RESUMO

The diagnosis of umbilical infections in neonates can be obtained from clinical signs, but the intracavitary involvement of structures and associated complications can be underestimated, compromising the establishment of adequate therapeutic approaches or prognosis. This case report presents the clinical, imaging, pathological and microbiological aspects of an umbilical infection in calves. Physical examination of the animal identified apathy, low body score, increased volume in the umbilical region and joints. The abdominal palpation identified firm structures in topography of the arteries and umbilical vein. Imaging examinations of the abdomen and joints were performed. Multiple, hyperechogenic focal structures have been identified in the liver, as well as cylindrical and firm structures in topography of the arteries and umbilical vein. In the joints, osteolytic changes, periosteal reactions, subchondral sclerosis and formation of osteophytes were seen. Umbilical panvasculitis triggered arthritis and an infectious process in the liver, the case being assessed as having an unfavorable prognosis and the animal being referred for euthanasia. At necropsy, multifocal abscesses were observed in the pleura, ribs, omentum, spleen and liver. There was granulomatous exudate in the urinary vesicle. The affected joints presented thickening of the joint capsule with the presence of exudat(AU)

O diagnóstico das infecções umbilicais em neonatos pode ser obtido a partir do exame clínico, porém o compro-metimento intracavitário das estruturas e as complicações associadas podem ser subestimados, comprometendo o estabeleci-mento de condutas terapêuticas ou prognósticos adequados. Apresenta-se nesse trabalho os aspectos clínicos, imaginológicos e patológicos de uma infecção umbilical em bezerro. No exame físico do animal identificou-se apatia, baixo escore corporal, aumento de volume na região umbilical e articulações e, em palpação abdominal, estruturas firmes em topografia das artérias e veia umbilical. Na avaliação ultrassonográfica abdominal identificou-se estruturas focais múltiplas, hiperecogênicas no fígado e estrutura bem definida, com parede hipoecoica e lúmen hiperecoico, estendendo-se de lobo hepático até porção cranial do anel umbilical. Na radiografia das articulações foram vistas alterações osteolíticas, reação periosteal, esclerose e formação de osteófitos, além do aumento de volume e radiopacidade de tecido moles adjacentes com presença de áreas radiolucentes, indi-cando presença gasosa local. Os sinais clínicos e os achados imaginológicos demonstraram a ocorrência de panvasculite umbi-lical que desencadeou um quadro de poliartrite séptica e processos infecciosos em diversos órgãos. O estudo imaginológico permitiu identificar onfaloflebite, grave acometimento de parênquima hepático e artrites sépticas, sendo o caso avaliado como tendo um prognóstico desfavorável e o animal eutanasiado. O tratamento conservador com antibioticoterapia prolongada e/ou a retirada ou marsupialização dos remanescentes umbilicais infectados podem ser utilizados em casos de onfaloflebites ou onfaloarterites. No entanto, esse procedimento não foi adotado devido ao comprometimento hepático e aos achados radio-gráficos que demonstraram ocorrência de osteoartrite séptica.(AU)

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The diagnosis of umbilical infections in neonates can be obtained from clinical signs, but the intracavitary involvement of structures and associated complications can be underestimated, compromising the establishment of adequate therapeutic approaches or prognosis. This case report presents the clinical, imaging, pathological and microbiological aspects of an umbilical infection in calves. Physical examination of the animal identified apathy, low body score, increased volume in the umbilical region and joints. The abdominal palpation identified firm structures in topography of the arteries and umbilical vein. Imaging examinations of the abdomen and joints were performed. Multiple, hyperechogenic focal structures have been identified in the liver, as well as cylindrical and firm structures in topography of the arteries and umbilical vein. In the joints, osteolytic changes, periosteal reactions, subchondral sclerosis and formation of osteophytes were seen. Umbilical panvasculitis triggered arthritis and an infectious process in the liver, the case being assessed as having an unfavorable prognosis and the animal being referred for euthanasia. At necropsy, multifocal abscesses were observed in the pleura, ribs, omentum, spleen and liver. There was granulomatous exudate in the urinary vesicle. The affected joints presented thickening of the joint capsule with the presence of exudat

