptospires in fragments of kidney, liver and uterus of 96 cows with unknown sanitary status, randomly chosen at slaughter in Paraná, Brazil. All 96 urine samples were submitted to direct examination using dark field microscopy. Positive samples in the direct examination and all kidney, liver and uterus fragments were cultured in EMJH modified medium and Tween 80/40/LH. Sections cut of kidney, liver and uterus were stained by Hematoxylin-Eosin (HE) and indirect immunoperoxidase with hyperimmune serum against serovar Hardjo (Hardjoprajitno) and strain Londrina 14 (LO14), from serovar Canicola, which was isolated in the northern region of Paraná state, Brazil, used as primary antibodies. Direct examination detected leptospires in the urine of four animals. All attempts to isolate leptospires from urine and kidney, liver and uterus fragments were negative after 16 weeks of incubation. In the HE stain, focal infiltrate of mononuclear inflammatory cells was observed in the renal interstitial area of most animals. In the indirect immunoperoxidase assay using hyperimmune serum against LO14 strain, the kidney of only one animal presented positive results. All fragments of kidney, liver and uterus tested with hyperimmune serum against serovar Hardjo were negative.

O objetivo deste trabalho foi detectar leptospiras em fragmentos de rim, fígado e útero de 96 fêmeas bovinas com histórico sanitário desconhecido, escolhidas aleatoriamente durante o abate em um frigorífico no Estado do Paraná, Brasil. Todas as 96 amostras de urina foram submetidas ao exame direto em microscópio de campo escuro. As amostras positivas neste exame e todos os fragmentos de rim, fígado e útero foram semeados nos meios de cultura EMJH modificado e Tween 80/40/LH. Os cortes histológicos de rim, fígado e útero foram submetidos à coloração de Hematoxilina-Eosina (HE) e a prova de imunoperoxidase indireta com soros hiperimunes contra o sorovar Hardjo (Hardjoprajitno) e contra a estirpe Londrina (LO14), do sorovar Canicola, isolada no norte do Paraná, Brasil, utilizados como anticorpo primário. O exame direto detectou leptospiras na urina de quatro animais. Todas as tentativas de isolamento das urinas e fragmentos de rim, fígado e útero foram negativas após 16 semanas de incubação. No exame histopatológico foi observado infiltrado focal de células mononucleares no interstício renal da maioria dos animais. Na prova de imunoperoxidase indireta com o soro hiperimune contra a estirpe LO14, o rim de um animal foi o único a apresentar resultado positivo. Todos os fragmentos de rim, fígado e útero testados com o soro hiperimune contra o sorovar Hardjo foram negativos.

RESUMO

O objetivo do presente trabalho foi estimar a soroprevalência da Leptospirose e da Brucelose em rebanhos leiteiros de Pernambuco. Seiscentas amostras de soro sangüíneo de 16 rebanhos leiteiros de diversas regiões de Pernambuco foram examinadas sorologicamente para detectar bovinos portadores de anticorpos anti-leptospirais pela técnica de soroaglutinação microscópica e anti- Brucella abortus pelo teste do AAT. As positivas ao AAT foram submetidas à soroaglutinação lenta em tubos (SAL) e 2-Mercaptoetanol (2-ME). Anticorpos anti-Brucella abortus foram detectados em 4,2% dos animais, em cinco rebanhos. Dois rebanhos tinham prevalência de 17,9% e 16,5%, respectivamente. Das amostras testadas, 57,7% reagiram positivamente a algum dos 24 antígenos vivos de Leptospira em todos os rebanhos examinados, com variações de até 95,0%. Os resultados obtidos neste estudo permitem concluir que deve-se incluir a brucelose a leptospirose no diagnóstico diferencial de doenças reprodutivas de bovinos desta região.