O diagnóstico das infecções umbilicais em neonatos pode ser obtido a partir do exame clínico, porém o compro-metimento intracavitário das estruturas e as complicações associadas podem ser subestimados, comprometendo o estabeleci-mento de condutas terapêuticas ou prognósticos adequados. Apresenta-se nesse trabalho os aspectos clínicos, imaginológicos e patológicos de uma infecção umbilical em bezerro. No exame físico do animal identificou-se apatia, baixo escore corporal, aumento de volume na região umbilical e articulações e, em palpação abdominal, estruturas firmes em topografia das artérias e veia umbilical. Na avaliação ultrassonográfica abdominal identificou-se estruturas focais múltiplas, hiperecogênicas no fígado e estrutura bem definida, com parede hipoecoica e lúmen hiperecoico, estendendo-se de lobo hepático até porção cranial do anel umbilical. Na radiografia das articulações foram vistas alterações osteolíticas, reação periosteal, esclerose e formação de osteófitos, além do aumento de volume e radiopacidade de tecido moles adjacentes com presença de áreas radiolucentes, indi-cando presença gasosa local. Os sinais clínicos e os achados imaginológicos demonstraram a ocorrência de panvasculite umbi-lical que desencadeou um quadro de poliartrite séptica e processos infecciosos em diversos órgãos. O estudo imaginológico permitiu identificar onfaloflebite, grave acometimento de parênquima hepático e artrites sépticas, sendo o caso avaliado como tendo um prognóstico desfavorável e o animal eutanasiado. O tratamento conservador com antibioticoterapia prolongada e/ou a retirada ou marsupialização dos remanescentes umbilicais infectados podem ser utilizados em casos de onfaloflebites ou onfaloarterites. No entanto, esse procedimento não foi adotado devido ao comprometimento hepático e aos achados radio-gráficos que demonstraram ocorrência de osteoartrite séptica.

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Rabies is a contagious, neurotropic zoonosis associated with abandoned street dogs and low immunity. The disease has a reduced laboratory diagnosis rate because it is difficult to gather and transport sample material (brain). Based on this challenge, we studied the cervical medulla (CNS) as the pathway of de Rabies virus from the body to the brain. The cervical medulla was an ideal candidate for our study because its anatomy and location make it an easy material to gather. Our objective was to analyse the use of cervical medulla in the laboratory diagnosis of Rabies. Rabies viruses were intramuscularly inoculated into five Rattus species. After death, the brain and cervical medulla of each animal were intra-cerebrally macerated and inoculated. 100% positive for Rabies using the direct immunofluorescence (DIF) test and intracerebral inoculation. Overall, there was agreement between the analyses of the brains and the cervical medullas. Therefore, we propose the use of cervical medulla as a material for the laboratory diagnosis of Rabies.

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O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito citotóxico das drogas antivirais em cultivos de fibroblastos que foram isolados por explantation da membrana sinovial de caprinos soronegativos para a presença de anticorpos para lentivírus de pequenos ruminantes. As células eram mantidas em cultivo, para posterior utilização nos testes de citotoxicidade, contendo Meio Essencial Mínimo (MEM) acrescido de SFB 10%, antifúngico, antibióticos e glutamina. Para o teste de citotoxicidade das drogas, alíquotas de 0,1mL de fibroblastos, na concentração de 2 x105 células/mL, foram depositadas em microplacas de 96 poços, incubadas por 24 e 48h com posterior troca do meio por outro contendo diluições de 0,005 μM, 0,05 μM, 0,5 μM, 5μM, 50 μM e 500 μM de cada droga, que foram: zidovudina (AZT), estavudina, lamivudina, didanosina, efavirenz, atazanavir e lopinavir. Após 24 h de incubação o meio foi desprezado e acrescentou-se 100 μL de azul de tetrazólio (MTT) a uma concentração de 5 mg/mL. As microplacas foram incubadas por 4 h/37oC. Posteriormente, adicionou-se 100 μL de uma solução de 95% de isopropanol e 5% de ácido fórmico. A análise espectrofotométrica foi medida em um leitor de ELISA a uma absorbância de 600 nm. A partir dos valores das densidades ópticas determinou-se a concentração da droga capaz de reduzir em 50% as células viáveis. Dessa forma, a zidovudina e a didanosina na concentração de 0,05 μM e a estavudina e a lamivudina nas concentrações de 0,5 μM e 500 μM, respectivamente, não apresentaram efeitos tóxicos. Concluindo-se que essas drogas mostram potencial para o desenvolvimento de testes capazes de mensurar sua atividade antiviral frente aos lentivírus de pequenos ruminantes (SRLV small ruminant lentivirus).(AU)

This work evaluates the cytotoxic effect of antiviral drugs on cultured fibroblasts that were isolated by explantation from the synovial membrane of goats that were soronegative to the presence of lentivirus antibodies from small ruminants. The cells were grown in MEM supplemented with 10% fetal bovine serum, an antifungal, antibiotics and glutamine. The drug cytotoxicity assay was performed in 0.1 mL of fibroblasts with 2x105 cells per mL, cultivated in 96 well microplates, incubated for 24h and submitted to dilutions of 0.005 μM, 0.05 μM, 0.5 μM, 5 μM, 50 μM and 500 μM of each of zidovudine, stavudine, lamivudine, didanosine, efavirenz, atazanavir and lopinavir. After incubation for 24 hours the medium was removed and replaced by 100 μL of MTT solution (5 mg/mL) for 4 h at 37ºC. Then, the MTT solution was removed and 100 μL of a solution of 95% isopropanol and 5% of acid formic was added in order to dissolve the crystals. The absorbance was read on a multiwell spectrophotometer at 600 nm. The optical density values were used to determine the concentration of the drug capable of reducing the viable cells by 50%. Zidovudine and the didanosine at a concentration of 0.05 μM and stavudine and lamivudine at concentrations of 0.5 μM and 500 μM had no toxic effect. Therefore, these drugs have potential to develop tests to measure their antiviral activity against small ruminant lentiviruses.(AU)

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O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito citotóxico das drogas antivirais em cultivos de fibroblastos que foram isolados por explantation da membrana sinovial de caprinos soronegativos para a presença de anticorpos para lentivírus de pequenos ruminantes. As células eram mantidas em cultivo, para posterior utilização nos testes de citotoxicidade, contendo Meio Essencial Mínimo (MEM) acrescido de SFB 10%, antifúngico, antibióticos e glutamina. Para o teste de citotoxicidade das drogas, alíquotas de 0,1mL de fibroblastos, na concentração de 2 x105 células/mL, foram depositadas em microplacas de 96 poços, incubadas por 24 e 48h com posterior troca do meio por outro contendo diluições de 0,005 μM, 0,05 μM, 0,5 μM, 5μM, 50 μM e 500 μM de cada droga, que foram: zidovudina (AZT), estavudina, lamivudina, didanosina, efavirenz, atazanavir e lopinavir. Após 24 h de incubação o meio foi desprezado e acrescentou-se 100 μL de azul de tetrazólio (MTT) a uma concentração de 5 mg/mL. As microplacas foram incubadas por 4 h/37oC. Posteriormente, adicionou-se 100 μL de uma solução de 95% de isopropanol e 5% de ácido fórmico. A análise espectrofotométrica foi medida em um leitor de ELISA a uma absorbância de 600 nm. A partir dos valores das densidades ópticas determinou-se a concentração da droga capaz de reduzir em 50% as células viáveis. Dessa forma, a zidovudina e a didanosina na concentração de 0,05 μM e a estavudina e a lamivudina nas concentrações de 0,5 μM e 500 μM, respectivamente, não apresentaram efeitos tóxicos. Concluindo-se que essas drogas mostram potencial para o desenvolvimento de testes capazes de mensurar sua atividade antiviral frente aos lentivírus de pequenos ruminantes (SRLV – small ruminant lentivirus).

This work evaluates the cytotoxic effect of antiviral drugs on cultured fibroblasts that were isolated by explantation from the synovial membrane of goats that were soronegative to the presence of lentivirus antibodies from small ruminants. The cells were grown in MEM supplemented with 10% fetal bovine serum, an antifungal, antibiotics and glutamine. The drug cytotoxicity assay was performed in 0.1 mL of fibroblasts with 2x105 cells per mL, cultivated in 96 well microplates, incubated for 24h and submitted to dilutions of 0.005 μM, 0.05 μM, 0.5 μM, 5 μM, 50 μM and 500 μM of each of zidovudine, stavudine, lamivudine, didanosine, efavirenz, atazanavir and lopinavir. After incubation for 24 hours the medium was removed and replaced by 100 μL of MTT solution (5 mg/mL) for 4 h at 37ºC. Then, the MTT solution was removed and 100 μL of a solution of 95% isopropanol and 5% of acid formic was added in order to dissolve the crystals. The absorbance was read on a multiwell spectrophotometer at 600 nm. The optical density values were used to determine the concentration of the drug capable of reducing the viable cells by 50%. Zidovudine and the didanosine at a concentration of 0.05 μM and stavudine and lamivudine at concentrations of 0.5 μM and 500 μM had no toxic effect. Therefore, these drugs have potential to develop tests to measure their antiviral activity against small ruminant lentiviruses.

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